对322名儿童鼻咽部嗜血杆菌的分离
作者：高春波 汤凤杰 郑苓
单位：高春波(哈尔滨市第一医院)；汤凤杰(黑龙江省第三医院)；郑苓(哈尔滨市政府第一幼儿园)
关键词：
黑龙江医学990455 1998-03，我们对322名6～8岁在校儿童的鼻咽部进行了嗜血杆菌的分离，并对其中部分菌株进行了β-内酰胺酶测试。本次实验还对两种培养基进行了比较。
1 标本的采集和处理
用无菌棉签取咽后壁分泌物，所有标本30min内接种于含50ug/ml万古霉素的5%兔血巧克力琼脂平皿和另1块不加万古霉素的巧克力琼脂平皿，置5%CO2环境35℃培养24h。
2 菌株的分离鉴定
巧克力平皿上生长有露滴状透明小菌落，边缘整齐，表面光滑为可疑菌落，镜下为G-短小杆菌，挑取可疑菌落用0.45%盐水制成1.5麦氏单位菌悬液，充入NHI卡(嗜血杆菌鉴定卡，与VITEK仪配套使用)，培养24h读数鉴定。
3 β-内酰胺酶试验
用Nitrocefin(头孢硝噻吩)纸片沾取菌落，10min内变成红色判断为β-内酰胺酶阳性。
4 结果
4.1 322名学龄儿童鼻咽部嗜血杆菌分离情况见表1。
表1 322名儿童鼻咽部嗜血杆菌分离情况 分离菌株
阳性例数
百分比
副流感嗜血杆菌
108
33.54
副溶血嗜血杆菌
80
24.84
流感嗜血杆菌
19
5.9
溶血嗜血杆菌
2
0.62
对所有分离到的19株流感嗜血杆菌β-内酰胺酶测试均为阴性。
4.2 加与不加万古霉素的巧克力琼脂培养基中嗜血杆菌分离率比较结果见表2。 表2 二种培养基中嗜血杆菌分离率比较 菌 名
分离菌株数(%)
加万古霉素
未加万古霉素
流感嗜血杆菌
19
(5.9)
4
(1.24)
副流感嗜血杆菌
108
(33.54)
48
(14.9)
溶血嗜血杆菌
2
(0.62)
2
(0.62)
副溶血嗜血杆菌
80
(24.84)
46
(14.3)
合 计
209
(64.90)
100
(31.06)
实验说明加万古霉素的培养基明显优于不加万古霉素的培养基，两者有明显差异(P<0.05)。
5 讨论
儿童感染嗜血杆菌的几率较高，流感嗜血杆菌是儿童细菌性肺炎时重要病原菌之一，因此提高流感杆菌的检出率是作出正确诊断的关键。嗜血杆菌对培养基的要求很严格，制备培养基时要严格按规定执行才能获得生长所需的X、V因子，另外，万古霉素有效地抑制了革兰氏阳性菌的生长，使嗜血杆菌得以充分生长，从而提高了分离率。
(收稿日期：1999-02-07), 百拇医药
单位：高春波(哈尔滨市第一医院)；汤凤杰(黑龙江省第三医院)；郑苓(哈尔滨市政府第一幼儿园)
关键词：
黑龙江医学990455 1998-03，我们对322名6～8岁在校儿童的鼻咽部进行了嗜血杆菌的分离，并对其中部分菌株进行了β-内酰胺酶测试。本次实验还对两种培养基进行了比较。
1 标本的采集和处理
用无菌棉签取咽后壁分泌物，所有标本30min内接种于含50ug/ml万古霉素的5%兔血巧克力琼脂平皿和另1块不加万古霉素的巧克力琼脂平皿，置5%CO2环境35℃培养24h。
2 菌株的分离鉴定
巧克力平皿上生长有露滴状透明小菌落，边缘整齐，表面光滑为可疑菌落，镜下为G-短小杆菌，挑取可疑菌落用0.45%盐水制成1.5麦氏单位菌悬液，充入NHI卡(嗜血杆菌鉴定卡，与VITEK仪配套使用)，培养24h读数鉴定。
3 β-内酰胺酶试验
用Nitrocefin(头孢硝噻吩)纸片沾取菌落，10min内变成红色判断为β-内酰胺酶阳性。
4 结果
4.1 322名学龄儿童鼻咽部嗜血杆菌分离情况见表1。
表1 322名儿童鼻咽部嗜血杆菌分离情况 分离菌株
阳性例数
百分比
副流感嗜血杆菌
108
33.54
副溶血嗜血杆菌
80
24.84
流感嗜血杆菌
19
5.9
溶血嗜血杆菌
2
0.62
对所有分离到的19株流感嗜血杆菌β-内酰胺酶测试均为阴性。
4.2 加与不加万古霉素的巧克力琼脂培养基中嗜血杆菌分离率比较结果见表2。 表2 二种培养基中嗜血杆菌分离率比较 菌 名
分离菌株数(%)
加万古霉素
未加万古霉素
流感嗜血杆菌
19
(5.9)
4
(1.24)
副流感嗜血杆菌
108
(33.54)
48
(14.9)
溶血嗜血杆菌
2
(0.62)
2
(0.62)
副溶血嗜血杆菌
80
(24.84)
46
(14.3)
合 计
209
(64.90)
100
(31.06)
实验说明加万古霉素的培养基明显优于不加万古霉素的培养基，两者有明显差异(P<0.05)。
5 讨论
儿童感染嗜血杆菌的几率较高，流感嗜血杆菌是儿童细菌性肺炎时重要病原菌之一，因此提高流感杆菌的检出率是作出正确诊断的关键。嗜血杆菌对培养基的要求很严格，制备培养基时要严格按规定执行才能获得生长所需的X、V因子，另外，万古霉素有效地抑制了革兰氏阳性菌的生长，使嗜血杆菌得以充分生长，从而提高了分离率。
(收稿日期：1999-02-07), 百拇医药