盐蒸法炮制补骨脂的合理性
作者：董玉珍 李爱群 黄志海 胡学军
单位：广州中医药大学第二附属医院，广州 510120
关键词：补骨脂；炮制；@盐蒸法；补骨脂素/分析；@异补骨脂素/分析
广州中医药大学学报990318摘要：为探讨盐蒸法炮制补骨脂的合理性，采用高效液相色谱法(HPLC)测定了盐炙品、盐蒸品水提和醇提液中补骨脂素和异补骨脂素的含量。结果：水提和醇提液中有效成份的含量均为盐蒸大于盐炙。表明盐蒸法炮制补骨脂是合理可取的。
中图分类号：R283.1 文献标识码：A
Rationality of Preparing Fructus Psoraleae by Salt-steaming Method
, 百拇医药
DONG Yuzhen, LI Aiqun， HUANG Zhihai, Hu Xuejun
(The Second Affiliated Hospital,Guangzhou University of TCM,Guangzhou 510120,China)
Abstract:To study the rationality of preparing Fructus Psoraleae by salt-steaming method,the content of psoralen and isopsoralen in salt-frying extraction and salt-steaming water and alcohol extraction was determined by high pressure liquid chromatography.Results showed that the content of psoralen and isopsoralen in the extraction by salt-steaming method was higher than that by salt-frying method.It is concluded that preparing Fructus Psoraleae by salt-steaming method is rational.
, 百拇医药
Key words:PSORALEA CORYLIFOLIA; PROCESSING(TCD);
@ SALT-STEAMING METHOD; PSORALEN/analysis;
@ISOPSORALEN/analysis
补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，具有补肾壮阳、纳气止泻之功，入药多为炮制品，中国药典和地方性的炮制规范均为“盐炙法”，而广州地区有“盐蒸法”。“盐蒸法”的合理性尚未见报道，为此本研究用高效液相色谱法(HPLC)测定了盐炙品、盐蒸品水提和醇提液中补骨脂素和异补骨脂素的含量。
1 仪器与药品
1.1 仪器
, http://www.100md.com Waters 600E HPLC系列(包括600泵、996二极管阵列检测器、2010色谱工作站)。
1.2 药品
甲醇，色谱纯，天津四友生物医学技术开发公司；冰醋酸，分析纯，汕头光华化学厂，批号960325-2；补骨脂素标准品，中国药品生物制品检定所，批号739-9203；异补骨脂素标准品，中国药品生物制品检定所，批号738-9404；补骨脂药材，购自广州市清平药材市场，经检定为豆科植物Psoralea corylifolia L.的成熟果实。
2 实验方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Waters Nova-Pak C18柱，3.9mm×150mm，柱温35℃；996二极管阵列检测器，波长245nm；流动相：甲醇：1%冰醋酸(45∶55)；流速：1mL/min。用以上条件各峰得到满意分离，补骨脂素和异补骨脂素的保留时间分别为5.145min和5.995min，见图1。理论塔板数分别为5440和5508，用2010软件分别对样品中补骨脂素和异补骨脂素的峰进行纯度分析，其中补骨脂素峰的纯度角为0.97，阈值为1.27；异补骨脂素的纯度角为0.962，阈值为1.103，两者均为纯峰。
, 百拇医药
图1 标准品和样品色谱图
A、B为标准品，C为样品2.2 线性关系的测定
精密称取105℃干燥至恒重的补骨脂素和异补骨脂素适量，用甲醇配成浓度为200mg/L的溶液。用流动相分别稀释成1、2、5、10、25、50、100mg/L的溶液，进样20μL，每一浓度进样2次。2010色谱工作站处理数据，外标法定量，以峰面积为纵坐标，标准品浓度为横坐标，进行线性回归，得补骨脂素回归方程为y=-91230.6+242781.9x，线性范围为1～100mg/L，r=0.9999；异补骨素回归方程为y=44347.2+170920.2x，线性范围为1～100mg/L，r=0.9991。
2.3 精密度试验
取低(1mg/L)、中(10mg/L)、高(50mg/L)3个浓度的补骨脂素和异补骨脂素标准品溶液，依线性关系测定的条件进样分析，每个浓度进样5次，用峰面积求算相对标准差(relative standa division,KRSD)，补骨脂素低、中、高3个浓度的KRSD分别为2.4%、0.7%、0.7%；异补骨脂素低、中、高3个浓度的KRSD分别为2.7%、0.7%、0.5%。
, 百拇医药
2.4 回收率测定
分别在补骨脂水提液和醇提液中加入一定量的补骨脂素和异补骨脂素标准品，依样品测定方法进样测定，计算含量，求回收率。水提液中补骨脂素和异补骨脂素的回收率分别为99.2%和98.6%，醇提液中补骨脂素和异补骨脂素的回收率分别为99.0%和99.4%。
2.5 不同炮制品的制备
按文献[1]方法分别制备盐炙、盐蒸炮制品各500g。
2.6 供试品的制备和测定
分别取补骨脂以上各炮制品适量，粉碎，过60目筛，取粉末20g，分成2份，一份加10倍量的水，煮沸30min，放至室温，用水补充至原重量，过滤，进样分析；另一份加3倍量的75%乙醇浸泡24h，过滤，按文献[2]方法分别测定水提液和醇提液中补骨脂素和异补骨脂素的含量。结果表明：水提液和醇提液中，补骨脂素和异补骨脂素含量均为盐蒸大于盐炙。见表1。
, http://www.100md.com
表1 盐蒸品与盐炙品有效成分的含量比较(w/%)
水 提
醇 提
补骨脂素
异补骨脂素
补骨脂素
异补骨脂素
盐蒸
0.16
0.19
0.24
0.26
盐炙
, http://www.100md.com
0.12
0.14
0.19
0.21
表中数据均为测3次所得平均数
3 讨论
补骨脂素和异补骨脂素具有抗肿瘤、止血、光敏作用[2]，为补骨脂的主要有效成份。由实验结果可见，盐蒸品补骨脂素和异补骨脂素含量均高于盐炙品，这一结果与文献[1]报道不一致，原因可能是供试品制备的方法不同，文献用甲醇超声振荡30min提取，中药传统的用药方法以水煎煮为主，补骨脂注射剂等现代剂型则以醇提取，因此本文测定了水提和醇提两种提取液中有效成分的含量，符合临床用药习惯。从含量测定的结果来看，广州地区的盐蒸法不失为补骨脂一种合理可取的炮制方法。
作者简介：第一作者，女，主任中药师
参考文献：
[1] 杨滨，姚三桃，崔淑莲.补骨脂古今主要炮制方法的比较[J].中国中药杂志，1996，21(9)：537
[2] 江纪武，肖庆祥.植物药有效成分手册[M].北京：人民卫生出版社，1986.58，1035
收稿日期：1998-11-09；, http://www.100md.com
单位：广州中医药大学第二附属医院，广州 510120
关键词：补骨脂；炮制；@盐蒸法；补骨脂素/分析；@异补骨脂素/分析
广州中医药大学学报990318摘要：为探讨盐蒸法炮制补骨脂的合理性，采用高效液相色谱法(HPLC)测定了盐炙品、盐蒸品水提和醇提液中补骨脂素和异补骨脂素的含量。结果：水提和醇提液中有效成份的含量均为盐蒸大于盐炙。表明盐蒸法炮制补骨脂是合理可取的。
中图分类号：R283.1 文献标识码：A
Rationality of Preparing Fructus Psoraleae by Salt-steaming Method
, 百拇医药
DONG Yuzhen, LI Aiqun， HUANG Zhihai, Hu Xuejun
(The Second Affiliated Hospital,Guangzhou University of TCM,Guangzhou 510120,China)
Abstract:To study the rationality of preparing Fructus Psoraleae by salt-steaming method,the content of psoralen and isopsoralen in salt-frying extraction and salt-steaming water and alcohol extraction was determined by high pressure liquid chromatography.Results showed that the content of psoralen and isopsoralen in the extraction by salt-steaming method was higher than that by salt-frying method.It is concluded that preparing Fructus Psoraleae by salt-steaming method is rational.
, 百拇医药
Key words:PSORALEA CORYLIFOLIA; PROCESSING(TCD);
@ SALT-STEAMING METHOD; PSORALEN/analysis;
@ISOPSORALEN/analysis
补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，具有补肾壮阳、纳气止泻之功，入药多为炮制品，中国药典和地方性的炮制规范均为“盐炙法”，而广州地区有“盐蒸法”。“盐蒸法”的合理性尚未见报道，为此本研究用高效液相色谱法(HPLC)测定了盐炙品、盐蒸品水提和醇提液中补骨脂素和异补骨脂素的含量。
1 仪器与药品
1.1 仪器
, http://www.100md.com Waters 600E HPLC系列(包括600泵、996二极管阵列检测器、2010色谱工作站)。
1.2 药品
甲醇，色谱纯，天津四友生物医学技术开发公司；冰醋酸，分析纯，汕头光华化学厂，批号960325-2；补骨脂素标准品，中国药品生物制品检定所，批号739-9203；异补骨脂素标准品，中国药品生物制品检定所，批号738-9404；补骨脂药材，购自广州市清平药材市场，经检定为豆科植物Psoralea corylifolia L.的成熟果实。
2 实验方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Waters Nova-Pak C18柱，3.9mm×150mm，柱温35℃；996二极管阵列检测器，波长245nm；流动相：甲醇：1%冰醋酸(45∶55)；流速：1mL/min。用以上条件各峰得到满意分离，补骨脂素和异补骨脂素的保留时间分别为5.145min和5.995min，见图1。理论塔板数分别为5440和5508，用2010软件分别对样品中补骨脂素和异补骨脂素的峰进行纯度分析，其中补骨脂素峰的纯度角为0.97，阈值为1.27；异补骨脂素的纯度角为0.962，阈值为1.103，两者均为纯峰。
, 百拇医药
图1 标准品和样品色谱图
A、B为标准品，C为样品2.2 线性关系的测定
精密称取105℃干燥至恒重的补骨脂素和异补骨脂素适量，用甲醇配成浓度为200mg/L的溶液。用流动相分别稀释成1、2、5、10、25、50、100mg/L的溶液，进样20μL，每一浓度进样2次。2010色谱工作站处理数据，外标法定量，以峰面积为纵坐标，标准品浓度为横坐标，进行线性回归，得补骨脂素回归方程为y=-91230.6+242781.9x，线性范围为1～100mg/L，r=0.9999；异补骨素回归方程为y=44347.2+170920.2x，线性范围为1～100mg/L，r=0.9991。
2.3 精密度试验
取低(1mg/L)、中(10mg/L)、高(50mg/L)3个浓度的补骨脂素和异补骨脂素标准品溶液，依线性关系测定的条件进样分析，每个浓度进样5次，用峰面积求算相对标准差(relative standa division,KRSD)，补骨脂素低、中、高3个浓度的KRSD分别为2.4%、0.7%、0.7%；异补骨脂素低、中、高3个浓度的KRSD分别为2.7%、0.7%、0.5%。
, 百拇医药
2.4 回收率测定
分别在补骨脂水提液和醇提液中加入一定量的补骨脂素和异补骨脂素标准品，依样品测定方法进样测定，计算含量，求回收率。水提液中补骨脂素和异补骨脂素的回收率分别为99.2%和98.6%，醇提液中补骨脂素和异补骨脂素的回收率分别为99.0%和99.4%。
2.5 不同炮制品的制备
按文献[1]方法分别制备盐炙、盐蒸炮制品各500g。
2.6 供试品的制备和测定
分别取补骨脂以上各炮制品适量，粉碎，过60目筛，取粉末20g，分成2份，一份加10倍量的水，煮沸30min，放至室温，用水补充至原重量，过滤，进样分析；另一份加3倍量的75%乙醇浸泡24h，过滤，按文献[2]方法分别测定水提液和醇提液中补骨脂素和异补骨脂素的含量。结果表明：水提液和醇提液中，补骨脂素和异补骨脂素含量均为盐蒸大于盐炙。见表1。
, http://www.100md.com
表1 盐蒸品与盐炙品有效成分的含量比较(w/%)
水 提
醇 提
补骨脂素
异补骨脂素
补骨脂素
异补骨脂素
盐蒸
0.16
0.19
0.24
0.26
盐炙
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0.12
0.14
0.19
0.21
表中数据均为测3次所得平均数
3 讨论
补骨脂素和异补骨脂素具有抗肿瘤、止血、光敏作用[2]，为补骨脂的主要有效成份。由实验结果可见，盐蒸品补骨脂素和异补骨脂素含量均高于盐炙品，这一结果与文献[1]报道不一致，原因可能是供试品制备的方法不同，文献用甲醇超声振荡30min提取，中药传统的用药方法以水煎煮为主，补骨脂注射剂等现代剂型则以醇提取，因此本文测定了水提和醇提两种提取液中有效成分的含量，符合临床用药习惯。从含量测定的结果来看，广州地区的盐蒸法不失为补骨脂一种合理可取的炮制方法。
作者简介：第一作者，女，主任中药师
参考文献：
[1] 杨滨，姚三桃，崔淑莲.补骨脂古今主要炮制方法的比较[J].中国中药杂志，1996，21(9)：537
[2] 江纪武，肖庆祥.植物药有效成分手册[M].北京：人民卫生出版社，1986.58，1035
收稿日期：1998-11-09；, http://www.100md.com
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