高效液相色谱法测定硫酸阿托品片的含量
作者：邢利苹 欧世强
单位：桂林制药厂 广西桂林市 541002
关键词：高效液相色谱法；硫酸阿托品；含量测定
华夏医学990493 硫酸阿托品片为我厂生产的一个老产品,为抗胆碱药,临床上用于解除平滑肌痉挛等症。中国药典1995年版对硫酸阿托品片含量的测定采用酸性染料比色法,操作繁琐。多年来,含量测定结果偏低,经查找原因,该片剂所用赋形剂对硫酸阿托品含量的测定有不同程度的干扰、吸附,致使结果偏低,笔者采用高效液相色谱法,方法准确,可靠,所用赋形剂在本法条件下不产生干扰,结果令人满意。
1 材料与方法
1.1 仪器与药品
日本岛津高效液相色谱仪
, 百拇医药
LC-5A泵
SPD-2AM紫外检测器
CTO-2A柱箱
C-R2AX数据处理机
硫酸阿托品对照品(0040-9109,中国生物制品检定所提供)
硫酸阿托品片(桂林制药厂生产)
硫酸阿托品原料(杭州民生药厂)
乙腈(色谱纯,上海生生化工助剂厂)
蒸馏水(超纯水)
磷酸(分析纯)
三乙胺(分析纯)
, 百拇医药
赋形剂(生产车间提供)
1.2 色谱条件
色谱柱 Spherisorb C8 5u
流动相 0.025mol/L磷酸(三乙胺调pH为3.0):乙腈(80∶20)
柱温 30℃
检测波长 215nm
该条件下,硫酸阿托品的理论塔板数为5 880,保留时间约9.7min。
1.3 标准曲线的绘制
精密称取硫酸阿托品适量,用上述流动相分别溶解成22.4,44.8,67.2,89.6,112μg/ml的溶液,进样3次,每次20μl,所得峰面积与浓度作标准曲线,呈良好的线性关系,相关系数r=0.9995。
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 回收率与干扰试验
精密称取硫酸阿托品原料约40mg,置50ml容量瓶中,加上述流动相溶解并稀释至刻度,摇匀。取按处方量除硫酸阿托品外的赋形剂的空白颗粒粉5份,每份约0.56g,分别精密称定,置50ml容量瓶中,精密吸取上述硫酸阿托品溶液约3.0ml,分别加入5份空白颗粒粉量瓶中,用流动相溶解,并稀释至刻度,摇匀,过滤,弃去初滤液,取续滤液作为试验液,另取上述硫酸阿托品溶液3.0ml,置50ml容量瓶中,用流动相稀释至刻度,为对照液,分别取上述溶液20μl进样,得出峰面积,计算回收率,结果见表1。
表1 回收率与干扰试验结果 试验组
空白颗粒粉
(m/g)
, 百拇医药
主药加入量
(m/mg)
测 得 量
(m/mg)
回 收 率
(%)
1
0.5656
2.2624
2.2646
100.10
2
0.5658
, 百拇医药
2.3432
2.3127
98.7
3
0.5660
2.424
2.3973
98.9
4
0.5656
2.4644
2.4718
100.3
, http://www.100md.com
5
0.5657
2.5856
2.5675
99.3
=99.14 KSO=0.7127
经统计学处理,t=1.6942,P<0.05,所以回收率良好,此法可行。
另取空白颗粒粉约0.56g,同法操作(不加主药)，结果硫酸阿托品片的赋形剂不干扰本法的测定结果。
2.2 样品的测定
对照品溶液的制备:精密称取硫酸阿托品约40mg,置50ml容量瓶中,用流动相溶解,并稀释至刻度,摇匀,精密吸取3.0ml置50ml容量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。
, http://www.100md.com
供试品溶液的制备:取本品20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于硫酸阿托品2.5mg)置50ml容量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,过滤,作为供试品溶液。
测定法:分别取对照品溶液及供试品溶液20μl,照上述HPLC色谱条件测定,根据峰面积,计算即得。
样品的测定结果:批号950102含量为98.9%，批号961101，含量为99.7%，批号971101，含量为96.6%，批号981201，含量为100.6%。
3 讨论
3.1 硫酸阿托品片采用酸性染料比色法繁琐,所用各种赋形剂在紫外分光光度计上测定有不同程度的干扰,根据我厂多年生产情况看,含量测定结果偏低,给生产带来不必要的麻烦,笔者采用HPLC法测定硫酸阿托品片的含量,所用赋形剂对本法无干扰,测定结果符合生产情况,且简便、快速、准确。
3.2 硫酸阿托品的浓度在22.4～112μg/ml范围内呈良好的线性关系,样品测试中，取约相当于硫酸阿托品2.5mg，经稀释后，浓度约为50μg/ml,在线性范围内，结果准确。
(收稿 1999-04-10), http://www.100md.com
单位：桂林制药厂 广西桂林市 541002
关键词：高效液相色谱法；硫酸阿托品；含量测定
华夏医学990493 硫酸阿托品片为我厂生产的一个老产品,为抗胆碱药,临床上用于解除平滑肌痉挛等症。中国药典1995年版对硫酸阿托品片含量的测定采用酸性染料比色法,操作繁琐。多年来,含量测定结果偏低,经查找原因,该片剂所用赋形剂对硫酸阿托品含量的测定有不同程度的干扰、吸附,致使结果偏低,笔者采用高效液相色谱法,方法准确,可靠,所用赋形剂在本法条件下不产生干扰,结果令人满意。
1 材料与方法
1.1 仪器与药品
日本岛津高效液相色谱仪
, 百拇医药
LC-5A泵
SPD-2AM紫外检测器
CTO-2A柱箱
C-R2AX数据处理机
硫酸阿托品对照品(0040-9109,中国生物制品检定所提供)
硫酸阿托品片(桂林制药厂生产)
硫酸阿托品原料(杭州民生药厂)
乙腈(色谱纯,上海生生化工助剂厂)
蒸馏水(超纯水)
磷酸(分析纯)
三乙胺(分析纯)
, 百拇医药
赋形剂(生产车间提供)
1.2 色谱条件
色谱柱 Spherisorb C8 5u
流动相 0.025mol/L磷酸(三乙胺调pH为3.0):乙腈(80∶20)
柱温 30℃
检测波长 215nm
该条件下,硫酸阿托品的理论塔板数为5 880,保留时间约9.7min。
1.3 标准曲线的绘制
精密称取硫酸阿托品适量,用上述流动相分别溶解成22.4,44.8,67.2,89.6,112μg/ml的溶液,进样3次,每次20μl,所得峰面积与浓度作标准曲线,呈良好的线性关系,相关系数r=0.9995。
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2 结果
2.1 回收率与干扰试验
精密称取硫酸阿托品原料约40mg,置50ml容量瓶中,加上述流动相溶解并稀释至刻度,摇匀。取按处方量除硫酸阿托品外的赋形剂的空白颗粒粉5份,每份约0.56g,分别精密称定,置50ml容量瓶中,精密吸取上述硫酸阿托品溶液约3.0ml,分别加入5份空白颗粒粉量瓶中,用流动相溶解,并稀释至刻度,摇匀,过滤,弃去初滤液,取续滤液作为试验液,另取上述硫酸阿托品溶液3.0ml,置50ml容量瓶中,用流动相稀释至刻度,为对照液,分别取上述溶液20μl进样,得出峰面积,计算回收率,结果见表1。
表1 回收率与干扰试验结果 试验组
空白颗粒粉
(m/g)
, 百拇医药
主药加入量
(m/mg)
测 得 量
(m/mg)
回 收 率
(%)
1
0.5656
2.2624
2.2646
100.10
2
0.5658
, 百拇医药
2.3432
2.3127
98.7
3
0.5660
2.424
2.3973
98.9
4
0.5656
2.4644
2.4718
100.3
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5
0.5657
2.5856
2.5675
99.3
=99.14 KSO=0.7127经统计学处理,t=1.6942,P<0.05,所以回收率良好,此法可行。
另取空白颗粒粉约0.56g,同法操作(不加主药)，结果硫酸阿托品片的赋形剂不干扰本法的测定结果。
2.2 样品的测定
对照品溶液的制备:精密称取硫酸阿托品约40mg,置50ml容量瓶中,用流动相溶解,并稀释至刻度,摇匀,精密吸取3.0ml置50ml容量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。
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供试品溶液的制备:取本品20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于硫酸阿托品2.5mg)置50ml容量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,过滤,作为供试品溶液。
测定法:分别取对照品溶液及供试品溶液20μl,照上述HPLC色谱条件测定,根据峰面积,计算即得。
样品的测定结果:批号950102含量为98.9%，批号961101，含量为99.7%，批号971101，含量为96.6%，批号981201，含量为100.6%。
3 讨论
3.1 硫酸阿托品片采用酸性染料比色法繁琐,所用各种赋形剂在紫外分光光度计上测定有不同程度的干扰,根据我厂多年生产情况看,含量测定结果偏低,给生产带来不必要的麻烦,笔者采用HPLC法测定硫酸阿托品片的含量,所用赋形剂对本法无干扰,测定结果符合生产情况,且简便、快速、准确。
3.2 硫酸阿托品的浓度在22.4～112μg/ml范围内呈良好的线性关系,样品测试中，取约相当于硫酸阿托品2.5mg，经稀释后，浓度约为50μg/ml,在线性范围内，结果准确。
(收稿 1999-04-10), http://www.100md.com