垂体腺瘤中垂体激素与S-100蛋白免疫组化双重染色观察
作者：刘冬戈 满开泉 孙肇武 罗玉风 臧旭
单位：刘冬戈 满开泉 孙肇武(北京医院病理科 100730)；罗玉风 臧旭(北京协和医院病理科 100700)
关键词：垂体肿瘤；垂体激素；免疫组织化学；神经组织；蛋白质S-100
临床与实验病理学杂志990405摘要 目的：探讨滤泡星状细胞在垂体腺瘤分类中的意义及滤泡星状细胞与内分泌细胞之间的关系。方法：应用免疫组化双重染色方法，对42例人重体腺瘤的垂体激素与S-100蛋白表达进行对照观察。结果：垂体腺瘤组织中的滤泡星状细胞有两种情况，一种为腺瘤组织中可见散在分布的滤泡星状细胞，并可见1个瘤细胞既有S-100蛋白表达，又含激素分泌颗粒；另一种为滤泡星状细胞构成了腺瘤的一种主要的细胞成分。结论：滤泡星状细胞与内分泌细胞的功能密切相关，可能在调整内分泌细胞的产生和激素释放方面起一定的作用；滤泡星状细胞腺瘤应作为垂体无功能腺瘤的一个单独类型。
, http://www.100md.com
分类号 R736.4； R392.31 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(1999)04-0296-02
An immunohistochemical double labelling study on pituitary hormons and S-100 protein in human pituitary adenoma
Liu Dongge, Man Kaiquan, Sun Zhaowu et al
(Dept of Pathol, Beijing Hospital, Beijing 100730)
ABSTRACT Purpose To explore the significance of the folliculo-stellate cells in the classification of human pituitary adenoma and the relationship between the folliculo-stellate cells and the endocrine cells. Methods Immunohistochemical double labelling technique on pituitary hormons and S-100 protein was used to study paraffin embedded sections of 42 cases of human pituitary adenoma. Results Folliculo-stellate cells in the pituitary adenomas may be two kinds of pattern. One was minor distribution of folliculo-stellate cells among the tumor tissue and pituitary hormonal production was observed in S-100 positive cells. On the other hand, folliculo-stellate cells constitute one of the chief components of the adenoma. Conclusions Folliculo-stellate cells are preferentially related to the functions of endocrine cells, particularly PRL secreting cells. They may play a role to modulate the hormon production and release from endocrine cells. We suggest that folliculo-stellate cell adenoma of the pituitary is one type of non-functioning adenomas.
, 百拇医药
KEY WORDS pituitary neoplasms; pituitary hormones; immunohistochemistry; nerve tissue; protein S-100
近年来，关于S-100蛋白在正常人垂体中表达的研究证明，S-100蛋白位于垂体前叶的滤泡星状细胞(folliculo-stellate cells, FSC)〔1，2〕，然而对此种细胞存在的功能意义目前尚不清楚。我们应用免疫组化双重染色技术，对人垂体腺瘤的垂体激素与S-100蛋白的表达进行对照研究，以探讨FSC在垂体腺瘤分类中的意义及FSC和内分泌细胞之间的关系。
1 材料和方法
42例垂体腺瘤为北京医院(32例)和北京协和医院(10例)神经外科手术切除标本，男25例，女17例，年龄24～60岁。临床表现为头痛、视力障碍、闭经和泌乳及肢端肥大等。
, 百拇医药
标本经10%福尔马林固定，梯度乙醇脱水、石蜡包埋，5 μm厚连续切片，做HE及ABC法生长激素(GH，1∶200)、催乳素(PRL，1∶300)、肾上腺皮质激素(ACTH，1∶200)、促甲状腺激素(TSH，1∶300)、卵泡刺激素(FSH，1∶130)和黄体生成素(LH，1∶300)及S-100蛋白(1∶50)免疫组化染色。所用抗体均为丹麦Dako公司产品。同时选用非内分泌疾病死亡尸检垂体组织作阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。为观察FSC和内分泌细胞之间的关系，选取S-100蛋白及任何一种垂体激素均阳性的病例作免疫组化双重染色，采用双重ABC法染色，第一次抗体用S-100蛋白，DAB-硝酸银显色呈黑色，切片经充分水洗，0.3%胃蛋白酶消化后，第二次抗体用垂体激素染色，仅用DAB显色呈棕色。
结果判定标准：S-100蛋白及垂体激素均为细胞浆着色，背景清晰。采用半定量法记录观察结果：所有瘤细胞胞浆无显色者为(-)；小于10%的瘤细胞胞浆显色为(+)；10%～50%的瘤细胞胞浆显色为(
)；大于50%的瘤细胞胞浆显色为(
)。
, 百拇医药
2 结果
42例垂体腺瘤中26例为功能性腺瘤，包括4例GH腺瘤，4例PRL腺瘤，7例LH腺瘤，1例FSH腺瘤，10例为同时产生两种以上激素的腺瘤，其中6例为GH+PRL组合，4例为GH+LH+FSH组合。
26例功能性腺瘤中有2例PRL腺瘤和1例FSH腺瘤组织中可见散在的S-100蛋白阳性(+)的细胞，其中1例PRL腺瘤组织中有些瘤细胞既有S-100蛋白表达，又含PRL分泌颗粒(图1)。另16例为无功能性垂体腺瘤，6种激素染色均阴性，瘤细胞排列为条索状、巢状及腺样结构，胞浆较丰富呈嫌色或弱嗜酸性。其中1例腺瘤的大部分瘤细胞S-100蛋白阳性(～，图2)，此种瘤细胞形状不规则略呈星状，排列成滤泡状结构，腔内可见淡红色胶样物质(图3)。
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图1 PRL 腺瘤,瘤组织中散在表达S-100蛋白(黑色),含PRL分泌颗粒(棕黄色).双重ABC法×400
图2 滤泡星状细胞腺瘤,部分瘤细胞S-100蛋白阳性.ABC×200
图3 滤泡星状细胞腺瘤,瘤细胞呈星状,形成滤泡状结构,腔内含淡红色物.HE状200
3 讨论
FSC位于垂体前叶，电镜下呈星状，胞浆内缺乏内分泌颗粒，但具有细长的分支状胞浆突起，常形成滤泡状结构，散在分布于内分泌细胞之间。体外细胞培养证实FSC具有调整PRL细胞释放激素的作用〔3〕。动物实验研究发现鼠FSC和LH、FSH的释放有关〔4〕。但在人体材料的研究中，有报道认为FSC与内分泌细胞无关〔5〕。而李玉林等〔6〕的研究结果显示，FSC和内分泌细胞尤其是ACTH细胞保持恒定的、高比例的接触关系，并多集中在垂体的中心粘液楔部，从而证明FSC属于早期分化细胞，对调整内分泌细胞特别是ACTH细胞产生和释放起重要作用。近年来的研究发现FSC是通过产生细胞激动素(cytokines)来调解内分泌细胞的产生和激素释放的〔1〕。我们的资料显示，有些垂体腺瘤组织中可见S-100蛋白阳性、并散在分布于内分泌细胞之间的FSC，其中1例PRL腺瘤中既有S-100蛋白表达，又含PRL分泌颗粒的肿瘤细胞。这进一步提示FSC和内分泌细胞特别是PRL细胞的功能密切相关，可能在调整内分泌细胞的产生和激素的释放方面起一定的作用。
, http://www.100md.com
有文献报道把FSC来源的垂体腺瘤称为滤泡星状细胞腺瘤〔6，7〕，到目前为止国内外报道的例数均较少。该肿瘤的特点是FSC为腺瘤的一种主要的细胞成分，瘤细胞呈典型的星芒状，胞浆丰富无内分泌颗粒，S-100蛋白呈阳性反应，常形成滤泡状结构。本组有1例符合此型腺瘤。为了便于研究，我们赞成应把滤泡星状细胞腺瘤作为垂体无功能腺瘤的一个单独类型。有些垂体腺瘤组织中仅有少数散在的FSC，这可能是正常垂体组织成分的残留，不应诊断为滤泡星状细胞腺瘤。
作者简介：刘冬戈，男，36岁，硕士，副主任医师。研究方向：神经系统病理
参考文献
1，Giometto B, Miotto D, Alessio L et al. Folliculo-stellate cells of human pituitary adenomas: immunohistochemical study of the monocyte/macrophage phenotype expression. Neuroendocrinology, 1997;65(1):47～52
, 百拇医药
2，Vila-Porcile E, Olivier I. The problems of the folliculo-stellate cells in the pituitary gland. In: Matta PM ed. Ultrastructure of endocrine cells and tissue. Boston: Martinus Nijhoff, 1984:46～76
3，Ishikawa H, Nogami H, Shirasawa N. Novel clonal strain from adult rat anterior pituitary produing S-100 protein. Nature, 1983;303:711～713
4，Shivasawa N, Kihara H, Yamagachi S et al. Pituitary folliculo-stellate cells immunostained with S-100 protein antiserum in postnatal castrated and thyroidectomized rats. Cell Tissue Res, 1983;231:235～249
, http://www.100md.com
5，Cirod C, Trouillas J, Dubois MP. Immunocytochemical localization of S-100 protein in stellate cells of the anterior lobe of the normal human pituitary. Cell Tissue Res, 1985;241:505～511
6，李玉林，杨相林，邱铁东等.正常人腺垂体和垂体腺瘤中滤泡星状细胞的免疫组织化学研究.中华病理学杂志，1990；19(3)：188～190
7，Yagishita S, Itoh Y， Nakazima S et al. Folliculo-stellate cell adenoma of the pituitary. Acta Neuropathol (Berl), 1984;62:340～344
收稿日期：1998-09-30, http://www.100md.com
单位：刘冬戈 满开泉 孙肇武(北京医院病理科 100730)；罗玉风 臧旭(北京协和医院病理科 100700)
关键词：垂体肿瘤；垂体激素；免疫组织化学；神经组织；蛋白质S-100
临床与实验病理学杂志990405摘要 目的：探讨滤泡星状细胞在垂体腺瘤分类中的意义及滤泡星状细胞与内分泌细胞之间的关系。方法：应用免疫组化双重染色方法，对42例人重体腺瘤的垂体激素与S-100蛋白表达进行对照观察。结果：垂体腺瘤组织中的滤泡星状细胞有两种情况，一种为腺瘤组织中可见散在分布的滤泡星状细胞，并可见1个瘤细胞既有S-100蛋白表达，又含激素分泌颗粒；另一种为滤泡星状细胞构成了腺瘤的一种主要的细胞成分。结论：滤泡星状细胞与内分泌细胞的功能密切相关，可能在调整内分泌细胞的产生和激素释放方面起一定的作用；滤泡星状细胞腺瘤应作为垂体无功能腺瘤的一个单独类型。
, http://www.100md.com
分类号 R736.4； R392.31 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(1999)04-0296-02
An immunohistochemical double labelling study on pituitary hormons and S-100 protein in human pituitary adenoma
Liu Dongge, Man Kaiquan, Sun Zhaowu et al
(Dept of Pathol, Beijing Hospital, Beijing 100730)
ABSTRACT Purpose To explore the significance of the folliculo-stellate cells in the classification of human pituitary adenoma and the relationship between the folliculo-stellate cells and the endocrine cells. Methods Immunohistochemical double labelling technique on pituitary hormons and S-100 protein was used to study paraffin embedded sections of 42 cases of human pituitary adenoma. Results Folliculo-stellate cells in the pituitary adenomas may be two kinds of pattern. One was minor distribution of folliculo-stellate cells among the tumor tissue and pituitary hormonal production was observed in S-100 positive cells. On the other hand, folliculo-stellate cells constitute one of the chief components of the adenoma. Conclusions Folliculo-stellate cells are preferentially related to the functions of endocrine cells, particularly PRL secreting cells. They may play a role to modulate the hormon production and release from endocrine cells. We suggest that folliculo-stellate cell adenoma of the pituitary is one type of non-functioning adenomas.
, 百拇医药
KEY WORDS pituitary neoplasms; pituitary hormones; immunohistochemistry; nerve tissue; protein S-100
近年来，关于S-100蛋白在正常人垂体中表达的研究证明，S-100蛋白位于垂体前叶的滤泡星状细胞(folliculo-stellate cells, FSC)〔1，2〕，然而对此种细胞存在的功能意义目前尚不清楚。我们应用免疫组化双重染色技术，对人垂体腺瘤的垂体激素与S-100蛋白的表达进行对照研究，以探讨FSC在垂体腺瘤分类中的意义及FSC和内分泌细胞之间的关系。
1 材料和方法
42例垂体腺瘤为北京医院(32例)和北京协和医院(10例)神经外科手术切除标本，男25例，女17例，年龄24～60岁。临床表现为头痛、视力障碍、闭经和泌乳及肢端肥大等。
, 百拇医药
标本经10%福尔马林固定，梯度乙醇脱水、石蜡包埋，5 μm厚连续切片，做HE及ABC法生长激素(GH，1∶200)、催乳素(PRL，1∶300)、肾上腺皮质激素(ACTH，1∶200)、促甲状腺激素(TSH，1∶300)、卵泡刺激素(FSH，1∶130)和黄体生成素(LH，1∶300)及S-100蛋白(1∶50)免疫组化染色。所用抗体均为丹麦Dako公司产品。同时选用非内分泌疾病死亡尸检垂体组织作阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。为观察FSC和内分泌细胞之间的关系，选取S-100蛋白及任何一种垂体激素均阳性的病例作免疫组化双重染色，采用双重ABC法染色，第一次抗体用S-100蛋白，DAB-硝酸银显色呈黑色，切片经充分水洗，0.3%胃蛋白酶消化后，第二次抗体用垂体激素染色，仅用DAB显色呈棕色。
结果判定标准：S-100蛋白及垂体激素均为细胞浆着色，背景清晰。采用半定量法记录观察结果：所有瘤细胞胞浆无显色者为(-)；小于10%的瘤细胞胞浆显色为(+)；10%～50%的瘤细胞胞浆显色为(
)；大于50%的瘤细胞胞浆显色为()。, 百拇医药
2 结果
42例垂体腺瘤中26例为功能性腺瘤，包括4例GH腺瘤，4例PRL腺瘤，7例LH腺瘤，1例FSH腺瘤，10例为同时产生两种以上激素的腺瘤，其中6例为GH+PRL组合，4例为GH+LH+FSH组合。
26例功能性腺瘤中有2例PRL腺瘤和1例FSH腺瘤组织中可见散在的S-100蛋白阳性(+)的细胞，其中1例PRL腺瘤组织中有些瘤细胞既有S-100蛋白表达，又含PRL分泌颗粒(图1)。另16例为无功能性垂体腺瘤，6种激素染色均阴性，瘤细胞排列为条索状、巢状及腺样结构，胞浆较丰富呈嫌色或弱嗜酸性。其中1例腺瘤的大部分瘤细胞S-100蛋白阳性(
～，图2)，此种瘤细胞形状不规则略呈星状，排列成滤泡状结构，腔内可见淡红色胶样物质(图3)。, http://www.100md.com
图1 PRL 腺瘤,瘤组织中散在表达S-100蛋白(黑色),含PRL分泌颗粒(棕黄色).双重ABC法×400
图2 滤泡星状细胞腺瘤,部分瘤细胞S-100蛋白阳性.ABC×200
图3 滤泡星状细胞腺瘤,瘤细胞呈星状,形成滤泡状结构,腔内含淡红色物.HE状200
3 讨论
FSC位于垂体前叶，电镜下呈星状，胞浆内缺乏内分泌颗粒，但具有细长的分支状胞浆突起，常形成滤泡状结构，散在分布于内分泌细胞之间。体外细胞培养证实FSC具有调整PRL细胞释放激素的作用〔3〕。动物实验研究发现鼠FSC和LH、FSH的释放有关〔4〕。但在人体材料的研究中，有报道认为FSC与内分泌细胞无关〔5〕。而李玉林等〔6〕的研究结果显示，FSC和内分泌细胞尤其是ACTH细胞保持恒定的、高比例的接触关系，并多集中在垂体的中心粘液楔部，从而证明FSC属于早期分化细胞，对调整内分泌细胞特别是ACTH细胞产生和释放起重要作用。近年来的研究发现FSC是通过产生细胞激动素(cytokines)来调解内分泌细胞的产生和激素释放的〔1〕。我们的资料显示，有些垂体腺瘤组织中可见S-100蛋白阳性、并散在分布于内分泌细胞之间的FSC，其中1例PRL腺瘤中既有S-100蛋白表达，又含PRL分泌颗粒的肿瘤细胞。这进一步提示FSC和内分泌细胞特别是PRL细胞的功能密切相关，可能在调整内分泌细胞的产生和激素的释放方面起一定的作用。
, http://www.100md.com
有文献报道把FSC来源的垂体腺瘤称为滤泡星状细胞腺瘤〔6，7〕，到目前为止国内外报道的例数均较少。该肿瘤的特点是FSC为腺瘤的一种主要的细胞成分，瘤细胞呈典型的星芒状，胞浆丰富无内分泌颗粒，S-100蛋白呈阳性反应，常形成滤泡状结构。本组有1例符合此型腺瘤。为了便于研究，我们赞成应把滤泡星状细胞腺瘤作为垂体无功能腺瘤的一个单独类型。有些垂体腺瘤组织中仅有少数散在的FSC，这可能是正常垂体组织成分的残留，不应诊断为滤泡星状细胞腺瘤。
作者简介：刘冬戈，男，36岁，硕士，副主任医师。研究方向：神经系统病理
参考文献
1，Giometto B, Miotto D, Alessio L et al. Folliculo-stellate cells of human pituitary adenomas: immunohistochemical study of the monocyte/macrophage phenotype expression. Neuroendocrinology, 1997;65(1):47～52
, 百拇医药
2，Vila-Porcile E, Olivier I. The problems of the folliculo-stellate cells in the pituitary gland. In: Matta PM ed. Ultrastructure of endocrine cells and tissue. Boston: Martinus Nijhoff, 1984:46～76
3，Ishikawa H, Nogami H, Shirasawa N. Novel clonal strain from adult rat anterior pituitary produing S-100 protein. Nature, 1983;303:711～713
4，Shivasawa N, Kihara H, Yamagachi S et al. Pituitary folliculo-stellate cells immunostained with S-100 protein antiserum in postnatal castrated and thyroidectomized rats. Cell Tissue Res, 1983;231:235～249
, http://www.100md.com
5，Cirod C, Trouillas J, Dubois MP. Immunocytochemical localization of S-100 protein in stellate cells of the anterior lobe of the normal human pituitary. Cell Tissue Res, 1985;241:505～511
6，李玉林，杨相林，邱铁东等.正常人腺垂体和垂体腺瘤中滤泡星状细胞的免疫组织化学研究.中华病理学杂志，1990；19(3)：188～190
7，Yagishita S, Itoh Y， Nakazima S et al. Folliculo-stellate cell adenoma of the pituitary. Acta Neuropathol (Berl), 1984;62:340～344
收稿日期：1998-09-30, http://www.100md.com
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