先天性弓形虫感染产前诊断和防治的研究＊
作者：刘焕玲 李上奎 何梓艳 徐 燕 程桂兰
单位：番禺市人民医院(511400)
关键词：弓形虫病；先天性感染；综合评定 产前诊断
广东医学990310 【摘要】 目的 探讨先天性弓形虫感染的产前诊断方法和防治措施，以减少畸形儿出生。方法 采用酶联免疫试验(ELISA)方法筛查5 164例孕妇血清，凡TOX-IgG(+)或TOX-IgM(+)的孕妇采用聚合酶链反应(PCR)技术检测血TOX-DNA。TOX-DNA(+)者的孕妇于孕期检测羊水TOX-DNA、AFP和GGT，同时结合B超检查和妊娠史等综合评定，对先天性弓形虫感染作出产前诊断，以采取药物治疗或引产等适当措施。结果 5 164例孕妇血清中TOX-DNA(+)30例(0.58%)，其中21例于孕中期接受羊水检测，羊水TOX-DNA(+)12例，TOX-DNA(-)9例，追踪随访这21例胎(婴)儿状况，(引)产后取脐血或畸形部位组织检测TOX-DNA，均与产前诊断相符。结论 采用特异性免疫抗体检测和弓形虫基因检测，并结合羊水监测、B超检查等综合评定方法是先天性弓形虫感染较客观的诊断手段，恰当的药物治疗或引产可有效地减少畸形儿出生。
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弓形虫(toxoplasmosis,简称TOX)是人类宫内感染致胎儿畸形的四大病原体这一。孕妇感染虫体后可通过胎盘垂直传播给胎儿，造成流产、早产、死胎和胎儿畸形等。因此，研究应用准确、简单的弓形虫病产前诊断方法，对孕妇进行筛查和产前监测，阻断母婴垂直传播，防止畸形胎儿出生，对优生优育有重要意义。本文采用ELISA法对孕妇进行筛查，阳性者采用PCR技术检测TOX-DNA，可疑TOX宫内感染的孕妇于孕中期抽取羊水检测，并结合B超和妊娠史等作出产前诊断，以采取相应的措施，防止残疾胎儿出生。
1 资料与方法
1.1 研究对象 自1996年1月～1998年1月在我院围产门诊产检的孕妇。常规进行ELISA法筛查，血清TOX-DNA阳性，无内科合并症的孕妇。
1.2 方法 采用ELISA法检测孕妇血TOX-IgG和TOX-IgM,阳性者再应用PCR技术检测其血清中TOX-DNA。TOX-DNA(+)的孕妇均给予螺旋霉素，每天2 g，分4次口服，连服1个月为一疗程，辅予叶酸、施尔康等治疗。TOX-DNA(+)的孕妇于孕中期(16～28周)经B超引导下行羊膜腔穿刺羊水5～15 mL，检测TOX-DNA、GGT和AFP等。根据上述检测结果，结合B超检查及有否不良接触史或不良妊娠史等作出综合评定，确定胎儿有无感染或畸形，以采取药物治疗或终止妊娠等处理。动态观察宫内胎儿和随访分娩后新生儿状态。分娩时取其脐血(近胎儿端7～9 cm处)2 mL或畸胎的畸形部位组织，检测TOX-DNA。ELISA法采用意大利苏来尔公司试剂盒，PCR试剂盒由第一军医大学生化室提供，GGT用定量动力法半自动生化分析仪测定，AFP检测用放射免疫法测定。
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2 结果
2.1 产前检测结果 在我院围产门诊产检的孕妇5164例中筛查出TOX-IgG(+)316例(6.12%)，TOX-IgM(+)29例(0.56%)。阳性者采用PCR技术检测TOX-DNA(+)30例，其中21例TOX-DNA(+)孕妇于妊娠中期接受羊水检测，发现12例羊水TOX-DNA(+)，9例阴性，阳性率为57.14%(12/21)。
2.2 回顾性诊断结果 随访21例血清TOX-DNA(+)并接受羊水检测的孕妇，其中8例实施引产，1例死胎，1例早产儿夭折，2例足月分娩。引产后脐血或畸形部位组织中11例检出TOX-DNA(+)，分别伴有无脑儿、脑积水、腹水、多发性畸形、黄疸、发热和抽搐等病理情况。另有1例脐血TOX-DNA(-)，新生儿足月顺产，外观正常，随访至今已7个多月未见异常。9例羊水TOX-DNA(-)的孕妇，继续给予螺旋霉素、叶酸和施尔康等治疗1～2个疗程，产检测脐血，均示TOX-DNA(-)，新生儿均未见异常。
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3 讨论
3.1 产前诊断方法的评价 对孕妇及胎儿是否有弓形虫感染的检验，以往采用各种免疫学筛查的方法，均有一定的缺陷。酶标板间的差异，标本污染，操作误差以及实验本身的缺陷等，故我们对抗体阳性均用PCR技术复查TOX-DNA。PCR诊断技术具有快速、简便及灵敏的特点，可减少假阴性的诊断，但也应考虑有假阳性的问题。测定羊水中GGT和AFP等生化指标有利于间接反映胎儿宫内生长和致病状况[1]。我们在本研究中发现12例羊水TOX-DNA(+)的孕妇中8例伴有AFP和(或)GGT的异常增高，B超提示有羊水过多、无脑儿、脑积水、腹水、双肾积液等异常情况；6例有过不良妊娠史，8例有不良接触史。提示上述因素与弓形虫感染相关，是有效的辅助诊断方法。因此，我们对弓形虫宫内感染的产前诊断和胎儿预后不能仅靠实验室检查，必须结合B超，其他生化指标和有否不良接触史及妊娠史等作出综合评定。
3.2 防治措施探讨 由于螺旋霉素不易透过胎盘对胎儿产生治疗作用，因此我们对可疑先天性弓形虫感染的孕妇改用乙胺嘧啶治疗，同时补充叶酸[2]。在研究中，12例羊水TOX-DNA(+)的孕妇，其中10例同时合并有GGT或AFP异常升高，或B超提示羊水过多、过少或合并有不良妊娠史或接触史等不良因素，考虑未能排除胎儿畸形，建议引产。引产后取脐血和畸形部位的组织中均检出TOX-DNA(+)，伴有无脑儿、脑积水、肝脾肿大、发热等病理情况。其余2例仅发现羊水TOX-DNA(+)，未合并上述不良因素，给予乙胺嘧啶和叶酸治疗至分娩。1例新生儿黄疸，肝脾肿大，脐血TOX-DNA(+)，给予螺旋霉素治疗后好转；另1例新生儿外观正常，脐血TOX-DNA(-)，随访至今7个多月，婴儿生长发育良好。研究说明了仅羊水TOX-DNA(+)并不是引产的唯一指征，必须综合评定，避免对未感染的胎儿作不必要的引产，对诊断感染的胎儿排除畸形者，密切观察、药物治疗。
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3.3 体会 我国的人群弓形虫感染率为5%～20%，产妇的感染率为3.6%～15%[3]。孕妇在妊娠期间感染弓形虫后，有20%～40%的机会传播给胎儿[4]。本研究垂直传播率是57.14%。因此，要降低先天性弓形虫病的发生，必须加强孕期卫生宣教，从婚检或孕前就做好自我保护，不吃半生半熟的肉类，不养猫、狗等宠物。孕期做好产前监测，从孕早期开始进行血清学检查，定期复检。对先天性弓形虫感染者做到及早诊断和治疗、适时终止妊娠，并做好追踪随访，尽可能减少母体把弓形虫病传给胎儿的机会，做到少生优生。
(本文承蒙中山医科大学孙逸仙纪念医院刘新质教授指正，特此志谢)
本项目为广州市科委重点科技项目(编号96-2-69-4)
4 参考文献
[1] Jeanel D. Epideminology of toxoplasmosis among pregnancy in the Paris women. Int J Epideminology, 1988,17(3):5959
, 百拇医药
[2] Matsui D. Prevention, diagnosis and treatment of fetal toxoplasmosis. Clin Perinato, 1994, 21:675
[3] 王崇功.弓形虫体病与妊娠.江苏医药，1998，7：399
[4] Grover CM, Thulliey P, Remington JS, et al. Rapid prenatal diagnosis of congenital toxoplsama infection polymerase chain reaction. J Clin Microbiol, 1990,28:2297, 百拇医药
单位：番禺市人民医院(511400)
关键词：弓形虫病；先天性感染；综合评定 产前诊断
广东医学990310 【摘要】 目的 探讨先天性弓形虫感染的产前诊断方法和防治措施，以减少畸形儿出生。方法 采用酶联免疫试验(ELISA)方法筛查5 164例孕妇血清，凡TOX-IgG(+)或TOX-IgM(+)的孕妇采用聚合酶链反应(PCR)技术检测血TOX-DNA。TOX-DNA(+)者的孕妇于孕期检测羊水TOX-DNA、AFP和GGT，同时结合B超检查和妊娠史等综合评定，对先天性弓形虫感染作出产前诊断，以采取药物治疗或引产等适当措施。结果 5 164例孕妇血清中TOX-DNA(+)30例(0.58%)，其中21例于孕中期接受羊水检测，羊水TOX-DNA(+)12例，TOX-DNA(-)9例，追踪随访这21例胎(婴)儿状况，(引)产后取脐血或畸形部位组织检测TOX-DNA，均与产前诊断相符。结论 采用特异性免疫抗体检测和弓形虫基因检测，并结合羊水监测、B超检查等综合评定方法是先天性弓形虫感染较客观的诊断手段，恰当的药物治疗或引产可有效地减少畸形儿出生。
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弓形虫(toxoplasmosis,简称TOX)是人类宫内感染致胎儿畸形的四大病原体这一。孕妇感染虫体后可通过胎盘垂直传播给胎儿，造成流产、早产、死胎和胎儿畸形等。因此，研究应用准确、简单的弓形虫病产前诊断方法，对孕妇进行筛查和产前监测，阻断母婴垂直传播，防止畸形胎儿出生，对优生优育有重要意义。本文采用ELISA法对孕妇进行筛查，阳性者采用PCR技术检测TOX-DNA，可疑TOX宫内感染的孕妇于孕中期抽取羊水检测，并结合B超和妊娠史等作出产前诊断，以采取相应的措施，防止残疾胎儿出生。
1 资料与方法
1.1 研究对象 自1996年1月～1998年1月在我院围产门诊产检的孕妇。常规进行ELISA法筛查，血清TOX-DNA阳性，无内科合并症的孕妇。
1.2 方法 采用ELISA法检测孕妇血TOX-IgG和TOX-IgM,阳性者再应用PCR技术检测其血清中TOX-DNA。TOX-DNA(+)的孕妇均给予螺旋霉素，每天2 g，分4次口服，连服1个月为一疗程，辅予叶酸、施尔康等治疗。TOX-DNA(+)的孕妇于孕中期(16～28周)经B超引导下行羊膜腔穿刺羊水5～15 mL，检测TOX-DNA、GGT和AFP等。根据上述检测结果，结合B超检查及有否不良接触史或不良妊娠史等作出综合评定，确定胎儿有无感染或畸形，以采取药物治疗或终止妊娠等处理。动态观察宫内胎儿和随访分娩后新生儿状态。分娩时取其脐血(近胎儿端7～9 cm处)2 mL或畸胎的畸形部位组织，检测TOX-DNA。ELISA法采用意大利苏来尔公司试剂盒，PCR试剂盒由第一军医大学生化室提供，GGT用定量动力法半自动生化分析仪测定，AFP检测用放射免疫法测定。
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2 结果
2.1 产前检测结果 在我院围产门诊产检的孕妇5164例中筛查出TOX-IgG(+)316例(6.12%)，TOX-IgM(+)29例(0.56%)。阳性者采用PCR技术检测TOX-DNA(+)30例，其中21例TOX-DNA(+)孕妇于妊娠中期接受羊水检测，发现12例羊水TOX-DNA(+)，9例阴性，阳性率为57.14%(12/21)。
2.2 回顾性诊断结果 随访21例血清TOX-DNA(+)并接受羊水检测的孕妇，其中8例实施引产，1例死胎，1例早产儿夭折，2例足月分娩。引产后脐血或畸形部位组织中11例检出TOX-DNA(+)，分别伴有无脑儿、脑积水、腹水、多发性畸形、黄疸、发热和抽搐等病理情况。另有1例脐血TOX-DNA(-)，新生儿足月顺产，外观正常，随访至今已7个多月未见异常。9例羊水TOX-DNA(-)的孕妇，继续给予螺旋霉素、叶酸和施尔康等治疗1～2个疗程，产检测脐血，均示TOX-DNA(-)，新生儿均未见异常。
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3.1 产前诊断方法的评价 对孕妇及胎儿是否有弓形虫感染的检验，以往采用各种免疫学筛查的方法，均有一定的缺陷。酶标板间的差异，标本污染，操作误差以及实验本身的缺陷等，故我们对抗体阳性均用PCR技术复查TOX-DNA。PCR诊断技术具有快速、简便及灵敏的特点，可减少假阴性的诊断，但也应考虑有假阳性的问题。测定羊水中GGT和AFP等生化指标有利于间接反映胎儿宫内生长和致病状况[1]。我们在本研究中发现12例羊水TOX-DNA(+)的孕妇中8例伴有AFP和(或)GGT的异常增高，B超提示有羊水过多、无脑儿、脑积水、腹水、双肾积液等异常情况；6例有过不良妊娠史，8例有不良接触史。提示上述因素与弓形虫感染相关，是有效的辅助诊断方法。因此，我们对弓形虫宫内感染的产前诊断和胎儿预后不能仅靠实验室检查，必须结合B超，其他生化指标和有否不良接触史及妊娠史等作出综合评定。
3.2 防治措施探讨 由于螺旋霉素不易透过胎盘对胎儿产生治疗作用，因此我们对可疑先天性弓形虫感染的孕妇改用乙胺嘧啶治疗，同时补充叶酸[2]。在研究中，12例羊水TOX-DNA(+)的孕妇，其中10例同时合并有GGT或AFP异常升高，或B超提示羊水过多、过少或合并有不良妊娠史或接触史等不良因素，考虑未能排除胎儿畸形，建议引产。引产后取脐血和畸形部位的组织中均检出TOX-DNA(+)，伴有无脑儿、脑积水、肝脾肿大、发热等病理情况。其余2例仅发现羊水TOX-DNA(+)，未合并上述不良因素，给予乙胺嘧啶和叶酸治疗至分娩。1例新生儿黄疸，肝脾肿大，脐血TOX-DNA(+)，给予螺旋霉素治疗后好转；另1例新生儿外观正常，脐血TOX-DNA(-)，随访至今7个多月，婴儿生长发育良好。研究说明了仅羊水TOX-DNA(+)并不是引产的唯一指征，必须综合评定，避免对未感染的胎儿作不必要的引产，对诊断感染的胎儿排除畸形者，密切观察、药物治疗。
, 百拇医药
3.3 体会 我国的人群弓形虫感染率为5%～20%，产妇的感染率为3.6%～15%[3]。孕妇在妊娠期间感染弓形虫后，有20%～40%的机会传播给胎儿[4]。本研究垂直传播率是57.14%。因此，要降低先天性弓形虫病的发生，必须加强孕期卫生宣教，从婚检或孕前就做好自我保护，不吃半生半熟的肉类，不养猫、狗等宠物。孕期做好产前监测，从孕早期开始进行血清学检查，定期复检。对先天性弓形虫感染者做到及早诊断和治疗、适时终止妊娠，并做好追踪随访，尽可能减少母体把弓形虫病传给胎儿的机会，做到少生优生。
(本文承蒙中山医科大学孙逸仙纪念医院刘新质教授指正，特此志谢)
本项目为广州市科委重点科技项目(编号96-2-69-4)
4 参考文献
[1] Jeanel D. Epideminology of toxoplasmosis among pregnancy in the Paris women. Int J Epideminology, 1988,17(3):5959
, 百拇医药
[2] Matsui D. Prevention, diagnosis and treatment of fetal toxoplasmosis. Clin Perinato, 1994, 21:675
[3] 王崇功.弓形虫体病与妊娠.江苏医药，1998，7：399
[4] Grover CM, Thulliey P, Remington JS, et al. Rapid prenatal diagnosis of congenital toxoplsama infection polymerase chain reaction. J Clin Microbiol, 1990,28:2297, 百拇医药