bcl-2基因蛋白在急性髓系白血病中的表达及意义
作者：赵谢兰 齐振华 何 群
单位：湖南医科大学附属湘雅医院(长沙 410008)
关键词：基因表达调控，白血病；蛋白质类
湖南医学/990414 急性髓系白血病(AML)是血液系统的常见恶性肿瘤，它的病因及发病机 制尚未阐明 。近来认为白血病是由于造血干细胞的增殖与凋亡失控所致。bcl-2基因是细胞凋亡的主要 调控基因[1]，它不仅通过抑制细胞调亡而导致白血病的发生，而且与白血病的疗 效、预 后关系密切[2，3]。本文旨在探讨bcl-2基因在 AML中的表达水平及其与临床生物 学特 征的相关性，以进一步阐明其对白血病的发生、治疗、预后判断的意义。
1 临床资料
1.1 一般资料 72例AML患者系本院1998年4月至1999年4月期间门诊或住院病人，其中男42例，女30例，年龄5～60岁，中位数年龄为31岁，按FAB分型标准诊断：72例中M1亚型14例， M2型23例，M3型19例，M4型3例，M5型13例。
, http://www.100md.com
根据就诊时情况分：初治组33例，复发组21例，完全缓解(CR)组18例。并以12例缺铁性贫血患者作对照。
1.3 方法 采用免疫组化法。bcl-2试剂盒购自武汉博士德生物制品公司， 参照试剂盒内所附方法进行。
1.4 观察项目 bcl-2基因表达水平与患者外周血白细胞数，骨髓中的幼稚细胞百分率，肝脾及淋巴结肿大情况，对化疗的敏感性及FAB分型等。
2 结果
72例AML患者bcl-2基因蛋白表达水平明显高于对照组(P <0.01)，且初治组和复发 组明显高于CR组(均P<0.01)；而初治组与复发组之间差异无显著性(P>0.05)，见表1。
表1 AML患者骨髓细胞bcl-2基因蛋白质的表达(
±s，%) 组别
, http://www.100md.com
n
bcl-2 阳性表达
初治组
33
79.1±14.2
复发组
21
71.5±13.4
CR组
18
46.7±8.6
对照组
12
, http://www.100md.com
18.3±4.1
本组外周血 白细胞数≥30×109/L者22例，<30×109/L者50例，其bcl-2阳性表达率分别为(83.3 ±10.3)%和(62.4 ±7.0)%，两者比较，差异显著(P<0.05)；骨髓中幼稚细胞≥80%者33例，<80%者39例 ，其b cl-2阳性表达率分别为(80.2±9.4)%和(59.1±6.8)%，两组比较，差异显著(P<0.05) ；本组有 或无肝脾、淋巴结肿大者各36例，其bcl-2阳性表达率分别为(78.7±11.5)%和(58.9±7.1) %，两者 比较，差异显著(P<0.05)；本文对42例住院治疗的初治或复发患者进行了追踪观察， 其中 对化疗敏感者31例(经<3疗程标准化疗获CR)，对化疗不敏感者(经3疗程标准化疗未获CR)11 例，其化疗前bcl-2阳性表达率分别为(69.5±13.6)%和(86.8±8.4)%，两者比较，差异显 著(P< 0.05)。但经比较，bcl-2基因表达水平与AML患者FAB分型无关。
, 百拇医药
本文还检测了31例AML患 者CR前bcl-2基因阳性表达率为(69.5±13.6)%，CR后降至(45.3±9.1)%，两者比较， 差异显著(t=3.257，P<0.01)。
3 讨论
bcl-2基因是1984年由Tujimito等在滤泡性淋巴瘤染色体t(14，18)断裂点发现的凋亡抑制 基因，它的抗凋亡作用主要是延长细胞寿命，而不是促细胞增殖[4]。急性白血病患者骨髓中bcl-2表达阳性细胞数明显增多，正常良性细胞常小于20%[5～7]，本文结果与文献报道相一致。
bcl-2基因不仅与白血病的发生有关，而且与白血病患者的预后及对治疗的反应密切相关， 许多化疗药物如维甲酸、米托蒽醌、Vp-16、阿糖胞苷等诱导白血病细胞凋亡的同时下调 bcl -2基因的表达[2，8～10]，本文检测了31例患者CR前后bcl-2基因蛋白表达明显下调，复发组与初治组差异无显著性。因此 bcl-2表达水平反应了 AML患者的病情进展。
, 百拇医药
关于 bcl-2基因与 AML临床生物学特性的关系已有报道，本文结果显示：bcl-2基因表达水平 与 FAB分型无关，与 Campos等[3]报道相符，但与患者周围血中白细胞数、骨髓中幼稚细胞 比例、髓外浸润症状及对治疗的敏感性等密切相关，即患者周围血中白细胞数越高、骨髓中幼稚细胞比例越高、髓外侵润症状出现越频繁，bcl-2表达水平越高，同时患者对治疗的敏感性越差。因此认为，bcl-2基因蛋白表达水平可作为临床指导治疗、判断预后的指标之一 。
参考文献
1 Sachs L,Lotem, J.Control of programmed cell death is normal a nd Leukemic
cells:new implications for therapy.Blood,1993,82:15～21
, 百拇医药
2 Brad Bury DA,Aldington S.Down-regulation of bcl-2 i n AML blasts by all- trans
retinoic acid and its relationship to CD34 antigen expression.Br J
Heam,1996,94:671～675
3 Campos L,Sabido O,Sebban Crete,et al.High expression of b cl-2 protein is acut e
myeloid leukemic cells is associated with poor response to chemotherapy.Leuk
, http://www.100md.com
emia,1996,10:434～438
4 Reed JC.bcl-2:preventios of apoptosis as a mechanism of drug resistance.Heamtol
Oncol Clin North AM,1995,9(2):451～473
5 Reed JC.Cellular mechanisms of disease series:bcl-2 and the regulation of
programmed cell death.J cell Biol,1994,124:1～6
6 Miyashita T and Reed JC.Bcl-2 oncoprotein blocks chemotherap y -induced apoptosis
, 百拇医药
in a human leukemia cell line. Blood,1993,81(1)151～157
7 陈协群，王文亮.抗凋亡基因bcl-2在急性白血病骨髓与细胞株中的转 录水平表达.中华血液学
杂志，1995，16(2)631～632
8 Bhalla K,Tbrado AM,Tourkina E,et al.Hing-dose mitoxantro ne induces programmed
cell death of apoptosis is human myeloid leukemia cells.Blood,1993,82(10):3 133～
3140
9 仇志根，马伴吟.阿糖胞苷诱导HL-60细胞凋亡中bcl-2,c-myc基因 表达水平的变化.临床血液
学杂志，1997，18(7)：372～373
10 Delia D,Aiello A,Soligo D,et al.Bcl-2 protoocogene expr essi on is normal and
neoplastic human myeloid cells.Blood,1992,79(5):1291～1298
19990615 收稿, http://www.100md.com
单位：湖南医科大学附属湘雅医院(长沙 410008)
关键词：基因表达调控，白血病；蛋白质类
湖南医学/990414 急性髓系白血病(AML)是血液系统的常见恶性肿瘤，它的病因及发病机 制尚未阐明 。近来认为白血病是由于造血干细胞的增殖与凋亡失控所致。bcl-2基因是细胞凋亡的主要 调控基因[1]，它不仅通过抑制细胞调亡而导致白血病的发生，而且与白血病的疗 效、预 后关系密切[2，3]。本文旨在探讨bcl-2基因在 AML中的表达水平及其与临床生物 学特 征的相关性，以进一步阐明其对白血病的发生、治疗、预后判断的意义。
1 临床资料
1.1 一般资料 72例AML患者系本院1998年4月至1999年4月期间门诊或住院病人，其中男42例，女30例，年龄5～60岁，中位数年龄为31岁，按FAB分型标准诊断：72例中M1亚型14例， M2型23例，M3型19例，M4型3例，M5型13例。
, http://www.100md.com
根据就诊时情况分：初治组33例，复发组21例，完全缓解(CR)组18例。并以12例缺铁性贫血患者作对照。
1.3 方法 采用免疫组化法。bcl-2试剂盒购自武汉博士德生物制品公司， 参照试剂盒内所附方法进行。
1.4 观察项目 bcl-2基因表达水平与患者外周血白细胞数，骨髓中的幼稚细胞百分率，肝脾及淋巴结肿大情况，对化疗的敏感性及FAB分型等。
2 结果
72例AML患者bcl-2基因蛋白表达水平明显高于对照组(P <0.01)，且初治组和复发 组明显高于CR组(均P<0.01)；而初治组与复发组之间差异无显著性(P>0.05)，见表1。
表1 AML患者骨髓细胞bcl-2基因蛋白质的表达(
±s，%) 组别, http://www.100md.com
n
bcl-2 阳性表达
初治组
33
79.1±14.2
复发组
21
71.5±13.4
CR组
18
46.7±8.6
对照组
12
, http://www.100md.com
18.3±4.1
本组外周血 白细胞数≥30×109/L者22例，<30×109/L者50例，其bcl-2阳性表达率分别为(83.3 ±10.3)%和(62.4 ±7.0)%，两者比较，差异显著(P<0.05)；骨髓中幼稚细胞≥80%者33例，<80%者39例 ，其b cl-2阳性表达率分别为(80.2±9.4)%和(59.1±6.8)%，两组比较，差异显著(P<0.05) ；本组有 或无肝脾、淋巴结肿大者各36例，其bcl-2阳性表达率分别为(78.7±11.5)%和(58.9±7.1) %，两者 比较，差异显著(P<0.05)；本文对42例住院治疗的初治或复发患者进行了追踪观察， 其中 对化疗敏感者31例(经<3疗程标准化疗获CR)，对化疗不敏感者(经3疗程标准化疗未获CR)11 例，其化疗前bcl-2阳性表达率分别为(69.5±13.6)%和(86.8±8.4)%，两者比较，差异显 著(P< 0.05)。但经比较，bcl-2基因表达水平与AML患者FAB分型无关。
, 百拇医药
本文还检测了31例AML患 者CR前bcl-2基因阳性表达率为(69.5±13.6)%，CR后降至(45.3±9.1)%，两者比较， 差异显著(t=3.257，P<0.01)。
3 讨论
bcl-2基因是1984年由Tujimito等在滤泡性淋巴瘤染色体t(14，18)断裂点发现的凋亡抑制 基因，它的抗凋亡作用主要是延长细胞寿命，而不是促细胞增殖[4]。急性白血病患者骨髓中bcl-2表达阳性细胞数明显增多，正常良性细胞常小于20%[5～7]，本文结果与文献报道相一致。
bcl-2基因不仅与白血病的发生有关，而且与白血病患者的预后及对治疗的反应密切相关， 许多化疗药物如维甲酸、米托蒽醌、Vp-16、阿糖胞苷等诱导白血病细胞凋亡的同时下调 bcl -2基因的表达[2，8～10]，本文检测了31例患者CR前后bcl-2基因蛋白表达明显下调，复发组与初治组差异无显著性。因此 bcl-2表达水平反应了 AML患者的病情进展。
, 百拇医药
关于 bcl-2基因与 AML临床生物学特性的关系已有报道，本文结果显示：bcl-2基因表达水平 与 FAB分型无关，与 Campos等[3]报道相符，但与患者周围血中白细胞数、骨髓中幼稚细胞 比例、髓外浸润症状及对治疗的敏感性等密切相关，即患者周围血中白细胞数越高、骨髓中幼稚细胞比例越高、髓外侵润症状出现越频繁，bcl-2表达水平越高，同时患者对治疗的敏感性越差。因此认为，bcl-2基因蛋白表达水平可作为临床指导治疗、判断预后的指标之一 。
参考文献
1 Sachs L,Lotem, J.Control of programmed cell death is normal a nd Leukemic
cells:new implications for therapy.Blood,1993,82:15～21
, 百拇医药
2 Brad Bury DA,Aldington S.Down-regulation of bcl-2 i n AML blasts by all- trans
retinoic acid and its relationship to CD34 antigen expression.Br J
Heam,1996,94:671～675
3 Campos L,Sabido O,Sebban Crete,et al.High expression of b cl-2 protein is acut e
myeloid leukemic cells is associated with poor response to chemotherapy.Leuk
, http://www.100md.com
emia,1996,10:434～438
4 Reed JC.bcl-2:preventios of apoptosis as a mechanism of drug resistance.Heamtol
Oncol Clin North AM,1995,9(2):451～473
5 Reed JC.Cellular mechanisms of disease series:bcl-2 and the regulation of
programmed cell death.J cell Biol,1994,124:1～6
6 Miyashita T and Reed JC.Bcl-2 oncoprotein blocks chemotherap y -induced apoptosis
, 百拇医药
in a human leukemia cell line. Blood,1993,81(1)151～157
7 陈协群，王文亮.抗凋亡基因bcl-2在急性白血病骨髓与细胞株中的转 录水平表达.中华血液学
杂志，1995，16(2)631～632
8 Bhalla K,Tbrado AM,Tourkina E,et al.Hing-dose mitoxantro ne induces programmed
cell death of apoptosis is human myeloid leukemia cells.Blood,1993,82(10):3 133～
3140
9 仇志根，马伴吟.阿糖胞苷诱导HL-60细胞凋亡中bcl-2,c-myc基因 表达水平的变化.临床血液
学杂志，1997，18(7)：372～373
10 Delia D,Aiello A,Soligo D,et al.Bcl-2 protoocogene expr essi on is normal and
neoplastic human myeloid cells.Blood,1992,79(5):1291～1298
19990615 收稿, http://www.100md.com