法洛四联症红细胞超微结构和变形性变化
作者：李明娴 张杰民 周春艳 任波 李淑珍 何淑清 戴洪龄
单位：李明娴 周春艳 戴洪龄 (白求恩医科大学第一临床学院呼吸科，长春 130021)；张杰民 (白求恩医科大学第三临床学院心外科)；任 波 (吉林省人民医院循环科)
关键词：法洛四联症；红细胞；超微结构；变形性
中国医学科学院学报990320 中图号 R541.1 R331.141
由于缺氧的刺激，法洛四联症(以下简称F4)患者的红细胞数及血红蛋白量均高于正常人。为了解F4患者红细胞超微结构(RBCU)和红细胞变形性(RBCD)有无改变，观察19例F4患者红细胞在扫描电子显微镜(以下简称扫描电镜)下的超微结构变化，测定RBCD，并对其变化原因做初步探讨。
, 百拇医药
1 材料和方法
病例选择 F4患者19例，男11例，女8例；年龄3～17岁，平均10.1岁；平均红细胞压积为0.520±0.076，平均动脉血氧饱和度为0.787±0.098。23名健康人做为对照组，男13例，女10例；年龄7～30岁，平均15.4岁。
RBCU的观察 采用日本X-650型扫描电镜观察RBCU。待观察的红细胞经固定、脱水、干燥、喷金等处理，先在低倍镜下观察整个标本，再于不同高倍镜下进一步观察，每例计数200个细胞，分类并摄影。
异常红细胞在扫描电镜下的形态不尽相同，笔者参阅文献并结合F4患者异常红细胞的种类和特点[1]，将F4患者异常红细胞的形态分为以下5种：双凹圆盘形、口形、棘形、单嵴盘形和其他异形(包括球形、三角形、幅形、泄气球形等)。
, 百拇医药
RBCD的测定 采用DXE-300型核孔滤膜红细胞变形能力测定仪，取静脉血2 ml，肝素抗凝，离心后进行红细胞洗涤，并制备红细胞悬浮液，利用核孔滤膜法测定RBCD指数(IF)。
ts和tb分别为红细胞悬浮液和缓冲液的滤过时间，H为红细胞悬浮液的压积。IF值愈大，表示红细胞滤过能力愈小，即红细胞变形性愈差；反之，红细胞变形性愈佳[2]。
实验以盲法进行。采血测定RBCU和RBCD前，先取股动脉血测血气值，然后抽取外周静脉血测红细胞压积。观察结果以均数±标准差(
±s)表示，组间显著性差异比较采用t检验。
2 结果
, http://www.100md.com
F4组RBCU变化：见附表。
附表 F4患者红细胞超微结构变化
Table The changes of RBCU in Fallot's syndrome (±s) RBC′s shapes
F4(n=19)
Control (n=23)
P
Normal
25.4±3.78
, 百拇医药 72.8±2.39
<0.01
Thorn
14.0±5.22
10.1±1.45
<0.05
Mouth
21.6±5.21
4.8±1.25
<0.01
Plate with
32.3±7.65
, 百拇医药
6.4±1.84
<0.01
single ridge
Other shapes
6.7±4.23
5.8±2.87
>0.01
F4组RBCD变化：F4组IF值为0.927±0.290，明显高于对照组的0.389±0.104(P<0.01)，表明F4组RBCD明显低于对照组。
3 讨论
已往研究表明，在扫描电镜下肝硬化、尿毒症及家族性高胆固醇血症患者的红细胞形态呈现异常变化[1]；另外，RBCD在糖尿病及急性脑血管病等病变中低于正常[3]。本实验结果发现：F4患者红细胞在扫描电镜下的形态呈现异常改变，表现为正常红细胞数量减少(P<0.01)，异常红细胞显著增加，以口形和单嵴盘形增加为主(P<0.01)，其次是棘形红细胞增加(P<0.05)；同时患者的RBCD明显低于正常对照组(P<0.01)。说明缺氧使F4患者正常红细胞数减少及血红蛋白量异常增加的同时，也使红细胞形态及功能发生了变化。
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RBCU变化的机制尚不十分清楚。有学者认为非通透性阴离子能改变跨膜pH梯度，致红细胞球形变。也有学者认为，在低氧条件下，红细胞膜表面ATP浓度降低，使Ca2+-Mg2+-ATP酶作用降低或消失，细胞内Ca2+潴留，而致红细胞呈棘形或球形改变[4，5]。本实验观察到F4患者RBCD明显降低，推测与缺氧有关。由于缺氧，ATP合成减少，红细胞膜硬度增加，加上缺氧造成红细胞异形变，均是RBCD降低的因素。
何淑清、李淑珍为进修医生
李明娴为通讯作者
参考文献
1 程宝庚.家族性高胆固醇血症患者红细胞扫描电镜观察.中华血液学杂志，1987，6：344～346
, http://www.100md.com
2 戴稼禾，梁子钧，陈良矩，等.DXC-200型核孔滤膜红细胞变形能力测定仪的研制及其临床应用.医疗器械，1986，10：10～14
3 张立楠，肖 威，李德高，等.急性脑血管病患者红细胞可滤过性的初步观察.中华内科杂志，1986，25：513～515
4 Cooper RA.Lipids of human red cell membrane normal composition and variability diseas.Semin Hematol, 1970,7:296～322
5 郑学志，王赞舜.红细胞变形性临床意义.国外医学老年医学分册，1988，2：72～76
(1998-03-20 收稿), http://www.100md.com
单位：李明娴 周春艳 戴洪龄 (白求恩医科大学第一临床学院呼吸科，长春 130021)；张杰民 (白求恩医科大学第三临床学院心外科)；任 波 (吉林省人民医院循环科)
关键词：法洛四联症；红细胞；超微结构；变形性
中国医学科学院学报990320 中图号 R541.1 R331.141
由于缺氧的刺激，法洛四联症(以下简称F4)患者的红细胞数及血红蛋白量均高于正常人。为了解F4患者红细胞超微结构(RBCU)和红细胞变形性(RBCD)有无改变，观察19例F4患者红细胞在扫描电子显微镜(以下简称扫描电镜)下的超微结构变化，测定RBCD，并对其变化原因做初步探讨。
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1 材料和方法
病例选择 F4患者19例，男11例，女8例；年龄3～17岁，平均10.1岁；平均红细胞压积为0.520±0.076，平均动脉血氧饱和度为0.787±0.098。23名健康人做为对照组，男13例，女10例；年龄7～30岁，平均15.4岁。
RBCU的观察 采用日本X-650型扫描电镜观察RBCU。待观察的红细胞经固定、脱水、干燥、喷金等处理，先在低倍镜下观察整个标本，再于不同高倍镜下进一步观察，每例计数200个细胞，分类并摄影。
异常红细胞在扫描电镜下的形态不尽相同，笔者参阅文献并结合F4患者异常红细胞的种类和特点[1]，将F4患者异常红细胞的形态分为以下5种：双凹圆盘形、口形、棘形、单嵴盘形和其他异形(包括球形、三角形、幅形、泄气球形等)。
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RBCD的测定 采用DXE-300型核孔滤膜红细胞变形能力测定仪，取静脉血2 ml，肝素抗凝，离心后进行红细胞洗涤，并制备红细胞悬浮液，利用核孔滤膜法测定RBCD指数(IF)。
ts和tb分别为红细胞悬浮液和缓冲液的滤过时间，H为红细胞悬浮液的压积。IF值愈大，表示红细胞滤过能力愈小，即红细胞变形性愈差；反之，红细胞变形性愈佳[2]。
实验以盲法进行。采血测定RBCU和RBCD前，先取股动脉血测血气值，然后抽取外周静脉血测红细胞压积。观察结果以均数±标准差(
±s)表示，组间显著性差异比较采用t检验。2 结果
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F4组RBCU变化：见附表。
附表 F4患者红细胞超微结构变化
Table The changes of RBCU in Fallot's syndrome (
±s) RBC′s shapesF4(n=19)
Control (n=23)
P
Normal
25.4±3.78
, 百拇医药 72.8±2.39
<0.01
Thorn
14.0±5.22
10.1±1.45
<0.05
Mouth
21.6±5.21
4.8±1.25
<0.01
Plate with
32.3±7.65
, 百拇医药
6.4±1.84
<0.01
single ridge
Other shapes
6.7±4.23
5.8±2.87
>0.01
F4组RBCD变化：F4组IF值为0.927±0.290，明显高于对照组的0.389±0.104(P<0.01)，表明F4组RBCD明显低于对照组。
3 讨论
已往研究表明，在扫描电镜下肝硬化、尿毒症及家族性高胆固醇血症患者的红细胞形态呈现异常变化[1]；另外，RBCD在糖尿病及急性脑血管病等病变中低于正常[3]。本实验结果发现：F4患者红细胞在扫描电镜下的形态呈现异常改变，表现为正常红细胞数量减少(P<0.01)，异常红细胞显著增加，以口形和单嵴盘形增加为主(P<0.01)，其次是棘形红细胞增加(P<0.05)；同时患者的RBCD明显低于正常对照组(P<0.01)。说明缺氧使F4患者正常红细胞数减少及血红蛋白量异常增加的同时，也使红细胞形态及功能发生了变化。
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RBCU变化的机制尚不十分清楚。有学者认为非通透性阴离子能改变跨膜pH梯度，致红细胞球形变。也有学者认为，在低氧条件下，红细胞膜表面ATP浓度降低，使Ca2+-Mg2+-ATP酶作用降低或消失，细胞内Ca2+潴留，而致红细胞呈棘形或球形改变[4，5]。本实验观察到F4患者RBCD明显降低，推测与缺氧有关。由于缺氧，ATP合成减少，红细胞膜硬度增加，加上缺氧造成红细胞异形变，均是RBCD降低的因素。
何淑清、李淑珍为进修医生
李明娴为通讯作者
参考文献
1 程宝庚.家族性高胆固醇血症患者红细胞扫描电镜观察.中华血液学杂志，1987，6：344～346
, http://www.100md.com
2 戴稼禾，梁子钧，陈良矩，等.DXC-200型核孔滤膜红细胞变形能力测定仪的研制及其临床应用.医疗器械，1986，10：10～14
3 张立楠，肖 威，李德高，等.急性脑血管病患者红细胞可滤过性的初步观察.中华内科杂志，1986，25：513～515
4 Cooper RA.Lipids of human red cell membrane normal composition and variability diseas.Semin Hematol, 1970,7:296～322
5 郑学志，王赞舜.红细胞变形性临床意义.国外医学老年医学分册，1988，2：72～76
(1998-03-20 收稿), http://www.100md.com