马洛替酯抑制肝纤维化的实验与临床研究
作者：阳学风 曾明新 张明亮 刘金法
单位：衡阳医学院第二附属医院消化疾病研究室 湖南省衡阳市 421001
关键词：肝硬化/药物疗法；肝炎/药物疗法；马洛替酯/治疗应用
中国图书资料分类号 R575
中国图书资料分类号 R575.2
摘 要
目的 研究国产马洛替酯抑制小鼠肝纤维化的作用.
方法 对Balb/c小白鼠用400mL/L CCl4 橄榄油溶液2mL/kg，ig，1次/wk，同时自由饮用50mL/L酒精水溶液，治疗组于wk16起加马洛替酯50或100mg/(kg.d)，ig，5d/wk. wk24末断头处死，取血检查谷丙转氨酶(ALT)、清蛋白(Alb) 剖腹取肝，部分作病理检查，HE和VG染色，观察肝纤维化分期；部分制成100g/L肝匀浆测定肝组织中羟脯氨酸(Hyp)、透明质酸(HA)含量. 选择40例中度慢性乙型病毒性肝炎，随机分2组，采用双盲法给药，治疗前及3mo后，检测血清ALT，Alb，Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)及透明质酸(HA).
, http://www.100md.com
结果 模型组绝大多数小鼠肝脏形成了假小叶，肝组织Hyp(mg/g)，HA含量(mg/g)是37.0±21.2，2.13±0.34. 治疗组Ⅳ，Ⅴ组Hyp含量是22.3±6.0，16.1±1.0；HA含量是1.34±0.14，0.53±0.17. 治疗组Ayp，HA含量较模型组明显减少(P<0.05). 慢性肝炎患者治疗3mo后，血清PⅢP(kU/L)，HA含量(mg/L)分别是1.4±1.0，74.5±27.6；安慰剂组PⅢP，HA含量是2.2±1.6，137.4±46.5，两组PⅢP，HA比较，差异有显著性(P<0.05).
结论 马洛替酯可使CCl4，酒精诱导的肝纤维化程度减轻，降低肝内Hyp和HA含量，降低中度慢性肝炎患者血清PⅢP及HA水平，具有一定的抑制肝纤维化作用.
Inhibitory effect of malotilate on hepatic fibrosis in mice and chronic hepatitis patients
, 百拇医药
YANG Xue-Feng, ZENG Ming-Xin, ZHANG Ming-Liang and LIU Jin-Fa
Section of Digestive Disease Research, Second Affiliated Hospital, Hengyang Medical College, Hengyang 421001, Hunan Province, China
Subject headings liver cirrhosis/drug therapy; hepatitis/drug therapy; malotilate/therapeutic use
Abstract
AIM The inhibitory effect of malotilate on hepatic fibrosis was studied in mice and chronic hepatitis patients.
, http://www.100md.com
METHODS Balb/c mice were given orally 400mL/L CCl4 with olive oil 2mL/kg, once a week with free access to 50mL/L alcohol for 24 weeks. In the treated group (Ⅳ,Ⅴ), administration of malotilate (50, 100mg/kg) 5 times a week started 16 weeks after the beginning of experiment and continued until week 24. Forty patients with chronic hepatitis (moderate degree) were randomly divided into two groups, treated group and placebo group. The patients were followed-up for 3 months.
, 百拇医药
RESULTS The liver in most of mice in pathologic model group formed pseudolobule. Hepatic hydroxyproline (Hyp, mg/g) and hyaluronic acid (HA, mg/g) contents were 37.0±21.2， 2.13±0.34 respectively. In the treated group (Ⅳ and Ⅴ), the contents of hepatic Hyp (mg/g) were 22.3±6.0， 16.1±1.0； HA (mg/g) were 1.34±0.14， 0.53±0.17, respectively. The contents of hepatic Hyp and HA were significantly reduced in the treated group than that in pathologic model group (P<0.05). After treatment for 3mo, the serum levels of procollagen Ⅲ peptide (PⅢP, kU/L) and HA (mg/L) in treated group of chronic hepatitis were 1.4±1.0，74.5±27.6; in the placebo group, PⅢP and HA were 2.2±1.6， 137.4±46.5, respectively. The serum levels of PⅢP and HA in treated group was significantly lower compared to placebo group(P<0.05).
, http://www.100md.com
CONCLUSION The hepatic fibrosis in mice and chronic hepatitis patients can be inhibited by malotilate.
0 引言
马洛替酯是否具有抑制肝纤维化作用，国外研究结果不一，国内对此未见实验及临床研究报道. 利用Balb/c小白鼠肝纤维模型及临床观察，研究国产马洛替酯抑制肝纤维化作用，为临床应用提供依据.
1 材料和方法
1.1 材料 马洛替酯及其安慰剂，由常州第三制药厂提供，片剂. 透明质酸放免试剂盒，由上海海军医学研究所提供. 人型Ⅲ型前胶原肽酶联免疫试剂盒由京狮医药科技开发研究所提供. Balb/c小白鼠80只，雌雄不限，体重15g～18g. 随机分为5组：Ⅰ组为正常对照组，普通饲料，自由饮水；Ⅱ组为药物对照组，饲料饮水同Ⅰ组，于wk16起加马洛替酯100mg/(kg.d)，ig，5d/wk；Ⅲ组为病理模型组，普通饲料，自由饮用50mL/L酒精水溶液，400mL/L四氯化碳橄榄油溶液2mL/kg,ig，1次/wk；Ⅳ，Ⅴ组为治疗组，在与Ⅲ组相同处理基础上，于16wk起加马洛替酯50或100mg/(kg.d)，ig,5d/wk. wk24末所有小鼠断头处死，留取血液测定谷丙转氨酶(ALT)，清蛋白(Alb). 剖腹取肝，部分用于病理观察：100mL/L福尔马林固定后，石蜡包埋切片，HE，VG染色，肝纤维化程度按1995年第五次全国传染病寄生虫学术会议讨论修订的《病毒性肝炎防治方案》(试行)(简称’95方案)标准分期(S)[1]；部分肝组织制成100g/L匀浆，检测肝组织羟脯氨酸(Hyp)[2]透明质酸(HA)含量(放免法，操作按说明进行)，同时按磺基水杨酸比浊法进行组织蛋白定量.
, http://www.100md.com
1.2 临床观察 按’95方案，人选病例为慢性乙型肝炎中度患者(均排除了其他疾病)，年龄20岁～45岁，男28例，女12例，临床随机分为2组，采用双盲法给药，其中A组为治疗组(600mg/d，5d/wk)，疗程3mo；B组为安慰剂组，除不含有效成分外，其余均相同. 治疗前及3mo后抽血检查ALT，Alb，血清Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)(酶联免疫法，操作按说明进行)，HA.
统计学处理 多组间比较采用F分析及q检查，两组间比较采用t检验.
2 结果
2.1 动物实验 血清及肝匀浆各项指标见表1. 病理检查：Ⅰ，Ⅱ组肝小叶完整，细胞清晰；Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ组有不同程度肝细胞变性坏死、炎症细胞浸润及纤维组织增生. Ⅲ组病变严重，广泛气球样变、点状或灶状坏死，汇管区炎症十分明显，炎症细胞主要是中性粒细胞和淋巴细胞，中央静脉周围和汇管区纤维母细胞聚集及纤维组织增生，绝大多数(11/12)形成了不完全或完全假小叶(图1)，与此对照，Ⅳ和Ⅴ组仅表现为肝细胞轻度变性、少量炎症细胞浸润和轻度纤维组织增生(图2). 各组肝纤维化分期见表2.
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2.2 临床结果 治疗3mo疗效明显(表3)，未发现明显的毒副作用.
表1 小鼠血清及肝匀浆生化检查
(
±s)
组别
n
ALT(nmol/s)
Alb(g/L)
肝Hyp(mg/g)
肝HA(mg/g)
, 百拇医药
Ⅰ
10
416.7±243.4
28.4±4.5
9.6 ±3.8
0.36±0.10
Ⅱ
10
366.7±113.4
34.1±4.9a
10.4±2.6
0.38±0.08
, http://www.100md.com
Ⅲ
12
798.5±141.7b
20.1±5.0b
37.0±21.2b
2.13±0.34b
Ⅳ
9
530.1±198.4d
26.2±21.2d
22.3±6.0c
, 百拇医药
1.34±0.14d
Ⅴ
12
431.7±155.0d
29.1±1.2d
16.1±1.0d
0.53±0.17d
aP<0.05，bP<0.01，vs Ⅰ组；cP<0.05，dP<0.01，vs Ⅲ组.表2 各组小鼠肝纤维化分期
组别
, http://www.100md.com
n
肝纤维化分期
0
1
2
3
4
Ⅰ
10
10
0
0
0
0
, 百拇医药
Ⅱ
10
10
0
0
0
0
Ⅲ
12
0
0
1
9
2
, 百拇医药
Ⅳ
9
6
1
2
0
0
Ⅴ
12
10
1
1
0
0
, 百拇医药
表3 马洛替酯治疗慢性肝炎3mo后血清指标结果
(±s)
组 织
PⅢP(kU/L)
HA(mg/L)
ALT(nmol/s)
Alb(g/L)
A 治疗前
2.1±1.4
, 百拇医药 130.2±47.5
1843.7±808.5
36.5±5.0
治疗后
1.4±1.0a
74.5 ±27.6a
466.8 ±196.7a
44.8±3.3a
B 治疗前
2.1±1.5
128.5±56.2
, 百拇医药
1950.4±513.4
37.6±4.7
治疗后
2.2±1.6c
137.4±46.5c
1275.3±666.8ac
36.8±3.2c
aP<0.05，vs 治疗前；cP<0.05，vs A组.
, http://www.100md.com
图1a 病理模型组肝假小叶 HE 3.3×10
图1b 病理模型组肝假小叶 VG 3.3×10
图2a 治疗组(Ⅴ组)肝组织形态学变化 HE 3.3×10
图2b 治疗组(Ⅴ组)肝组织形态学变化 HG 3.3×10
, 百拇医药
3 讨论
3.1 马洛替酯对肝脏病理的影响 国产马洛替酯具有保肝及纠正低蛋白血症作用[3]，它对肝纤维化的影响国内未见实验及临床研究报道. 我们用CCl4，酒精饲灌Balb/c小鼠24wk后，形成了不同程度肝纤维化，其中模型组绝大多数(11/12)形成完全或不完全性假小叶(表1，图1). 应用马洛替酯治疗，肝纤维化明显减轻(表1，图2)，病理研究结果说明马洛替酯有一定的抑制肝纤维化作用.
3.2 马洛替酯对胶原代谢的影响 肝纤维化涉及肝内细胞，基质及纤维增生，本组肝纤维化VG染色结果提示，增生的纤维主要是胶原纤维，胶原纤维中含有占胶原氨基酸总量13%的Hyp，后者在其他蛋白质中含量甚微或不含有. 因此，检测组织中Hyp含量可作为胶原纤维定量的一种指标. 本研究中，动物模型组Hyp含量是正常对照组的3.9倍，治疗组Hyp含量高于正常对照组，但明显低于模型组. 这些结果说明肝纤维化时，胶原增生活跃(与病理形态结果一致)，同时也说明马洛替酯抗肝纤维化作用的一个途径是抑制胶原的沉积. 临床上肝脏病理检查十分困难，由于肝穿属于损伤性检查，患者多不乐意接受，作为肝纤维化治疗药物考核指标更难(需多次活检)，加上肝穿活检存在多种误差影响因素，因此临床上迫切需要无损伤性能反映肝纤维化程度的血清学指标. 多数学者认为血清Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)测定为首选，近年京狮医药科技开发研究所生产的人型PⅢP酶标试剂，临床应用结果较好，能反映肝纤维化的程度[4]. 应用马洛替酯治疗中度慢性肝炎3mo，患者血清PⅢP水平显著降低，具有国外同类产品相似作用[5].
, 百拇医药
3.3 马洛替酯对透明质酸代谢的影响 肝纤维化时，基质成分也明显增加. HA是基质的一种主要成分，本研究中，模型组HA含量是正常组的6倍，治疗组肝内HA含量高于正常对照组，但明显低于模型组，结果说明肝纤维化时，肝内HA与胶原纤维一样含量亦会增多，马洛替酯可减少这种沉积. 肝内HA系由肝内Ito细胞合成，肝窦内皮细胞清除. 如果合成增多、清除减少，肝内HA含量就会相应增多，同样释放入血的量亦会增多，检测血清HA的含量可以反映纤维化组织中HA代谢状态，由于HA与肝内胶原呈比例增加，检测血清含量可以反映肝纤维化的程度[4,6,7]. 本研究中，慢性中度肝炎患者治疗组血清HA的水平明显低于安慰剂组，证明马洛替酯可影响肝内HA代谢，降低肝内及血清含量. 众多的研究认为，马洛替酯对实验性的肝纤维化效果尚可，临床应用效果如何，结论有些分岐. 本研究结果倾向于肯定其抗肝纤维化作用，但须进一步扩大规模研究，尤其是需要积累病理资料.
作者简介：
, http://www.100md.com 阳学风，男，1960-05-01生，湖南省衡阳市人，汉族. 1982年衡阳医学院医疗系本科毕业，1992年湖南医科大学硕士，消化内科副主任医师，副教授，大内科副主任，主要从事肝纤维化的研究，发表论文10篇.
通讯作者 阳学风，421001，衡阳医学院第二附属医院消化疾病研究室，湖南省衡阳市解放路60号.
Correspondence to:YANG Xue-Feng, Section of Digestive Disease Research , Second Affiliated Hospital, Hengyang Medical College, 60 Jiefanglu, Hengyang 421001, Hunan Province, China
Tel. +86.734.8223251 Ext. 8405
, 百拇医药
4 参考文献
[1] 病毒性肝炎防治方案(试行). 中华内科杂志，1995；34：788-791
[2] Jamall IS, Finelli VN, Hee SS, Q. A sample method to determine nanogram levels of 4-hydroxyproline in biological tissues. Anal Biochem, 1981;112:70-75
[3] 施文鸿，贾辅忠，买凯，熊诗松. 肝蛋白代谢改善剂马洛替酯. 国外医学合成药生化药制剂分册，1990；11：169-171
[4] 陈峰，蔡卫民. 近3年来肝纤维化血清学诊断与治疗. 新消化病学杂志，1997；5：69-71
[5] Taksase S, Takada A, Yasnhara M, Sato H, Matsuda Y. Effect of malotilate treatment on the serum markers of hepatic fibrogenesis in the liver cirrhosis. Gastroenterol Jpn, 1998;23:639-645
[6] 赵聚琪，阳学风. 血清透明质酸水平与慢性肝病进展及预后的关系. 衡阳医学院学报，1996；24：226-(下转234)
[7] 赵永锋，闻勤生，辛召平. 血清HA，Ⅳ-C，LN及CHE诊断肝纤维化的评价. 新消化病学杂志，1997；5：812
收稿日期 1998-07-06, 百拇医药
单位：衡阳医学院第二附属医院消化疾病研究室 湖南省衡阳市 421001
关键词：肝硬化/药物疗法；肝炎/药物疗法；马洛替酯/治疗应用
中国图书资料分类号 R575
中国图书资料分类号 R575.2
摘 要
目的 研究国产马洛替酯抑制小鼠肝纤维化的作用.
方法 对Balb/c小白鼠用400mL/L CCl4 橄榄油溶液2mL/kg，ig，1次/wk，同时自由饮用50mL/L酒精水溶液，治疗组于wk16起加马洛替酯50或100mg/(kg.d)，ig，5d/wk. wk24末断头处死，取血检查谷丙转氨酶(ALT)、清蛋白(Alb) 剖腹取肝，部分作病理检查，HE和VG染色，观察肝纤维化分期；部分制成100g/L肝匀浆测定肝组织中羟脯氨酸(Hyp)、透明质酸(HA)含量. 选择40例中度慢性乙型病毒性肝炎，随机分2组，采用双盲法给药，治疗前及3mo后，检测血清ALT，Alb，Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)及透明质酸(HA).
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结果 模型组绝大多数小鼠肝脏形成了假小叶，肝组织Hyp(mg/g)，HA含量(mg/g)是37.0±21.2，2.13±0.34. 治疗组Ⅳ，Ⅴ组Hyp含量是22.3±6.0，16.1±1.0；HA含量是1.34±0.14，0.53±0.17. 治疗组Ayp，HA含量较模型组明显减少(P<0.05). 慢性肝炎患者治疗3mo后，血清PⅢP(kU/L)，HA含量(mg/L)分别是1.4±1.0，74.5±27.6；安慰剂组PⅢP，HA含量是2.2±1.6，137.4±46.5，两组PⅢP，HA比较，差异有显著性(P<0.05).
结论 马洛替酯可使CCl4，酒精诱导的肝纤维化程度减轻，降低肝内Hyp和HA含量，降低中度慢性肝炎患者血清PⅢP及HA水平，具有一定的抑制肝纤维化作用.
Inhibitory effect of malotilate on hepatic fibrosis in mice and chronic hepatitis patients
, 百拇医药
YANG Xue-Feng, ZENG Ming-Xin, ZHANG Ming-Liang and LIU Jin-Fa
Section of Digestive Disease Research, Second Affiliated Hospital, Hengyang Medical College, Hengyang 421001, Hunan Province, China
Subject headings liver cirrhosis/drug therapy; hepatitis/drug therapy; malotilate/therapeutic use
Abstract
AIM The inhibitory effect of malotilate on hepatic fibrosis was studied in mice and chronic hepatitis patients.
, http://www.100md.com
METHODS Balb/c mice were given orally 400mL/L CCl4 with olive oil 2mL/kg, once a week with free access to 50mL/L alcohol for 24 weeks. In the treated group (Ⅳ,Ⅴ), administration of malotilate (50, 100mg/kg) 5 times a week started 16 weeks after the beginning of experiment and continued until week 24. Forty patients with chronic hepatitis (moderate degree) were randomly divided into two groups, treated group and placebo group. The patients were followed-up for 3 months.
, 百拇医药
RESULTS The liver in most of mice in pathologic model group formed pseudolobule. Hepatic hydroxyproline (Hyp, mg/g) and hyaluronic acid (HA, mg/g) contents were 37.0±21.2， 2.13±0.34 respectively. In the treated group (Ⅳ and Ⅴ), the contents of hepatic Hyp (mg/g) were 22.3±6.0， 16.1±1.0； HA (mg/g) were 1.34±0.14， 0.53±0.17, respectively. The contents of hepatic Hyp and HA were significantly reduced in the treated group than that in pathologic model group (P<0.05). After treatment for 3mo, the serum levels of procollagen Ⅲ peptide (PⅢP, kU/L) and HA (mg/L) in treated group of chronic hepatitis were 1.4±1.0，74.5±27.6; in the placebo group, PⅢP and HA were 2.2±1.6， 137.4±46.5, respectively. The serum levels of PⅢP and HA in treated group was significantly lower compared to placebo group(P<0.05).
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CONCLUSION The hepatic fibrosis in mice and chronic hepatitis patients can be inhibited by malotilate.
0 引言
马洛替酯是否具有抑制肝纤维化作用，国外研究结果不一，国内对此未见实验及临床研究报道. 利用Balb/c小白鼠肝纤维模型及临床观察，研究国产马洛替酯抑制肝纤维化作用，为临床应用提供依据.
1 材料和方法
1.1 材料 马洛替酯及其安慰剂，由常州第三制药厂提供，片剂. 透明质酸放免试剂盒，由上海海军医学研究所提供. 人型Ⅲ型前胶原肽酶联免疫试剂盒由京狮医药科技开发研究所提供. Balb/c小白鼠80只，雌雄不限，体重15g～18g. 随机分为5组：Ⅰ组为正常对照组，普通饲料，自由饮水；Ⅱ组为药物对照组，饲料饮水同Ⅰ组，于wk16起加马洛替酯100mg/(kg.d)，ig，5d/wk；Ⅲ组为病理模型组，普通饲料，自由饮用50mL/L酒精水溶液，400mL/L四氯化碳橄榄油溶液2mL/kg,ig，1次/wk；Ⅳ，Ⅴ组为治疗组，在与Ⅲ组相同处理基础上，于16wk起加马洛替酯50或100mg/(kg.d)，ig,5d/wk. wk24末所有小鼠断头处死，留取血液测定谷丙转氨酶(ALT)，清蛋白(Alb). 剖腹取肝，部分用于病理观察：100mL/L福尔马林固定后，石蜡包埋切片，HE，VG染色，肝纤维化程度按1995年第五次全国传染病寄生虫学术会议讨论修订的《病毒性肝炎防治方案》(试行)(简称’95方案)标准分期(S)[1]；部分肝组织制成100g/L匀浆，检测肝组织羟脯氨酸(Hyp)[2]透明质酸(HA)含量(放免法，操作按说明进行)，同时按磺基水杨酸比浊法进行组织蛋白定量.
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1.2 临床观察 按’95方案，人选病例为慢性乙型肝炎中度患者(均排除了其他疾病)，年龄20岁～45岁，男28例，女12例，临床随机分为2组，采用双盲法给药，其中A组为治疗组(600mg/d，5d/wk)，疗程3mo；B组为安慰剂组，除不含有效成分外，其余均相同. 治疗前及3mo后抽血检查ALT，Alb，血清Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)(酶联免疫法，操作按说明进行)，HA.
统计学处理 多组间比较采用F分析及q检查，两组间比较采用t检验.
2 结果
2.1 动物实验 血清及肝匀浆各项指标见表1. 病理检查：Ⅰ，Ⅱ组肝小叶完整，细胞清晰；Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ组有不同程度肝细胞变性坏死、炎症细胞浸润及纤维组织增生. Ⅲ组病变严重，广泛气球样变、点状或灶状坏死，汇管区炎症十分明显，炎症细胞主要是中性粒细胞和淋巴细胞，中央静脉周围和汇管区纤维母细胞聚集及纤维组织增生，绝大多数(11/12)形成了不完全或完全假小叶(图1)，与此对照，Ⅳ和Ⅴ组仅表现为肝细胞轻度变性、少量炎症细胞浸润和轻度纤维组织增生(图2). 各组肝纤维化分期见表2.
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2.2 临床结果 治疗3mo疗效明显(表3)，未发现明显的毒副作用.
表1 小鼠血清及肝匀浆生化检查
(
±s)组别
n
ALT(nmol/s)
Alb(g/L)
肝Hyp(mg/g)
肝HA(mg/g)
, 百拇医药
Ⅰ
10
416.7±243.4
28.4±4.5
9.6 ±3.8
0.36±0.10
Ⅱ
10
366.7±113.4
34.1±4.9a
10.4±2.6
0.38±0.08
, http://www.100md.com
Ⅲ
12
798.5±141.7b
20.1±5.0b
37.0±21.2b
2.13±0.34b
Ⅳ
9
530.1±198.4d
26.2±21.2d
22.3±6.0c
, 百拇医药
1.34±0.14d
Ⅴ
12
431.7±155.0d
29.1±1.2d
16.1±1.0d
0.53±0.17d
aP<0.05，bP<0.01，vs Ⅰ组；cP<0.05，dP<0.01，vs Ⅲ组.表2 各组小鼠肝纤维化分期
组别
, http://www.100md.com
n
肝纤维化分期
0
1
2
3
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Ⅰ
10
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Ⅱ
10
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0
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0
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Ⅲ
12
0
0
1
9
2
, 百拇医药
Ⅳ
9
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1
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0
Ⅴ
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10
1
1
0
0
, 百拇医药
表3 马洛替酯治疗慢性肝炎3mo后血清指标结果
(
±s)组 织
PⅢP(kU/L)
HA(mg/L)
ALT(nmol/s)
Alb(g/L)
A 治疗前
2.1±1.4
, 百拇医药 130.2±47.5
1843.7±808.5
36.5±5.0
治疗后
1.4±1.0a
74.5 ±27.6a
466.8 ±196.7a
44.8±3.3a
B 治疗前
2.1±1.5
128.5±56.2
, 百拇医药
1950.4±513.4
37.6±4.7
治疗后
2.2±1.6c
137.4±46.5c
1275.3±666.8ac
36.8±3.2c
aP<0.05，vs 治疗前；cP<0.05，vs A组.
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图1a 病理模型组肝假小叶 HE 3.3×10
图1b 病理模型组肝假小叶 VG 3.3×10
图2a 治疗组(Ⅴ组)肝组织形态学变化 HE 3.3×10
图2b 治疗组(Ⅴ组)肝组织形态学变化 HG 3.3×10
, 百拇医药
3 讨论
3.1 马洛替酯对肝脏病理的影响 国产马洛替酯具有保肝及纠正低蛋白血症作用[3]，它对肝纤维化的影响国内未见实验及临床研究报道. 我们用CCl4，酒精饲灌Balb/c小鼠24wk后，形成了不同程度肝纤维化，其中模型组绝大多数(11/12)形成完全或不完全性假小叶(表1，图1). 应用马洛替酯治疗，肝纤维化明显减轻(表1，图2)，病理研究结果说明马洛替酯有一定的抑制肝纤维化作用.
3.2 马洛替酯对胶原代谢的影响 肝纤维化涉及肝内细胞，基质及纤维增生，本组肝纤维化VG染色结果提示，增生的纤维主要是胶原纤维，胶原纤维中含有占胶原氨基酸总量13%的Hyp，后者在其他蛋白质中含量甚微或不含有. 因此，检测组织中Hyp含量可作为胶原纤维定量的一种指标. 本研究中，动物模型组Hyp含量是正常对照组的3.9倍，治疗组Hyp含量高于正常对照组，但明显低于模型组. 这些结果说明肝纤维化时，胶原增生活跃(与病理形态结果一致)，同时也说明马洛替酯抗肝纤维化作用的一个途径是抑制胶原的沉积. 临床上肝脏病理检查十分困难，由于肝穿属于损伤性检查，患者多不乐意接受，作为肝纤维化治疗药物考核指标更难(需多次活检)，加上肝穿活检存在多种误差影响因素，因此临床上迫切需要无损伤性能反映肝纤维化程度的血清学指标. 多数学者认为血清Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)测定为首选，近年京狮医药科技开发研究所生产的人型PⅢP酶标试剂，临床应用结果较好，能反映肝纤维化的程度[4]. 应用马洛替酯治疗中度慢性肝炎3mo，患者血清PⅢP水平显著降低，具有国外同类产品相似作用[5].
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3.3 马洛替酯对透明质酸代谢的影响 肝纤维化时，基质成分也明显增加. HA是基质的一种主要成分，本研究中，模型组HA含量是正常组的6倍，治疗组肝内HA含量高于正常对照组，但明显低于模型组，结果说明肝纤维化时，肝内HA与胶原纤维一样含量亦会增多，马洛替酯可减少这种沉积. 肝内HA系由肝内Ito细胞合成，肝窦内皮细胞清除. 如果合成增多、清除减少，肝内HA含量就会相应增多，同样释放入血的量亦会增多，检测血清HA的含量可以反映纤维化组织中HA代谢状态，由于HA与肝内胶原呈比例增加，检测血清含量可以反映肝纤维化的程度[4,6,7]. 本研究中，慢性中度肝炎患者治疗组血清HA的水平明显低于安慰剂组，证明马洛替酯可影响肝内HA代谢，降低肝内及血清含量. 众多的研究认为，马洛替酯对实验性的肝纤维化效果尚可，临床应用效果如何，结论有些分岐. 本研究结果倾向于肯定其抗肝纤维化作用，但须进一步扩大规模研究，尤其是需要积累病理资料.
作者简介：
, http://www.100md.com 阳学风，男，1960-05-01生，湖南省衡阳市人，汉族. 1982年衡阳医学院医疗系本科毕业，1992年湖南医科大学硕士，消化内科副主任医师，副教授，大内科副主任，主要从事肝纤维化的研究，发表论文10篇.
通讯作者 阳学风，421001，衡阳医学院第二附属医院消化疾病研究室，湖南省衡阳市解放路60号.
Correspondence to:YANG Xue-Feng, Section of Digestive Disease Research , Second Affiliated Hospital, Hengyang Medical College, 60 Jiefanglu, Hengyang 421001, Hunan Province, China
Tel. +86.734.8223251 Ext. 8405
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收稿日期 1998-07-06, 百拇医药