维生素E抑制痴呆模型大鼠海马结构淀粉样前体蛋白表达的实验研究1
作者：杨 杰 钱亦华 胡海涛 张樟进 王唯析 胡晓丹
单位：西安医科大学解剖教研室，西安 710061
关键词：维生素E；海马；β-淀粉样前体蛋白；大鼠
中国老年学杂志/990426 摘 要 目的 观察VE对AD大鼠海马β-APP表达的影响。方法 使用三氯化铝诱导建立AD模型大鼠。用VE(10 mg/d/只)对AD模型大鼠进行灌胃治疗3月。采用行为测试，光镜免疫细胞化学ABC法，观测大鼠海马结构淀粉样前体蛋白反应阳性神经元的数目和β-淀粉样前体蛋白表达的变化。结果 VE组大鼠受电击次数和潜伏期较对照组明显减少和延长(P<0.05)；VE组大鼠海马结构齿状回和CA1区淀粉样蛋白反应阳性神经元的数目较对照组均有明显减少(P<0.05)，β-淀粉样前体蛋白呈弱阳性表达。结论 VE可以改善AD模型大鼠的学习记忆，降低海马结构β-淀粉样前体蛋白过度表达。
, http://www.100md.com
The expression of β-APP in Hippocampal structure of dementia
Yang Jie, Qian Yihua, Hu Haitao et al
Department of Anatomy, Xian Medical University, Xian 710061
The model of dementia was established by pretreatment with aluminium chlorid, PO. After treating with vitamin E for two monthis. The alternation of rat's behaviour and the expression of β-APP in hippocampal structure was observed with behaviour test and ABC immunocytochemical method. The results showed that the frequency of electric shock was decreased, incubation period was prolonged, the number of APP-Li neuron in CA1 region and dentate gyrus was decreased, there were significant difference between VE group and control group(P<0.01),It is suggested that VE could improve the learning and memorizing abilities of AD model rats and prevent β-APP overexpression in hippocampal structure.
, 百拇医药
Key words Vitamin E Hippocampus β-amyloid precursor protein Rat
Alzheimer氏病(AD)是最常见的老年性痴呆，其主要的组织病理学特征之一是脑内出现大量的β-淀粉样蛋白(β-AP)沉积。β-AP是β-淀粉样前体蛋白(β-APP)的异常病理性裂解产物。β-APP表达的改变对于淀粉样蛋白沉积的形成及AD的发病机制，起着重要作用〔1〕。维生素E(VE)是公认抗衰老药物，对AD有一定的治疗作用，但作用机制不详〔2〕。鉴此，我们用VE治疗AD模型大鼠，对大鼠海马β-APP表达的改变进行了观察和研究。
1 材料和方法
1.1 材料 选用健康成年SD大鼠20只，随机分为AD和VE两组，各10只。
1.2 方法
, 百拇医药
1.2.1 AD模型的建立 采用钱亦华等〔3〕人用铝诱导建立AD模型的方法，所有实验动物用三氯化铝溶液，按60 mg AlCl3/100 g体重/d灌胃，连续3个月后，VE组用VE(按10 mg/d/只，用菜油稀释)灌胃治疗，AD组用等量的菜油代替灌胃。
1.2.2 海马内β-APP反应阳性(APP-Li)神经元的计数 全部大鼠分别于治疗3月后处死。处死前均先做行为测试即一次性避暗回避试验。常规灌注、固定、取脑、振动切片。免疫细胞化学ABC法，光镜下观测海马结构APP-Li神经元的数目变化。以上结果均进行统计学t检验处理。
2 结 果
2.1 行为测试 避暗回避试验，VE组大鼠受电击次数减少，潜伏期延长，与AD组之间有显著性差异(P<0.05)(见表1)。
表1 AD模型大鼠内受电击次数和潜伏期的变化 组别
, http://www.100md.com
n
电击次数
潜伏期
AD组
10
2.29±0.73
51.88±26.65
VE组
10
1.79±0.581)
68.17±23.401)
1)与AD组比较P<0.05，下表同
, 百拇医药
2.2 海马内APP-Li神经元的数目变化 AD组大鼠在海马结构的各区均可见APP-Li神经元，主要集中分布于齿状回和CA1区。β-APP呈强阳性表达。VE组大鼠海马结构内APP-Li神经元布分与AD组基本相同，但数目较少，两组间有显著性差异(P<0.05)(见表2)，β-APP呈弱阳性表达。
表2 AD模型大鼠海马结构内APP-Li神经元数目的变化(
±s) 组别
n
CA1区
齿状回
AD组
10
25.03±6.30
, 百拇医药
19.87±6.761)
VE组
10
18.03±5.92
15.63±5.801)
3 讨 论
避暗回避试验可有效检验动物学习记忆的变化。行为测试结果显示VE组大鼠受电击次数和潜伏期较AD组大鼠有明显减少和增长，表明VE组大鼠的学习记忆有明显改善，说明VE对AD模型大鼠有治疗作用。
β-APP广泛分布于正常脑组织中，不仅参与正常的生理活动，同时也参与异常病理过程。铝在脑内的异常蓄积可引起β-APP过度表达，引起β-AP的产生和沉积〔4〕。我们的实验结果表明，VE治疗后的AD大鼠海马结构齿状回、CA1区APP-Li神经元数量明显减少，β-APP呈弱阳性表达，说明VE可以降低β-APP在脑内的过度表达，从而抑制β-AP的产生和沉积，这也是VE治疗AD的作用机理。
, 百拇医药
1 国家自然科学基金资助(39400178)
作者简介：杨 杰，男，34岁，讲师，主要从事神经生物学的研究
参考文献
1 Clarris HJ, Key B, Beyreuther K et al.Expression of the amyloid protein precursor of Alzheimer's disease in the developing rat of factory system.Devel Brain Res，1995；88：87
2 陈冠容，周培恩.老药新用.北京：人民卫生出版社，1981：143
3 钱亦华，胡海涛，杨 杰 et al.鼠脑铝含量分析及其与学习记忆改变的研究.微量元素与健康研究，1997；14(3)：1
4 胡海涛，钱亦华，杨 杰 et al.淀粉样前体蛋白在痴呆模型大鼠背海马结构内的表达.解剖学杂志，1997；20(5)：444
〔1998-12-14收稿 1999-03-01修回〕, http://www.100md.com
单位：西安医科大学解剖教研室，西安 710061
关键词：维生素E；海马；β-淀粉样前体蛋白；大鼠
中国老年学杂志/990426 摘 要 目的 观察VE对AD大鼠海马β-APP表达的影响。方法 使用三氯化铝诱导建立AD模型大鼠。用VE(10 mg/d/只)对AD模型大鼠进行灌胃治疗3月。采用行为测试，光镜免疫细胞化学ABC法，观测大鼠海马结构淀粉样前体蛋白反应阳性神经元的数目和β-淀粉样前体蛋白表达的变化。结果 VE组大鼠受电击次数和潜伏期较对照组明显减少和延长(P<0.05)；VE组大鼠海马结构齿状回和CA1区淀粉样蛋白反应阳性神经元的数目较对照组均有明显减少(P<0.05)，β-淀粉样前体蛋白呈弱阳性表达。结论 VE可以改善AD模型大鼠的学习记忆，降低海马结构β-淀粉样前体蛋白过度表达。
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The expression of β-APP in Hippocampal structure of dementia
Yang Jie, Qian Yihua, Hu Haitao et al
Department of Anatomy, Xian Medical University, Xian 710061
The model of dementia was established by pretreatment with aluminium chlorid, PO. After treating with vitamin E for two monthis. The alternation of rat's behaviour and the expression of β-APP in hippocampal structure was observed with behaviour test and ABC immunocytochemical method. The results showed that the frequency of electric shock was decreased, incubation period was prolonged, the number of APP-Li neuron in CA1 region and dentate gyrus was decreased, there were significant difference between VE group and control group(P<0.01),It is suggested that VE could improve the learning and memorizing abilities of AD model rats and prevent β-APP overexpression in hippocampal structure.
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Key words Vitamin E Hippocampus β-amyloid precursor protein Rat
Alzheimer氏病(AD)是最常见的老年性痴呆，其主要的组织病理学特征之一是脑内出现大量的β-淀粉样蛋白(β-AP)沉积。β-AP是β-淀粉样前体蛋白(β-APP)的异常病理性裂解产物。β-APP表达的改变对于淀粉样蛋白沉积的形成及AD的发病机制，起着重要作用〔1〕。维生素E(VE)是公认抗衰老药物，对AD有一定的治疗作用，但作用机制不详〔2〕。鉴此，我们用VE治疗AD模型大鼠，对大鼠海马β-APP表达的改变进行了观察和研究。
1 材料和方法
1.1 材料 选用健康成年SD大鼠20只，随机分为AD和VE两组，各10只。
1.2 方法
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1.2.1 AD模型的建立 采用钱亦华等〔3〕人用铝诱导建立AD模型的方法，所有实验动物用三氯化铝溶液，按60 mg AlCl3/100 g体重/d灌胃，连续3个月后，VE组用VE(按10 mg/d/只，用菜油稀释)灌胃治疗，AD组用等量的菜油代替灌胃。
1.2.2 海马内β-APP反应阳性(APP-Li)神经元的计数 全部大鼠分别于治疗3月后处死。处死前均先做行为测试即一次性避暗回避试验。常规灌注、固定、取脑、振动切片。免疫细胞化学ABC法，光镜下观测海马结构APP-Li神经元的数目变化。以上结果均进行统计学t检验处理。
2 结 果
2.1 行为测试 避暗回避试验，VE组大鼠受电击次数减少，潜伏期延长，与AD组之间有显著性差异(P<0.05)(见表1)。
表1 AD模型大鼠内受电击次数和潜伏期的变化 组别
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n
电击次数
潜伏期
AD组
10
2.29±0.73
51.88±26.65
VE组
10
1.79±0.581)
68.17±23.401)
1)与AD组比较P<0.05，下表同
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2.2 海马内APP-Li神经元的数目变化 AD组大鼠在海马结构的各区均可见APP-Li神经元，主要集中分布于齿状回和CA1区。β-APP呈强阳性表达。VE组大鼠海马结构内APP-Li神经元布分与AD组基本相同，但数目较少，两组间有显著性差异(P<0.05)(见表2)，β-APP呈弱阳性表达。
表2 AD模型大鼠海马结构内APP-Li神经元数目的变化(
±s) 组别n
CA1区
齿状回
AD组
10
25.03±6.30
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19.87±6.761)
VE组
10
18.03±5.92
15.63±5.801)
3 讨 论
避暗回避试验可有效检验动物学习记忆的变化。行为测试结果显示VE组大鼠受电击次数和潜伏期较AD组大鼠有明显减少和增长，表明VE组大鼠的学习记忆有明显改善，说明VE对AD模型大鼠有治疗作用。
β-APP广泛分布于正常脑组织中，不仅参与正常的生理活动，同时也参与异常病理过程。铝在脑内的异常蓄积可引起β-APP过度表达，引起β-AP的产生和沉积〔4〕。我们的实验结果表明，VE治疗后的AD大鼠海马结构齿状回、CA1区APP-Li神经元数量明显减少，β-APP呈弱阳性表达，说明VE可以降低β-APP在脑内的过度表达，从而抑制β-AP的产生和沉积，这也是VE治疗AD的作用机理。
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1 国家自然科学基金资助(39400178)
作者简介：杨 杰，男，34岁，讲师，主要从事神经生物学的研究
参考文献
1 Clarris HJ, Key B, Beyreuther K et al.Expression of the amyloid protein precursor of Alzheimer's disease in the developing rat of factory system.Devel Brain Res，1995；88：87
2 陈冠容，周培恩.老药新用.北京：人民卫生出版社，1981：143
3 钱亦华，胡海涛，杨 杰 et al.鼠脑铝含量分析及其与学习记忆改变的研究.微量元素与健康研究，1997；14(3)：1
4 胡海涛，钱亦华，杨 杰 et al.淀粉样前体蛋白在痴呆模型大鼠背海马结构内的表达.解剖学杂志，1997；20(5)：444
〔1998-12-14收稿 1999-03-01修回〕, http://www.100md.com