生长抑素及P物质在胃电节律失常中的作用
作者：黄茂涛 王振华 余 宁* 雷佩琪* 向永聪*
单位：重庆市第三人民医院麻醉科(400014)
关键词：胃电节律失常；生长抑素；P物质
重庆医学990406 摘 要 探讨生长抑素(SS)和P物质(SP)在大鼠胃电节律失常中的作用。利用大鼠胃电节律失常模型，测量胃窦肌间神经丛中生长抑素免疫反应(SS-IR)神经和P物质免疫反应(SP-IR)神经的含量。分别记录注射SS类似物善得定(奥曲肽，Oct)和SP后的胃电活动。与对照组比较，实验组大鼠胃窦肌间神经丛SS-IR神经含量明显增多，而SP-IR神经含量明显减少(P<0.05)。注射Oct后出现胃电节律失常，注射SP后胃电节律无明显变化，只是快波(fast wave)的发放明显增多。表明胃窦肌间神经丛中SP-IR神经与SP-IR神经的比例失调可能是胃电节律失常发生的重要原因之一。
, 百拇医药
Effects of Somatostatin and Substance P on Development of elecfrogastric dysrhythmias
HUANG maotao,Yu Ning Lei Peiqi Department of Gastroenterology,Chinese PLA 452 Hospital,Chengdu 610021,Sichuan Province,China
Wang Zhenhua,Department of Gastroenterology,Southwest Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China
Abstract:To investigate the effects of somatostatin(SS)and substance P(SP)on occuring of electrogastric dysrhythmias in rats.The contents of SS immunoreactive(SS-IR)nerves and SP-IR nerves were studied in antral myenteric plexus in rat model of electrogastric dysrhythmias.Gastric myoelectric activities were recorded followed by injecting SS analogue,sandostatin(Octretide,Oct)and SP respectively.Compared with control,the contents of SP-IR nerves in myenteric plexus in test group rats were increased significantly,while SP-IR nerves were decreased significantly(P<0.005).The electrogastric dysrhythmias was induced by injecting Oct,while the electrogastric rhythm was not varied significantly and fast waves increased significantly by injection of SP.The abnormal proportion of SP-IR nerves to SP-IR nerves plays a most important role in the development of electrogastric dysrhythmias in rats.
, 百拇医药
Key words:electrogastric dysrhythmias somatostatin substace P
近年来大量的临床及实验研究均表明胃电节律失常十分常见，可在器质性病变中出现，也可在功能性消化不良(FD)中出现，原因非常复杂[1]，我们曾报道大鼠胃电节律失常与一氧化氮(NO)关系密切[2]。此外，与肽能神经关系也很密切，我们利用自制大鼠模型[2]，着重探讨生长抑素、P物质与胃电节律失常关系。
1 材料与方法
1.1 材料
健康成年Wistar大鼠70只，雌雄各半，随机分成3组：①正常对照组20只，正常进食饮水。②实验组40只，隔日禁食，饮水不限，共4WK。③药物组10只，正常进食、饮水。主要仪器及试剂：FWC-3型胃电放大仪，银丝电极，3066型水平台式多导记录仪，善得定(Sandostatin,奥曲肽，Octretide,Oct)、P物质(Substance P,SP)、生长抑素(Somatostatin,SS)抗体、SP抗体，链霉菌抗生物素过氧化物酶复合物免疫组化试剂盒等。
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1.2 方法
1.2.1 记录胃电活动 动物喂养3WK后，禁食18h，腹腔麻醉后开腹在胃窦浆膜下埋置一对银丝电极，导丝经皮下由颈后穿出，缝合腹壁。再按原方案喂养1WK后记录胃电。记录前禁食12h，麻醉状态下记录胃电，每次记录约60min～120min。
1.2.2 胃电参数分析 以每5min为一时间段，测量每一时间段的慢波频率、快波频率，计算慢波频率的变异系数和异常节律指数。
慢波频率变异系数=慢波频率标准差/慢波频率均值×100%。
异常节律指数=异常节律所占时间/记录总时间×100%；
胃电节律失常标准 根据本实验记录的正常对照组慢波频率(3.84min-1±0.17min-1)，将正常范围定为3.5min-1～4.2min-1，并将大鼠胃电节律失常分为3型：胃动过速，慢波频率>4.2min-1，节律和波型较规则时间>1min；胃动过缓，频率<3.5min-1，节律较整齐，时间>1min；节律紊乱，慢波节律不规则，波形紊乱，时间>1min。
, 百拇医药
1.2.3 药物对胃电及肽能神经的影响 记录方法同前，每只动物均先记录基础胃电30min，然后SP(8μg/kg)或SS类似物Oct(1μg/kg)腹腔注射后记录胃电。
1.2.4 胃窦肌间神经丛生长抑素免疫反应(SS-IR)及P物质免疫反应(SP-IR)神经的分布及定量分析：动物麻醉后，用40mg/L多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.4)心脏灌注固定，取出胃窦进行石蜡包埋切片。切片备好后用链霉素抗生物素-过氧化物酶复合物技术显示SS-IR，SP-IR神经。图像分析阳性神经的面积。
统计学处理 数据用均数±标准差(X±s)表示，并进行t检验。
2 结 果
2.1 胃电参数分析 对照组慢波多呈正弦或三相波，节律规则，偶出现节律不齐，平均异常节律指数仅为1.34%，平均慢波频率变异系数也仅为9.50%快波为双向不对称针形波，呈簇状发放。多数时间能记录到快波。实验组动物出现明显节律紊乱，异常节律指数38.0%，慢性频率变异系数23.9%，均明显高于对照组(P<0.01)。三种类型节律失常均出现，其中节律紊乱者最多，占60.0%；胃动过速占50.0%；胃动过缓占10.0%。快波受到明显抑制。
, 百拇医药
表1 药物对胃电的影响 药物
n
慢波频率(min-1)
快波频率(簇/min)
慢波频率变异系数(%)
异常节律指数(%)
对照组
20
3.84±0.17
2.41±0.32
9.50±2.54
1.34±0.62
, http://www.100md.com
P物质
10
3.87±0.21
2.57±0.38a
8.32±1.15
1.18±0.43
Oct
10
3.28±0.11b
1.78±0.19b
25.23±6.46b
, http://www.100md.com
41.34±3.53b
aP<0.05，bP<0.01，vs对照组
2.2 药物对胃电的影响见表1。
2.3 肌间神经丛SS-IR及SP-IR神经分布相似，均为网状棕黄色沉淀，图像分析显示，实验组SS-IR神经密度(182.0μm2±4.1μm2)较对照组(178.4μm2±5.8μm2)明显增多(P<0.05)，而实验组SP-IP神经密度(381.2μm2±2.7μm2)较对照组(390.6μm2±3.2μm2 )明显减少(P<0.05)。
3 讨 论
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胃电活动系胃平滑肌的电位变化，在很大程度上受肠道神经系统(ENS)调控。ENS中存在一类非肾上腺素能非胆碱能(NANC)神经。肽能神经为NANC神经的重要组成部分，随着免疫组化技术发展，已有越来越多的含多肽类的胃肠激素被证实存在于NANC神经中，最主要的有SP，SS，VIP，CCK等。胃电活动也受这些肽能神经的调控。
SS是一种对胃肠道具有广泛抑制作用的多肽，它能抑制多种神经递质的释放，有证据表明，SS能抑制胆硷能神经介质的释放。[3]我们发现，正常大鼠注射SS类似物Oct后出现胃电节律失常，且实验组大鼠胃窦SS-IR神经含量增多，说明SS对胃电节律失常的发生起一定作用。
SP广泛分布于肌间神经丛，SP-IR神经为胃肠道兴奋性神经，研究表明，SP能刺激Ach释放[4]。注射SP后，大鼠胃电节律无明显变化，但快波发放增多，说明SP对胃电的作用主要是促使快波发放，而实验组动物胃窦肌间神经丛SP-IR神经含量减少，说明SP-IR神经对胃电节律失常的发生起一定的拮抗作用。以上实验结果揭示外源性SS或内源性SS-IR神经增多可致胃电节律失常，而SP具有拮抗作用，二者在肌间神经丛中的比例失调可能是胃电节律失常发生的重要原因之一。 参考文献
, http://www.100md.com
[1] 张勇，王振华.胃电节律失常的研究进展.临床消化病杂志，1996,8(1)∶19
[2] 黄茂涛，王振华，陈代陆，氮能神经在大鼠胃电节律失常中作用的研究.中华消化杂志，1997,17(增刊)∶61
[3] Patel PC.BERLIN:Springer Sandos,1992，1
[4] Jun JY,et al,Jpn J Pharmacol.1992，58(Suppl 2)∶362
(上接246页)
4例，其中局灶性异常放电为主2例，顶颞叶高幅δ波及棘慢波2例。2例作心脏彩超，其中二尖瓣及主动脉瓣狭窄、左房右室扩大1例，限制性心肌病1例(心室腔缩小，收缩及钙张期容量变化小)。10例脑CT扫描，层厚10mm，10层，均有单个或多个低密度灶，CT值14～27Hu，其中伴高密度影1例，即晚发性维K缺乏症颅内出血。5例基底节区腔隙性梗塞；左侧内囊后肢脑梗塞1例；皮质梗塞4例。
, 百拇医药
1.4 治疗及转归 除针对原发病治疗外，急性脑梗塞以扩血管、活血化瘀为主，疗程为2～4周。①清除氧自由基 20%甘露醇0.5～1g/kg次，每日2～3次快速静滴1～2周，辅以维C、维E、辅酶A。②地塞米松0.5mg/kg*d静滴。③扩血管、活血化瘀：低分子右旋糖酐5～10ml/kg*d加复方丹参液。④钙离子挤抗剂：尼莫地平口顺至痊愈。⑤恢复期高压氧治疗。住院时间：1周至5周，治愈5例(肌力恢复正常，意识及语言功能正常)。好转3例，2例无变化放弃治疗。
2 讨 论
小儿急性及梗塞起病突然，常以一例肢体瘫痪及意识障碍，失语为主要的临床综合征表现。表病因多与脑及其他部位的感染有关。如病毒、结核核等各种微生物代谢产物及毒素作用激活免疫系统，致动脉炎，进而发生动脉栓塞。病理改变为血管壁细胞浸润；内膜增厚，管腔狭窄或血栓形成，使血管供应区的脑组织发生缺血、缺氧、软化、环死。同时缺氧致血管内皮细胞变性水肿也可导致血栓形成。而心肌病、心瓣膜病变引起心动能低下，心搏减弱，形成附壁血栓；患儿在剧烈活动后，心肌收缩力增强，栓子脱落随血流入脑部致脑梗塞。脑CT从形态学上显影梗塞部位，类型、范围，又为无创性，故很有诊断价值；而脑电图、脑脊液检查及心脏彩超等，可明确病因，预防梗塞发生。故在治疗原发病的基础上，急性脑梗塞以扩血管、活血化瘀治疗为主。近年来随着缺血、缺氧疾病发病机制的不断研究，已认识到缺血再灌注损伤、自由基连续反应是缺血缺氧性脑损伤的主要病理环节，应用氧自由基清除剂及抗氧化剂如：甘露醇、地塞米松有抗炎、抗氧化、稳定细胞生物膜作用，早期大量使用可有效控制再灌注损伤；钙离子拮抗剂能降低细胞内Ca浓度，扩张脑血管，增加脑血流量，缩小梗塞灶及改善神经损伤。高压氧治疗脑梗塞也是一种有效方法。
参考文献
[1] 张庆燕.小儿急性偏瘫42例临床分析。中国实用儿科杂志，1998，1(13)：16
[2] 罗新名.小儿外伤性腔隙性脑梗塞21例分析。临床儿科杂志，1997，1(15)：39
[3] 李均.24例小儿急性脑血管闭塞治疗效果观察。临床儿科杂志，1995，2(13)：136, http://www.100md.com(黄茂涛 王振华 余 宁* 雷佩琪* 向永聪*)
单位：重庆市第三人民医院麻醉科(400014)
关键词：胃电节律失常；生长抑素；P物质
重庆医学990406 摘 要 探讨生长抑素(SS)和P物质(SP)在大鼠胃电节律失常中的作用。利用大鼠胃电节律失常模型，测量胃窦肌间神经丛中生长抑素免疫反应(SS-IR)神经和P物质免疫反应(SP-IR)神经的含量。分别记录注射SS类似物善得定(奥曲肽，Oct)和SP后的胃电活动。与对照组比较，实验组大鼠胃窦肌间神经丛SS-IR神经含量明显增多，而SP-IR神经含量明显减少(P<0.05)。注射Oct后出现胃电节律失常，注射SP后胃电节律无明显变化，只是快波(fast wave)的发放明显增多。表明胃窦肌间神经丛中SP-IR神经与SP-IR神经的比例失调可能是胃电节律失常发生的重要原因之一。
, 百拇医药
Effects of Somatostatin and Substance P on Development of elecfrogastric dysrhythmias
HUANG maotao,Yu Ning Lei Peiqi Department of Gastroenterology,Chinese PLA 452 Hospital,Chengdu 610021,Sichuan Province,China
Wang Zhenhua,Department of Gastroenterology,Southwest Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China
Abstract:To investigate the effects of somatostatin(SS)and substance P(SP)on occuring of electrogastric dysrhythmias in rats.The contents of SS immunoreactive(SS-IR)nerves and SP-IR nerves were studied in antral myenteric plexus in rat model of electrogastric dysrhythmias.Gastric myoelectric activities were recorded followed by injecting SS analogue,sandostatin(Octretide,Oct)and SP respectively.Compared with control,the contents of SP-IR nerves in myenteric plexus in test group rats were increased significantly,while SP-IR nerves were decreased significantly(P<0.005).The electrogastric dysrhythmias was induced by injecting Oct,while the electrogastric rhythm was not varied significantly and fast waves increased significantly by injection of SP.The abnormal proportion of SP-IR nerves to SP-IR nerves plays a most important role in the development of electrogastric dysrhythmias in rats.
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Key words:electrogastric dysrhythmias somatostatin substace P
近年来大量的临床及实验研究均表明胃电节律失常十分常见，可在器质性病变中出现，也可在功能性消化不良(FD)中出现，原因非常复杂[1]，我们曾报道大鼠胃电节律失常与一氧化氮(NO)关系密切[2]。此外，与肽能神经关系也很密切，我们利用自制大鼠模型[2]，着重探讨生长抑素、P物质与胃电节律失常关系。
1 材料与方法
1.1 材料
健康成年Wistar大鼠70只，雌雄各半，随机分成3组：①正常对照组20只，正常进食饮水。②实验组40只，隔日禁食，饮水不限，共4WK。③药物组10只，正常进食、饮水。主要仪器及试剂：FWC-3型胃电放大仪，银丝电极，3066型水平台式多导记录仪，善得定(Sandostatin,奥曲肽，Octretide,Oct)、P物质(Substance P,SP)、生长抑素(Somatostatin,SS)抗体、SP抗体，链霉菌抗生物素过氧化物酶复合物免疫组化试剂盒等。
, http://www.100md.com
1.2 方法
1.2.1 记录胃电活动 动物喂养3WK后，禁食18h，腹腔麻醉后开腹在胃窦浆膜下埋置一对银丝电极，导丝经皮下由颈后穿出，缝合腹壁。再按原方案喂养1WK后记录胃电。记录前禁食12h，麻醉状态下记录胃电，每次记录约60min～120min。
1.2.2 胃电参数分析 以每5min为一时间段，测量每一时间段的慢波频率、快波频率，计算慢波频率的变异系数和异常节律指数。
慢波频率变异系数=慢波频率标准差/慢波频率均值×100%。
异常节律指数=异常节律所占时间/记录总时间×100%；
胃电节律失常标准 根据本实验记录的正常对照组慢波频率(3.84min-1±0.17min-1)，将正常范围定为3.5min-1～4.2min-1，并将大鼠胃电节律失常分为3型：胃动过速，慢波频率>4.2min-1，节律和波型较规则时间>1min；胃动过缓，频率<3.5min-1，节律较整齐，时间>1min；节律紊乱，慢波节律不规则，波形紊乱，时间>1min。
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1.2.3 药物对胃电及肽能神经的影响 记录方法同前，每只动物均先记录基础胃电30min，然后SP(8μg/kg)或SS类似物Oct(1μg/kg)腹腔注射后记录胃电。
1.2.4 胃窦肌间神经丛生长抑素免疫反应(SS-IR)及P物质免疫反应(SP-IR)神经的分布及定量分析：动物麻醉后，用40mg/L多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.4)心脏灌注固定，取出胃窦进行石蜡包埋切片。切片备好后用链霉素抗生物素-过氧化物酶复合物技术显示SS-IR，SP-IR神经。图像分析阳性神经的面积。
统计学处理 数据用均数±标准差(X±s)表示，并进行t检验。
2 结 果
2.1 胃电参数分析 对照组慢波多呈正弦或三相波，节律规则，偶出现节律不齐，平均异常节律指数仅为1.34%，平均慢波频率变异系数也仅为9.50%快波为双向不对称针形波，呈簇状发放。多数时间能记录到快波。实验组动物出现明显节律紊乱，异常节律指数38.0%，慢性频率变异系数23.9%，均明显高于对照组(P<0.01)。三种类型节律失常均出现，其中节律紊乱者最多，占60.0%；胃动过速占50.0%；胃动过缓占10.0%。快波受到明显抑制。
, 百拇医药
表1 药物对胃电的影响 药物
n
慢波频率(min-1)
快波频率(簇/min)
慢波频率变异系数(%)
异常节律指数(%)
对照组
20
3.84±0.17
2.41±0.32
9.50±2.54
1.34±0.62
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P物质
10
3.87±0.21
2.57±0.38a
8.32±1.15
1.18±0.43
Oct
10
3.28±0.11b
1.78±0.19b
25.23±6.46b
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41.34±3.53b
aP<0.05，bP<0.01，vs对照组
2.2 药物对胃电的影响见表1。
2.3 肌间神经丛SS-IR及SP-IR神经分布相似，均为网状棕黄色沉淀，图像分析显示，实验组SS-IR神经密度(182.0μm2±4.1μm2)较对照组(178.4μm2±5.8μm2)明显增多(P<0.05)，而实验组SP-IP神经密度(381.2μm2±2.7μm2)较对照组(390.6μm2±3.2μm2 )明显减少(P<0.05)。
3 讨 论
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胃电活动系胃平滑肌的电位变化，在很大程度上受肠道神经系统(ENS)调控。ENS中存在一类非肾上腺素能非胆碱能(NANC)神经。肽能神经为NANC神经的重要组成部分，随着免疫组化技术发展，已有越来越多的含多肽类的胃肠激素被证实存在于NANC神经中，最主要的有SP，SS，VIP，CCK等。胃电活动也受这些肽能神经的调控。
SS是一种对胃肠道具有广泛抑制作用的多肽，它能抑制多种神经递质的释放，有证据表明，SS能抑制胆硷能神经介质的释放。[3]我们发现，正常大鼠注射SS类似物Oct后出现胃电节律失常，且实验组大鼠胃窦SS-IR神经含量增多，说明SS对胃电节律失常的发生起一定作用。
SP广泛分布于肌间神经丛，SP-IR神经为胃肠道兴奋性神经，研究表明，SP能刺激Ach释放[4]。注射SP后，大鼠胃电节律无明显变化，但快波发放增多，说明SP对胃电的作用主要是促使快波发放，而实验组动物胃窦肌间神经丛SP-IR神经含量减少，说明SP-IR神经对胃电节律失常的发生起一定的拮抗作用。以上实验结果揭示外源性SS或内源性SS-IR神经增多可致胃电节律失常，而SP具有拮抗作用，二者在肌间神经丛中的比例失调可能是胃电节律失常发生的重要原因之一。 参考文献
, http://www.100md.com
[1] 张勇，王振华.胃电节律失常的研究进展.临床消化病杂志，1996,8(1)∶19
[2] 黄茂涛，王振华，陈代陆，氮能神经在大鼠胃电节律失常中作用的研究.中华消化杂志，1997,17(增刊)∶61
[3] Patel PC.BERLIN:Springer Sandos,1992，1
[4] Jun JY,et al,Jpn J Pharmacol.1992，58(Suppl 2)∶362
(上接246页)
4例，其中局灶性异常放电为主2例，顶颞叶高幅δ波及棘慢波2例。2例作心脏彩超，其中二尖瓣及主动脉瓣狭窄、左房右室扩大1例，限制性心肌病1例(心室腔缩小，收缩及钙张期容量变化小)。10例脑CT扫描，层厚10mm，10层，均有单个或多个低密度灶，CT值14～27Hu，其中伴高密度影1例，即晚发性维K缺乏症颅内出血。5例基底节区腔隙性梗塞；左侧内囊后肢脑梗塞1例；皮质梗塞4例。
, 百拇医药
1.4 治疗及转归 除针对原发病治疗外，急性脑梗塞以扩血管、活血化瘀为主，疗程为2～4周。①清除氧自由基 20%甘露醇0.5～1g/kg次，每日2～3次快速静滴1～2周，辅以维C、维E、辅酶A。②地塞米松0.5mg/kg*d静滴。③扩血管、活血化瘀：低分子右旋糖酐5～10ml/kg*d加复方丹参液。④钙离子挤抗剂：尼莫地平口顺至痊愈。⑤恢复期高压氧治疗。住院时间：1周至5周，治愈5例(肌力恢复正常，意识及语言功能正常)。好转3例，2例无变化放弃治疗。
2 讨 论
小儿急性及梗塞起病突然，常以一例肢体瘫痪及意识障碍，失语为主要的临床综合征表现。表病因多与脑及其他部位的感染有关。如病毒、结核核等各种微生物代谢产物及毒素作用激活免疫系统，致动脉炎，进而发生动脉栓塞。病理改变为血管壁细胞浸润；内膜增厚，管腔狭窄或血栓形成，使血管供应区的脑组织发生缺血、缺氧、软化、环死。同时缺氧致血管内皮细胞变性水肿也可导致血栓形成。而心肌病、心瓣膜病变引起心动能低下，心搏减弱，形成附壁血栓；患儿在剧烈活动后，心肌收缩力增强，栓子脱落随血流入脑部致脑梗塞。脑CT从形态学上显影梗塞部位，类型、范围，又为无创性，故很有诊断价值；而脑电图、脑脊液检查及心脏彩超等，可明确病因，预防梗塞发生。故在治疗原发病的基础上，急性脑梗塞以扩血管、活血化瘀治疗为主。近年来随着缺血、缺氧疾病发病机制的不断研究，已认识到缺血再灌注损伤、自由基连续反应是缺血缺氧性脑损伤的主要病理环节，应用氧自由基清除剂及抗氧化剂如：甘露醇、地塞米松有抗炎、抗氧化、稳定细胞生物膜作用，早期大量使用可有效控制再灌注损伤；钙离子拮抗剂能降低细胞内Ca浓度，扩张脑血管，增加脑血流量，缩小梗塞灶及改善神经损伤。高压氧治疗脑梗塞也是一种有效方法。
参考文献
[1] 张庆燕.小儿急性偏瘫42例临床分析。中国实用儿科杂志，1998，1(13)：16
[2] 罗新名.小儿外伤性腔隙性脑梗塞21例分析。临床儿科杂志，1997，1(15)：39
[3] 李均.24例小儿急性脑血管闭塞治疗效果观察。临床儿科杂志，1995，2(13)：136, http://www.100md.com(黄茂涛 王振华 余 宁* 雷佩琪* 向永聪*)