黄杞总黄酮活血化瘀作用研究1
作者：钟正贤 周桂芬 陈学芬 袁阿兴
单位：广西壮族自治区中医药研究所 530022 南宁市东葛路20-1号
关键词：
广西中医药990435 摘要 目的：研究黄杞总黄酮(Total Flavone of Engelhardtia Roxburghiana TFER)的活血化瘀作用。方法：采用兔血浆复钙试验、大鼠体外血小板聚集和体内血栓形成方法、大鼠急性“血瘀”证血液流变学指标、高脂血症小鼠血脂含量和常压耐缺氧时间等，观察TFER的活血化瘀作用；用小鼠急性毒性试验，观察TFER的毒性情况。结果：TFER具有体外抗凝、抗血小板聚集和抗血栓形成作用；能降低血液粘度和血脂水平；延长耐缺氧时间。其急性毒性的最大耐受量为19.8g/kg.结论：TFER具有较明显的活血化瘀作用，可为临床应用提供科学依据。
关键词 黄杞总黄酮；活血化瘀；药理作用；毒性试验
, 百拇医药
Study on the Effects of Total Flavone of Engelhardtia Roxburghiana
on Promoting Blood Circulation to Remove Blood Stasis
Zhong Zhengxian, Zhou Guifen, Chen Xuefen,et al Guangxi Reseach
Institute of Traditional Medical and Pharmaceutical Sciences Nanning 530022
Abstract Purpose:To study the effects of the total flavone in Engelhardtia Roxburghiana (TFER) on promoting blood circulation to remove blood stasis.Methods: The effects of TFER on promoting blood circulation to remove blood stasis were observed through the test of calcium-restoration in rabbit plasma;platelet aggregation outside the rat body and thrombus formation inside the rat body;index of blood rheology in acute blood stasis syndrome in rat; the blood lipid content in hyperlipemia mouse and hypoxia tolerance under the ordinary pressure.Besides,the toxicity of TFER was studied through the acute toxicity test from the mouse.Results:TFER indicated the role of anti-coagulation in vitro,anti-platelet aggregation and anti-thrombus formation.Furthermore,it could lower blood viscosity and blood lipid level and prolong the duration for hyoxia tolerance.The maximum tolerance of TFER for acute toxicity was 19.8g/kg. Conclusions:The total flavone in Engelhardtia Roburghiana has significant clinical effects on promoting blood circulation to remove blood stasis.
, 百拇医药
Key Words TFER；promoting blood circulation to remove blood stasis; pharmacological action; toxicity test
黄杞叶为胡桃科植物黄杞(Engelhardtia roxburghiana wall)的干燥叶，分布于广东、广西、云南等地，资源丰富。具有清热止痛之功效，用于治疗感冒发热、疝气腹痛〔1〕。民间常作茶饮，可预防高血压，并有降血脂作用。国外报道从该植物或同属植物中分离得到落新妇甙和新黄杞甙等多种成分，具有抗癌作用〔2〕。袁阿兴等从黄杞叶中分离得到黄杞总黄酮(Total Flavone of Engelhardtia Roxburghiana TFER)，其药理作用国内尚未见报道。由于黄酮类化合物具有强心、降血压、降血脂、抗血栓等多种生理活性，因此笔者以探讨黄杞总黄酮治疗冠心病和动脉粥样硬化为目的，对其进行了活血化瘀的中药药理研究，现将研究结果报1广西壮族自治区卫生厅资助课题(9817)道如下。
, http://www.100md.com
1 实验材料
1.1 药物及试剂 黄杞总黄酮(TFER)由广西壮族自治区中医药研究所植化室提供，实验时用蒸馏水溶解稀释至所需浓度。丹参注射液(四川雅安制药厂，批号970403)，复方丹参片(广州花城制药厂，批号970512)，心得安(上海辛帕斯制药有限公司，批号971001)，安妥明(扬州制药厂，批号840327)，二磷酸腺苷(ADP)(中国科学院上海生物化学研究所，批号920823)，血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)测定试剂盒(均为温州东瓯生物工程试剂厂产品)。
1.2 动物 新西兰种大白兔，由广西草业开发中心提供。SD大鼠、NIH种小鼠，雌雄兼用，均由广西壮族自治区中医药研究所动物室提供。
1.3 仪器 BS 631型血小板聚集仪(北京生化仪器厂)，MDK-3200型双通道全自动血流变测试分析仪(重庆市麦迪克科技开发有限公司)。
, 百拇医药
2 方法与结果
2.1 对兔血浆复钙时间的影响〔3〕 取2.3kg大白兔1只，从兔耳中央动脉取血，以3.8%枸橼酸钠抗凝，离心取上层血浆备用。试验时取0.1ml血浆放入小试管内，空白对照组加入0.1ml生理盐水，阳性对照丹参注射液组，TFER大、小剂量组分别加入0.1ml不同浓度的药液，每组共做10管。置37℃水浴温育1min，再加入0.1ml 0.025mol/L氯化钙，立即开动秒表记时，再隔10s缓缓侧动试管1次，观察血浆凝固情况，记录自加入Ca2+至纤维蛋白凝块形成所需时间即为复钙时间，结果见表1.空白对照组与药物组比较，TFER大、小剂量组和丹参注射液组均能明显延长兔血浆复钙时间，表明TFER具有体外抗凝作用。
2.2 对大鼠血小板聚集的影响〔4〕 取200～250g禁食大鼠，用戊巴比妥钠(35mg/kg)麻醉后从腹主动脉取血(3.8%枸橼酸钠抗凝)。按常规方法制备富血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP)，以PPP于血小板聚集仪上调100%幅度，以PRP调0%.准确吸取300μlPRP，对照组样品管加20μl 0.2mol/L磷酸缓冲液，药物组样品管加20μl不同浓度的TFER或丹参注射液。37℃预温3min后，以ADP为诱导剂(剂量2μmol/L)，描记血小板聚集曲线，测量曲线下降毫米数，比较药物组和空白对照组血小板聚集抑制百分率，结果见表2.与空白对照组比较，TFER大、小剂量组和丹参注射液组对ADP诱导的大鼠血小板聚集均有明显的抑制作用。
, 百拇医药
表1 TFER对兔血浆复钙时间的影响 组 别
样本数
(管)
浓度
(mg.ml-1)
血浆复钙时间
(min，
±s)
空白对照组
10
0.66±0.04
丹参注射液组
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10
3.60
0.98±0.07③
TFER小剂量组
10
2.08
0.94±0.07③
TFER大剂量组
10
4.16
1.30±0.11③
注：与空白对照组比较：①P>0.05；②P<0.05；③P<0.01.下同表2 TFER对大鼠血小板聚集的影响(n=10) 组 别
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浓度
(mg.ml-1)
血小板聚集曲线
幅度(mm，±s)
抑制百分率
(%)
空白对照组
110.5±32.8
丹参注射液组
3.0
34.5±16.6③
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68.7
TFER小剂量组
3.0
47.0±15.1③
57.5
TFER大剂量组
6.0
32.2±12.3③
70.8
2.3 对大鼠血栓形成的影响 取200～250g大鼠32只，分为4组，每组8只。TFER大、小剂量(0.5g/kg和0.25g/kg)组和复方丹参片(0.66g/kg)组分别i.g给药，空白对照组给予等体积蒸馏水，每天1次，连续10天。末次给药后，用戊巴比妥钠(35mg/kg)麻醉，按体内血栓形成方法〔5〕进行。切开颈部皮肤，分离颈外静脉和颈总动脉，用肝素生理盐水充满聚乙烯套管，自颈总动脉至颈外静脉联接形成体外旁路循环，开放血流15min后中断血流，迅速取出丝线，置滤纸上吸去水份，称重，将总重量减去丝线重量即得血栓湿重，结果见表3.与空白对照组比较，TFER大、小剂量组及复方丹参片组均能明显减轻大鼠血栓湿重，提示TFER具有抗大鼠血栓形成作用。表3 TFER对大鼠血栓形成的影响(n=10) 组 别
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剂量
(g.kg-1)
血栓湿重
(mg，±s )
抑制率
(%)
空白对照组
24.3±2.9
复方丹参片组
0.66
19.5±1.7③
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19.8
TFER小剂量组
0.25
21.6±1.8②
11.1
TFER大剂量组
0.50
20.1±1.7③
17.3
2.4 对急性“血瘀”证大鼠血液流变学的影响〔3〕 取200～250g大鼠40只，分为5组。TFER大、小剂量(0.5g/kg和0.25g/kg)组和复方丹参片(0.66g/kg)组i.g给药，空白对照组和模型组给予等体积水，每天1次，连续14天。于第14天除空白对照组外，其余各组动物均皮下注射0.1%肾上腺素0.08ml/100g体重，共2次，每次间隔4h.在第1次注射后2h将大鼠置冰水中浸泡5min，然后禁食，次日从腹主动脉取血，肝素抗凝，于全自动血流变测试分析仪上测定大鼠全血粘度，血浆粘度，红细胞压积和红细胞电泳时间，结果见表4.TFER大剂量组和复方丹参片组能降低急性“血瘀”证大鼠的全血和血浆粘度以及红细胞压积，缩短红细胞电泳时间，具有一定的活血化瘀作用；但TFER小剂量组作用不够明显，各项指标仅比模型组略有降低。表4 TFER对“血瘀”证大鼠血液流变学的影响(n=8，±s) 组 别
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剂量g.kg-1
全血粘度
血浆粘度
红细胞电
泳时间(s)
红细胞压积
高切
低切
空白对照组
6.20±0.63
18.54±2.23
1.71±0.21
, 百拇医药
23.26±2.36
0.48±0.04
模型组
8.36±0.92③
21.59±1.94③
1.90±0.13②
31.36±3.46③
0.52±0.02②
复方丹参片组
0.66
6.97±0.81⑥
, 百拇医药
19.64±0.81⑤
1.76±0.06⑤
26.57±2.54⑥
0.48±0.03⑥
ERTF小剂量组
0.25
7.59±0.91④
21.17±1.28
1.95±0.18
28.49±3.41④
, 百拇医药
0.52±0.02
ERTF大剂量组
0.50
7.31±0.93⑤
19.81±1.86④
1.78±0.07⑤
27.41±3.52⑤
0.49±0.02⑥
注：与模型组比较④P>0.05；⑤P<0.05；⑥P<0.01.下同
2.5 对高脂血症小鼠血脂水平的影响 按单爱莲等〔6〕介绍的方法，预先制备高脂乳剂：10%胆固醇，2%去氧胆酸钠，1%甲基硫氧嘧啶，20%猪油，吐温-80和丙二醇各20ml助溶，加水至100ml装瓶备用。
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取小鼠50只，分为5组。TFER大、小剂量(0.5g/kg和0.25g/kg)和阳性对照药安妥明(0.07g/kg)组i.g给药，空白对照组和模型组给予等体积蒸馏水，每天1次，连续用药14天。每天上午给药后，下午除空白对照组外，其余各组小鼠均给予高脂乳剂0.5毫升/只，造成实验性高脂血症。于第14天用药后禁食过夜，次日晨对小鼠摘眼球取血，按酶法检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量，结果见表5.TFER可使高脂血症小鼠TC和TG含量明显降低，特别是TFER大剂量组与阳性药安妥明作用强度相近，但对HDL-C含量无明显影响。提示TFER具有一定的降血脂作用。
2.6 对小鼠常压耐缺氧的影响〔4〕 取小鼠40只，分为4组。TFER大、小剂量(0.5g/kg和0.25g/kg)组和阳性药心得安(0.02g/kg)组i.g给药，空白对照组给予等体积蒸馏水，每天1次，连续用药7天。末次给药30min后，将小鼠放入装有5g钠石灰的125ml广口瓶内，每瓶1只，加盖密封，观察并记录小鼠呼吸停止作为缺氧死亡时间，结果见表6.与对照组比较，TFER大、小剂量组和心得安组均能明显延长小鼠常压耐缺氧时间。提示TFER有提高小鼠因缺氧引起心肌缺血的代偿能力。表5 TFER对高脂血症小鼠血脂水平的影响(±s) 组 别
, 百拇医药
剂量
(g*kg-1)
动物数
(只)
TC
(mmol*L-1)
TG
(mmol*L-1)
HDL-C
(mmol*L-1)
空白对照组
, 百拇医药 10
2.62±0.81
1.25±0.59
2.06±0.36
模型组
10
8.95±2.19③
1.69±0.24②
1.72±0.86
安妥明组
0.07
10
, 百拇医药
6.33±2.43⑤
0.79±0.56⑥
2.28±0.76④
TFER小剂量组
0.25
10
6.97±1.49⑤
1.49±0.52④
1.68±0.86
TFER大剂量组
0.50
, 百拇医药
10
6.09±2.36⑤
0.94±0.49⑥
1.72±0.96
表6 ERTF对小鼠常压耐缺氧的影响 组 别
剂量
(g*kg-1)
动物数
(只)
耐缺氧时间
(min,±s)
, 百拇医药
延长百分率
(%)
空白对照组
10
16.7±2.7
心得安组
0.02
10
26.3±4.2③
57.5
TFER小剂量组
0.25
, 百拇医药 10
21.1±3.8⑤
26.3
TFER大剂量组
0.50
10
21.2±2.6③
26.9
2.7 急性毒性试验 用TFER给小鼠预试后，选18～22g小鼠20只，雌雄各半，以最大浓度(0.33g/ml)和最大体积(0.3ml/10g体重)i.g给药，24h内给药2次，观察7天，未见任何毒性反应和动物死亡，表明TFER毒性很小，计算其最大耐受量为19.8g/kg.
, 百拇医药
3 讨 论
冠心病和动脉粥样硬化均为常见病和多发病。脂质代谢紊乱所致的高脂血症，血粘度增高、血小板功能异常等引起的血液理化特性异常与其发生有密切关系。活血化瘀药对治疗冠心病、血栓形成和动脉硬化等有较好的疗效。因此，本文对TFER设计了活血化瘀方面的药理研究，试图寻找能防治动脉硬化、冠心病及脑血栓等的治疗药物。本实验结果表明，TFER具有体外抗凝作用，抑制血小板聚集和血栓形成，可改善急性“血瘀”证大鼠血液流变学指标，降低高脂血症小鼠的血脂水平及延长常压耐缺氧时小鼠生存时间，从而证实其具有较好的活血化瘀作用，是一个值得开发利用的植物药。
参考文献
1 广西中医药研究所.广西药用植物名录.南宁：广西人民出版社，1986.326.
2 Kozuka,Mutsuo,Tokuda,et al.C*A*，Astibinn as inhibition for promotion of cancer.1995.122：17182W.
3 陈 奇.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993.485～486，614.
4 李仪奎.中药药理实验方法学.上海：上海科学技术出版社，1991.83～84，110.
5 陈 奇.中药药理实验.贵阳：贵州人民出版社，1988.149～150.
6 单爱莲，谢明智.介绍一种小鼠高血脂模型.药学通报，1986，21(3)∶141.
1998-11-27收稿, 百拇医药
单位：广西壮族自治区中医药研究所 530022 南宁市东葛路20-1号
关键词：
广西中医药990435 摘要 目的：研究黄杞总黄酮(Total Flavone of Engelhardtia Roxburghiana TFER)的活血化瘀作用。方法：采用兔血浆复钙试验、大鼠体外血小板聚集和体内血栓形成方法、大鼠急性“血瘀”证血液流变学指标、高脂血症小鼠血脂含量和常压耐缺氧时间等，观察TFER的活血化瘀作用；用小鼠急性毒性试验，观察TFER的毒性情况。结果：TFER具有体外抗凝、抗血小板聚集和抗血栓形成作用；能降低血液粘度和血脂水平；延长耐缺氧时间。其急性毒性的最大耐受量为19.8g/kg.结论：TFER具有较明显的活血化瘀作用，可为临床应用提供科学依据。
关键词 黄杞总黄酮；活血化瘀；药理作用；毒性试验
, 百拇医药
Study on the Effects of Total Flavone of Engelhardtia Roxburghiana
on Promoting Blood Circulation to Remove Blood Stasis
Zhong Zhengxian, Zhou Guifen, Chen Xuefen,et al Guangxi Reseach
Institute of Traditional Medical and Pharmaceutical Sciences Nanning 530022
Abstract Purpose:To study the effects of the total flavone in Engelhardtia Roxburghiana (TFER) on promoting blood circulation to remove blood stasis.Methods: The effects of TFER on promoting blood circulation to remove blood stasis were observed through the test of calcium-restoration in rabbit plasma;platelet aggregation outside the rat body and thrombus formation inside the rat body;index of blood rheology in acute blood stasis syndrome in rat; the blood lipid content in hyperlipemia mouse and hypoxia tolerance under the ordinary pressure.Besides,the toxicity of TFER was studied through the acute toxicity test from the mouse.Results:TFER indicated the role of anti-coagulation in vitro,anti-platelet aggregation and anti-thrombus formation.Furthermore,it could lower blood viscosity and blood lipid level and prolong the duration for hyoxia tolerance.The maximum tolerance of TFER for acute toxicity was 19.8g/kg. Conclusions:The total flavone in Engelhardtia Roburghiana has significant clinical effects on promoting blood circulation to remove blood stasis.
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Key Words TFER；promoting blood circulation to remove blood stasis; pharmacological action; toxicity test
黄杞叶为胡桃科植物黄杞(Engelhardtia roxburghiana wall)的干燥叶，分布于广东、广西、云南等地，资源丰富。具有清热止痛之功效，用于治疗感冒发热、疝气腹痛〔1〕。民间常作茶饮，可预防高血压，并有降血脂作用。国外报道从该植物或同属植物中分离得到落新妇甙和新黄杞甙等多种成分，具有抗癌作用〔2〕。袁阿兴等从黄杞叶中分离得到黄杞总黄酮(Total Flavone of Engelhardtia Roxburghiana TFER)，其药理作用国内尚未见报道。由于黄酮类化合物具有强心、降血压、降血脂、抗血栓等多种生理活性，因此笔者以探讨黄杞总黄酮治疗冠心病和动脉粥样硬化为目的，对其进行了活血化瘀的中药药理研究，现将研究结果报1广西壮族自治区卫生厅资助课题(9817)道如下。
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1 实验材料
1.1 药物及试剂 黄杞总黄酮(TFER)由广西壮族自治区中医药研究所植化室提供，实验时用蒸馏水溶解稀释至所需浓度。丹参注射液(四川雅安制药厂，批号970403)，复方丹参片(广州花城制药厂，批号970512)，心得安(上海辛帕斯制药有限公司，批号971001)，安妥明(扬州制药厂，批号840327)，二磷酸腺苷(ADP)(中国科学院上海生物化学研究所，批号920823)，血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)测定试剂盒(均为温州东瓯生物工程试剂厂产品)。
1.2 动物 新西兰种大白兔，由广西草业开发中心提供。SD大鼠、NIH种小鼠，雌雄兼用，均由广西壮族自治区中医药研究所动物室提供。
1.3 仪器 BS 631型血小板聚集仪(北京生化仪器厂)，MDK-3200型双通道全自动血流变测试分析仪(重庆市麦迪克科技开发有限公司)。
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2 方法与结果
2.1 对兔血浆复钙时间的影响〔3〕 取2.3kg大白兔1只，从兔耳中央动脉取血，以3.8%枸橼酸钠抗凝，离心取上层血浆备用。试验时取0.1ml血浆放入小试管内，空白对照组加入0.1ml生理盐水，阳性对照丹参注射液组，TFER大、小剂量组分别加入0.1ml不同浓度的药液，每组共做10管。置37℃水浴温育1min，再加入0.1ml 0.025mol/L氯化钙，立即开动秒表记时，再隔10s缓缓侧动试管1次，观察血浆凝固情况，记录自加入Ca2+至纤维蛋白凝块形成所需时间即为复钙时间，结果见表1.空白对照组与药物组比较，TFER大、小剂量组和丹参注射液组均能明显延长兔血浆复钙时间，表明TFER具有体外抗凝作用。
2.2 对大鼠血小板聚集的影响〔4〕 取200～250g禁食大鼠，用戊巴比妥钠(35mg/kg)麻醉后从腹主动脉取血(3.8%枸橼酸钠抗凝)。按常规方法制备富血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP)，以PPP于血小板聚集仪上调100%幅度，以PRP调0%.准确吸取300μlPRP，对照组样品管加20μl 0.2mol/L磷酸缓冲液，药物组样品管加20μl不同浓度的TFER或丹参注射液。37℃预温3min后，以ADP为诱导剂(剂量2μmol/L)，描记血小板聚集曲线，测量曲线下降毫米数，比较药物组和空白对照组血小板聚集抑制百分率，结果见表2.与空白对照组比较，TFER大、小剂量组和丹参注射液组对ADP诱导的大鼠血小板聚集均有明显的抑制作用。
, 百拇医药
表1 TFER对兔血浆复钙时间的影响 组 别
样本数
(管)
浓度
(mg.ml-1)
血浆复钙时间
(min，
±s)空白对照组
10
0.66±0.04
丹参注射液组
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10
3.60
0.98±0.07③
TFER小剂量组
10
2.08
0.94±0.07③
TFER大剂量组
10
4.16
1.30±0.11③
注：与空白对照组比较：①P>0.05；②P<0.05；③P<0.01.下同表2 TFER对大鼠血小板聚集的影响(n=10) 组 别
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浓度
(mg.ml-1)
血小板聚集曲线
幅度(mm，
±s)抑制百分率
(%)
空白对照组
110.5±32.8
丹参注射液组
3.0
34.5±16.6③
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TFER小剂量组
3.0
47.0±15.1③
57.5
TFER大剂量组
6.0
32.2±12.3③
70.8
2.3 对大鼠血栓形成的影响 取200～250g大鼠32只，分为4组，每组8只。TFER大、小剂量(0.5g/kg和0.25g/kg)组和复方丹参片(0.66g/kg)组分别i.g给药，空白对照组给予等体积蒸馏水，每天1次，连续10天。末次给药后，用戊巴比妥钠(35mg/kg)麻醉，按体内血栓形成方法〔5〕进行。切开颈部皮肤，分离颈外静脉和颈总动脉，用肝素生理盐水充满聚乙烯套管，自颈总动脉至颈外静脉联接形成体外旁路循环，开放血流15min后中断血流，迅速取出丝线，置滤纸上吸去水份，称重，将总重量减去丝线重量即得血栓湿重，结果见表3.与空白对照组比较，TFER大、小剂量组及复方丹参片组均能明显减轻大鼠血栓湿重，提示TFER具有抗大鼠血栓形成作用。表3 TFER对大鼠血栓形成的影响(n=10) 组 别
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剂量
(g.kg-1)
血栓湿重
(mg，
±s )抑制率
(%)
空白对照组
24.3±2.9
复方丹参片组
0.66
19.5±1.7③
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19.8
TFER小剂量组
0.25
21.6±1.8②
11.1
TFER大剂量组
0.50
20.1±1.7③
17.3
2.4 对急性“血瘀”证大鼠血液流变学的影响〔3〕 取200～250g大鼠40只，分为5组。TFER大、小剂量(0.5g/kg和0.25g/kg)组和复方丹参片(0.66g/kg)组i.g给药，空白对照组和模型组给予等体积水，每天1次，连续14天。于第14天除空白对照组外，其余各组动物均皮下注射0.1%肾上腺素0.08ml/100g体重，共2次，每次间隔4h.在第1次注射后2h将大鼠置冰水中浸泡5min，然后禁食，次日从腹主动脉取血，肝素抗凝，于全自动血流变测试分析仪上测定大鼠全血粘度，血浆粘度，红细胞压积和红细胞电泳时间，结果见表4.TFER大剂量组和复方丹参片组能降低急性“血瘀”证大鼠的全血和血浆粘度以及红细胞压积，缩短红细胞电泳时间，具有一定的活血化瘀作用；但TFER小剂量组作用不够明显，各项指标仅比模型组略有降低。表4 TFER对“血瘀”证大鼠血液流变学的影响(n=8，
±s) 组 别, http://www.100md.com
剂量g.kg-1
全血粘度
血浆粘度
红细胞电
泳时间(s)
红细胞压积
高切
低切
空白对照组
6.20±0.63
18.54±2.23
1.71±0.21
, 百拇医药
23.26±2.36
0.48±0.04
模型组
8.36±0.92③
21.59±1.94③
1.90±0.13②
31.36±3.46③
0.52±0.02②
复方丹参片组
0.66
6.97±0.81⑥
, 百拇医药
19.64±0.81⑤
1.76±0.06⑤
26.57±2.54⑥
0.48±0.03⑥
ERTF小剂量组
0.25
7.59±0.91④
21.17±1.28
1.95±0.18
28.49±3.41④
, 百拇医药
0.52±0.02
ERTF大剂量组
0.50
7.31±0.93⑤
19.81±1.86④
1.78±0.07⑤
27.41±3.52⑤
0.49±0.02⑥
注：与模型组比较④P>0.05；⑤P<0.05；⑥P<0.01.下同
2.5 对高脂血症小鼠血脂水平的影响 按单爱莲等〔6〕介绍的方法，预先制备高脂乳剂：10%胆固醇，2%去氧胆酸钠，1%甲基硫氧嘧啶，20%猪油，吐温-80和丙二醇各20ml助溶，加水至100ml装瓶备用。
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取小鼠50只，分为5组。TFER大、小剂量(0.5g/kg和0.25g/kg)和阳性对照药安妥明(0.07g/kg)组i.g给药，空白对照组和模型组给予等体积蒸馏水，每天1次，连续用药14天。每天上午给药后，下午除空白对照组外，其余各组小鼠均给予高脂乳剂0.5毫升/只，造成实验性高脂血症。于第14天用药后禁食过夜，次日晨对小鼠摘眼球取血，按酶法检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量，结果见表5.TFER可使高脂血症小鼠TC和TG含量明显降低，特别是TFER大剂量组与阳性药安妥明作用强度相近，但对HDL-C含量无明显影响。提示TFER具有一定的降血脂作用。
2.6 对小鼠常压耐缺氧的影响〔4〕 取小鼠40只，分为4组。TFER大、小剂量(0.5g/kg和0.25g/kg)组和阳性药心得安(0.02g/kg)组i.g给药，空白对照组给予等体积蒸馏水，每天1次，连续用药7天。末次给药30min后，将小鼠放入装有5g钠石灰的125ml广口瓶内，每瓶1只，加盖密封，观察并记录小鼠呼吸停止作为缺氧死亡时间，结果见表6.与对照组比较，TFER大、小剂量组和心得安组均能明显延长小鼠常压耐缺氧时间。提示TFER有提高小鼠因缺氧引起心肌缺血的代偿能力。表5 TFER对高脂血症小鼠血脂水平的影响(
±s) 组 别, 百拇医药
剂量
(g*kg-1)
动物数
(只)
TC
(mmol*L-1)
TG
(mmol*L-1)
HDL-C
(mmol*L-1)
空白对照组
, 百拇医药 10
2.62±0.81
1.25±0.59
2.06±0.36
模型组
10
8.95±2.19③
1.69±0.24②
1.72±0.86
安妥明组
0.07
10
, 百拇医药
6.33±2.43⑤
0.79±0.56⑥
2.28±0.76④
TFER小剂量组
0.25
10
6.97±1.49⑤
1.49±0.52④
1.68±0.86
TFER大剂量组
0.50
, 百拇医药
10
6.09±2.36⑤
0.94±0.49⑥
1.72±0.96
表6 ERTF对小鼠常压耐缺氧的影响 组 别
剂量
(g*kg-1)
动物数
(只)
耐缺氧时间
(min,
±s), 百拇医药
延长百分率
(%)
空白对照组
10
16.7±2.7
心得安组
0.02
10
26.3±4.2③
57.5
TFER小剂量组
0.25
, 百拇医药 10
21.1±3.8⑤
26.3
TFER大剂量组
0.50
10
21.2±2.6③
26.9
2.7 急性毒性试验 用TFER给小鼠预试后，选18～22g小鼠20只，雌雄各半，以最大浓度(0.33g/ml)和最大体积(0.3ml/10g体重)i.g给药，24h内给药2次，观察7天，未见任何毒性反应和动物死亡，表明TFER毒性很小，计算其最大耐受量为19.8g/kg.
, 百拇医药
3 讨 论
冠心病和动脉粥样硬化均为常见病和多发病。脂质代谢紊乱所致的高脂血症，血粘度增高、血小板功能异常等引起的血液理化特性异常与其发生有密切关系。活血化瘀药对治疗冠心病、血栓形成和动脉硬化等有较好的疗效。因此，本文对TFER设计了活血化瘀方面的药理研究，试图寻找能防治动脉硬化、冠心病及脑血栓等的治疗药物。本实验结果表明，TFER具有体外抗凝作用，抑制血小板聚集和血栓形成，可改善急性“血瘀”证大鼠血液流变学指标，降低高脂血症小鼠的血脂水平及延长常压耐缺氧时小鼠生存时间，从而证实其具有较好的活血化瘀作用，是一个值得开发利用的植物药。
参考文献
1 广西中医药研究所.广西药用植物名录.南宁：广西人民出版社，1986.326.
2 Kozuka,Mutsuo,Tokuda,et al.C*A*，Astibinn as inhibition for promotion of cancer.1995.122：17182W.
3 陈 奇.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993.485～486，614.
4 李仪奎.中药药理实验方法学.上海：上海科学技术出版社，1991.83～84，110.
5 陈 奇.中药药理实验.贵阳：贵州人民出版社，1988.149～150.
6 单爱莲，谢明智.介绍一种小鼠高血脂模型.药学通报，1986，21(3)∶141.
1998-11-27收稿, 百拇医药