幽门螺杆菌感染3种快速诊断方法的比较
作者：吴丽娟 张文俊 张航 邓光贵
单位：吴丽娟 张文俊 张航 邓光贵 第三军医大学附属大坪医院检验科 重庆，400042
关键词：幽门螺杆菌；快速尿素酶试验；血清IgG抗体测定；聚合酶链反应
中图法分类号 R377
中图法分类号 R377;R446
Comparison of three rapid diagnosis methods of helicobacter pylori infection
提 要 目的：通过研究以确定已报道的3种Hp快速诊断方法的适用范围。方法：以细菌培养法为标准，对快速尿素酶试验、IgG抗体测定和PCR法诊断Hp感染进行了比较研究。结果：快速尿素酶试验对Hp的阳性检出率与培养法差别不显著。PCR法和抗体测定法阳性检出率高于培养法，两法特异性较低，敏感性和阴性预测性高。结论：快速尿毒酶试验价格低廉，操作简便、快速，可在临床推广应用；PCR法适合于快速尿素酶试验阴性患者排除Hp感染的检验；抗体测定法标本易得，适合于大规模人群普查。
, 百拇医药
目前，实验室用于诊断幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的方法有细菌培养法、快速尿素酶试验、抗体测定和PCR法，我们以培养法为“金标准”，对上述3种快速诊断方法进了比较研究。
1 材料与方法
1.1 临床资料
41例病人均为我院1995年1～6月接受胃镜检查患者，男41例，女19例，年龄17～75岁，包括胃溃疡5例，十二指肠球部溃疡23例，复合性溃疡2例，慢性胃炎11例。有活动性出血及明显癌灶者未计在内。
1.2 标本采集
全部病人于进镜后在距幽门2cm处取胃粘膜标本一小块。胃镜检查当天采集静脉血1ml送检。
1.3 方法
, 百拇医药
1.3.1培养法
采用自制MHEY培养基进行[1]。
1.3.2 快速尿素酶试验 参考文献[1]的方法。
1.3.3 抗体测定(ELISA法) Bio-Rad G.A.P.IgG试剂盒购于上海亚利生物工程公司，操作按说明书进行。
1.3.4 PCR法 试剂盒购于厦门长城生物工程公司，靶基因为外膜蛋白OMP，扩增产物456bp。
1.4 统计学处理
3种快速诊断方法对HP检出率的比较采用χ2检验，并用敏感性、特异性、阳性预测性、阴性预测性和准确性5项指标进行综合评价。
, 百拇医药 2 结果
32例培养法阳性的胃粘膜组织，快速尿素酶试验阳性30例(93.75%)，PCR法阳性32例(100%)，其相应患者的血清抗体阳性32例(100%)。19例培养法阴性的胃粘膜组织，快速尿素酶试验阳性2例(10.53%)，PCR法阳性5例(26.32%)，其血清抗体阳性10例(52.63%)。经卡方检验，快速尿素酶试验对Hp的阳性检出率与培养法差别不显著(χ2=0,P>0.05)；PCR法和抗体测定法阳性检出率高于培养法(PCR法χ2=5,P<0.05；抗体法χ2=10,P<0.01)。5项指标见表1。
表1 Hp感染3种快速诊断方法的比较
方法
敏感性
(%)
, 百拇医药
特异性
(%)
阳性预测性
(%)
阴性预测性
(%)
准确性
(%)
快速尿素酶试验
93.75
89.47
93.75
89.47
, http://www.100md.com
92.17
PCR法
100.00
73.68
86.49
100.00
90.20
抗体测定法
100.00
47.37
76.19
100.00
80.39
, http://www.100md.com
3 讨论
细菌培养法是诊断Hp感染最可靠的方法，也是目前验证其它诊断性实验的标准，该法以胃粘膜组织为受试标本，培养时间3～5 d，培养条件和技术要求高，且灵敏度低，如胃镜检查时病人误吞利多卡因、口服二甲基硅油、活检钳沾有戊二醛、所取标本为肠腺化生上皮、未能及时接种培养等均可造成假阴性发生。鉴于上述原因，国内绝大多数检验科细菌室未开展Hp的培养项目。快速尿素酶试验十分快捷易操作，但不能检出Hp不产生尿素酶株如CLO-2型，而相当部分的革兰氏阴性细菌如枸橼酸杆菌属、肠杆菌属、克雷伯氏菌属、摩根氏菌属、变形杆菌属、H. mustale、H. felis等，以及胃部微生物Gastropirillum hominis具有尿素酶基因，可导致假阳性[2]。抗体测定以血清受试，标本易得，但阳性结果不能区分是现症感染还是回忆反应，仅适用于流行病学筛检。PCR法用于Hp诊断具有灵敏、快速，阴性预测值高，受试样品种类灵活，可以是胃液、唾液、胃内容物、血液等优点，适用于快速尿素酶试验阴性患者排出Hp感染的检验。值得注意的是，现阶段以培养法为“金标准”来评价PCR法和抗体测定法结果的优劣仍值得进一步商榷。本室统计资料表明，36例胃粘膜培养阳性患者，唾液PCR法阳性16例(44%)，抗体测定阳性36例(100%)。29例胃粘膜培养阴性患者，唾液PCR法阳性5例(17%)，抗体测定阳性7例(24%)。提示Hp可感染人体胃粘膜上皮和唾液腺上皮，且两部位的感染可以不同时存在，单纯以胃粘膜组织Hp培养的阴性结果一票否认血清抗体测定阳性是不合理的。
, 百拇医药
(感谢本院消化内科胃镜室对我们工作的大力支持!)
作者简介:吴丽娟,女,32岁,主治医师,讲师,学士
参考文献
1 吴丽娟，张文俊，邓光贵，等.胃镜检查引起幽门螺杆菌医院感染可能性的调查.中华医院感染学杂志，1998，8(B)：44
2 吴丽娟，邓光贵 综述.幽门螺杆菌感染快速诊断技术的研究进展.国外医学：生化与检验学分册，1993，16(专辑)：6
收稿：1998-05-05
修回：1998-10-07, http://www.100md.com
单位：吴丽娟 张文俊 张航 邓光贵 第三军医大学附属大坪医院检验科 重庆，400042
关键词：幽门螺杆菌；快速尿素酶试验；血清IgG抗体测定；聚合酶链反应
中图法分类号 R377
中图法分类号 R377;R446
Comparison of three rapid diagnosis methods of helicobacter pylori infection
提 要 目的：通过研究以确定已报道的3种Hp快速诊断方法的适用范围。方法：以细菌培养法为标准，对快速尿素酶试验、IgG抗体测定和PCR法诊断Hp感染进行了比较研究。结果：快速尿素酶试验对Hp的阳性检出率与培养法差别不显著。PCR法和抗体测定法阳性检出率高于培养法，两法特异性较低，敏感性和阴性预测性高。结论：快速尿毒酶试验价格低廉，操作简便、快速，可在临床推广应用；PCR法适合于快速尿素酶试验阴性患者排除Hp感染的检验；抗体测定法标本易得，适合于大规模人群普查。
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目前，实验室用于诊断幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的方法有细菌培养法、快速尿素酶试验、抗体测定和PCR法，我们以培养法为“金标准”，对上述3种快速诊断方法进了比较研究。
1 材料与方法
1.1 临床资料
41例病人均为我院1995年1～6月接受胃镜检查患者，男41例，女19例，年龄17～75岁，包括胃溃疡5例，十二指肠球部溃疡23例，复合性溃疡2例，慢性胃炎11例。有活动性出血及明显癌灶者未计在内。
1.2 标本采集
全部病人于进镜后在距幽门2cm处取胃粘膜标本一小块。胃镜检查当天采集静脉血1ml送检。
1.3 方法
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1.3.1培养法
采用自制MHEY培养基进行[1]。
1.3.2 快速尿素酶试验 参考文献[1]的方法。
1.3.3 抗体测定(ELISA法) Bio-Rad G.A.P.IgG试剂盒购于上海亚利生物工程公司，操作按说明书进行。
1.3.4 PCR法 试剂盒购于厦门长城生物工程公司，靶基因为外膜蛋白OMP，扩增产物456bp。
1.4 统计学处理
3种快速诊断方法对HP检出率的比较采用χ2检验，并用敏感性、特异性、阳性预测性、阴性预测性和准确性5项指标进行综合评价。
, 百拇医药 2 结果
32例培养法阳性的胃粘膜组织，快速尿素酶试验阳性30例(93.75%)，PCR法阳性32例(100%)，其相应患者的血清抗体阳性32例(100%)。19例培养法阴性的胃粘膜组织，快速尿素酶试验阳性2例(10.53%)，PCR法阳性5例(26.32%)，其血清抗体阳性10例(52.63%)。经卡方检验，快速尿素酶试验对Hp的阳性检出率与培养法差别不显著(χ2=0,P>0.05)；PCR法和抗体测定法阳性检出率高于培养法(PCR法χ2=5,P<0.05；抗体法χ2=10,P<0.01)。5项指标见表1。
表1 Hp感染3种快速诊断方法的比较
方法
敏感性
(%)
, 百拇医药
特异性
(%)
阳性预测性
(%)
阴性预测性
(%)
准确性
(%)
快速尿素酶试验
93.75
89.47
93.75
89.47
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92.17
PCR法
100.00
73.68
86.49
100.00
90.20
抗体测定法
100.00
47.37
76.19
100.00
80.39
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3 讨论
细菌培养法是诊断Hp感染最可靠的方法，也是目前验证其它诊断性实验的标准，该法以胃粘膜组织为受试标本，培养时间3～5 d，培养条件和技术要求高，且灵敏度低，如胃镜检查时病人误吞利多卡因、口服二甲基硅油、活检钳沾有戊二醛、所取标本为肠腺化生上皮、未能及时接种培养等均可造成假阴性发生。鉴于上述原因，国内绝大多数检验科细菌室未开展Hp的培养项目。快速尿素酶试验十分快捷易操作，但不能检出Hp不产生尿素酶株如CLO-2型，而相当部分的革兰氏阴性细菌如枸橼酸杆菌属、肠杆菌属、克雷伯氏菌属、摩根氏菌属、变形杆菌属、H. mustale、H. felis等，以及胃部微生物Gastropirillum hominis具有尿素酶基因，可导致假阳性[2]。抗体测定以血清受试，标本易得，但阳性结果不能区分是现症感染还是回忆反应，仅适用于流行病学筛检。PCR法用于Hp诊断具有灵敏、快速，阴性预测值高，受试样品种类灵活，可以是胃液、唾液、胃内容物、血液等优点，适用于快速尿素酶试验阴性患者排出Hp感染的检验。值得注意的是，现阶段以培养法为“金标准”来评价PCR法和抗体测定法结果的优劣仍值得进一步商榷。本室统计资料表明，36例胃粘膜培养阳性患者，唾液PCR法阳性16例(44%)，抗体测定阳性36例(100%)。29例胃粘膜培养阴性患者，唾液PCR法阳性5例(17%)，抗体测定阳性7例(24%)。提示Hp可感染人体胃粘膜上皮和唾液腺上皮，且两部位的感染可以不同时存在，单纯以胃粘膜组织Hp培养的阴性结果一票否认血清抗体测定阳性是不合理的。
, 百拇医药
(感谢本院消化内科胃镜室对我们工作的大力支持!)
作者简介:吴丽娟,女,32岁,主治医师,讲师,学士
参考文献
1 吴丽娟，张文俊，邓光贵，等.胃镜检查引起幽门螺杆菌医院感染可能性的调查.中华医院感染学杂志，1998，8(B)：44
2 吴丽娟，邓光贵 综述.幽门螺杆菌感染快速诊断技术的研究进展.国外医学：生化与检验学分册，1993，16(专辑)：6
收稿：1998-05-05
修回：1998-10-07, http://www.100md.com