肾透明细胞癌与HLA-A和HLA-B抗原关联性研究
作者：富赛里 王 颖 张祖豹 周光炎
单位：富赛里 王 颖 周光炎(上海市免疫学研究所(上海200025)；张祖豹(上海第二医科大学瑞金医院泌尿外科)
关键词：肾肿瘤；癌，透明细胞；组织相容性抗原
肿瘤990314
自Rosenberg倡导用TIL(肿瘤浸润淋巴细胞)治疗肾细胞癌以后，大量的文献报道TIL疗法对肾细胞癌具有较好的疗效[1]。这一事实提示肾细胞癌细胞可表达供特异性CTL识别的肿瘤抗原，具有较强的免疫原性。由于恶性黑素瘤也对TIL治疗有良好反应，已经鉴定出了一些黑素瘤抗原如MAGE，BAGE，GAG[2]等。并揭示了相应的肿瘤抗原肽是由HLA Ⅰ类分子递呈的[3]。说明研究肿瘤细胞的HLA背景对发展瘤苗和开展免疫治疗十分重要。
, http://www.100md.com
在本研究中，作者对35名病理证实的肾细胞癌患者作了HLA-A，-B分型，试图通过对肾细胞癌与HLA关联分析，探索肾细胞癌的易感因素，为确定递呈肾癌抗原肽的HLA Ⅰ类分子、鉴定特异性肿瘤抗原和探索肾细胞癌中T细胞受体(TCR)的取用偏移等研究提供线索，为发展肾细胞癌的免疫治疗打下基础。
材料和方法
一、研究对象
肾细胞癌患者35名，均为上海瑞金医院泌尿外科住院病人。手术切除标本病理检查证实为肾透明细胞癌。其中男性28名，女性7名。年龄47～64岁，平均53.5岁。提供HLA Ⅰ类分型结果的427名正常对照取自上海中心血站[4]。
二、材料
淋巴细胞分离液(上海试剂二厂)，HLA分型板(上海市中心血站)。
, 百拇医药
三、HLA-A、-B抗原分型
外周静脉血肝素抗凝，用密度梯度离心法分离单个核细胞。标准微量细胞毒试验作HLA-A和-B分型。共鉴定15种HLA-A抗原和22种HLA-B抗原。
四、统计学分析
抗原频率用直接计数法计算。病人组和正常对照组之间HLA抗原频率作χ2检验。如2×2表中有频数小于5者，则计算Fisher确切P值。校正P值(Pc)等于P值与测定的抗原数的乘积。
结果和讨论
本研究观察到肾细胞癌患者中HLA-A2，-A10，-A33和-B15抗原频率较对照组降低(见附表)，而-A11的频率较对照组升高，但P值经校正后，只有HLA-A 11的升高仍保持显著差异(Pc=0.0133)。这一结果提示HLA-A 11基因可能为肾细胞癌提供易感性。肿瘤抗原是肿瘤细胞产生的突变蛋白质。大多数肿瘤抗原在胞浆内蛋白酶体的作用下降解为肽。其中一些长度为8～11氨基酸的肽经TAP(抗原处理相关转运蛋白)进入内质网，与HLA Ⅰ类分子结合后表达于细胞表面。特异性CTL识别肿瘤细胞表面HLA Ⅰ类分子-肽复合物后，通过释放穿孔素(perforin)、粒酶(granzyme)和表达FasL等导致肿瘤细胞死亡[5]。
, 百拇医药
由于大多数肿瘤抗原是由HLA Ⅰ类分子递呈的，因此，确定某一恶性肿瘤中递呈肿瘤抗原的HLA Ⅰ类分子，不但有利于鉴定肿瘤抗原肽，而且为制备肿瘤特异性疫苗和发展过继性免疫治疗提供基础。本研究发现，带有等位基因HLA-A 11的个体对肾细胞癌易感，深入探索肾细胞癌患者中T细胞受体取用的偏移及其与HLA分型之间的关系，将有利于揭示这种易感性是否与HLA-A11分子不能递呈肾细胞癌的肿瘤抗原肽有关。这一工作正在进行中。
附表 肾细胞癌患者中HLA-A和HLA-B抗原频率(%) HLA-A
患者组
n=35
对照组
n=427
χ2
, 百拇医药
P
HLA-B
患者组
n=35
对照组
n=427
χ2
P
A1
2.86
4.9
B7
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51.0
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0
0.3
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25.71
43.9
4.33
B16
8.6
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10.3
A11
22.85
4.5
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0
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17.1
11.3
A30
14.29
10.3
B37
0
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1.6
A31
5.71
6.1
B41
2.9
0
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0
0
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2.9
0
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0
15.9
P=0.010083
B12
0
6.8
A34
0
8.4
Bw46
11.4
15.8
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0
0
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0
0
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5.7
N
B21
0
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0.3
B5
14.3
16.8
B22
0
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B17
2.9
12.9
B40
34.3
31.6
, 百拇医药
B15
5.7
25.5
P=0.12023
第一作者简介 富赛里,女，大专，主管技师。参 考 文 献
1 Rosenberg SA,Spiess P,Lafreniere R,et al.A new approach to the adoptive immunotherapy of cancer with tumor infiltrating lymphocytes.Science,1986,223:1218
2 Boon T,Cerollini JC,Van-den-Eynde B,et al.Tumor antigens recognized by T lymphocytes.Ann Rev Immunol,1994,12:337
, 百拇医药
3 Hom SS,Topalian SL,Simonis T,et al.Common expression of melanoma tumor-associated antigens recognized by human tumor infiltrating lymphocytes:analysis by human lymphocyte antigen restriction.J Immunother,1991,10:153
4 Lee TD,Zhao TM,Mickey R,et al.The polymorphism of HLA antigens in the Chinese.Tissue Antigens,1988,32:188
5 Bernhard H,Karbach J,Wolfedl T,et al.Cellular immune response to human renal-cell carcinomas:Definition of a common antigen recognized by HLA-A2-restricted cytotoxic T-lymphocyte (CTL) clones.Int J Cancer,1994,59:837
(收稿：1998-11-13), 百拇医药
单位：富赛里 王 颖 周光炎(上海市免疫学研究所(上海200025)；张祖豹(上海第二医科大学瑞金医院泌尿外科)
关键词：肾肿瘤；癌，透明细胞；组织相容性抗原
肿瘤990314
自Rosenberg倡导用TIL(肿瘤浸润淋巴细胞)治疗肾细胞癌以后，大量的文献报道TIL疗法对肾细胞癌具有较好的疗效[1]。这一事实提示肾细胞癌细胞可表达供特异性CTL识别的肿瘤抗原，具有较强的免疫原性。由于恶性黑素瘤也对TIL治疗有良好反应，已经鉴定出了一些黑素瘤抗原如MAGE，BAGE，GAG[2]等。并揭示了相应的肿瘤抗原肽是由HLA Ⅰ类分子递呈的[3]。说明研究肿瘤细胞的HLA背景对发展瘤苗和开展免疫治疗十分重要。
, http://www.100md.com
在本研究中，作者对35名病理证实的肾细胞癌患者作了HLA-A，-B分型，试图通过对肾细胞癌与HLA关联分析，探索肾细胞癌的易感因素，为确定递呈肾癌抗原肽的HLA Ⅰ类分子、鉴定特异性肿瘤抗原和探索肾细胞癌中T细胞受体(TCR)的取用偏移等研究提供线索，为发展肾细胞癌的免疫治疗打下基础。
材料和方法
一、研究对象
肾细胞癌患者35名，均为上海瑞金医院泌尿外科住院病人。手术切除标本病理检查证实为肾透明细胞癌。其中男性28名，女性7名。年龄47～64岁，平均53.5岁。提供HLA Ⅰ类分型结果的427名正常对照取自上海中心血站[4]。
二、材料
淋巴细胞分离液(上海试剂二厂)，HLA分型板(上海市中心血站)。
, 百拇医药
三、HLA-A、-B抗原分型
外周静脉血肝素抗凝，用密度梯度离心法分离单个核细胞。标准微量细胞毒试验作HLA-A和-B分型。共鉴定15种HLA-A抗原和22种HLA-B抗原。
四、统计学分析
抗原频率用直接计数法计算。病人组和正常对照组之间HLA抗原频率作χ2检验。如2×2表中有频数小于5者，则计算Fisher确切P值。校正P值(Pc)等于P值与测定的抗原数的乘积。
结果和讨论
本研究观察到肾细胞癌患者中HLA-A2，-A10，-A33和-B15抗原频率较对照组降低(见附表)，而-A11的频率较对照组升高，但P值经校正后，只有HLA-A 11的升高仍保持显著差异(Pc=0.0133)。这一结果提示HLA-A 11基因可能为肾细胞癌提供易感性。肿瘤抗原是肿瘤细胞产生的突变蛋白质。大多数肿瘤抗原在胞浆内蛋白酶体的作用下降解为肽。其中一些长度为8～11氨基酸的肽经TAP(抗原处理相关转运蛋白)进入内质网，与HLA Ⅰ类分子结合后表达于细胞表面。特异性CTL识别肿瘤细胞表面HLA Ⅰ类分子-肽复合物后，通过释放穿孔素(perforin)、粒酶(granzyme)和表达FasL等导致肿瘤细胞死亡[5]。
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由于大多数肿瘤抗原是由HLA Ⅰ类分子递呈的，因此，确定某一恶性肿瘤中递呈肿瘤抗原的HLA Ⅰ类分子，不但有利于鉴定肿瘤抗原肽，而且为制备肿瘤特异性疫苗和发展过继性免疫治疗提供基础。本研究发现，带有等位基因HLA-A 11的个体对肾细胞癌易感，深入探索肾细胞癌患者中T细胞受体取用的偏移及其与HLA分型之间的关系，将有利于揭示这种易感性是否与HLA-A11分子不能递呈肾细胞癌的肿瘤抗原肽有关。这一工作正在进行中。
附表 肾细胞癌患者中HLA-A和HLA-B抗原频率(%) HLA-A
患者组
n=35
对照组
n=427
χ2
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P
HLA-B
患者组
n=35
对照组
n=427
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A1
2.86
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B7
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51.0
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B18
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A28
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P=0.12023
第一作者简介 富赛里,女，大专，主管技师。参 考 文 献
1 Rosenberg SA,Spiess P,Lafreniere R,et al.A new approach to the adoptive immunotherapy of cancer with tumor infiltrating lymphocytes.Science,1986,223:1218
2 Boon T,Cerollini JC,Van-den-Eynde B,et al.Tumor antigens recognized by T lymphocytes.Ann Rev Immunol,1994,12:337
, 百拇医药
3 Hom SS,Topalian SL,Simonis T,et al.Common expression of melanoma tumor-associated antigens recognized by human tumor infiltrating lymphocytes:analysis by human lymphocyte antigen restriction.J Immunother,1991,10:153
4 Lee TD,Zhao TM,Mickey R,et al.The polymorphism of HLA antigens in the Chinese.Tissue Antigens,1988,32:188
5 Bernhard H,Karbach J,Wolfedl T,et al.Cellular immune response to human renal-cell carcinomas:Definition of a common antigen recognized by HLA-A2-restricted cytotoxic T-lymphocyte (CTL) clones.Int J Cancer,1994,59:837
(收稿：1998-11-13), 百拇医药