黄芪治疗流行性出血热体液免疫检测的动态观察
作者：杨宗琪 唐恩洁
单位：川北医学院微生物学教研室 南充 637000
关键词：黄芪；EHF；检测；免疫调节
川北医学院学报990405摘要 本文报道黄芪对流行性出血热(EHF)患者外周血IgG、IgM、C3、HIT、B细胞绝对值(B绝)及百分率(B%)的影响。结果表明黄芪对B细胞数量影响不大，不能选择性增加特异性抗体的含量，但能显著提高IgM，并使显著低下的IgG及C3迅速恢复到正常水平。提示黄芪虽不是单独针对EHF病毒提高特异性抗体水平，但对机体失去平衡的免疫应答有明显的调节作用，以减少免疫病理损伤。
文章编号：1005-3697(1999)04-0008-03中图分类号：R282.71 文献标识码：A
, http://www.100md.com 黄芪有多种生物活性，具有双相免疫调节功能，已有人用于治疗慢性活动性肝炎、呼吸道病毒感染、EHF等[1～4]。我们对黄芪治疗与非黄芪治疗的EHF患者及正常人分别检测了IgG、IgM、C3、B细胞百分率(B%)及绝对值(简称B绝)等体液免疫指标，并用血凝抑制试验(Hemagglutination-Inhibition Test,HIT)检测了保存血清的特异性抗体含量及动态变化。
1 材料与方法
1.1 检测对象 将本院按1981年全国西安EHF防治科研工作座谈会诊断标准收治的82例EHF患者随机分为黄芪治疗组(40例)与对照组(42例)，正常人对照组70例，其年龄、性别、病型分布及来源见文献[4]。
1.2 主要材料 黄芪注射液，华西医科大学药厂提供；IgG、IgM、C3抗血清及标准参考血清为上海生物制品研究所产品；EHF HA抗原为本室从EHF(McAb证实)尸解腹腔积液中采用Clarks与Casals的蔗糖丙酮提取法[5]提取，其中用尸体腹腔积液替代鼠脑蔗糖液，HA效价为1∶64，PH6.2，采用1∶16作为4单位HA作HIT。
, 百拇医药
1.3 方法 治疗方法：按1981年西安全国EHF会议防治方案，分为治疗组常规治疗加黄芪治疗(黄芪注射液4ml，(○)/(m)，q12h×5)，对照组(仅常规治疗)。每隔3病日于晨7～8时定时采血送检，并同时作血常规及淋巴细胞绝对数检测，试验过程采用双盲法。HIT：采用Tsai TF等[6]的方法检测，PH6.2。B细胞百分率：采用吴健民等[7]的方法测定。IgG、IgM、C3：采用单相琼脂扩散法。
2 结 果
两组EHF患者检测结果均按病期(发热低血压期、少尿期、多尿期及恢复期)统计。所有结果均采用方差分析，见表1。
表1 正常人与两组EHF患者体液免疫检测结果 检测内容
B绝
±SE
, 百拇医药
P值
C3
B%
IgG
IgM
正常人组
234.3
11.58
1410.77
291.20
121.53
n＝70
±15.74
, 百拇医药
±0.56
±204.25
±26.79
±6.88
治 疗 组
发热低血压期
344.43
10.14
882.96
271.89
107.83
n＝14
±69.87
, 百拇医药
±2.03
±210.59
±55.83
±22.25
少 尿 期
283.00
8.71
925.64
433.69
144.17
n＝31
±38.08
±0.77**
, 百拇医药
±136.74
±70.14
±12.37
多 尿 期
266.11
9.94
1218.35
493.55
137.69
n＝44
±32.61
±1.02
, 百拇医药 ±124.51
±65.54**
±11.97
恢复期
n＝12
175.67±44.46
8.60±1.42
1195.78±206.69
421.08±59.09·
135.60±18.96
对 照 组
, http://www.100md.com
发热低血压期
331.10
8.66
1072.70
164.40
80.46
n＝18
±80.18
±1.21*
±312.76
±23.28**
±8.40**
, 百拇医药
少 尿 期
289.52
8.29
779.92
206.09
73.16
n＝36
±41.40
±0.62**
±90.04*
±24.32*
±5.06**
, http://www.100md.com
多 尿 期
200.26
8.74
738.02
298.67
66.30
n＝46
±16.88
±0.55**
±80.95**
±36.85
±4.25**
, 百拇医药
恢 复 期
176.36
8.90
694.49
279.09
88.55
n＝11
±28.58
±0.90*
±176.41*
±49.74
±5.87**
, 百拇医药
注：数字后“*”＝P<0.05，“**”＝P<0.01，“空白”＝P>0.05，表2同。
B绝与B%：表1表明，两组EHF的B细胞绝对数随病程推移而减少，两组间无统计学意义。两组EHF各期的B%都低于正常人组，但治疗组除少尿期外，其余各期与正常人组均无显著差异(P>0.05)，而对照组各期B%均显著低于正常人组(P<0.05或0.01)。
IgG：两组EHF患者各期虽IgG水平均低于正常人，但经统计分析，治疗组与正常人组比较无显著差异，且能迅速回升到正常水平，而对照组除发热低血压期外，IgG水平均显著低于正常人组(P<0.05或0.01)，并随病程进展而下降。治疗组除发热低血压期外，其余各期IgG水平均显著高于对照组(P<0.05或0.01)。
IgM：治疗组发热低血压期IgM水平略下降，以后即迅速上升，到多尿期与恢复期已显著高于正常人组(P<0.05)，而对照组发热低血压期、少尿期IgM水平却显著低于正常人组(P<0.01，P<0.05)，以后回升到正常水平。治疗组各期IgM水平均高于对照组，且少尿期及多尿期两组有显著差异(P<0.01，P<0.05)。
, 百拇医药
C3：治疗组各期与正常人组之间C3水平无显著差异，而对照组各期均非常显著低于正常人组(P<0.01)，到恢复期仍未能回到正常水平。治疗组除发热低血压期外，其余各期C3水平均显著高于对照组(P<0.05或0.01)。
HIT：70例正常对照只有3例测到1∶5的HI抗体(可能为隐性感染)，其余均阴性，因此将1∶10定为EHF患者的阳性起始效价。表2表明，两组EHF患者之间比较，除了多尿期治疗组显著高于对照组(P<0.05)外，其余各期均无统计学意义。两组EHF患者的组内比较，各期之间均差异显著(P<0.01或0.05)。
表2 两组EHF患者HIT检测结果 分 期
对照组
治疗组
, 百拇医药 n
G
n
G
发热低血压期
14
18.11
11
16.56
少 尿 期
34
62.63
29
, 百拇医药 81.94
多 尿 期
46
135.55
44
193.29
恢 复 期
11
193.29
12
253.98
3 讨 论
黄芪能显著提高T细胞数量[4]，但对B细胞数量的影响不大，符合对病毒的清除主要是依靠细胞免疫而不是体液免疫的一般规律。EHF患者的B细胞数量变化不大，B%明显低于正常人，而黄芪不能有效提高B细胞数量，但能显著提高循环抗体含量的结果提示，黄芪促进IgG、IgM的产生，可能是显著活化现有B细胞产生抗体的能力，对低下的体液免疫进行正相的免疫调节作用。
, 百拇医药
EHT患者病理损害与第Ⅲ型变态反应有关。黄芪在提高IgG、IgM含量的同时，促使C3水平迅速恢复到正常水平的结果，提示黄芪可能通过减少循环中的中等大小抗原抗体复合物而减少补体的激活过程，以达到减轻免疫病理损伤的作用[8]，从而促进机体的康复。
黄芪能显著提高IgG、IgM含量，但针对EHF病毒的特异性抗体含量提高不如血清总抗体明显，只有多尿期有显著差异，说明黄芪对特异性抗体产生的促进作用，仅仅是伴随着机体产生抗体总能力的提高而提高，黄芪对机体的免疫调节作用是 针对机体整体，而不能选择性针对EHF病毒。这也解释了黄芪能对多种病原引起的免疫异常均有调节作用的原因，并进一步提示黄芪在祖国医学中的补气扶正作用，其实质可能就是通过对失衡的免疫应答的调节作用，以维持机体内环境的平衡。 参考文献
1 周明行，等.黄芪对慢性活动性肝炎的疗效及其免疫功能变化.解放军医学杂志，1982；7(4)∶242
, 百拇医药
2 侯云德，等.黄芪的某些生物学活性有效部分的研究.中西医结合杂志，1984；4(7)∶420
3 潘谷云，等.黄芪注射液治疗流行性出血热临床及免疫学观察.哈医大学报，1982；16(2)∶70
4 唐恩洁，等.黄芪对流行性出血热EHF免疫功能的影响.川北医学院学报，1988；3(3)∶1
5 Clarke DH et al.Techniques for hemagglutination and hemagglutination-inhibilion with Arthropod-Borne Viruses,Am J Trop Med Hyg,1958;7∶561
6 Tsai TF et al.Hemagglutination-inhibinting antibody in hemorrhagic fever with renal syndrome,The journal of infectious diseases,1984;150(6)∶895
7 吴健民，等.新生儿脐血淋巴细胞分类和T细胞亚群及其功能.中华儿科杂志，1982；20(2)∶7
8 冯为新，等(译).免疫复合物在疾病中的作用(世界卫生组织技术资料译丛).第1版.北京：人民卫生出版社，1979；34～50
收稿日期：1999-10-11, 百拇医药
单位：川北医学院微生物学教研室 南充 637000
关键词：黄芪；EHF；检测；免疫调节
川北医学院学报990405摘要 本文报道黄芪对流行性出血热(EHF)患者外周血IgG、IgM、C3、HIT、B细胞绝对值(B绝)及百分率(B%)的影响。结果表明黄芪对B细胞数量影响不大，不能选择性增加特异性抗体的含量，但能显著提高IgM，并使显著低下的IgG及C3迅速恢复到正常水平。提示黄芪虽不是单独针对EHF病毒提高特异性抗体水平，但对机体失去平衡的免疫应答有明显的调节作用，以减少免疫病理损伤。
文章编号：1005-3697(1999)04-0008-03中图分类号：R282.71 文献标识码：A
, http://www.100md.com 黄芪有多种生物活性，具有双相免疫调节功能，已有人用于治疗慢性活动性肝炎、呼吸道病毒感染、EHF等[1～4]。我们对黄芪治疗与非黄芪治疗的EHF患者及正常人分别检测了IgG、IgM、C3、B细胞百分率(B%)及绝对值(简称B绝)等体液免疫指标，并用血凝抑制试验(Hemagglutination-Inhibition Test,HIT)检测了保存血清的特异性抗体含量及动态变化。
1 材料与方法
1.1 检测对象 将本院按1981年全国西安EHF防治科研工作座谈会诊断标准收治的82例EHF患者随机分为黄芪治疗组(40例)与对照组(42例)，正常人对照组70例，其年龄、性别、病型分布及来源见文献[4]。
1.2 主要材料 黄芪注射液，华西医科大学药厂提供；IgG、IgM、C3抗血清及标准参考血清为上海生物制品研究所产品；EHF HA抗原为本室从EHF(McAb证实)尸解腹腔积液中采用Clarks与Casals的蔗糖丙酮提取法[5]提取，其中用尸体腹腔积液替代鼠脑蔗糖液，HA效价为1∶64，PH6.2，采用1∶16作为4单位HA作HIT。
, 百拇医药
1.3 方法 治疗方法：按1981年西安全国EHF会议防治方案，分为治疗组常规治疗加黄芪治疗(黄芪注射液4ml，(○)/(m)，q12h×5)，对照组(仅常规治疗)。每隔3病日于晨7～8时定时采血送检，并同时作血常规及淋巴细胞绝对数检测，试验过程采用双盲法。HIT：采用Tsai TF等[6]的方法检测，PH6.2。B细胞百分率：采用吴健民等[7]的方法测定。IgG、IgM、C3：采用单相琼脂扩散法。
2 结 果
两组EHF患者检测结果均按病期(发热低血压期、少尿期、多尿期及恢复期)统计。所有结果均采用方差分析，见表1。
表1 正常人与两组EHF患者体液免疫检测结果 检测内容
B绝
±SE, 百拇医药
P值
C3
B%
IgG
IgM
正常人组
234.3
11.58
1410.77
291.20
121.53
n＝70
±15.74
, 百拇医药
±0.56
±204.25
±26.79
±6.88
治 疗 组
发热低血压期
344.43
10.14
882.96
271.89
107.83
n＝14
±69.87
, 百拇医药
±2.03
±210.59
±55.83
±22.25
少 尿 期
283.00
8.71
925.64
433.69
144.17
n＝31
±38.08
±0.77**
, 百拇医药
±136.74
±70.14
±12.37
多 尿 期
266.11
9.94
1218.35
493.55
137.69
n＝44
±32.61
±1.02
, 百拇医药 ±124.51
±65.54**
±11.97
恢复期
n＝12
175.67±44.46
8.60±1.42
1195.78±206.69
421.08±59.09·
135.60±18.96
对 照 组
, http://www.100md.com
发热低血压期
331.10
8.66
1072.70
164.40
80.46
n＝18
±80.18
±1.21*
±312.76
±23.28**
±8.40**
, 百拇医药
少 尿 期
289.52
8.29
779.92
206.09
73.16
n＝36
±41.40
±0.62**
±90.04*
±24.32*
±5.06**
, http://www.100md.com
多 尿 期
200.26
8.74
738.02
298.67
66.30
n＝46
±16.88
±0.55**
±80.95**
±36.85
±4.25**
, 百拇医药
恢 复 期
176.36
8.90
694.49
279.09
88.55
n＝11
±28.58
±0.90*
±176.41*
±49.74
±5.87**
, 百拇医药
注：数字后“*”＝P<0.05，“**”＝P<0.01，“空白”＝P>0.05，表2同。
B绝与B%：表1表明，两组EHF的B细胞绝对数随病程推移而减少，两组间无统计学意义。两组EHF各期的B%都低于正常人组，但治疗组除少尿期外，其余各期与正常人组均无显著差异(P>0.05)，而对照组各期B%均显著低于正常人组(P<0.05或0.01)。
IgG：两组EHF患者各期虽IgG水平均低于正常人，但经统计分析，治疗组与正常人组比较无显著差异，且能迅速回升到正常水平，而对照组除发热低血压期外，IgG水平均显著低于正常人组(P<0.05或0.01)，并随病程进展而下降。治疗组除发热低血压期外，其余各期IgG水平均显著高于对照组(P<0.05或0.01)。
IgM：治疗组发热低血压期IgM水平略下降，以后即迅速上升，到多尿期与恢复期已显著高于正常人组(P<0.05)，而对照组发热低血压期、少尿期IgM水平却显著低于正常人组(P<0.01，P<0.05)，以后回升到正常水平。治疗组各期IgM水平均高于对照组，且少尿期及多尿期两组有显著差异(P<0.01，P<0.05)。
, 百拇医药
C3：治疗组各期与正常人组之间C3水平无显著差异，而对照组各期均非常显著低于正常人组(P<0.01)，到恢复期仍未能回到正常水平。治疗组除发热低血压期外，其余各期C3水平均显著高于对照组(P<0.05或0.01)。
HIT：70例正常对照只有3例测到1∶5的HI抗体(可能为隐性感染)，其余均阴性，因此将1∶10定为EHF患者的阳性起始效价。表2表明，两组EHF患者之间比较，除了多尿期治疗组显著高于对照组(P<0.05)外，其余各期均无统计学意义。两组EHF患者的组内比较，各期之间均差异显著(P<0.01或0.05)。
表2 两组EHF患者HIT检测结果 分 期
对照组
治疗组
, 百拇医药 n
G
n
G
发热低血压期
14
18.11
11
16.56
少 尿 期
34
62.63
29
, 百拇医药 81.94
多 尿 期
46
135.55
44
193.29
恢 复 期
11
193.29
12
253.98
3 讨 论
黄芪能显著提高T细胞数量[4]，但对B细胞数量的影响不大，符合对病毒的清除主要是依靠细胞免疫而不是体液免疫的一般规律。EHF患者的B细胞数量变化不大，B%明显低于正常人，而黄芪不能有效提高B细胞数量，但能显著提高循环抗体含量的结果提示，黄芪促进IgG、IgM的产生，可能是显著活化现有B细胞产生抗体的能力，对低下的体液免疫进行正相的免疫调节作用。
, 百拇医药
EHT患者病理损害与第Ⅲ型变态反应有关。黄芪在提高IgG、IgM含量的同时，促使C3水平迅速恢复到正常水平的结果，提示黄芪可能通过减少循环中的中等大小抗原抗体复合物而减少补体的激活过程，以达到减轻免疫病理损伤的作用[8]，从而促进机体的康复。
黄芪能显著提高IgG、IgM含量，但针对EHF病毒的特异性抗体含量提高不如血清总抗体明显，只有多尿期有显著差异，说明黄芪对特异性抗体产生的促进作用，仅仅是伴随着机体产生抗体总能力的提高而提高，黄芪对机体的免疫调节作用是 针对机体整体，而不能选择性针对EHF病毒。这也解释了黄芪能对多种病原引起的免疫异常均有调节作用的原因，并进一步提示黄芪在祖国医学中的补气扶正作用，其实质可能就是通过对失衡的免疫应答的调节作用，以维持机体内环境的平衡。 参考文献
1 周明行，等.黄芪对慢性活动性肝炎的疗效及其免疫功能变化.解放军医学杂志，1982；7(4)∶242
, 百拇医药
2 侯云德，等.黄芪的某些生物学活性有效部分的研究.中西医结合杂志，1984；4(7)∶420
3 潘谷云，等.黄芪注射液治疗流行性出血热临床及免疫学观察.哈医大学报，1982；16(2)∶70
4 唐恩洁，等.黄芪对流行性出血热EHF免疫功能的影响.川北医学院学报，1988；3(3)∶1
5 Clarke DH et al.Techniques for hemagglutination and hemagglutination-inhibilion with Arthropod-Borne Viruses,Am J Trop Med Hyg,1958;7∶561
6 Tsai TF et al.Hemagglutination-inhibinting antibody in hemorrhagic fever with renal syndrome,The journal of infectious diseases,1984;150(6)∶895
7 吴健民，等.新生儿脐血淋巴细胞分类和T细胞亚群及其功能.中华儿科杂志，1982；20(2)∶7
8 冯为新，等(译).免疫复合物在疾病中的作用(世界卫生组织技术资料译丛).第1版.北京：人民卫生出版社，1979；34～50
收稿日期：1999-10-11, 百拇医药