山豆根酒制品中苦参碱含量比较
作者：江海燕 莫缓恒
单位：广西中医学院药学系(南宁 530001)
关键词：山豆根；苦参碱；氧化苦参碱；薄层扫描
广西中医学院学报990358 摘 要 该文采用薄层扫描法对山豆根的生品、水润品、酒润品、水润酒炙品中苦参碱及氧化苦参碱的含量进行了测定，为合理制定其炮制规范提供了实验依据。
中图分类号 R283.1
山豆根来源于豆科植物南槐(Sophora tonkinensis Gapnep.)的干燥根及根茎。一般秋季采挖，除去杂质，洗净，干燥，即可供药用。传统中医认为其味苦性寒，有毒，归肺胃经，具有清热解毒，消肿利咽之功效。主要用于火毒蕴结，咽喉肿痛，齿龈肿痛等症〔1〕。传统多以水泡或润〔1，2，3〕，未见有其生制品含量测定的报道。本文采用TLCS法对其有效成分苦参碱、氧化苦参碱进行测定，为制定其合理的炮制规范提供了实验依据，现报道如下。
, 百拇医药
1 实验仪器和材料
仪器：CS—9000薄层扫描仪(日本岛津)；PBQ—Ⅰ型薄层自动铺板器(重庆南岸新力实验电器厂)；点样用定量毛细管(Drunmand Scientifi—cco USA)。
材料：样品购自南宁药材站，经本院周子静教授的鉴定，其为豆科植物越南槐(Sophora tonkinensis Gapnep).的干燥根及根茎。
硅胶G，青岛海洋化工厂产品；苦参碱、氧化苦参碱，均由中国药品生物制品检定所提供；白酒，市售品，实验所用试剂均为分析纯。
2 实验方法
2.1 山豆根生制品制备
生品：取原药材除去杂质，切片，备用。
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水润品：取原药材用抢水洗净后，置于竹器中，上盖湿布，定时淋水使之润透，切片，低温干燥，备用。
酒润品：取原药材用抢水洗净置于盆中，加少量酒拌匀，上盖，密闭72h，每8h加少量酒使之润透，切片，低温干燥，备用。
水润酒炙品：取切片干燥后的水润品，加酒拌匀，闷0.5h，文火炒至干，放凉，备用。
2.2 生制品供试液制备
分别精密称取上述生品、水润品、酒润品、水润酒炙粉末(过40目筛)各约2g，分别置于50ml具塞三角锥形瓶中，加氯仿10ml，浓氨水0.2ml，冷浸16h，过滤，滤液蒸干，精密加氯仿1ml溶解即得。
2.3 对照品液的制备
精密称取苦参碱对照品2.00mg于2ml容量瓶中，加甲醇至刻度，浓度为1.00mg/ml；精密称取苦参对照品2.30mg于2ml容量瓶中，加甲醇至刻度，浓度为1.15mg/ml。
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2.4 样品液的制备
分别精密称取生制品粉末(60℃烘4h)各约0.5g，分别置于50ml具塞三角锥形瓶中，精密加入氯仿25ml，浓氨水0.4ml，密塞，冷浸16h，定时振摇，过滤，滤液冷风挥干，用甲醇分别定容于5ml容量瓶中即得。
2.5 层析条件
取硅胶G加0.7%CMC—Na(1∶3)，用电动搅拌器搅匀后，用自动铺板器铺板，规格10cm×20cm，厚度为0.6mm，晾干，110℃活化1h，置于燥器内备用。
展开剂为氯仿—甲醇—氯水(60∶8∶0.3)，显色剂为改良剂碘化铋溶液。
2.6 薄层定性
在同一块薄层板上，分别点生制品供试液各6μl，苦参碱对照液2μl，氧化苦参碱对照液3μl，在上述层分析条件下进行展开，展距8.5cm，取出晾干，喷以显色剂，热风吹干，在可见光下观察结果，见生制品在相同Rf值处分别与对照品均有相同橙红色的斑点。
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2.7 扫描条件
对上述特征斑点进行光谱扫描，结果苦参碱、氧化苦参碱与生品分别在510nm波长处有最大吸收，而在650nm波长处吸收较小。故采用λS＝510nm，λR＝650nm，双波长反射锯齿扫描。
2.8 线性关系考察
用定量毛细管分别精密吸取苦参碱对照液、氧化苦参碱对照液各1、2、3、4、5μl按上述条件点样、展开、显色，扫描测定其峰面积，以计算两者的回归方程分别为：苦参碱 y=32850.3x—9318.8 r=0.9989；氧化苦参碱 y=18036.5x—626.6 r=0.9999。
2.9 精密度检验
同一斑点连续扫描5次，各次测得峰面积，苦参碱和氧化苦参碱(RSD)分别为：0.134%，0.33%；同一样品在同一薄层板不同位置点样测定结果(RSD)分别为：0.24%，1.80%；同一样品在不同薄层板上测定结果(RSD)分别为：0.24%，1.50%(n均等于5)。
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2.10 稳定性试验
分别精密吸取对照品，点样，按上述条件展开，显色，扫描测定其峰面积，从15mm起测定，每隔30min测定一次，直至2h，结果两者在2h内基本稳定，RSD分别为1.75%，1.04%(n均等于5)。
2.11 样品测定
分别精密吸取样品液6μl，苦参碱对照液1μl和2μl，氧化苦参碱2μl和3μl分别点于同一薄层板上，展开，显色，按上述条件分别测定其峰面积，按外标两点法计算，结果见表1。
表1 苦参碱和氧化苦参碱含量测定结果 样 品
苦 参 碱
氧化苦参碱
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RSD(%)
T值
RSD(%)
T值
生 品
0.169
3.140
—
1.080
2.970
—
水润品
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0.143
4.680
8.314
0.942
1.830
9.285
酒润品
0.158
0.760
5.084
1.054
2.630
0.246
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水润酒炙品
0.125
0.240
20.315
0.961
1.590
8.197
2.12 回收率测定
精密吸取一样品液点于板上，同时精密加上定量对照液，余按样品测定项下方法进行测定、计算，结果为：苦参碱平均回收率97.10%，RSD＝1.72%；氯化苦参碱平均回收率96.68%，RSD＝0.64%。
3 讨论
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3.1 据报道〔4〕，苦参碱与氧化苦参碱为山豆根的主要有效成分，具有抗菌消炎的作用，这与山豆根中医传统功效相一致，因此测定山豆根生制品这两种成分，并以其作为衡量其质量的指标有一定的实际意义。
3.2 在实验中采用薄层色谱法，所用的展开系统以多方选择确定为本系统，所展出的斑点距离拉得开且圆整，稳定性好，利于扫描测定。
3.3 实验中采用TLCS法测定，从方法的精密度和线性关系考察及加样回收的结果来看，样品在点样范围内，浓度与峰面积成线性关系，本法重现性、准确度好。
3.4 从实验结果来看，苦参碱含量：生品>酒润品>水润品>水润酒炙品；氧化苦参碱含量：生品>酒润品>水润酒炙品>水润品。数理统计结果表明，除酒润品的氧化苦参碱外，其余各炮制品与生品均有显著性差异(P<0.05)。若以这两者来评价山豆根的质量，在用水洗时，应尽量减少时间，以洗净为度或将传统的水润及泡改为酒润，以减少其有效成分的损失。
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*本院药学系94级实习生
参考文献
〔1〕卫生部药典委员会.中国药典一部.广州：广东科技出版社，1995.19
〔2〕卫生部中医研究院.中药炮制经验集成.北京：人民出版社，1963.13
〔3〕卫生部药政管理局.全国中药炮制规范.北京：人民卫生出版社，1988.10
〔4〕李家实.中药鉴定学.上海科技出版社，1996.10
收稿日期：1999-04-21, http://www.100md.com
单位：广西中医学院药学系(南宁 530001)
关键词：山豆根；苦参碱；氧化苦参碱；薄层扫描
广西中医学院学报990358 摘 要 该文采用薄层扫描法对山豆根的生品、水润品、酒润品、水润酒炙品中苦参碱及氧化苦参碱的含量进行了测定，为合理制定其炮制规范提供了实验依据。
中图分类号 R283.1
山豆根来源于豆科植物南槐(Sophora tonkinensis Gapnep.)的干燥根及根茎。一般秋季采挖，除去杂质，洗净，干燥，即可供药用。传统中医认为其味苦性寒，有毒，归肺胃经，具有清热解毒，消肿利咽之功效。主要用于火毒蕴结，咽喉肿痛，齿龈肿痛等症〔1〕。传统多以水泡或润〔1，2，3〕，未见有其生制品含量测定的报道。本文采用TLCS法对其有效成分苦参碱、氧化苦参碱进行测定，为制定其合理的炮制规范提供了实验依据，现报道如下。
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1 实验仪器和材料
仪器：CS—9000薄层扫描仪(日本岛津)；PBQ—Ⅰ型薄层自动铺板器(重庆南岸新力实验电器厂)；点样用定量毛细管(Drunmand Scientifi—cco USA)。
材料：样品购自南宁药材站，经本院周子静教授的鉴定，其为豆科植物越南槐(Sophora tonkinensis Gapnep).的干燥根及根茎。
硅胶G，青岛海洋化工厂产品；苦参碱、氧化苦参碱，均由中国药品生物制品检定所提供；白酒，市售品，实验所用试剂均为分析纯。
2 实验方法
2.1 山豆根生制品制备
生品：取原药材除去杂质，切片，备用。
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水润品：取原药材用抢水洗净后，置于竹器中，上盖湿布，定时淋水使之润透，切片，低温干燥，备用。
酒润品：取原药材用抢水洗净置于盆中，加少量酒拌匀，上盖，密闭72h，每8h加少量酒使之润透，切片，低温干燥，备用。
水润酒炙品：取切片干燥后的水润品，加酒拌匀，闷0.5h，文火炒至干，放凉，备用。
2.2 生制品供试液制备
分别精密称取上述生品、水润品、酒润品、水润酒炙粉末(过40目筛)各约2g，分别置于50ml具塞三角锥形瓶中，加氯仿10ml，浓氨水0.2ml，冷浸16h，过滤，滤液蒸干，精密加氯仿1ml溶解即得。
2.3 对照品液的制备
精密称取苦参碱对照品2.00mg于2ml容量瓶中，加甲醇至刻度，浓度为1.00mg/ml；精密称取苦参对照品2.30mg于2ml容量瓶中，加甲醇至刻度，浓度为1.15mg/ml。
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2.4 样品液的制备
分别精密称取生制品粉末(60℃烘4h)各约0.5g，分别置于50ml具塞三角锥形瓶中，精密加入氯仿25ml，浓氨水0.4ml，密塞，冷浸16h，定时振摇，过滤，滤液冷风挥干，用甲醇分别定容于5ml容量瓶中即得。
2.5 层析条件
取硅胶G加0.7%CMC—Na(1∶3)，用电动搅拌器搅匀后，用自动铺板器铺板，规格10cm×20cm，厚度为0.6mm，晾干，110℃活化1h，置于燥器内备用。
展开剂为氯仿—甲醇—氯水(60∶8∶0.3)，显色剂为改良剂碘化铋溶液。
2.6 薄层定性
在同一块薄层板上，分别点生制品供试液各6μl，苦参碱对照液2μl，氧化苦参碱对照液3μl，在上述层分析条件下进行展开，展距8.5cm，取出晾干，喷以显色剂，热风吹干，在可见光下观察结果，见生制品在相同Rf值处分别与对照品均有相同橙红色的斑点。
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2.7 扫描条件
对上述特征斑点进行光谱扫描，结果苦参碱、氧化苦参碱与生品分别在510nm波长处有最大吸收，而在650nm波长处吸收较小。故采用λS＝510nm，λR＝650nm，双波长反射锯齿扫描。
2.8 线性关系考察
用定量毛细管分别精密吸取苦参碱对照液、氧化苦参碱对照液各1、2、3、4、5μl按上述条件点样、展开、显色，扫描测定其峰面积，以计算两者的回归方程分别为：苦参碱 y=32850.3x—9318.8 r=0.9989；氧化苦参碱 y=18036.5x—626.6 r=0.9999。
2.9 精密度检验
同一斑点连续扫描5次，各次测得峰面积，苦参碱和氧化苦参碱(RSD)分别为：0.134%，0.33%；同一样品在同一薄层板不同位置点样测定结果(RSD)分别为：0.24%，1.80%；同一样品在不同薄层板上测定结果(RSD)分别为：0.24%，1.50%(n均等于5)。
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2.10 稳定性试验
分别精密吸取对照品，点样，按上述条件展开，显色，扫描测定其峰面积，从15mm起测定，每隔30min测定一次，直至2h，结果两者在2h内基本稳定，RSD分别为1.75%，1.04%(n均等于5)。
2.11 样品测定
分别精密吸取样品液6μl，苦参碱对照液1μl和2μl，氧化苦参碱2μl和3μl分别点于同一薄层板上，展开，显色，按上述条件分别测定其峰面积，按外标两点法计算，结果见表1。
表1 苦参碱和氧化苦参碱含量测定结果 样 品
苦 参 碱
氧化苦参碱
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RSD(%)
T值
RSD(%)
T值
生 品
0.169
3.140
—
1.080
2.970
—
水润品
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0.143
4.680
8.314
0.942
1.830
9.285
酒润品
0.158
0.760
5.084
1.054
2.630
0.246
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水润酒炙品
0.125
0.240
20.315
0.961
1.590
8.197
2.12 回收率测定
精密吸取一样品液点于板上，同时精密加上定量对照液，余按样品测定项下方法进行测定、计算，结果为：苦参碱平均回收率97.10%，RSD＝1.72%；氯化苦参碱平均回收率96.68%，RSD＝0.64%。
3 讨论
, 百拇医药
3.1 据报道〔4〕，苦参碱与氧化苦参碱为山豆根的主要有效成分，具有抗菌消炎的作用，这与山豆根中医传统功效相一致，因此测定山豆根生制品这两种成分，并以其作为衡量其质量的指标有一定的实际意义。
3.2 在实验中采用薄层色谱法，所用的展开系统以多方选择确定为本系统，所展出的斑点距离拉得开且圆整，稳定性好，利于扫描测定。
3.3 实验中采用TLCS法测定，从方法的精密度和线性关系考察及加样回收的结果来看，样品在点样范围内，浓度与峰面积成线性关系，本法重现性、准确度好。
3.4 从实验结果来看，苦参碱含量：生品>酒润品>水润品>水润酒炙品；氧化苦参碱含量：生品>酒润品>水润酒炙品>水润品。数理统计结果表明，除酒润品的氧化苦参碱外，其余各炮制品与生品均有显著性差异(P<0.05)。若以这两者来评价山豆根的质量，在用水洗时，应尽量减少时间，以洗净为度或将传统的水润及泡改为酒润，以减少其有效成分的损失。
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*本院药学系94级实习生
参考文献
〔1〕卫生部药典委员会.中国药典一部.广州：广东科技出版社，1995.19
〔2〕卫生部中医研究院.中药炮制经验集成.北京：人民出版社，1963.13
〔3〕卫生部药政管理局.全国中药炮制规范.北京：人民卫生出版社，1988.10
〔4〕李家实.中药鉴定学.上海科技出版社，1996.10
收稿日期：1999-04-21, http://www.100md.com