滤纸采血ELISA法检测HBsAg效果观察
作者：陈妙玉
单位：防城港市防城区卫生防疫站 广西防城港市 538021
关键词：滤纸采血法；ELISA法；HBsAg
华夏医学990492 HBsAg阳性是乙型肝炎病毒(HBV)感染的重要标志，也是卫生监测机构开展日常卫生监测的主要指标之一。目前常使用灵敏度较高的ELISA法进行检测，其常规采血方式为静脉采血[1]，该采血方法给被检者带来一定的心理压力，在某种程度上制约了该项工作的开展，且静脉采血需一次性注射器，对大规模的采样而言，无疑增加了成本。为此，本文根据ELISA检测灵敏度高的特点[2]，尝试使用洁净滤纸采集末梢血的采样方法，用ELISA试剂盒进行检测，用肉眼观察检测结果[3]，大大地提高了采血效率，检测结果与常规ELISA法无显著性差异，可广泛应用于学生体检和社会人群的HBV感染的流行病学调查。
, http://www.100md.com
1 材料与方法
1.1 滤纸 用普通洁净定性滤纸裁成1.5cm×3.0cm，密封，高压消毒后烘干备用。
1.2 试剂 上海荣盛生物技术有限公司EIA(TMB-立刻知)“检测HBsAg试剂盒(灵敏度1ng/ml)”。
1.3 样本采集 在校学生预防性健康检查时取血样316份，其中已知HBsAg阳性的血样25份。
1.3.1 滤纸采血法 无菌消毒取指端末梢血2滴于洁净滤纸片上(直径约1.5cm)，晾干后用洁净的密封盒收集带回实验室。
1.3.2 静脉采血法 按试剂盒说明操作。
2 检验方法
, 百拇医药
将采血滤纸分别剪碎置1ml洁净小试管中，各加生理盐水0.1ml，振荡1min，置37℃10min，离心取上清，按试剂盒说明进行检测操作。
静脉采血所得对比血清样品按试剂盒说明操作。
3 结果判断
滤纸采血法的结果判断：置板于白色背景，用肉眼判断，出现颜色比阴性对照深的判为阳性，无色为阴性。
静脉采血法的结果判断按试剂盒说明，用酶标仪进行操作。
4 结果
4.1 两种采血方法对已知HBsAg阳性血清的比较 对已知HBsAg阳性的25例学生同批血清，两种方法的检出率均为100%(25/25)。
, 百拇医药
4.2 两种采血方法对291名体检学生同批血清的比较 结果阳性符合的有38份，阴性符合的250份，两法一次性符合率为99.05%，详见表1。
表1 两种采血方法检测HBsAg结果(n,%) 样 品
份数
阳性符合份数(注)
阴性符合份数
符合率(%)
滤纸法
316
63
250
99.05
, 百拇医药
静脉法
316
63
250
99.05
注：含25份已知HBsAg阳性血清。
4.3 两种采血方法检出率比较 结果滤纸法的检出率为19.94%(63/316)；静脉法的检出率为20.89%(66/316)，两法经卡方检验，差异无显著性(P>0.1)，详见表2。
表2 两种采血方法HBsAg检出率(n,%) 样品
份数
阳性份数
, 百拇医药
阴性份数
检出率(%)
滤纸法
316
63
253
19.94
静脉法
316
66
250
20.89
χ2=0.004 P>0.1
, 百拇医药
5 讨论
卫生监测机构依照法律、法规所进行的从业人员，特别是在校学生体检的要求是每年一次，HBsAg是必检项目，因而这些人员每年都要作一次静脉采血，给被检者造成一定的心理压力，出现晕针情况时有发生，还可能影响到被检者的工作和学习；而对于监测机构来说，静脉采血对采血员的要求相对较高，一人一管的一次性注射器是一笔不小的开支。若能采用滤纸末梢采血法，既可以降低对采血员的要求并减少采血人员，还可节约如注射器等原材料开支，降低检验成本。笔者认为在诸如预防性健康检查和社会人群的HBV感染状况调查等大规模检测HBsAg的工作中，有推广使用滤纸采血法检测HBsAg的必要。
参考文献
1 刘永佳.乙型肝炎表面抗原测定.临床医师手册.检验分册，1991.413
2 许执文.酶联免疫吸附试验方法学研究近展.中国卫生检验杂志，1997，7(1)：49
3 吴作成.微量采血检验用于从业人员血检.中国卫生检验杂志，1996，6(4)：封二
(收稿 1999-04-18), 百拇医药
单位：防城港市防城区卫生防疫站 广西防城港市 538021
关键词：滤纸采血法；ELISA法；HBsAg
华夏医学990492 HBsAg阳性是乙型肝炎病毒(HBV)感染的重要标志，也是卫生监测机构开展日常卫生监测的主要指标之一。目前常使用灵敏度较高的ELISA法进行检测，其常规采血方式为静脉采血[1]，该采血方法给被检者带来一定的心理压力，在某种程度上制约了该项工作的开展，且静脉采血需一次性注射器，对大规模的采样而言，无疑增加了成本。为此，本文根据ELISA检测灵敏度高的特点[2]，尝试使用洁净滤纸采集末梢血的采样方法，用ELISA试剂盒进行检测，用肉眼观察检测结果[3]，大大地提高了采血效率，检测结果与常规ELISA法无显著性差异，可广泛应用于学生体检和社会人群的HBV感染的流行病学调查。
, http://www.100md.com
1 材料与方法
1.1 滤纸 用普通洁净定性滤纸裁成1.5cm×3.0cm，密封，高压消毒后烘干备用。
1.2 试剂 上海荣盛生物技术有限公司EIA(TMB-立刻知)“检测HBsAg试剂盒(灵敏度1ng/ml)”。
1.3 样本采集 在校学生预防性健康检查时取血样316份，其中已知HBsAg阳性的血样25份。
1.3.1 滤纸采血法 无菌消毒取指端末梢血2滴于洁净滤纸片上(直径约1.5cm)，晾干后用洁净的密封盒收集带回实验室。
1.3.2 静脉采血法 按试剂盒说明操作。
2 检验方法
, 百拇医药
将采血滤纸分别剪碎置1ml洁净小试管中，各加生理盐水0.1ml，振荡1min，置37℃10min，离心取上清，按试剂盒说明进行检测操作。
静脉采血所得对比血清样品按试剂盒说明操作。
3 结果判断
滤纸采血法的结果判断：置板于白色背景，用肉眼判断，出现颜色比阴性对照深的判为阳性，无色为阴性。
静脉采血法的结果判断按试剂盒说明，用酶标仪进行操作。
4 结果
4.1 两种采血方法对已知HBsAg阳性血清的比较 对已知HBsAg阳性的25例学生同批血清，两种方法的检出率均为100%(25/25)。
, 百拇医药
4.2 两种采血方法对291名体检学生同批血清的比较 结果阳性符合的有38份，阴性符合的250份，两法一次性符合率为99.05%，详见表1。
表1 两种采血方法检测HBsAg结果(n,%) 样 品
份数
阳性符合份数(注)
阴性符合份数
符合率(%)
滤纸法
316
63
250
99.05
, 百拇医药
静脉法
316
63
250
99.05
注：含25份已知HBsAg阳性血清。
4.3 两种采血方法检出率比较 结果滤纸法的检出率为19.94%(63/316)；静脉法的检出率为20.89%(66/316)，两法经卡方检验，差异无显著性(P>0.1)，详见表2。
表2 两种采血方法HBsAg检出率(n,%) 样品
份数
阳性份数
, 百拇医药
阴性份数
检出率(%)
滤纸法
316
63
253
19.94
静脉法
316
66
250
20.89
χ2=0.004 P>0.1
, 百拇医药
5 讨论
卫生监测机构依照法律、法规所进行的从业人员，特别是在校学生体检的要求是每年一次，HBsAg是必检项目，因而这些人员每年都要作一次静脉采血，给被检者造成一定的心理压力，出现晕针情况时有发生，还可能影响到被检者的工作和学习；而对于监测机构来说，静脉采血对采血员的要求相对较高，一人一管的一次性注射器是一笔不小的开支。若能采用滤纸末梢采血法，既可以降低对采血员的要求并减少采血人员，还可节约如注射器等原材料开支，降低检验成本。笔者认为在诸如预防性健康检查和社会人群的HBV感染状况调查等大规模检测HBsAg的工作中，有推广使用滤纸采血法检测HBsAg的必要。
参考文献
1 刘永佳.乙型肝炎表面抗原测定.临床医师手册.检验分册，1991.413
2 许执文.酶联免疫吸附试验方法学研究近展.中国卫生检验杂志，1997，7(1)：49
3 吴作成.微量采血检验用于从业人员血检.中国卫生检验杂志，1996，6(4)：封二
(收稿 1999-04-18), 百拇医药