非甲～庚型肝炎患者中TTV感染的研究
作者：宋建新 田德英 雷洪波 陈红云
单位：430030 武汉,同济医科大学附属同济医院传染科
关键词：非甲～庚型肝炎；TT病毒；肝炎,庚型
临床内科杂志/990412 【摘要】 目的 检测TTV-DNA在非甲～庚型肝炎病人中的感染状况。方法 采用巢式聚合酶反应检测38例非甲～庚型肝炎病人血清中TTV-DNA并观察与肝功能的关系。结果 38例非甲～庚型肝炎病人中16例TTV-DNA阳性,占42.1%,其中,7例急性黄疸型肝炎病人TTV-DNA阳性率为71.4%,明显高于总体水平,部分病例TTV-DNA随肝功能恢复而阴转。结论 非甲～庚型肝炎病人中存在TTV感染,而且可能与肝功能损害有关。
The Detection of TT Virus in Patients with Non A-G Hepatitis
, 百拇医药
Song Jianxin,Tian Deying,Lei Hongbo,et al.
Department of Infectious Diseases,Tongji Hospital,Tongji Medical University,Wuhan 430030
【Abstract】 Objective To detect TTV(transfusion transmitted virus)DNA in sera isolated from patients with non A-G hepatitis.Methods A nested polymerase chain reaction(PCR)assay was established to detect TTV-DNA in 38 patients with non A-G hepatitis and its association with liver function.Results TTV-DNA was positive in 16 of 38 paticnts (42.1%)with non A-G hepatitis.Among them the positive rate in 7 patients with acute hepatitis was 74.1%,significantly higher than total level.And in part of the patients,the TTV-DNA became negative following the recovery of liver function. Conclusion This study confirmed the existence of TTV infection in patients with non A-G hepatitis,and implicated that it probably correlated with the impairment of liver function.
, 百拇医药
【Key words】 Non A-G hepatitis TT virus Hepatitis G
随着肝炎研究的不断深入,目前已发现甲、乙、丙、丁、戊以及庚型等6种肝炎病毒,但仍有部分肝炎病人不能检出这6种病毒因而找不到病原体。1997年日本学者NishizAwA首次发现一种与输血后肝炎有关的病毒,命名为TTV(Transfusion Transmitted Virus)。TTV是否与非甲～庚型肝炎有关引起肝病学界广泛关注。我们检测了38例非甲～庚型肝炎患者中TTV感染状况,并对其临床表现进行观察分析。
对象与方法
一、对象:38例均为同济医院门诊及住院病人,男性22例,年龄19～56岁。女性16例,年龄17～49岁。全部病例血清甲、乙、丙、丁、戊及庚型肝炎病毒标志物,包括HBV-DNA和HCV-RNA均阴性。其中7例为急性黄疸型表现,丙氨酸转移酶(ALT)及血清总胆红素(TB)分别为532～2115 U/L和98.4～187.6 mmol/L。另31例呈慢性表现,ALT波动在100U/L左右,TB基本正常。另选16例一般人群作对照,男性10例,女性6例,年龄21～49岁。甲～庚型病毒标志物均阴性。
, 百拇医药
二、方法:血清标本的收集采用经高压灭菌处理的一次性试管,空腹抽取静脉血4 ml,离心分离血清,分装后放-70℃保存备用。主要试剂Taq DNA聚合酶、dNTPs、琼脂糖及扩增引物分别购自Promega公司和厦门大学国家肿瘤重点实验室。TTV-DNA的PCR扩增采用蛋白酶K法提取血清中TTV-DNA,经第一和第二次PCR扩增。两次反应体系分别含相应引物、dNTPs、Taq酶及缓冲液。两次循环参数为:94℃45秒,56℃40秒,72℃45秒,循环35次,最后72℃延伸5分钟。PCR产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭染色,紫外检测仪观察结果,出现199 bp DNA扩增条带者为阳性。
结果
TTV-DNA检测结果:38例非甲～庚型肝炎中,血清TTV-DNA阳性者16例,占42.1%。7例急性黄疸型病人中5例阳性,占71.4%。16例一般人群中,TTV-DNA阳性2例,占12.5%。
, 百拇医药 讨论
TTV是一种单股DNA病毒,约3.7 kb,含有ORF1和ORF2两个开放读码框,分别编码770与202个氨基酸[1]。在随后的进一步研究中发现,它不仅与输血后肝炎有关,也存在于非甲～庚型肝炎患者以及其他慢性肝炎及肝硬化患者血清中,最近国内有学者报道[2],我国的非甲～庚型肝炎患者血清中也发现有TTV-DNA,约40%左右,与日本学者报道相近。我们采用巢式PCR法检测了38例非甲～庚型肝炎病人,结果42.1%的病人阳性,与文献报道接近。也说明在这类病人中存在TTV感染。
尽管存在有TTV感染,但TTV感染是否引起肝功能损害尚难以确定。为此,我们初步观察了7例急性黄疸型肝炎患者肝功能损害与TTV感染的关系。7例病人中5例TTV-DNA阳性(71.4%),明显高于其他仅只ALT异常的非甲～庚型肝炎患者。经过1～2个月的护肝降黄治疗后,7例病人有6例ALT和TB完全恢复正常。1例TTV-DNA阳性病人病程持续4个月后恢复正常。5例TTV-DNA阳性病人ALT恢复正常后1～2个月,3例TTV-DNA阴转,2例持续阳性。提示TTV可能与这类病人的发病有关。因例数较少,目前无法获得血清学及组织学结果,有待进一步深入研究[1-3]。
, 百拇医药
16例一般人群中2例TTV-DNA阳性,说明有部分健康携带者。但也说明TTV可能不引起肝功能损害[3]。我们检测的共18例TTV-DNA阳性血清中,仅5例有输血史,说明TTV可能还存在输血以外的传播途径[4-5]。
因此,进一步深入研究TTV在各型肝炎病人中的感染状况、与肝功能损害的关系及其流行病学具有重要意义。
参考文献
1.Okamoto H,Nishizawa,T,Kato N,et al.Molecular cloning and characterization of a novel DNA virus(TTV)associated with posttransfusion hepatitis of unknown etiology.Hepatology Research,1998,10∶1.
, http://www.100md.com
2.周伯平,马为民,孙彤,等.TTV在非甲～庚型肝炎患者中的检测.克隆及测序.中华传染病杂志,1998,16∶131.
3.马为民,周伯平,王火生,等.一种新的可经输血传播病毒(TTV)的分子流行病学研究.中华肝病杂志,1998,6∶167.
4.骆抗先,章廉,王珊珊,等.一种新型肠传性病毒性肝炎的临床流行病学及病毒学的初步研究.中华肝病杂志,1998,6∶161.
5.陈红松,丛旭,王宇.经输血传播病毒(TTV)在血液透析患者中感染状况及基因分析.中华肝脏病杂志,1998,6∶164.
收稿:1998-11-02 修回:1999-01-28, 百拇医药
单位：430030 武汉,同济医科大学附属同济医院传染科
关键词：非甲～庚型肝炎；TT病毒；肝炎,庚型
临床内科杂志/990412 【摘要】 目的 检测TTV-DNA在非甲～庚型肝炎病人中的感染状况。方法 采用巢式聚合酶反应检测38例非甲～庚型肝炎病人血清中TTV-DNA并观察与肝功能的关系。结果 38例非甲～庚型肝炎病人中16例TTV-DNA阳性,占42.1%,其中,7例急性黄疸型肝炎病人TTV-DNA阳性率为71.4%,明显高于总体水平,部分病例TTV-DNA随肝功能恢复而阴转。结论 非甲～庚型肝炎病人中存在TTV感染,而且可能与肝功能损害有关。
The Detection of TT Virus in Patients with Non A-G Hepatitis
, 百拇医药
Song Jianxin,Tian Deying,Lei Hongbo,et al.
Department of Infectious Diseases,Tongji Hospital,Tongji Medical University,Wuhan 430030
【Abstract】 Objective To detect TTV(transfusion transmitted virus)DNA in sera isolated from patients with non A-G hepatitis.Methods A nested polymerase chain reaction(PCR)assay was established to detect TTV-DNA in 38 patients with non A-G hepatitis and its association with liver function.Results TTV-DNA was positive in 16 of 38 paticnts (42.1%)with non A-G hepatitis.Among them the positive rate in 7 patients with acute hepatitis was 74.1%,significantly higher than total level.And in part of the patients,the TTV-DNA became negative following the recovery of liver function. Conclusion This study confirmed the existence of TTV infection in patients with non A-G hepatitis,and implicated that it probably correlated with the impairment of liver function.
, 百拇医药
【Key words】 Non A-G hepatitis TT virus Hepatitis G
随着肝炎研究的不断深入,目前已发现甲、乙、丙、丁、戊以及庚型等6种肝炎病毒,但仍有部分肝炎病人不能检出这6种病毒因而找不到病原体。1997年日本学者NishizAwA首次发现一种与输血后肝炎有关的病毒,命名为TTV(Transfusion Transmitted Virus)。TTV是否与非甲～庚型肝炎有关引起肝病学界广泛关注。我们检测了38例非甲～庚型肝炎患者中TTV感染状况,并对其临床表现进行观察分析。
对象与方法
一、对象:38例均为同济医院门诊及住院病人,男性22例,年龄19～56岁。女性16例,年龄17～49岁。全部病例血清甲、乙、丙、丁、戊及庚型肝炎病毒标志物,包括HBV-DNA和HCV-RNA均阴性。其中7例为急性黄疸型表现,丙氨酸转移酶(ALT)及血清总胆红素(TB)分别为532～2115 U/L和98.4～187.6 mmol/L。另31例呈慢性表现,ALT波动在100U/L左右,TB基本正常。另选16例一般人群作对照,男性10例,女性6例,年龄21～49岁。甲～庚型病毒标志物均阴性。
, 百拇医药
二、方法:血清标本的收集采用经高压灭菌处理的一次性试管,空腹抽取静脉血4 ml,离心分离血清,分装后放-70℃保存备用。主要试剂Taq DNA聚合酶、dNTPs、琼脂糖及扩增引物分别购自Promega公司和厦门大学国家肿瘤重点实验室。TTV-DNA的PCR扩增采用蛋白酶K法提取血清中TTV-DNA,经第一和第二次PCR扩增。两次反应体系分别含相应引物、dNTPs、Taq酶及缓冲液。两次循环参数为:94℃45秒,56℃40秒,72℃45秒,循环35次,最后72℃延伸5分钟。PCR产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭染色,紫外检测仪观察结果,出现199 bp DNA扩增条带者为阳性。
结果
TTV-DNA检测结果:38例非甲～庚型肝炎中,血清TTV-DNA阳性者16例,占42.1%。7例急性黄疸型病人中5例阳性,占71.4%。16例一般人群中,TTV-DNA阳性2例,占12.5%。
, 百拇医药 讨论
TTV是一种单股DNA病毒,约3.7 kb,含有ORF1和ORF2两个开放读码框,分别编码770与202个氨基酸[1]。在随后的进一步研究中发现,它不仅与输血后肝炎有关,也存在于非甲～庚型肝炎患者以及其他慢性肝炎及肝硬化患者血清中,最近国内有学者报道[2],我国的非甲～庚型肝炎患者血清中也发现有TTV-DNA,约40%左右,与日本学者报道相近。我们采用巢式PCR法检测了38例非甲～庚型肝炎病人,结果42.1%的病人阳性,与文献报道接近。也说明在这类病人中存在TTV感染。
尽管存在有TTV感染,但TTV感染是否引起肝功能损害尚难以确定。为此,我们初步观察了7例急性黄疸型肝炎患者肝功能损害与TTV感染的关系。7例病人中5例TTV-DNA阳性(71.4%),明显高于其他仅只ALT异常的非甲～庚型肝炎患者。经过1～2个月的护肝降黄治疗后,7例病人有6例ALT和TB完全恢复正常。1例TTV-DNA阳性病人病程持续4个月后恢复正常。5例TTV-DNA阳性病人ALT恢复正常后1～2个月,3例TTV-DNA阴转,2例持续阳性。提示TTV可能与这类病人的发病有关。因例数较少,目前无法获得血清学及组织学结果,有待进一步深入研究[1-3]。
, 百拇医药
16例一般人群中2例TTV-DNA阳性,说明有部分健康携带者。但也说明TTV可能不引起肝功能损害[3]。我们检测的共18例TTV-DNA阳性血清中,仅5例有输血史,说明TTV可能还存在输血以外的传播途径[4-5]。
因此,进一步深入研究TTV在各型肝炎病人中的感染状况、与肝功能损害的关系及其流行病学具有重要意义。
参考文献
1.Okamoto H,Nishizawa,T,Kato N,et al.Molecular cloning and characterization of a novel DNA virus(TTV)associated with posttransfusion hepatitis of unknown etiology.Hepatology Research,1998,10∶1.
, http://www.100md.com
2.周伯平,马为民,孙彤,等.TTV在非甲～庚型肝炎患者中的检测.克隆及测序.中华传染病杂志,1998,16∶131.
3.马为民,周伯平,王火生,等.一种新的可经输血传播病毒(TTV)的分子流行病学研究.中华肝病杂志,1998,6∶167.
4.骆抗先,章廉,王珊珊,等.一种新型肠传性病毒性肝炎的临床流行病学及病毒学的初步研究.中华肝病杂志,1998,6∶161.
5.陈红松,丛旭,王宇.经输血传播病毒(TTV)在血液透析患者中感染状况及基因分析.中华肝脏病杂志,1998,6∶164.
收稿:1998-11-02 修回:1999-01-28, 百拇医药