刺苋的药理研究
作者:廖 里 郑作文
单位:廖 里 广西南宁医药有限责任公司(南宁 530012);郑作文 广西中医学院制药厂(南宁市东葛路 530023)
关键词:刺苋正丁醇提取部分;镇痛;止血;抗炎
广西中医学院学报990360 摘 要 刺苋正丁醇提取部分的镇痛、止血和抗炎作用初步研究表明:刺苋正丁醇提取部分能减轻醋酸所致的扭体反应,缩短凝血时间和减轻二甲苯所致的小鼠耳肿胀程度。
中图分类号 R285.5
刺苋为苋科(Amaranthus spinosusl)植物刺苋的根或全草〔1〕。别名苋菜,野勒苋,野苋菜,土苋菜,猪母菜,棘棘草。其根成分含黄酮甙氨基酸,有机酸,糖类〔1〕,a—菠菜甾醇,混合皂甙〔2〕。据临床报道该药具有治疗痔疮肿痛,内痔便血,治痢,湿疹,牙龈糜烂出血,妇女白带,甲状腺肿大,咽喉肿痛,蛇咬伤,治急性胃肠炎,胃、十二指肠溃疡合并出血等肿痛,出血之功效〔3〕。但未见有药理学方面的研究报道。因此,笔者对刺苋正丁醇提取部分进行了镇痛抗炎,止血等药理作用研究,以探讨其成分与临床疗效的关系。
, http://www.100md.com
1 实验材料
1.1 药品 地塞米松片,广东省制药工业公司华南制药厂,批号920301;止血敏注射液,唐山市第三制药厂,批号870707;硫酸颅通定,广西南宁制药企业集团公司,批号930616。
1.2 动物 昆明种小白鼠,由广西中医学院动物室供应。
1.3 仪器 电子天秤,LIBRORAEU—210,日本产;721分光光度计,上海第三分析仪器厂。
1.4 药物制备 刺苋根饮片,由广西中医学院制药厂提供。用65%乙醇按生药1∶1比例加热回流提取两次,每次两小时。醇提液经浓缩,放置,分离出部分结晶物后,药液按1∶1比例用乙醚萃取分离脂性部分4次。乙醚不溶物按1∶1比例用水饱和正丁醇减压加热回流提取3次。水饱和正丁醇提取液减压蒸馏尽可能除去正丁醇得浓缩物。浓缩物用适量水热溶,放置,除去水不溶物,滤液供药理研究用。工艺流程见图1。同时作其化学定性预试试验〔4〕,结果见表1。
, 百拇医药
表1 正丁醇提取部分的化学定性试验结果
定性成分
试 验 方 法
定性反应结果
1
氨基酸
①茚三酮试验
-
多 肽
②多肽,蛋白质的双缩脲反应
-
蛋白质
③蛋白质沉淀反应
, 百拇医药
+
2
糖、多糖
①Fahling 反应
+
甙 类
②α—萘酚 试验
+
3
有机酸
①pH试纸 检查
+
②溴酚绿 试验
, 百拇医药
+
4
黄酮类
①盐酸——镁粉反应
-
②三氯化铝反应
-
③氨熏试验
-
④荧光试验
+
5
蒽醌类
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①碱性试验
-
②醋酸镁试验
-
6
酚 类
①三氯化铁反应
-
7
强心甙
①3.5一二硝基苯甲酸试验
+
②碱性苦味酸试验
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+
③亚硝酰铁氰化钠试验
+
8
植物甾醇
①醋酐—浓硫酸反应
+
三萜类
②氯仿—浓硫酸反应
+
9
生物碱
①碘化汞钾试验
, 百拇医药
+
②碘化铋钾试验
+
③硅钨酸试验
+
注:表1中“-”表示反应结果为阴性,“+”表示反应结果为阳性。
表1结果表明:刺苋正丁醇提取部分的化学成分除含有混合总皂甙外,尚含有有机酸类、多糖类、强心甙和生物碱等化学成分。
2 方法与结果
2.1 对小鼠镇痛作用的影响(扭体法)〔5〕 取(20±3)g小白鼠,随机分为4组,每组10只。低剂量用药组按15g/kg;高剂量用药组按30g/kg,Qd×1d,ig。阳性对照组给予颅通定30mg/kg,ig。对照组给予等容量NS。给药后1小时,各鼠腹注射0.6%醋酸溶液0.1ml/10g,观察注射后15min内小鼠出现的扭体反应次数。结果见表2。
, 百拇医药
表2 对小鼠镇痛作用的影响(扭体法) 组别
剂量
(g/kg)
扭体次数
(
±SD,n=10/组)
用药组(低)
15.0
22.9±5.99***
用药组(高)
30.0
25.1±5.93**
, 百拇医药
颅痛定组
0.03
14.1±5.73***
NS组
—
38.8±11.03
注:与NS组比较 ***P<0.001;**P<0.01 表2结果表明:刺苋正丁醇提取部分两个剂量均能对抗小白鼠腹腔注射醋酸所致的扭体反应,与NS组比较差异非常显著。
2.2 对凝血时间的影响(毛细玻管法与玻片法)〔6〕 取(20±3)g小白鼠,随机分为4组,每组10只。低剂量用药组按15g/kg,高剂量用药组按30g/kg,Qd×3d,ig。阳性对照组在实验当天给予5%的止血敏0.2ml/10g,ig。对照组给予等容量NS。末次给药后1小时,用标准毛细管插入小鼠眼球后静脉丛取血。使毛细管注满血液并让血液顺细管滴出,滴在玻片上,同时按下秒表,取出毛细管。每隔30秒折断毛血管1次和用针头自玻片血滴边缘向里轻轻拨动1次,直至有血丝出现为止。所历时间即为凝血时间。结果见表3、表4。
, 百拇医药
表3 对小鼠凝血时间的影响(玻片法) 组别
剂量
(g/kg)
凝血时间(S)
(
±SD,n=10/组)
用药组(低)
15.0
129.0±70.78
用药组(高)
30.0
90.0±60.00**
, 百拇医药
止血敏组
1.0
36.0±12.65***
NS组
—
165.0±32.40
注:与NS组比较 ***P<0.001 **P<0.01表4 对小鼠凝血时间的影响(毛细玻管法) 组别
剂量
(g/kg)
凝血时间(S)
(
±SD,n=10/组)
, 百拇医药
用药组(低)
15.0
117.0±53.76
用药组(高)
30.0
90.0±50.99**
止血敏组
1.0
39.0±20.25***
NS组
—
159.0±44.83
, 百拇医药
注:与NS组比较 ***P<0.001 **P<0.01 表3、表4结果表明:刺苋正丁醇提取部分能缩短小血鼠凝血时间,与NS组比较,高剂量药组有非常显著差异,而低剂量用药组无显著差异。
2.3 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响〔6〕 取(20±3)g小白鼠,随机分为4组,每组10只。低剂量用药组按15g/kg,高剂量用药组按30g/kg,Qd×7d,ig。阳性对照组给予地塞米松3mg/kg,Qd×7d,ig。对照组给予等容量NS。末次给药后1小时,用注射器滴加2滴二甲苯于各鼠右耳背。15min后,将小鼠颈椎脱臼致死,沿耳廓基线剪下两耳。用4mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片,电子天秤称重。每鼠右耳片重量减去左耳片重量值除以小鼠体重,即为小鼠每10g体重的耳片肿胀度(mg/10g),作t检验。结果见表5。
表5 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响 组别
剂量
, 百拇医药
(g/kg)
肿胀度(S)
(X±SD,n=10/组)
用药组(低)
15.0
1.83±1.33*
用药组(高)
30.0
1.70±1.05*
地塞米松组
0.003
0.746±0.912**
, 百拇医药
NS组
—
3.54±2.14
注:与NS组比较 **P<0.01 *P<0.05 表5结果表明:刺苋正丁醇提取部分,两个剂量均能对二甲苯所致小白鼠耳肿胀有抑制作用,与NS比较有显著性差异。
2.4 对毛细血管通透性的影响〔8〕 取(20±3)g小白鼠,随机分为4组,每组10只。低剂量用药组按15g/kg,高剂量用药组按30g/kg,Qd×7d,ig。阳性对照组给地塞米松3mg/kg,Qd×7d,ig。对照组给予等容量NS。末次给药后1小时,各鼠尾静脉注射伊文思蓝(5%),,0.1ml/10g。并同时腹腔注射0.6%醋酸,0.1ml/10g。15min后,将小鼠颈椎脱臼致死,腹腔注射NS,6ml。轻揉小鼠腹部后,沿腹中线剪1小口,倾出腹腔溶液约5~6ml,1000rpm离心5min。在721分光光度计590nm处测定吸收度(OD值)。结果见表6。
, 百拇医药
表6 对毛细血管通透性的影响 组别
剂量
(g/kg)
腹腔洗出液吸收度值
(
±SD,n=10/组)
用药组(低)
15.0
0.326±0.114
用药组(高)
30.0
0.283±0.104
, http://www.100md.com
地塞米松组
0.003
0.243±0.097
NS组
—
0.276±0.117
表6结果表明:刺苋正丁醇提取部分对毛细血管通透性无明显影响。
3 讨论
本文对刺苋正丁醇提取部分进行镇痛、止血和抗炎作用研究。结果表明其正丁醇提取部分能显著地对抗醋酸所引起的疼痛反应,缩短凝血时间和有效地抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀度,具有抗炎作用,但对毛细血管通透性无明显影响。因此可以初步认为:
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(1)刺苋正丁醇提取部分具有镇痛,止血作用,其止血作用可能与用药量高低有关。高剂量用药组30g/kg)具有非常显著止血作用,而低剂量组(15g/kg)的止血作用则不明显。
(2)抗炎实验结果表明,刺苋正丁醇提取部分能显著地抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀程度,但对毛细管通透性无明显影响。地塞米松组对毛细血管通透性的影响不显著,可能与其用量(3mg/kg)时间较长有关。
(3)皂甙在正丁醇中有较大的溶解度,用正丁醇提取总皂甙是一种常用的方法,因而刺苋正丁醇提取部分的主要化学成分是混合皂甙。其药理实验研究结果表明,刺苋正丁醇提取部分的药理作用与刺苋用药临床疗效有一定的吻合。正丁醇提取部分为刺苋的有效活性部分。因而推知刺苋的主要活性成分是其混合皂甙。
(4)刺苋正丁醇提取部分的化学定性实验结果表明,其成分除含混合皂甙外,尚含有有机酸类、多糖、生物碱、强心甙等多种成分。是否是这些或其中某一类成分在起药理作用,还须作进一步的研究。
, 百拇医药
参考文献
〔1〕江苏新医学院.中药大辞典(上册).上海科学技术出版社,1979.1370
〔2〕广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准.南宁:广西科学技术出版社,1990
〔3〕黄洪坤.苋菜的临床应用.新中医.1984,(12):23
〔4〕广西中医学院中化教研室.中药化学试验讲义.1991
〔5〕陈奇.中药药理实验.贵州人民出版社,1988.120
〔6〕陈奇.中药药理实验.贵州人民出版社,1988;126
〔7〕徐淑云.药理实验方法学(第二版).人民卫生出版社,1992.719
〔8〕陈奇.中药药理实验.贵州人民出版社,1988.86
收稿日期:1999-06-02, http://www.100md.com
单位:廖 里 广西南宁医药有限责任公司(南宁 530012);郑作文 广西中医学院制药厂(南宁市东葛路 530023)
关键词:刺苋正丁醇提取部分;镇痛;止血;抗炎
广西中医学院学报990360 摘 要 刺苋正丁醇提取部分的镇痛、止血和抗炎作用初步研究表明:刺苋正丁醇提取部分能减轻醋酸所致的扭体反应,缩短凝血时间和减轻二甲苯所致的小鼠耳肿胀程度。
中图分类号 R285.5
刺苋为苋科(Amaranthus spinosusl)植物刺苋的根或全草〔1〕。别名苋菜,野勒苋,野苋菜,土苋菜,猪母菜,棘棘草。其根成分含黄酮甙氨基酸,有机酸,糖类〔1〕,a—菠菜甾醇,混合皂甙〔2〕。据临床报道该药具有治疗痔疮肿痛,内痔便血,治痢,湿疹,牙龈糜烂出血,妇女白带,甲状腺肿大,咽喉肿痛,蛇咬伤,治急性胃肠炎,胃、十二指肠溃疡合并出血等肿痛,出血之功效〔3〕。但未见有药理学方面的研究报道。因此,笔者对刺苋正丁醇提取部分进行了镇痛抗炎,止血等药理作用研究,以探讨其成分与临床疗效的关系。
, http://www.100md.com
1 实验材料
1.1 药品 地塞米松片,广东省制药工业公司华南制药厂,批号920301;止血敏注射液,唐山市第三制药厂,批号870707;硫酸颅通定,广西南宁制药企业集团公司,批号930616。
1.2 动物 昆明种小白鼠,由广西中医学院动物室供应。
1.3 仪器 电子天秤,LIBRORAEU—210,日本产;721分光光度计,上海第三分析仪器厂。
1.4 药物制备 刺苋根饮片,由广西中医学院制药厂提供。用65%乙醇按生药1∶1比例加热回流提取两次,每次两小时。醇提液经浓缩,放置,分离出部分结晶物后,药液按1∶1比例用乙醚萃取分离脂性部分4次。乙醚不溶物按1∶1比例用水饱和正丁醇减压加热回流提取3次。水饱和正丁醇提取液减压蒸馏尽可能除去正丁醇得浓缩物。浓缩物用适量水热溶,放置,除去水不溶物,滤液供药理研究用。工艺流程见图1。同时作其化学定性预试试验〔4〕,结果见表1。
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表1 正丁醇提取部分的化学定性试验结果
定性成分
试 验 方 法
定性反应结果
1
氨基酸
①茚三酮试验
-
多 肽
②多肽,蛋白质的双缩脲反应
-
蛋白质
③蛋白质沉淀反应
, 百拇医药
+
2
糖、多糖
①Fahling 反应
+
甙 类
②α—萘酚 试验
+
3
有机酸
①pH试纸 检查
+
②溴酚绿 试验
, 百拇医药
+
4
黄酮类
①盐酸——镁粉反应
-
②三氯化铝反应
-
③氨熏试验
-
④荧光试验
+
5
蒽醌类
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①碱性试验
-
②醋酸镁试验
-
6
酚 类
①三氯化铁反应
-
7
强心甙
①3.5一二硝基苯甲酸试验
+
②碱性苦味酸试验
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+
③亚硝酰铁氰化钠试验
+
8
植物甾醇
①醋酐—浓硫酸反应
+
三萜类
②氯仿—浓硫酸反应
+
9
生物碱
①碘化汞钾试验
, 百拇医药
+
②碘化铋钾试验
+
③硅钨酸试验
+
注:表1中“-”表示反应结果为阴性,“+”表示反应结果为阳性。
表1结果表明:刺苋正丁醇提取部分的化学成分除含有混合总皂甙外,尚含有有机酸类、多糖类、强心甙和生物碱等化学成分。
2 方法与结果
2.1 对小鼠镇痛作用的影响(扭体法)〔5〕 取(20±3)g小白鼠,随机分为4组,每组10只。低剂量用药组按15g/kg;高剂量用药组按30g/kg,Qd×1d,ig。阳性对照组给予颅通定30mg/kg,ig。对照组给予等容量NS。给药后1小时,各鼠腹注射0.6%醋酸溶液0.1ml/10g,观察注射后15min内小鼠出现的扭体反应次数。结果见表2。
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表2 对小鼠镇痛作用的影响(扭体法) 组别
剂量
(g/kg)
扭体次数
(
用药组(低)
15.0
22.9±5.99***
用药组(高)
30.0
25.1±5.93**
, 百拇医药
颅痛定组
0.03
14.1±5.73***
NS组
—
38.8±11.03
注:与NS组比较 ***P<0.001;**P<0.01 表2结果表明:刺苋正丁醇提取部分两个剂量均能对抗小白鼠腹腔注射醋酸所致的扭体反应,与NS组比较差异非常显著。
2.2 对凝血时间的影响(毛细玻管法与玻片法)〔6〕 取(20±3)g小白鼠,随机分为4组,每组10只。低剂量用药组按15g/kg,高剂量用药组按30g/kg,Qd×3d,ig。阳性对照组在实验当天给予5%的止血敏0.2ml/10g,ig。对照组给予等容量NS。末次给药后1小时,用标准毛细管插入小鼠眼球后静脉丛取血。使毛细管注满血液并让血液顺细管滴出,滴在玻片上,同时按下秒表,取出毛细管。每隔30秒折断毛血管1次和用针头自玻片血滴边缘向里轻轻拨动1次,直至有血丝出现为止。所历时间即为凝血时间。结果见表3、表4。
, 百拇医药
表3 对小鼠凝血时间的影响(玻片法) 组别
剂量
(g/kg)
凝血时间(S)
(
用药组(低)
15.0
129.0±70.78
用药组(高)
30.0
90.0±60.00**
, 百拇医药
止血敏组
1.0
36.0±12.65***
NS组
—
165.0±32.40
注:与NS组比较 ***P<0.001 **P<0.01表4 对小鼠凝血时间的影响(毛细玻管法) 组别
剂量
(g/kg)
凝血时间(S)
(
, 百拇医药
用药组(低)
15.0
117.0±53.76
用药组(高)
30.0
90.0±50.99**
止血敏组
1.0
39.0±20.25***
NS组
—
159.0±44.83
, 百拇医药
注:与NS组比较 ***P<0.001 **P<0.01 表3、表4结果表明:刺苋正丁醇提取部分能缩短小血鼠凝血时间,与NS组比较,高剂量药组有非常显著差异,而低剂量用药组无显著差异。
2.3 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响〔6〕 取(20±3)g小白鼠,随机分为4组,每组10只。低剂量用药组按15g/kg,高剂量用药组按30g/kg,Qd×7d,ig。阳性对照组给予地塞米松3mg/kg,Qd×7d,ig。对照组给予等容量NS。末次给药后1小时,用注射器滴加2滴二甲苯于各鼠右耳背。15min后,将小鼠颈椎脱臼致死,沿耳廓基线剪下两耳。用4mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片,电子天秤称重。每鼠右耳片重量减去左耳片重量值除以小鼠体重,即为小鼠每10g体重的耳片肿胀度(mg/10g),作t检验。结果见表5。
表5 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响 组别
剂量
, 百拇医药
(g/kg)
肿胀度(S)
(X±SD,n=10/组)
用药组(低)
15.0
1.83±1.33*
用药组(高)
30.0
1.70±1.05*
地塞米松组
0.003
0.746±0.912**
, 百拇医药
NS组
—
3.54±2.14
注:与NS组比较 **P<0.01 *P<0.05 表5结果表明:刺苋正丁醇提取部分,两个剂量均能对二甲苯所致小白鼠耳肿胀有抑制作用,与NS比较有显著性差异。
2.4 对毛细血管通透性的影响〔8〕 取(20±3)g小白鼠,随机分为4组,每组10只。低剂量用药组按15g/kg,高剂量用药组按30g/kg,Qd×7d,ig。阳性对照组给地塞米松3mg/kg,Qd×7d,ig。对照组给予等容量NS。末次给药后1小时,各鼠尾静脉注射伊文思蓝(5%),,0.1ml/10g。并同时腹腔注射0.6%醋酸,0.1ml/10g。15min后,将小鼠颈椎脱臼致死,腹腔注射NS,6ml。轻揉小鼠腹部后,沿腹中线剪1小口,倾出腹腔溶液约5~6ml,1000rpm离心5min。在721分光光度计590nm处测定吸收度(OD值)。结果见表6。
, 百拇医药
表6 对毛细血管通透性的影响 组别
剂量
(g/kg)
腹腔洗出液吸收度值
(
用药组(低)
15.0
0.326±0.114
用药组(高)
30.0
0.283±0.104
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地塞米松组
0.003
0.243±0.097
NS组
—
0.276±0.117
表6结果表明:刺苋正丁醇提取部分对毛细血管通透性无明显影响。
3 讨论
本文对刺苋正丁醇提取部分进行镇痛、止血和抗炎作用研究。结果表明其正丁醇提取部分能显著地对抗醋酸所引起的疼痛反应,缩短凝血时间和有效地抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀度,具有抗炎作用,但对毛细血管通透性无明显影响。因此可以初步认为:
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(1)刺苋正丁醇提取部分具有镇痛,止血作用,其止血作用可能与用药量高低有关。高剂量用药组30g/kg)具有非常显著止血作用,而低剂量组(15g/kg)的止血作用则不明显。
(2)抗炎实验结果表明,刺苋正丁醇提取部分能显著地抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀程度,但对毛细管通透性无明显影响。地塞米松组对毛细血管通透性的影响不显著,可能与其用量(3mg/kg)时间较长有关。
(3)皂甙在正丁醇中有较大的溶解度,用正丁醇提取总皂甙是一种常用的方法,因而刺苋正丁醇提取部分的主要化学成分是混合皂甙。其药理实验研究结果表明,刺苋正丁醇提取部分的药理作用与刺苋用药临床疗效有一定的吻合。正丁醇提取部分为刺苋的有效活性部分。因而推知刺苋的主要活性成分是其混合皂甙。
(4)刺苋正丁醇提取部分的化学定性实验结果表明,其成分除含混合皂甙外,尚含有有机酸类、多糖、生物碱、强心甙等多种成分。是否是这些或其中某一类成分在起药理作用,还须作进一步的研究。
, 百拇医药
参考文献
〔1〕江苏新医学院.中药大辞典(上册).上海科学技术出版社,1979.1370
〔2〕广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准.南宁:广西科学技术出版社,1990
〔3〕黄洪坤.苋菜的临床应用.新中医.1984,(12):23
〔4〕广西中医学院中化教研室.中药化学试验讲义.1991
〔5〕陈奇.中药药理实验.贵州人民出版社,1988.120
〔6〕陈奇.中药药理实验.贵州人民出版社,1988;126
〔7〕徐淑云.药理实验方法学(第二版).人民卫生出版社,1992.719
〔8〕陈奇.中药药理实验.贵州人民出版社,1988.86
收稿日期:1999-06-02, http://www.100md.com