真人妇科宝胶囊质量控制研究
作者：杨 枫
单位：中国医学科学院中国协和医科大学，药用植物研究所 北京 100094
关键词：真人妇科宝胶囊；TLC鉴别法；薄层扫描法；人参皂苷Rg1
摘要 建立了真人妇科宝胶囊中当归 摘要 建立了真人妇科宝胶囊中当归、川芎、延胡索、白术、木香薄层鉴别方法；探索了薄层扫描法测定胶囊中人参皂苷Rg1含量的方法；结果表明试品需经乙醚脱脂-甲醇提取-氧化铝-大孔树脂混和柱精制，双波长反射锯齿扫描定量(λR＝680 nm，λs＝540 nm)，回收率98.13%，RSD为1.54%。试品平均含人参皂苷Rg1 0.15 mg/粒。
Study on quality control for Zhenrenfukebao capsules
, 百拇医药
Yang Feng
(Beijing Union Medical College, Chinese Academy of Medical Sciences, Beijing, 100094)
ABSTRACT The TLC methods were established for identifying Radix Angelicae sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Atractylodis macrocephalae and Rhizoma Corydalis in Zhenrenfukebao capsules. And the TLC scanning method was developed for assaying the content of ginsenosides Rg1 in the capsules. The results showed that the samples were defatted with ether, extracted with methanol, refined by alumina and resin columns, determined by dual-wavelength reflection scanning (λR＝680 nm, λs＝540 nm).The average recovery was 98.13%(RSD＝1.54%). The ginsenosides Rg1 was 0.15 mg in each capsule.
, 百拇医药
KEY WORDS Zhenrenfukebao capsule; TLC identification; TLC scan; ginsenosides Rg1
真人妇科宝胶囊系由黄芪、人参、熟地黄、白芍、当归、甘草、香附、川芎、茯苓、木香、白术、紫河车、鹿茸胶、杜仲、益母草、艾叶、黄芩、柴胡、延胡索、巴戟天二十味药制成的复方制剂，具有滋肝肾、补气血、调任冲、健脾胃、除暗病等功效。为有效地进行产品的质量控制，笔者建立了胶囊剂定性鉴别及人参皂苷Rg1含量测定方法。
1 仪器与试药
1.1 仪器 CS-9000型薄层扫描仪(日本岛津)。
1.2 试药 硅胶预制板(烟台化学工业研究所)；当归、川芎、白术、木香对照药材、延胡索乙素、人参皂苷Rg1对照品(中国药品生物制品检定所)；真人妇科宝胶囊(香港宗岐氏药厂)。
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2 方法与结果
2.1 定性鉴别
2.1.1 当归、川芎〔1，2〕 取试品约5 g，加30 ml醋酸乙酯超声提取20 min，过滤，滤液浓缩至1 ml，作为供试液；取当归、川芎对照药材粉末各0.5 g，分别加醋酸乙酯15 ml，同法制成阳性对照液；另取按处方量制备的不含当归、川芎试品，同法制成阴性对照液。吸取供试液、阴性对照液各3 μl，阳性对照液1 μl，分别点于同一硅胶板上，用正己烷-醋酸乙酯(9∶1)展开，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱在与对照药材色谱相应位置上显相同淡蓝色荧光斑点，Rf＝0.68。见图1。
图1 当归、川芎薄层色谱图
1-川芎阴性对照 2-川芎 3-供试品
, 百拇医药
4-川芎、当归阴性对照 5-当归 6-当归阴性对照
2.1.2 延胡索〔1〕 取试品约5 g，加浓氨试液1 ml与氯仿30 ml超声提取30 min，过滤，滤液蒸干，残渣加乙醇5 ml溶解，过滤，滤液浓缩至5 ml作供试液；取延胡索乙素对照品，加乙醇制成1 mg/ml阳性对照液；另取不含延胡索试品，同法制成阴性对照液。吸取供试液、阴性对照液各10 μl，阳性对照液1 μl，点样，用正己烷-氯仿-甲醇(10∶6∶1)展开，晾干，置碘蒸汽中熏数秒钟后，置365 nm下检视。供试品色谱与对照品色谱相应位置上显相同亮黄色荧光斑点，Rf＝0.52，见图2。
图2 延胡索薄层色谱图
1-阴性对照 2-供试品 3-延胡索乙素
, 百拇医药
2.1.3 白术〔1〕 取试品约4 g，加环己烷超声提取20 min过滤，滤液浓缩至2 ml作供试液；取白术药材0.5 g，同法制成阳性对照液；另取不含白术试品，同法制成阴性对照液。吸取供试液、阴性对照液各10 μl，阳性对照液3 μl，点样，用环己烷展开，晾干，喷以香草醛-乙醇-浓硫酸(0.5∶8∶2)显色剂。供试品色谱与对照药材色谱相应位置上显相同的桃红色斑点，Rf＝0.58，见图3。
图3 白术薄层色谱图
1-阴性对照 2-供试品 3-白术
2.1.4 木香〔3〕 取试品5 g，加乙醚30 ml超声提取20 min后过滤，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯1 ml溶解作供试液；取木香对照药材1 g，同法制成阳性对照液；另取不含木香试品同法制成阴性对照液。吸取供试品溶液及阴性对照液各2 μl，阳性对照液1 μl，点样，用环己烷-丙酮(10∶3)展开，晾干，喷以5%香草醛硫酸液。供试品色谱与对照药材色谱相应位置显相同的蓝色斑点，Rf＝0.74，见图4。
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图4 木香薄层色谱图
1-阴性对照 2-供试品 3-木香
2.2 人参皂苷Rg1含量测定〔2，4〕
2.2.1 试液的制备 准确称取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成2 mg/ml的对照品溶液。准确称取样品及不含人参制品各约5 g，加乙醚回流4 h，回收乙醚。残渣加甲醇浸泡过夜后回流提取至甲醇无色，回收甲醇，残渣加水约10 ml溶解，上中性氧化铝大孔树脂混合柱(内径为1.5 cm，柱高13 cm)，用水洗至馏出液近无色，再用70%乙醇洗脱并收集，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解、定容至5 ml，静置，吸取上清液作为供试液。
2.2.2 薄层扫描 采用硅胶预制板；以氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)的下层液；展开后，用5%的硫酸乙醇液浸板，置100℃烘箱中烘7 min左右至斑点清晰，人参皂苷Rg1Rf＝0.51，见图5。双波长反射法锯齿扫描：λR＝680 nm，λs＝540 nm，外标两点法计算Rg1的含量。
, 百拇医药
图5 人参皂苷薄层色谱图
1-混合人参皂苷(自下而上斑点为Rb1、Re、Rg1)
2-人参药材 3-人参对照药材 4-供试品
5-混合皂苷阴性对照 6-空白
人参皂苷Rg1在1.14 μg～11.4 μg范围呈良好的线性关系：A＝-1849+6232C， r＝0.9996，从显色15 min起，每隔30 min测定一次，结果在3 h内，斑点积分值稳定(RSD＝2.61%)。同一斑点连续重复扫描测定5次，RSD＝1.04%；同一硅胶板数斑点扫描，RSD＝3.73%。不同薄层板扫描，RSD＝3.39%。方法回收率为98.13%，RSD＝1.54%。
2.3 样品含量测定 取3批样品，按2.2项下操作，结果人参皂苷Rg1含量分别为0.1517，0.1543，0.1498 mg/粒。
, 百拇医药
3 讨论
曾参照中国药典1995年版脑得生丸项下人参皂苷含量测定方法，结果空白有干扰。后参照中成药质量标准复方人参酊项下Re的含量测定方法，样品经乙醚脱酯、甲醇提取后，上氧化铝及大孔树脂混合柱精制，空白无干扰，分离效果好。
参考文献
1 王绮秋.中药制剂成分现代分析法.贵阳：贵州科技出版社，1991：13，18，42
2 王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究.北京：中国医药科技出版社，1994：284～285，328～329
3 康廷国.中成药薄层色谱鉴别.北京：人民卫生出版社，1995：123～124
4 中国药典1995年版一部.1995：579～580
(收稿：1998-12-06), http://www.100md.com
单位：中国医学科学院中国协和医科大学，药用植物研究所 北京 100094
关键词：真人妇科宝胶囊；TLC鉴别法；薄层扫描法；人参皂苷Rg1
摘要 建立了真人妇科宝胶囊中当归 摘要 建立了真人妇科宝胶囊中当归、川芎、延胡索、白术、木香薄层鉴别方法；探索了薄层扫描法测定胶囊中人参皂苷Rg1含量的方法；结果表明试品需经乙醚脱脂-甲醇提取-氧化铝-大孔树脂混和柱精制，双波长反射锯齿扫描定量(λR＝680 nm，λs＝540 nm)，回收率98.13%，RSD为1.54%。试品平均含人参皂苷Rg1 0.15 mg/粒。
Study on quality control for Zhenrenfukebao capsules
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Yang Feng
(Beijing Union Medical College, Chinese Academy of Medical Sciences, Beijing, 100094)
ABSTRACT The TLC methods were established for identifying Radix Angelicae sinensis, Rhizoma Chuanxiong, Rhizoma Atractylodis macrocephalae and Rhizoma Corydalis in Zhenrenfukebao capsules. And the TLC scanning method was developed for assaying the content of ginsenosides Rg1 in the capsules. The results showed that the samples were defatted with ether, extracted with methanol, refined by alumina and resin columns, determined by dual-wavelength reflection scanning (λR＝680 nm, λs＝540 nm).The average recovery was 98.13%(RSD＝1.54%). The ginsenosides Rg1 was 0.15 mg in each capsule.
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KEY WORDS Zhenrenfukebao capsule; TLC identification; TLC scan; ginsenosides Rg1
真人妇科宝胶囊系由黄芪、人参、熟地黄、白芍、当归、甘草、香附、川芎、茯苓、木香、白术、紫河车、鹿茸胶、杜仲、益母草、艾叶、黄芩、柴胡、延胡索、巴戟天二十味药制成的复方制剂，具有滋肝肾、补气血、调任冲、健脾胃、除暗病等功效。为有效地进行产品的质量控制，笔者建立了胶囊剂定性鉴别及人参皂苷Rg1含量测定方法。
1 仪器与试药
1.1 仪器 CS-9000型薄层扫描仪(日本岛津)。
1.2 试药 硅胶预制板(烟台化学工业研究所)；当归、川芎、白术、木香对照药材、延胡索乙素、人参皂苷Rg1对照品(中国药品生物制品检定所)；真人妇科宝胶囊(香港宗岐氏药厂)。
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2 方法与结果
2.1 定性鉴别
2.1.1 当归、川芎〔1，2〕 取试品约5 g，加30 ml醋酸乙酯超声提取20 min，过滤，滤液浓缩至1 ml，作为供试液；取当归、川芎对照药材粉末各0.5 g，分别加醋酸乙酯15 ml，同法制成阳性对照液；另取按处方量制备的不含当归、川芎试品，同法制成阴性对照液。吸取供试液、阴性对照液各3 μl，阳性对照液1 μl，分别点于同一硅胶板上，用正己烷-醋酸乙酯(9∶1)展开，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱在与对照药材色谱相应位置上显相同淡蓝色荧光斑点，Rf＝0.68。见图1。
图1 当归、川芎薄层色谱图
1-川芎阴性对照 2-川芎 3-供试品
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4-川芎、当归阴性对照 5-当归 6-当归阴性对照
2.1.2 延胡索〔1〕 取试品约5 g，加浓氨试液1 ml与氯仿30 ml超声提取30 min，过滤，滤液蒸干，残渣加乙醇5 ml溶解，过滤，滤液浓缩至5 ml作供试液；取延胡索乙素对照品，加乙醇制成1 mg/ml阳性对照液；另取不含延胡索试品，同法制成阴性对照液。吸取供试液、阴性对照液各10 μl，阳性对照液1 μl，点样，用正己烷-氯仿-甲醇(10∶6∶1)展开，晾干，置碘蒸汽中熏数秒钟后，置365 nm下检视。供试品色谱与对照品色谱相应位置上显相同亮黄色荧光斑点，Rf＝0.52，见图2。
图2 延胡索薄层色谱图
1-阴性对照 2-供试品 3-延胡索乙素
, 百拇医药
2.1.3 白术〔1〕 取试品约4 g，加环己烷超声提取20 min过滤，滤液浓缩至2 ml作供试液；取白术药材0.5 g，同法制成阳性对照液；另取不含白术试品，同法制成阴性对照液。吸取供试液、阴性对照液各10 μl，阳性对照液3 μl，点样，用环己烷展开，晾干，喷以香草醛-乙醇-浓硫酸(0.5∶8∶2)显色剂。供试品色谱与对照药材色谱相应位置上显相同的桃红色斑点，Rf＝0.58，见图3。
图3 白术薄层色谱图
1-阴性对照 2-供试品 3-白术
2.1.4 木香〔3〕 取试品5 g，加乙醚30 ml超声提取20 min后过滤，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯1 ml溶解作供试液；取木香对照药材1 g，同法制成阳性对照液；另取不含木香试品同法制成阴性对照液。吸取供试品溶液及阴性对照液各2 μl，阳性对照液1 μl，点样，用环己烷-丙酮(10∶3)展开，晾干，喷以5%香草醛硫酸液。供试品色谱与对照药材色谱相应位置显相同的蓝色斑点，Rf＝0.74，见图4。
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图4 木香薄层色谱图
1-阴性对照 2-供试品 3-木香
2.2 人参皂苷Rg1含量测定〔2，4〕
2.2.1 试液的制备 准确称取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成2 mg/ml的对照品溶液。准确称取样品及不含人参制品各约5 g，加乙醚回流4 h，回收乙醚。残渣加甲醇浸泡过夜后回流提取至甲醇无色，回收甲醇，残渣加水约10 ml溶解，上中性氧化铝大孔树脂混合柱(内径为1.5 cm，柱高13 cm)，用水洗至馏出液近无色，再用70%乙醇洗脱并收集，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解、定容至5 ml，静置，吸取上清液作为供试液。
2.2.2 薄层扫描 采用硅胶预制板；以氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)的下层液；展开后，用5%的硫酸乙醇液浸板，置100℃烘箱中烘7 min左右至斑点清晰，人参皂苷Rg1Rf＝0.51，见图5。双波长反射法锯齿扫描：λR＝680 nm，λs＝540 nm，外标两点法计算Rg1的含量。
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图5 人参皂苷薄层色谱图
1-混合人参皂苷(自下而上斑点为Rb1、Re、Rg1)
2-人参药材 3-人参对照药材 4-供试品
5-混合皂苷阴性对照 6-空白
人参皂苷Rg1在1.14 μg～11.4 μg范围呈良好的线性关系：A＝-1849+6232C， r＝0.9996，从显色15 min起，每隔30 min测定一次，结果在3 h内，斑点积分值稳定(RSD＝2.61%)。同一斑点连续重复扫描测定5次，RSD＝1.04%；同一硅胶板数斑点扫描，RSD＝3.73%。不同薄层板扫描，RSD＝3.39%。方法回收率为98.13%，RSD＝1.54%。
2.3 样品含量测定 取3批样品，按2.2项下操作，结果人参皂苷Rg1含量分别为0.1517，0.1543，0.1498 mg/粒。
, 百拇医药
3 讨论
曾参照中国药典1995年版脑得生丸项下人参皂苷含量测定方法，结果空白有干扰。后参照中成药质量标准复方人参酊项下Re的含量测定方法，样品经乙醚脱酯、甲醇提取后，上氧化铝及大孔树脂混合柱精制，空白无干扰，分离效果好。
参考文献
1 王绮秋.中药制剂成分现代分析法.贵阳：贵州科技出版社，1991：13，18，42
2 王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究.北京：中国医药科技出版社，1994：284～285，328～329
3 康廷国.中成药薄层色谱鉴别.北京：人民卫生出版社，1995：123～124
4 中国药典1995年版一部.1995：579～580
(收稿：1998-12-06), http://www.100md.com