冠心病病人红细胞变形能力与脂质过氧化损伤及血浆sC5b-9浓度的关系
作者：王丽君 李 晖 谭润鸾
单位：王丽君 李 晖(青岛医学院(青岛 266021)松山医院内科；谭润鸾(诊断学教研室)
关键词：冠状动脉疾病；红细胞变形能力；红细胞膜；脂质过氧化损伤；补体
齐鲁医学杂志990403 【摘要】 ①目的 探讨冠心病病人红细胞变形能力(ED)变化与红细胞膜脂质过氧化物(LPO)及血浆补体激活片段(sC5b-9)的关系。②方法 采用DXC-300A型核孔膜红细胞变形能力测定仪,硫代巴比妥酸比色法和酶联免疫吸附法(ELISA),检测了35例冠心病病人红细胞滤过指数(EFI)、红细胞膜LPO含量和sC5b-9浓度的变化。③结果 冠心病病人EFI, LPO,sC5b-9明显增高,与对照组比较差异有显著性(t=13.688～26.630,P<0.001),且不同类型冠心病病人EFI,LPO,sC5b-9的差异亦具有显著意义(F=39.86～80.13,q=11.267～25.440,P<0.001),以急性心肌梗死病人各指标增高最明显。有并发症者和合并其他疾病者各指标增高较无并发症和单纯冠心病者更明显(t=7.746～19.519,P<0.001)。冠心病病人EFI与LPO,sC5b-9呈正相关(r=0.662,0.715,P<0.001)。④结论 冠心病病人ED降低与红细胞膜LPO和血浆sC5b-9增高有密切关系。
, 百拇医药
中国图书馆分类法分类号 R541.4
THE RELATIONSHIP BETWEEN ERYTHROCYTE DEFORMABILITY AND ERYTHROCYTE MEMBRANE LIPID PEROXIDATIVE INJURY AND PLASMA sC5b-9 IN PATIENTS WITH CORONARY HEART DISEASE
Wang Lijun, Li Hui, Tan Runluan Department of Internal Medicine, The Songshan Hospital of Qingdao Medical College, Qingdao 266021
【ABSTRACT】 Objective To explore the relationship between the erythrocyte deformability(ED) and erythrocyte membrane lipid peroxidase(LPO), plasma complement activation composition(sC5b-9) in patients with coronary heart disease(CHD).Methods The erythrocyte filtration index(EFI), LPO and sC5b-9 were measured in 35 CHD patients and 36 controls, by using erythrocyte deformability apparatus, thiobarturic acid method and enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) method. ResultsThe EFI, LPO, sC5b-9 were significantly higher in CHD patients than those in controls(t= 13.688-26.230, P<0.001), all indicators were significantly different among unstable angina(UA), acute myocardial infarction(AMI) and old myocardial infarction(OMI) patients(F=39.86-80.13,q=11.267-25.440,P<0.01). And the increase of all indicators were more obvious in AMI patients. The EFI, LPO and sC5b-9 in patients with complications and other diseases were markedly higher than those patients without any complications (t=7.746-19.519,P<0.001). The EFI of CHD patients was positively correlated with LPO and sC5b-9 (r=0.662,0.715,P<0.001). Conclusion The decrease of ED in patients with CHD was related to the increase of erythrocyte membrane LPO and plasma sC5b-9 concentration.
, 百拇医药
【KEY WORDS】 coronary heart disease; erythrocyte deformability; erythrocyte membrane;lipid peroxidase injury; complement
研究表明，冠心病病人红细胞变形能力(ED)明显降低，其降低与脂质过氧化损伤有关〔1,2〕，而血浆补体激活与心肌缺血性损伤有一定的关系〔3〕。但冠心病病人ED变化与血浆补体激活片段(sC5b-9)浓度变化的关系尚未见报道。为此，我们检测了35例冠心病病人ED，红细胞膜脂质过氧化物(LPO)含量和血浆sC5b-9浓度的变化，旨在探讨LPO和sC5b-9变化对冠心病病人ED变化的影响。现将结果报告如下。
1 对象与方法
1.1 对象与分组
, 百拇医药
1.1.1 冠心病组 根据WHO诊断标准选择冠心病病人36例，男26例，女10例；年龄48～81岁，平均(63±8)岁。排除伴有免疫性疾病和近期感染者。36例病人中，不稳定性心绞痛(UA)16例，急性心肌梗死(AMI)10例，陈旧性心肌梗死(OMI)10例。冠心病并发心律失常(室性期前收缩、心房纤颤)、心力衰竭者16例，合并糖尿病、高血压者15例。
1.1.2 对照组 选择同期的无心、脑、肾脏、内分泌和肝脏疾病的健康人38例，男20例，女18例；年龄46～78岁，平均(65±7)岁。
1.2 检测方法
1.2.1 标本制备 EDTA-2Na抗凝血4mL，分离血浆用于检测sC5b-9.再用生理盐水洗涤剩余红细胞3次，制备体积分数为0.05的红细胞悬液用于检测ED和红细胞膜LPO.
1.2.2 ED测定 采用DXC-300A型核孔膜红细胞变形能力测定仪，测定红细胞滤过指数(EFI)作为判断ED的指标。EFI愈小，ED愈大；EFI愈大，ED愈小。
, 百拇医药
1.2.3 sC5b-9测定 采用ELISA法〔3〕，试剂盒由华美公司提供。
1.2.4 红细胞膜LPO测定 采用硫代巴比妥酸比色法。
1.3 统计学处理
检测结果以
±s表示，组间比较采用t检验和方差分析，相关关系采用直线相关分析。
2 结 果
冠心病病人EFI，LPO，sC5b-9明显增高，与对照组比较差异有显著性(t=13.688～26.230，P<0.001)；且不同类型冠心病病人EFI，LPO，sC5b-9的比较差异亦具有显著性(F=39.86～80.13，q=11.267～25.440，P<0.001)，以急性心肌梗死病人各指标增高最明显。有并发症者和合并其他疾病者各指标增高较无并发症及单纯冠心病者更明显(t=7.746～19.519，P<0.001)。见表1.冠心病病人EFI与LPO，sC5b-9均呈正相关(r=0.662，0.715，P<0.001)。
, 百拇医药
表1 冠心病病人EFI,LPO和sC5b-9测定结果(±s) 组 别
n
EFI
LPO
sC5b-9(ρ/μg.L-1)
对照组
38
0.23±0.03
0.59±0.007
360±42
, 百拇医药
冠心病组
36
0.42±0.08△
1.26±0.14△
524±58△
UA组
16
0.48±0.06
1.47±0.17
587±62
AMI组
10
, 百拇医药
0.52±0.07
1.52±0.20
563±49
OMI组
10
0.30±0.05
0.72±0.10
432±50
有并发症
16
0.53±0.08**
1.57±0.18**
, 百拇医药
653±66**
无并发症
20
0.36±0.05
0.76±0.14
448±49
并其他疾病
15
0.59±0.06*
1.69±0.19*
674±68*
, 百拇医药
单纯冠心病
21
0.30±0.04
0.65±0.13
426±40
与对照组比较，△t=13.688～26.230，P<0.001；不同类型冠心病病人各指标比较，F=39.86～80.13，q=11.267～25.440，P<0.001；与单纯冠心病组比较，*t=17.407～19.519，P<0.001;与无并发症者比较，**t=7.746～15.199，P<0.001
3 讨 论
ED是红细胞的主要物理特性之一，它不仅是影响血液流动性和黏滞性的重要因素，而且也是保证微循环有效灌注的必要条件。研究表明，ED参与了冠心病的发生与发展〔4〕。但冠心病病人ED变化的机制尚不十分清楚。本文从红细胞膜LPO 和血浆补体激活产物sC5b-9浓度变化入手，探讨冠心病病人ED变化的机制。本文结果显示，冠心病病人EFI，LPO和sC5b-9较对照组明显增高，且冠心病病人EFI与LPO，sC5b-9呈正相关关系。同时，随着病情的发展，EFI，LPO，sC5b-9增高逐渐明显。有并发症者和合并其他疾病者各指标增高较无并发症和无合并其他疾病者更明显，提示冠心病病人ED降低与红细胞膜脂质过氧化损伤和血浆补体激活有密切关系，且各指标随着病情变化和是否合并其他疾病而变化。
, http://www.100md.com
LPO是生物膜中的多价不饱和脂肪酸，受氧自由基的作用，启动自由基连锁反应生成的脂质过氧化物，造成生物膜结构和功能障碍，引起内皮细胞损伤，导致动脉粥样硬化。红细胞无细胞器，含有引发并启动催化脂质过氧化作用的金属络合物血红蛋白，膜上又含有丰富的多价不饱和脂肪酸。因此，红细胞易遭受自由基攻击而发生脂质过氧化反应，导致红细胞膜骨架结构破坏，使红细胞脆性增加和红细胞膜完整性改变，引起ED降低〔1，5〕，参与了冠心病的发生与发展。
补体系统激活后C5～C9形成末端补体复合物(TCC)，其结合在红细胞膜上者为攻击复合体(MAC)，存在于血浆中者为sC5b-9.研究表明，补体系统激活与心肌梗死时心肌缺血再灌注损伤有关〔6，7〕。而冠心病病人ED降低与sC5b-9浓度的关系尚未见报道。本文结果显示，冠心病病人EFI与sC5b-9呈正相关，提示ED降低与血浆补体激活有一定关系，但sC5b-9 浓度增高导致ED降低的机制尚不清楚，可能为sC5b-9增高直接作用于红细胞膜，产生攻膜作用〔8〕，破坏红细胞膜结构和功能，导致ED降低。
, 百拇医药
综上所述，冠心病病人ED降低与LPO和sC5b-9浓度增高有密切关系，且与病变程度及合并其他疾病有关系。提示在预防和治疗冠心病过程中，除应用抗氧化剂和治疗并发症外，还应适当应用补体激活成分单克隆抗体，以减小心肌缺血和损伤面积，这为进一步预防和治疗冠心病提供了理论依据。参考文献
1 Hasegawa S， Rodgers GP, Shio H, et al. Impaired deformability of Heiz body forming red cells. Biorheology,1993,30(3～4):275
2 Uyesaka N,Hasegawa S,Ishioka N,et al.Effects of superoxide anions on red cell deformability and membrane protein. Biorheology,1992,29(2～3):217
, 百拇医药
3 Vakeva A, Morgon BP, Tikkannen I, et al. Time course of complement activation and inhibitor expression after ischemic injury of rat myocardium. Am J Pathol, 1994,144(6):1357
4 刘成玉，冯 毅，谭云鸾. 急性心肌梗塞患者红细胞变形能力与红细胞膜三磷酸腺苷酶活性关系的研究.中国循环杂志，1995,10(5)：268
5 Capari P, Bozzi A, Malorni W, et al. Junctional site of erythrocyte skeletal proteins are specific targets of tert-butylhydroperoxide oxidative demage. Chem Biol Interact, 1995,94(3): 243
, 百拇医药
6 Amsterdam EA, Stahl GL, Pan HL, et al. Limitation of reperfusion injury by a monoclonal antibody to C5a during myocardial infarction in pigs. Am J Physiol,1995,268(1 pt 2 ):H448
7 Thonsen H, Held H, Immuno-histochemical detection of C5b-9(m) in myocardium: an aid in distiguishing infarction induced ischemic heart muscle necrosis from other forms of lethal myocardial injury. Forensic Sci Int,1995,71(2):87
8 Hansch GH. The complement attack phase : control of lysis and no-lethal affacts of C5b-9. Immunopharmacol,1992,24:107
(1999-04-20收稿 1999-09-26修回), http://www.100md.com
单位：王丽君 李 晖(青岛医学院(青岛 266021)松山医院内科；谭润鸾(诊断学教研室)
关键词：冠状动脉疾病；红细胞变形能力；红细胞膜；脂质过氧化损伤；补体
齐鲁医学杂志990403 【摘要】 ①目的 探讨冠心病病人红细胞变形能力(ED)变化与红细胞膜脂质过氧化物(LPO)及血浆补体激活片段(sC5b-9)的关系。②方法 采用DXC-300A型核孔膜红细胞变形能力测定仪,硫代巴比妥酸比色法和酶联免疫吸附法(ELISA),检测了35例冠心病病人红细胞滤过指数(EFI)、红细胞膜LPO含量和sC5b-9浓度的变化。③结果 冠心病病人EFI, LPO,sC5b-9明显增高,与对照组比较差异有显著性(t=13.688～26.630,P<0.001),且不同类型冠心病病人EFI,LPO,sC5b-9的差异亦具有显著意义(F=39.86～80.13,q=11.267～25.440,P<0.001),以急性心肌梗死病人各指标增高最明显。有并发症者和合并其他疾病者各指标增高较无并发症和单纯冠心病者更明显(t=7.746～19.519,P<0.001)。冠心病病人EFI与LPO,sC5b-9呈正相关(r=0.662,0.715,P<0.001)。④结论 冠心病病人ED降低与红细胞膜LPO和血浆sC5b-9增高有密切关系。
, 百拇医药
中国图书馆分类法分类号 R541.4
THE RELATIONSHIP BETWEEN ERYTHROCYTE DEFORMABILITY AND ERYTHROCYTE MEMBRANE LIPID PEROXIDATIVE INJURY AND PLASMA sC5b-9 IN PATIENTS WITH CORONARY HEART DISEASE
Wang Lijun, Li Hui, Tan Runluan Department of Internal Medicine, The Songshan Hospital of Qingdao Medical College, Qingdao 266021
【ABSTRACT】 Objective To explore the relationship between the erythrocyte deformability(ED) and erythrocyte membrane lipid peroxidase(LPO), plasma complement activation composition(sC5b-9) in patients with coronary heart disease(CHD).Methods The erythrocyte filtration index(EFI), LPO and sC5b-9 were measured in 35 CHD patients and 36 controls, by using erythrocyte deformability apparatus, thiobarturic acid method and enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) method. ResultsThe EFI, LPO, sC5b-9 were significantly higher in CHD patients than those in controls(t= 13.688-26.230, P<0.001), all indicators were significantly different among unstable angina(UA), acute myocardial infarction(AMI) and old myocardial infarction(OMI) patients(F=39.86-80.13,q=11.267-25.440,P<0.01). And the increase of all indicators were more obvious in AMI patients. The EFI, LPO and sC5b-9 in patients with complications and other diseases were markedly higher than those patients without any complications (t=7.746-19.519,P<0.001). The EFI of CHD patients was positively correlated with LPO and sC5b-9 (r=0.662,0.715,P<0.001). Conclusion The decrease of ED in patients with CHD was related to the increase of erythrocyte membrane LPO and plasma sC5b-9 concentration.
, 百拇医药
【KEY WORDS】 coronary heart disease; erythrocyte deformability; erythrocyte membrane;lipid peroxidase injury; complement
研究表明，冠心病病人红细胞变形能力(ED)明显降低，其降低与脂质过氧化损伤有关〔1,2〕，而血浆补体激活与心肌缺血性损伤有一定的关系〔3〕。但冠心病病人ED变化与血浆补体激活片段(sC5b-9)浓度变化的关系尚未见报道。为此，我们检测了35例冠心病病人ED，红细胞膜脂质过氧化物(LPO)含量和血浆sC5b-9浓度的变化，旨在探讨LPO和sC5b-9变化对冠心病病人ED变化的影响。现将结果报告如下。
1 对象与方法
1.1 对象与分组
, 百拇医药
1.1.1 冠心病组 根据WHO诊断标准选择冠心病病人36例，男26例，女10例；年龄48～81岁，平均(63±8)岁。排除伴有免疫性疾病和近期感染者。36例病人中，不稳定性心绞痛(UA)16例，急性心肌梗死(AMI)10例，陈旧性心肌梗死(OMI)10例。冠心病并发心律失常(室性期前收缩、心房纤颤)、心力衰竭者16例，合并糖尿病、高血压者15例。
1.1.2 对照组 选择同期的无心、脑、肾脏、内分泌和肝脏疾病的健康人38例，男20例，女18例；年龄46～78岁，平均(65±7)岁。
1.2 检测方法
1.2.1 标本制备 EDTA-2Na抗凝血4mL，分离血浆用于检测sC5b-9.再用生理盐水洗涤剩余红细胞3次，制备体积分数为0.05的红细胞悬液用于检测ED和红细胞膜LPO.
1.2.2 ED测定 采用DXC-300A型核孔膜红细胞变形能力测定仪，测定红细胞滤过指数(EFI)作为判断ED的指标。EFI愈小，ED愈大；EFI愈大，ED愈小。
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1.2.3 sC5b-9测定 采用ELISA法〔3〕，试剂盒由华美公司提供。
1.2.4 红细胞膜LPO测定 采用硫代巴比妥酸比色法。
1.3 统计学处理
检测结果以
±s表示，组间比较采用t检验和方差分析，相关关系采用直线相关分析。2 结 果
冠心病病人EFI，LPO，sC5b-9明显增高，与对照组比较差异有显著性(t=13.688～26.230，P<0.001)；且不同类型冠心病病人EFI，LPO，sC5b-9的比较差异亦具有显著性(F=39.86～80.13，q=11.267～25.440，P<0.001)，以急性心肌梗死病人各指标增高最明显。有并发症者和合并其他疾病者各指标增高较无并发症及单纯冠心病者更明显(t=7.746～19.519，P<0.001)。见表1.冠心病病人EFI与LPO，sC5b-9均呈正相关(r=0.662，0.715，P<0.001)。
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表1 冠心病病人EFI,LPO和sC5b-9测定结果(
±s) 组 别n
EFI
LPO
sC5b-9(ρ/μg.L-1)
对照组
38
0.23±0.03
0.59±0.007
360±42
, 百拇医药
冠心病组
36
0.42±0.08△
1.26±0.14△
524±58△
UA组
16
0.48±0.06
1.47±0.17
587±62
AMI组
10
, 百拇医药
0.52±0.07
1.52±0.20
563±49
OMI组
10
0.30±0.05
0.72±0.10
432±50
有并发症
16
0.53±0.08**
1.57±0.18**
, 百拇医药
653±66**
无并发症
20
0.36±0.05
0.76±0.14
448±49
并其他疾病
15
0.59±0.06*
1.69±0.19*
674±68*
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单纯冠心病
21
0.30±0.04
0.65±0.13
426±40
与对照组比较，△t=13.688～26.230，P<0.001；不同类型冠心病病人各指标比较，F=39.86～80.13，q=11.267～25.440，P<0.001；与单纯冠心病组比较，*t=17.407～19.519，P<0.001;与无并发症者比较，**t=7.746～15.199，P<0.001
3 讨 论
ED是红细胞的主要物理特性之一，它不仅是影响血液流动性和黏滞性的重要因素，而且也是保证微循环有效灌注的必要条件。研究表明，ED参与了冠心病的发生与发展〔4〕。但冠心病病人ED变化的机制尚不十分清楚。本文从红细胞膜LPO 和血浆补体激活产物sC5b-9浓度变化入手，探讨冠心病病人ED变化的机制。本文结果显示，冠心病病人EFI，LPO和sC5b-9较对照组明显增高，且冠心病病人EFI与LPO，sC5b-9呈正相关关系。同时，随着病情的发展，EFI，LPO，sC5b-9增高逐渐明显。有并发症者和合并其他疾病者各指标增高较无并发症和无合并其他疾病者更明显，提示冠心病病人ED降低与红细胞膜脂质过氧化损伤和血浆补体激活有密切关系，且各指标随着病情变化和是否合并其他疾病而变化。
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LPO是生物膜中的多价不饱和脂肪酸，受氧自由基的作用，启动自由基连锁反应生成的脂质过氧化物，造成生物膜结构和功能障碍，引起内皮细胞损伤，导致动脉粥样硬化。红细胞无细胞器，含有引发并启动催化脂质过氧化作用的金属络合物血红蛋白，膜上又含有丰富的多价不饱和脂肪酸。因此，红细胞易遭受自由基攻击而发生脂质过氧化反应，导致红细胞膜骨架结构破坏，使红细胞脆性增加和红细胞膜完整性改变，引起ED降低〔1，5〕，参与了冠心病的发生与发展。
补体系统激活后C5～C9形成末端补体复合物(TCC)，其结合在红细胞膜上者为攻击复合体(MAC)，存在于血浆中者为sC5b-9.研究表明，补体系统激活与心肌梗死时心肌缺血再灌注损伤有关〔6，7〕。而冠心病病人ED降低与sC5b-9浓度的关系尚未见报道。本文结果显示，冠心病病人EFI与sC5b-9呈正相关，提示ED降低与血浆补体激活有一定关系，但sC5b-9 浓度增高导致ED降低的机制尚不清楚，可能为sC5b-9增高直接作用于红细胞膜，产生攻膜作用〔8〕，破坏红细胞膜结构和功能，导致ED降低。
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综上所述，冠心病病人ED降低与LPO和sC5b-9浓度增高有密切关系，且与病变程度及合并其他疾病有关系。提示在预防和治疗冠心病过程中，除应用抗氧化剂和治疗并发症外，还应适当应用补体激活成分单克隆抗体，以减小心肌缺血和损伤面积，这为进一步预防和治疗冠心病提供了理论依据。参考文献
1 Hasegawa S， Rodgers GP, Shio H, et al. Impaired deformability of Heiz body forming red cells. Biorheology,1993,30(3～4):275
2 Uyesaka N,Hasegawa S,Ishioka N,et al.Effects of superoxide anions on red cell deformability and membrane protein. Biorheology,1992,29(2～3):217
, 百拇医药
3 Vakeva A, Morgon BP, Tikkannen I, et al. Time course of complement activation and inhibitor expression after ischemic injury of rat myocardium. Am J Pathol, 1994,144(6):1357
4 刘成玉，冯 毅，谭云鸾. 急性心肌梗塞患者红细胞变形能力与红细胞膜三磷酸腺苷酶活性关系的研究.中国循环杂志，1995,10(5)：268
5 Capari P, Bozzi A, Malorni W, et al. Junctional site of erythrocyte skeletal proteins are specific targets of tert-butylhydroperoxide oxidative demage. Chem Biol Interact, 1995,94(3): 243
, 百拇医药
6 Amsterdam EA, Stahl GL, Pan HL, et al. Limitation of reperfusion injury by a monoclonal antibody to C5a during myocardial infarction in pigs. Am J Physiol,1995,268(1 pt 2 ):H448
7 Thonsen H, Held H, Immuno-histochemical detection of C5b-9(m) in myocardium: an aid in distiguishing infarction induced ischemic heart muscle necrosis from other forms of lethal myocardial injury. Forensic Sci Int,1995,71(2):87
8 Hansch GH. The complement attack phase : control of lysis and no-lethal affacts of C5b-9. Immunopharmacol,1992,24:107
(1999-04-20收稿 1999-09-26修回), http://www.100md.com