慢性肾功能不全病人红细胞内游离原卟啉测定
作者：夏鹄 邓小兵 谢兰 敬华 边立华 王文广
单位：
夏鹄 邓小兵 谢兰 敬华 北京 解放军第三零陆医院 邮政编码：北京，100101；边立华 王文广 中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所(100050)
关键词：肾功能不全，慢性；贫血；红细胞内游离原卟啉；铁蛋白
临床血液学杂志990404 摘要 目的：了解肾性贫血病人骨髓细胞内可染铁明显增加的原因。方法：采用免疫荧光分光光度法测定40例慢性肾功能不全病人红细胞内游离原卟啉(FEP)，并以31例正常人作为对照。结果：显示慢性肾功能不全组FEP/Hb及FEP/RBC水平(2.85±1.29 μg/Hb.g；82.45±34.65 μg/RBC.dl)，显著高于正常对照组(1.76±0.71 μg/Hb.g；51.16±20.25 μg/RBC.dl)P<0.001。而全血FEP值两组之间差异无显著性(慢性肾功能不全组：21.04±10.80 μg/dl全血；正常组：24.78±9.83 μg/dl全血，P>0.05)。同时，慢性肾功能不全组血清铁蛋白水平(238.56±169.59 μg/L)显著高于正常对照组(112.51±71.54μg/L ，P=0.0002)。而且反复接受输血组与未曾输血组之间差异无显著性。结论：肾性贫血具有FEP增高及铁负荷增加等特点。
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FEP in Patients with Chronic Renal Dysfunction
Xia Hu,Deng Xiaobing,Xie lan,et al
306 Hospital PLA,100101
Abstract Objectiue:To study on the anaemia due to chronic renal dysfunction,free erythrocyte protoporphyrin(FEP).Method:Fluorospectophyotometry was used in 40 patents with chronic renal dysfunction (group 1) and in 31 normal persons (group 2).Result:The levels of FEP/Hb and FEP/RBC in group 1(2.85±1.29 μg/Hb.g;82.45±34.65 μg/RBC.dl) were significantly higher (P<0.001) than that in group 2(1.76±0.71 μg/Hb.g;51.16±20.25 μg/RBC.dl),and were also higher than the previously published normal value derived from a large population (2.3 μg/Hb.g;75 μg/RBC.dl).However,no intergroup difference of FEP in whole blood could be found (group 1:21.04±10.80 μg/dl whole blood;group 2:24.78±9.83 μg/dl whole blood;P>0.05).Meanwhile,the level of serum ferritin in group 1 (238.56±169.59 μg/L) was also significantly higher (P=0.0002)than that in group 2(112.51±71.54μg/L)，and there was no significantly difference (P>0.05) between repeatedly received blood transfusion (297.68±196.11 μg/L) and never received blood transfusion (194.86±135.33 μg/L).Conclusion:The anaemia due to chronic renal dysfunction is characterized of high level of FEP and overload iron.
, 百拇医药
Key words FEP Anaemia Chronic renal dysfunction Serum ferritin
我们在临床工作中观察到肾性贫血病人的骨髓中细胞内可染铁明显增加而红细胞系统有明显血红蛋白合成不足的表现。为了了解这种情况发生的原因及从一个侧面了解发生肾性贫血时的铁负荷情况，我们对慢性肾功能不全病人进行了红细胞内游离原卟啉(Free Erythrocyte Protoporphyrin,FEP)的测定。
1 材料和方法
1.1 病例选择 符合慢性肾功能不全诊断标准〔1〕的病人40例，男25人，女15人。年龄22～70岁，平均42.4岁。血液透析治疗(每周11 h，>1年)病人28人，未接受血液透析治疗的病人12人。反复接受输血(输血总量>2 000 ml)者17人，未曾接受过输血者23人。EPO治疗中(2 000 U，每周2次，>2周)者12人，未用EPO治疗者28人。正常对照组：经健康检查排除肝、肾、心、血管疾病及急、慢性炎症的本院工作人员31人，男17人，女14人。年龄22～59岁，平均38.3岁。病人及对照组均经静脉采血，查Hb，RBC，HCT，计算MCV，MCH，MCHC。测定血清铁蛋白(125Ⅰ-铁蛋白试剂盒为中国原子能科学院同位素研究所产品)。接受血液透析的病人均于透析当日透析前采血。
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1.2 FEP测定 采用荧光分光光度法。8401-Ⅱ型特定滤纸为天津造纸厂产品。F-8000荧光分光光度计为日本日立公司产品。标准为美国Sigma公司产品。质控采用国际标准质控(GBW 09136)。
1.3 统计学处理 采用NESS统计软件进行。
2 结果
①慢性肾功能不全组Hb、RBC、HCT均明显低于正常对照组，差异有显著性。但MCV、MCH、MCHC与正常对照组比较无差异(见表1)。②慢性肾功能不全组全血FEP值与正常对照组比较无差异，但FEP/Hb及FEP/RBC值均明显高于正常对照组，差异有非常显著性。应用EPO治疗组FEP/Hb及FEP/RBC平均值虽然明显低于未用EPO组，但经统计学处理差异无显著性(见表2)。③慢性肾功能不全组血清铁蛋白显著高于正常对照组，并且反复输血组与未输血组比较差异无显著性。但应用EPO治疗组血清铁蛋白水平低于未用EPO组，差异有显著性(见表2)。④透析组与未透析组比较，各项指标差异均无显著性(详见表1，2)。
, 百拇医药
表1 各组之间Age、Hb、RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC的比较
±s
Age
Hb
(g/L)
RBC
(×1012/L)
HCT
MCV
(fl)
MCH
(pg)
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MCHC
(g/L)
正常对照组(31例)
38.29±7.94
142.26±16.30
4.85±0.44
0.47±0.05
96.90±5.42
29.41±1.62
30.41±1.62
慢性肾衰组(40例)
42.38±13.42
, http://www.100md.com
75.30±19.64*
2.57±0.62**
0.24±0.06**
95.58±8.75
29.22±1.69
30.59±2.45
应用EPO组(12例)
46.67±16.33
73.70±16.70
2.54±0.43
0.24±0.06
, http://www.100md.com
94.42±9.30
28.78±2.15
30.59±1.52
未用EPO组(28例)
41.07±11.69
75.58±21.40
2.58±0.70
0.25±0.07
96.04±8.79
29.34±1.45
30.62±2.83
, http://www.100md.com
输血组(17例)
39.88±12.26
72.30±18.10
2.40±0.61
0.23±0.06
96.82±9.14
29.36±1.87
30.42±2.45
未输血组(23例)
44.22±14.19
79.10±20.30
, 百拇医药
2.70±0.61
0.26±0.07
94.65±8.54
29.12±1.59
30.70±2.50
透析组(28例)
40.80±13.70
71.40±16.90
2.42±0.11
0.23±0.06
96.40±8.40
, http://www.100md.com 29.43±1.74
30.50±2.03
未透析组(23例)
46.10±12.40
84.50±23.20
2.92±0.69
0.27±0.07
93.50±9.50
28.75±1.55
30.80±3.32
*P<0.05，**P<0.0013 讨论
, http://www.100md.com
卟啉是血红蛋白合成过程中的一个关键性物质。当铁缺乏和血红素合成酶活性降低时，可出现红细胞内游离原卟啉增高〔2〕。红细胞内游离原卟啉正常上限的确定各家报道略有差异〔3〕。由于红细胞内游离原卟啉有发育期变化〔4〕，而国内所调查的人群多为小儿、青少年，故该差异可能与不同年龄组机体造血活跃程度不同有关。根据美国2.2万人调查，Dallman〔4〕提出可用2.3 μg/Hb.g或75 μg/RBC.dl(全血)作为既代表成人也代表儿童的FEP的正常95%上限值。我们测定的慢性肾功能不全病人全血FEP值与年龄相同的正常对照组比较虽差异无显著性，但FEP/Hb及FEP/RBC值较对照组明显增高，差异非常显著，并超过了Dallman〔4〕报道的正常上限。在有贫血存在的情况下，FEP/Hb及FEP/RBC值较全血FEP值更能准确的反映红细胞内游离原卟啉的含量，故我们认为慢性肾功能不全病人红细胞内游离原卟啉是增高的。红细胞内游离原卟啉增高仅见于铁缺乏和血红素合成酶活性下降者。我们观察到肾性贫血病人骨髓中细胞内铁沉积明显。并且本组慢性肾功能不全病人血清铁蛋白均明显增高，故我们认为慢性肾功能不全病人FEP增高与铁缺乏无关，而可能是血红素合成酶活性下降的结果。文献报道EPO可提高血红素合成酶的活性〔5〕。我们12例应用EPO治疗中的病人FEP平均值虽低于未用EPO组，但经统计学处理两组差异无显著性。这可能与EPO用量小、时间短，尚未达到治疗剂量(全部12例病人均有贫血，贫血程度与未用EPO组无差异)及病例数太少等因素有关。铁蛋白是机体储存铁的主要形式之一。一般认为血清铁蛋白测定是了解机体铁储存状态的好方法之一〔6〕。我们的研究显示慢性肾功能不全病人血清铁蛋白显著增高，与正常人比较差异非常显著(P<0.001)。反复输血组与未输血组比较，血清铁蛋白水平无差异，说明慢性肾功能不全病人血清铁蛋白增高与反复输血导致的铁负荷增加无关，而是疾病本身的一种表现。EPO治疗组血清铁蛋白与未用EPO组比较差异显著(P<0.05)，提示EPO有促进铁代谢的作用。此外，血红蛋白合成减少，铁利用下降致铁蓄积，以及肌酐、尿素氮等代谢毒物对铁代谢的影响也是引起铁蛋白增加的原因之一。由此，我们认为肾性贫血是正细胞、正色素性贫血，并具有血清铁蛋白增高及红细胞内游离原卟啉增高等特征，间接反映血红素合成酶活性降低。并提示肾性贫血病人在未用EPO治疗前不宜补充铁剂。
, 百拇医药
表2 各组之间SF，FEP，FEP/Hb，FEP/RBC的比较±s
SF(μg/L)
FEP
(μg/dl)
FEP/Hb
(μg/Hb.g)
FEP/RBC
(μg/RBC.dl)
total
male
, 百拇医药 female
正常对照组(31例)
112.51±71.54
154.28±66.37
61.79±36.55
24.78±9.83
1.76±0.71
51.16±20.25
慢性肾衰组(40例)
238.56±169.59△
285.55±184.94△
, 百拇医药
160.24±104.72△
21.04±10.80
2.85±1.29△
82.46±34.65△
应用EPO组(12例)
163.98±157.61
17.73±8.83
2.50±1.38
70.10±33.30
未用EPO组(28例)
, 百拇医药
279.33±163.42*
22.81±11.45
3.06±1.23
89.17±34.00
输血组(17例)
297.68±196.11
20.19±8.87
2.93±1.11
85.30±30.00
未输血组(23例)
194.86±135.33
, 百拇医药
21.67±12.19
2.80±1.43
80.36±38.23
透析组(28例)
237.20±190.22
18.50±1.55
2.66±1.14
77.60±30.80
未透析组(12例)
241.73±114.60
26.95±13.91
, http://www.100md.com
3.30±1.54
93.77±41.60
*P<0.05，△P<0.001 (本文得到301医院汪月增主任医师指导，武警总院、304医院提供部分病例，特此致谢)
参考文献
1 戴自英主编.实用内科学.第9版.北京：人民卫生出版社，1993.1521～1521
2 张之南，殷德厚主编.贫血.重庆：科学技术文献出版社重庆分社，1989.334～334
3 谢华丽，刘锈云，杨育林等.红细胞内游离原卟啉正常值探讨.营养学报，1993，15(4)：466～468
4 Dallman PR.人体铁代谢铁缺乏检查与人群铁营养水平.生理科学杂志，1985，5：187～193
5 Rosenlǒf K,Fyhrquist F,Tenhunen R.Erythropoietin,aluminium,and anaemia in patients on haemodialysis.The Lancet,1990,Vol.335:247～249
6 杨跃煌，铁蛋白与细胞铁代谢.国外医学输血及血液学分册，1991，14(2)：69～71
(1998-10-28 收稿), http://www.100md.com
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夏鹄 邓小兵 谢兰 敬华 北京 解放军第三零陆医院 邮政编码：北京，100101；边立华 王文广 中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所(100050)
关键词：肾功能不全，慢性；贫血；红细胞内游离原卟啉；铁蛋白
临床血液学杂志990404 摘要 目的：了解肾性贫血病人骨髓细胞内可染铁明显增加的原因。方法：采用免疫荧光分光光度法测定40例慢性肾功能不全病人红细胞内游离原卟啉(FEP)，并以31例正常人作为对照。结果：显示慢性肾功能不全组FEP/Hb及FEP/RBC水平(2.85±1.29 μg/Hb.g；82.45±34.65 μg/RBC.dl)，显著高于正常对照组(1.76±0.71 μg/Hb.g；51.16±20.25 μg/RBC.dl)P<0.001。而全血FEP值两组之间差异无显著性(慢性肾功能不全组：21.04±10.80 μg/dl全血；正常组：24.78±9.83 μg/dl全血，P>0.05)。同时，慢性肾功能不全组血清铁蛋白水平(238.56±169.59 μg/L)显著高于正常对照组(112.51±71.54μg/L ，P=0.0002)。而且反复接受输血组与未曾输血组之间差异无显著性。结论：肾性贫血具有FEP增高及铁负荷增加等特点。
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FEP in Patients with Chronic Renal Dysfunction
Xia Hu,Deng Xiaobing,Xie lan,et al
306 Hospital PLA,100101
Abstract Objectiue:To study on the anaemia due to chronic renal dysfunction,free erythrocyte protoporphyrin(FEP).Method:Fluorospectophyotometry was used in 40 patents with chronic renal dysfunction (group 1) and in 31 normal persons (group 2).Result:The levels of FEP/Hb and FEP/RBC in group 1(2.85±1.29 μg/Hb.g;82.45±34.65 μg/RBC.dl) were significantly higher (P<0.001) than that in group 2(1.76±0.71 μg/Hb.g;51.16±20.25 μg/RBC.dl),and were also higher than the previously published normal value derived from a large population (2.3 μg/Hb.g;75 μg/RBC.dl).However,no intergroup difference of FEP in whole blood could be found (group 1:21.04±10.80 μg/dl whole blood;group 2:24.78±9.83 μg/dl whole blood;P>0.05).Meanwhile,the level of serum ferritin in group 1 (238.56±169.59 μg/L) was also significantly higher (P=0.0002)than that in group 2(112.51±71.54μg/L)，and there was no significantly difference (P>0.05) between repeatedly received blood transfusion (297.68±196.11 μg/L) and never received blood transfusion (194.86±135.33 μg/L).Conclusion:The anaemia due to chronic renal dysfunction is characterized of high level of FEP and overload iron.
, 百拇医药
Key words FEP Anaemia Chronic renal dysfunction Serum ferritin
我们在临床工作中观察到肾性贫血病人的骨髓中细胞内可染铁明显增加而红细胞系统有明显血红蛋白合成不足的表现。为了了解这种情况发生的原因及从一个侧面了解发生肾性贫血时的铁负荷情况，我们对慢性肾功能不全病人进行了红细胞内游离原卟啉(Free Erythrocyte Protoporphyrin,FEP)的测定。
1 材料和方法
1.1 病例选择 符合慢性肾功能不全诊断标准〔1〕的病人40例，男25人，女15人。年龄22～70岁，平均42.4岁。血液透析治疗(每周11 h，>1年)病人28人，未接受血液透析治疗的病人12人。反复接受输血(输血总量>2 000 ml)者17人，未曾接受过输血者23人。EPO治疗中(2 000 U，每周2次，>2周)者12人，未用EPO治疗者28人。正常对照组：经健康检查排除肝、肾、心、血管疾病及急、慢性炎症的本院工作人员31人，男17人，女14人。年龄22～59岁，平均38.3岁。病人及对照组均经静脉采血，查Hb，RBC，HCT，计算MCV，MCH，MCHC。测定血清铁蛋白(125Ⅰ-铁蛋白试剂盒为中国原子能科学院同位素研究所产品)。接受血液透析的病人均于透析当日透析前采血。
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1.2 FEP测定 采用荧光分光光度法。8401-Ⅱ型特定滤纸为天津造纸厂产品。F-8000荧光分光光度计为日本日立公司产品。标准为美国Sigma公司产品。质控采用国际标准质控(GBW 09136)。
1.3 统计学处理 采用NESS统计软件进行。
2 结果
①慢性肾功能不全组Hb、RBC、HCT均明显低于正常对照组，差异有显著性。但MCV、MCH、MCHC与正常对照组比较无差异(见表1)。②慢性肾功能不全组全血FEP值与正常对照组比较无差异，但FEP/Hb及FEP/RBC值均明显高于正常对照组，差异有非常显著性。应用EPO治疗组FEP/Hb及FEP/RBC平均值虽然明显低于未用EPO组，但经统计学处理差异无显著性(见表2)。③慢性肾功能不全组血清铁蛋白显著高于正常对照组，并且反复输血组与未输血组比较差异无显著性。但应用EPO治疗组血清铁蛋白水平低于未用EPO组，差异有显著性(见表2)。④透析组与未透析组比较，各项指标差异均无显著性(详见表1，2)。
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表1 各组之间Age、Hb、RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC的比较
±sAge
Hb
(g/L)
RBC
(×1012/L)
HCT
MCV
(fl)
MCH
(pg)
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MCHC
(g/L)
正常对照组(31例)
38.29±7.94
142.26±16.30
4.85±0.44
0.47±0.05
96.90±5.42
29.41±1.62
30.41±1.62
慢性肾衰组(40例)
42.38±13.42
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75.30±19.64*
2.57±0.62**
0.24±0.06**
95.58±8.75
29.22±1.69
30.59±2.45
应用EPO组(12例)
46.67±16.33
73.70±16.70
2.54±0.43
0.24±0.06
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94.42±9.30
28.78±2.15
30.59±1.52
未用EPO组(28例)
41.07±11.69
75.58±21.40
2.58±0.70
0.25±0.07
96.04±8.79
29.34±1.45
30.62±2.83
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输血组(17例)
39.88±12.26
72.30±18.10
2.40±0.61
0.23±0.06
96.82±9.14
29.36±1.87
30.42±2.45
未输血组(23例)
44.22±14.19
79.10±20.30
, 百拇医药
2.70±0.61
0.26±0.07
94.65±8.54
29.12±1.59
30.70±2.50
透析组(28例)
40.80±13.70
71.40±16.90
2.42±0.11
0.23±0.06
96.40±8.40
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30.50±2.03
未透析组(23例)
46.10±12.40
84.50±23.20
2.92±0.69
0.27±0.07
93.50±9.50
28.75±1.55
30.80±3.32
*P<0.05，**P<0.0013 讨论
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卟啉是血红蛋白合成过程中的一个关键性物质。当铁缺乏和血红素合成酶活性降低时，可出现红细胞内游离原卟啉增高〔2〕。红细胞内游离原卟啉正常上限的确定各家报道略有差异〔3〕。由于红细胞内游离原卟啉有发育期变化〔4〕，而国内所调查的人群多为小儿、青少年，故该差异可能与不同年龄组机体造血活跃程度不同有关。根据美国2.2万人调查，Dallman〔4〕提出可用2.3 μg/Hb.g或75 μg/RBC.dl(全血)作为既代表成人也代表儿童的FEP的正常95%上限值。我们测定的慢性肾功能不全病人全血FEP值与年龄相同的正常对照组比较虽差异无显著性，但FEP/Hb及FEP/RBC值较对照组明显增高，差异非常显著，并超过了Dallman〔4〕报道的正常上限。在有贫血存在的情况下，FEP/Hb及FEP/RBC值较全血FEP值更能准确的反映红细胞内游离原卟啉的含量，故我们认为慢性肾功能不全病人红细胞内游离原卟啉是增高的。红细胞内游离原卟啉增高仅见于铁缺乏和血红素合成酶活性下降者。我们观察到肾性贫血病人骨髓中细胞内铁沉积明显。并且本组慢性肾功能不全病人血清铁蛋白均明显增高，故我们认为慢性肾功能不全病人FEP增高与铁缺乏无关，而可能是血红素合成酶活性下降的结果。文献报道EPO可提高血红素合成酶的活性〔5〕。我们12例应用EPO治疗中的病人FEP平均值虽低于未用EPO组，但经统计学处理两组差异无显著性。这可能与EPO用量小、时间短，尚未达到治疗剂量(全部12例病人均有贫血，贫血程度与未用EPO组无差异)及病例数太少等因素有关。铁蛋白是机体储存铁的主要形式之一。一般认为血清铁蛋白测定是了解机体铁储存状态的好方法之一〔6〕。我们的研究显示慢性肾功能不全病人血清铁蛋白显著增高，与正常人比较差异非常显著(P<0.001)。反复输血组与未输血组比较，血清铁蛋白水平无差异，说明慢性肾功能不全病人血清铁蛋白增高与反复输血导致的铁负荷增加无关，而是疾病本身的一种表现。EPO治疗组血清铁蛋白与未用EPO组比较差异显著(P<0.05)，提示EPO有促进铁代谢的作用。此外，血红蛋白合成减少，铁利用下降致铁蓄积，以及肌酐、尿素氮等代谢毒物对铁代谢的影响也是引起铁蛋白增加的原因之一。由此，我们认为肾性贫血是正细胞、正色素性贫血，并具有血清铁蛋白增高及红细胞内游离原卟啉增高等特征，间接反映血红素合成酶活性降低。并提示肾性贫血病人在未用EPO治疗前不宜补充铁剂。
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表2 各组之间SF，FEP，FEP/Hb，FEP/RBC的比较
±sSF(μg/L)
FEP
(μg/dl)
FEP/Hb
(μg/Hb.g)
FEP/RBC
(μg/RBC.dl)
total
male
, 百拇医药 female
正常对照组(31例)
112.51±71.54
154.28±66.37
61.79±36.55
24.78±9.83
1.76±0.71
51.16±20.25
慢性肾衰组(40例)
238.56±169.59△
285.55±184.94△
, 百拇医药
160.24±104.72△
21.04±10.80
2.85±1.29△
82.46±34.65△
应用EPO组(12例)
163.98±157.61
17.73±8.83
2.50±1.38
70.10±33.30
未用EPO组(28例)
, 百拇医药
279.33±163.42*
22.81±11.45
3.06±1.23
89.17±34.00
输血组(17例)
297.68±196.11
20.19±8.87
2.93±1.11
85.30±30.00
未输血组(23例)
194.86±135.33
, 百拇医药
21.67±12.19
2.80±1.43
80.36±38.23
透析组(28例)
237.20±190.22
18.50±1.55
2.66±1.14
77.60±30.80
未透析组(12例)
241.73±114.60
26.95±13.91
, http://www.100md.com
3.30±1.54
93.77±41.60
*P<0.05，△P<0.001 (本文得到301医院汪月增主任医师指导，武警总院、304医院提供部分病例，特此致谢)
参考文献
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(1998-10-28 收稿), http://www.100md.com