枣庄市驻地一年级新生抗-HBs检测分析
作者：高聘金 孙中霞 韩业琴
单位：高聘金 孙中霞(枣庄市卫生防疫站， 山东 枣庄 277101)；韩业琴(枣庄市立新学校卫生室， 山东 枣庄 277101)
关键词：抗-HBs；小学生
疾病控制杂志990336 【文献标识码】 A
【中图分类号】 R817.4
【文章编号】 1008-6013(1999)03-0227-01
Establishment on immunity radioaction analysis methods of β-HCG
FANG Zi-guo， ZHANG Xiu-qing, HE Xiao-li, NI Ji-hong, XU Xi-ping
, http://www.100md.com
为了探讨更特异、更灵敏检测月经周期尿样中β-HCG含量的方法。我们与哈佛大学公共卫生学院共同建立检测β-HCG含量的免疫放射分析法(IRMA)，现将有关情况报告如下。
1 仪器与试剂
1.1 Gamma counter 由芬兰EGNG公司提供。
1.2 试剂 抗体(B108、B109、B204)标准品(Cr127)以及BSA、BGG、酶标反应板等均由哈佛大学公共卫生学院提供。所用的包被液、稀释液、洗液均按常规法配制。
1.3 抗体标记 中科院北京401所标记。
1.4 样本的来源 分别收集4～6岁的男孩尿样(作为稀释HCG阳性尿样用)和妊娠一个月左右HCG阳性的孕妇尿样。
, http://www.100md.com 2 方法
2.1 包被 将包被抗体B109和B204按一定的浓度包被到酶标反应板上，4℃过夜。
2.2 封板 弃去包被抗体，用BSA封板。
2.3 加样 分别加入标准品和待测样品，室温过夜。加入标记抗体B108125I室温过夜。洗板测样。
3 结果
3.1 灵敏度 我们用已知浓度为0.2 ng.ml-1的样品稀释为0.2、0.1、0.05、0.001、0.0005等不同浓度，然后用IRMA法测定其含量，结果发现，凡浓度大于0.001 ng.ml-1的样品均能准确检出，这与有关文献报道最低检出浓度为10-9 g.ml-1是一致的。
, http://www.100md.com
3.2 回收率的测定 现已知β-HCG浓度为10.54 ng.ml-1的样品，在常规测定中分别加入5、2.5、0.156、0.078 ng.ml-1的标准品，测得回收率分别为98%、96%、97.2%、101.8%，其平均回收率为98.2%。
3.3 重复性测定 二份分别已知浓度为4.562 ng.ml-1、0.487 ngml-1的样品，经测定：高浓度，批内CV为4.3%(n=10)，批间CV为8.19%(n=7)。低浓度：批内CV为6.1%(n=10)，批间CV为7.9%(n=7)。
3.4 测定样品的处理 我们在测定尿样中的β-HCG的含量时，为了减少非特异性物质的干扰，尽可能将所测样品调到相同的碱性环境中，经多次测试，待测尿样需用Tris(pH=9.0)缓冲液进行处理。
, 百拇医药
4 讨论
以上结果显示，IRMA法测定β-HCG各项指标完全符合IRMA的有关质量控制要求，说明建立IRMA法检测尿样或血清中β-HCG含量是完全可行的。
由于HCG是由胎盘滋养层合体细胞所分泌的糠尿白，其结构由α和β两个亚基组成。而α亚基的核心部分有80%氨基酸与垂体分泌的一些糖蛋白激素如LH、FSH、TSH的组成、排列顺序相同，存在着共同的免疫基团。β亚基则完全不同，同时表现出很强的特异性，所以我们所建立的IRMA法主要检测HCG的β亚基部分，从而避免了与其它激素的交叉免疫反应，使检测结果更加可靠。
【作者简介】 方自国(1967-)，男，主管技师
徐希平(1957-)，男，教授，博士
(收稿日期 1999-07-26), 百拇医药
单位：高聘金 孙中霞(枣庄市卫生防疫站， 山东 枣庄 277101)；韩业琴(枣庄市立新学校卫生室， 山东 枣庄 277101)
关键词：抗-HBs；小学生
疾病控制杂志990336 【文献标识码】 A
【中图分类号】 R817.4
【文章编号】 1008-6013(1999)03-0227-01
Establishment on immunity radioaction analysis methods of β-HCG
FANG Zi-guo， ZHANG Xiu-qing, HE Xiao-li, NI Ji-hong, XU Xi-ping
, http://www.100md.com
为了探讨更特异、更灵敏检测月经周期尿样中β-HCG含量的方法。我们与哈佛大学公共卫生学院共同建立检测β-HCG含量的免疫放射分析法(IRMA)，现将有关情况报告如下。
1 仪器与试剂
1.1 Gamma counter 由芬兰EGNG公司提供。
1.2 试剂 抗体(B108、B109、B204)标准品(Cr127)以及BSA、BGG、酶标反应板等均由哈佛大学公共卫生学院提供。所用的包被液、稀释液、洗液均按常规法配制。
1.3 抗体标记 中科院北京401所标记。
1.4 样本的来源 分别收集4～6岁的男孩尿样(作为稀释HCG阳性尿样用)和妊娠一个月左右HCG阳性的孕妇尿样。
, http://www.100md.com 2 方法
2.1 包被 将包被抗体B109和B204按一定的浓度包被到酶标反应板上，4℃过夜。
2.2 封板 弃去包被抗体，用BSA封板。
2.3 加样 分别加入标准品和待测样品，室温过夜。加入标记抗体B108125I室温过夜。洗板测样。
3 结果
3.1 灵敏度 我们用已知浓度为0.2 ng.ml-1的样品稀释为0.2、0.1、0.05、0.001、0.0005等不同浓度，然后用IRMA法测定其含量，结果发现，凡浓度大于0.001 ng.ml-1的样品均能准确检出，这与有关文献报道最低检出浓度为10-9 g.ml-1是一致的。
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3.2 回收率的测定 现已知β-HCG浓度为10.54 ng.ml-1的样品，在常规测定中分别加入5、2.5、0.156、0.078 ng.ml-1的标准品，测得回收率分别为98%、96%、97.2%、101.8%，其平均回收率为98.2%。
3.3 重复性测定 二份分别已知浓度为4.562 ng.ml-1、0.487 ngml-1的样品，经测定：高浓度，批内CV为4.3%(n=10)，批间CV为8.19%(n=7)。低浓度：批内CV为6.1%(n=10)，批间CV为7.9%(n=7)。
3.4 测定样品的处理 我们在测定尿样中的β-HCG的含量时，为了减少非特异性物质的干扰，尽可能将所测样品调到相同的碱性环境中，经多次测试，待测尿样需用Tris(pH=9.0)缓冲液进行处理。
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4 讨论
以上结果显示，IRMA法测定β-HCG各项指标完全符合IRMA的有关质量控制要求，说明建立IRMA法检测尿样或血清中β-HCG含量是完全可行的。
由于HCG是由胎盘滋养层合体细胞所分泌的糠尿白，其结构由α和β两个亚基组成。而α亚基的核心部分有80%氨基酸与垂体分泌的一些糖蛋白激素如LH、FSH、TSH的组成、排列顺序相同，存在着共同的免疫基团。β亚基则完全不同，同时表现出很强的特异性，所以我们所建立的IRMA法主要检测HCG的β亚基部分，从而避免了与其它激素的交叉免疫反应，使检测结果更加可靠。
【作者简介】 方自国(1967-)，男，主管技师
徐希平(1957-)，男，教授，博士
(收稿日期 1999-07-26), 百拇医药