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编号:10238175
绞股蓝总皂甙对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织SOD、GSH-PX、MDA、LDH和ATPase含量的影响
http://www.100md.com 《咸宁学院学报(医学版)》 1999年第4期
     作者:王秋桂 何丽娅 陈业文 吴基良

    单位:王秋桂 陈业文(咸宁医学院组织胚胎研教室,咸宁 437100);何丽娅(咸宁医学院生物化学研教室,咸宁 437100);吴基良(咸宁医学院药学系药理学研教室,咸宁 437100)

    关键词:烫伤;过氧化脂质;绞股蓝;腺苷三磷酸类

    咸宁医学院学报990402 摘 要 目的:观察严重烫伤大鼠脑、心、肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、ATPase含量的变化及绞股蓝总皂甙(GP)防治作用。方法:选用健康Wistar大鼠85只,随机分成①正常对照组(5只);②烫伤对照组(40只,10%水合氯醛腹腔麻醉,颈、背部脱毛,浸入100℃沸水中16s造成40%Ⅲ度烫伤);③烫伤治疗组(40只,烫伤后立即腹腔注射GP(50mg/kg),以后每8小时重复一次)。烫伤后分别于4、8、24、48h几个不同时相点(每个时相点10只)取出脑、心、肾组织分别制成匀浆,测定SOD、GSH-PX、LDH、MDA、ATPase的含量。结果:烫伤后脑、心、肾组织中SOD、GSH-PX、ATPase含量呈进行性下降,LDH、MDA的含量明显上升,各时相点与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01)。采用绞股蓝治疗后,SOD、GSH-PX、ATPase逐渐回升,LDH、MDA的含量明显下降,各时相点与烫伤对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:严重烫伤对脑、心、肾组织有损害作用。胶股蓝能够提高机体的抗氧化能力,降低LDH的释放,抑制脂质过氧化产物的形成,对膜结构有明显保护作用。
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    中图分类号 R285.5

    Effects of Gynostemma Pentaphyllum on the Contents of SOD、GSH-PX、MDA、LDH and ATPase in Brain、Heart and Kidney of Severely Burned Rrats

    WANG Qiugui1,HE Liya2,CHENG Yewen1 et al

    1 Department of Histology and Embryology,Xianning Medical College,Xianning 437100

    2 Department of Biochemistry,Xianning Medical College,Xianning 437100
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    ABSTRACT Objective To observe the effects of gynostemma pentaphyllum (GP) on the contents of SOD、GSH-PX、LDA,ATPase and MDA in brain,heart and kidney of severely burned rats.Methods Divide the rats randomly into three groups:①normal group.②non-treated burned group (inflicted with 40%TBSA,full thickness burn injury).③treated burned group (intraabdominal injection of GP immediately after burn,and then repeated q8h).Tissues of brain,heart and kidney were gathered and homogenized respectively at 4、8、、24、48h after burn,then the contents of SOD,GSH-PX,LDH ATPase and MDA were assayed.Result Comparing with normal group,in brin,heart and kidney tissues of burned group the contents of SOD,GSH-PX,and ATPase were significantly decreased (P<0.01) but LDH and MDA variously enhanced(P<0.01).After the treatment of GP,the SOD,GSH-PX and ATPase contents were significantly higher but the LDH and MDA lower than that of the burned group (P<0.01).Conclusion Decrease of SOD GSH-PX、and ATPase may reflect the damage of distent organ caused by severe burn,and GP can enhance the activity of SOD,GSH-PXm and ATPase but reduce lipid peroxide in brain,heart,kidney of severely burned rats.
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    KEY WORDS Burn;Gynostemma pentaphyllum;Lipid peroxide;Adenosine-triphophatase

    严重烧伤所致消化系统损害的首要因素为血液灌流不良,尤其是胃肠道缺血[1]。胃肠缺血对全身的影响是广泛而深刻的,其不仅能造成肠道通透性增加,肠腔内细菌和毒素移位,还释放大量炎症介质。针对严重热损伤的这一特征,本文根据绞股蓝总皂甙能扩张外周血管,增加脏器的血流量,抗缺氧等药物作用[2]。观察了严重烫伤大鼠脑、心、肾组织SOD、GSG—PX、MDA、LDH、ATPase的变化及绞股蓝总皂甙的防治效果,以期为GP的临床合理应用提供参考依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    选用健康Wistar大鼠85只,雌雄不拘,体重250g,实验前禁食24h,自由饮水。
, 百拇医药
    1.2 动物分组与模型

    动物随机分成①正常对照组(5只);②烫伤对照组(40只);③烫伤治疗组(40只);②③两组动物均以10%水合氯醛(300mg/kg)腹腔麻醉,用8%Na2S对颈、背、体侧部脱毛,待动物清醒后,脱毛区浸入100℃沸水中16s,造成40%Ⅲ度烫伤模型。其中②组烫伤后不作任何处理,分别于烫后4、8、24、48h等几个不同时相点抽血处死,取脑、心、肾组织,匀浆,而③组立即腹腔注射GP(50mg/kg,此后每8小时重复一次。其它方法同②组。

    1.3 生化指标测定

    各组动物分别在烫伤后和治疗后按不同时相经麻醉抽血处死,然后取脑、心、肾组织制成匀浆,测定SOD[3]、GSH-PX[4]、MDA[5]、LDH[6]ATPase[7]的含量。
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    1.4 统计学处理

    实验数据以均数±标准差(±s)表示,进行t检验。

    2 结果

    2.1 组织SOD、GSH-PX、LDH、MDA含量的变化

    烫伤后脑、心、肾组织SOD、GSH-PX含量呈进行性下降,各时相点与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。经GP治疗后,各时相点SOD、GSH-PX含量随治疗时间延长逐渐回升,与烫伤组比较,有明显差异(P<0.01)。(表1、2)

    表1 绞股蓝对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织SOD活性影响(±s,u/ml)
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    对照组

    (n=5)

    烫 伤 组(n=10)

    治 疗 组(n=10)

    4h

    8h

    24h

    48h

    4h

    8h

    24h

    48h

    脑
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    4.48±

    3.58±

    2.66±

    1.99±

    0.83±

    4.20±#

    4.52±#

    4.58±#

    4.85±#

    0.57
, 百拇医药
    0.59

    0.51

    0.28

    0.52

    0.33

    0.57

    0.56±#

    0.61

    心

    6.13±

    5.05±

    4.21±
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    3.09±

    1.98±

    5.87±#

    5.64±#

    6.09±#

    6.26±#

    1.13

    0.32

    0.47

    0.95

    0.71
, 百拇医药
    0.61

    0.35

    0.21±#

    0.33

    肾

    6.17±

    4.16±

    3.00±

    2.43±

    1.32±

    5.94±#
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    6.28±#

    6.51±#

    6.68±#

    0.82

    0.78

    0.98

    0.58

    0.57

    0.50

    0.35

    0.35

    0.29
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    与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.01表2 绞股蓝对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织GSH-PX活性影响(±s,ng/mg)

    对照组

    (n=5)

    烫 伤 组(n=10)

    治 疗 组(n=10)

    4h

    8h

    24h

    48h

    4h
, 百拇医药
    8h

    24h

    48h

    脑

    58.61±

    55.44±

    52.56±

    49.08±

    46.56±

    58.02±#

    61.09±#
, 百拇医药
    63.58±#

    65.77±#

    0.83

    0.86

    1.11

    0.87

    0.83

    1.28

    0.81

    1.11±#

    0.93

    心
, 百拇医药
    52.17±

    49.34±

    45.32±

    42.68±

    40.03±

    52.14±#

    54.15±#

    59.54±#

    66.81±#

    16.30
, 百拇医药
    4.03

    1.65

    2.62

    1.96

    1.37

    7.03

    6.03±#

    3.25

    肾

    55.05±

    51.88±

    47.84±
, http://www.100md.com
    44.51±

    41.47±

    54.56±#

    57.19±#

    60.37±#

    62.69±#

    2.15

    1.33

    0.88

    0.75

    0.76
, 百拇医药
    1.98

    0.77

    1.11

    0.82

    与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.01

    烫伤后脑、心、肾组织LDA、MDA含量均高于对照组,经治疗后,各时相点LDH、MDA值均显著降低,尤以治疗后24和48h明显,与烫伤组比较有显著差异(P<0.01),见表3、4。

    表3 绞股蓝总皂甙对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织MDA含量影响(±s,nmol/mg)

    对照组
, 百拇医药
    (n=5)

    烫 伤 组(n=10)

    治 疗 组(n=10)

    4h

    8h

    24h

    48h

    4h

    8h

    24h

    48h

    脑

    6.05±
, http://www.100md.com
    6.58±

    7.75±

    9.23±

    13.36±

    6.36±#

    4.56±#

    6.76±#

    7.01±#

    0.19

    0.13
, 百拇医药
    1.64

    1.47

    1.87

    0.62

    0.20

    0.36±#

    0.59

    心

    3.99±

    5.88±

    7.65±

    10.02±
, 百拇医药
    12.75±

    4.30±#

    3.97±#

    3.99±#

    3.93±#

    0.53

    0.59

    0.58

    1.35

    0.64

    0.12
, 百拇医药
    0.73

    0.43±#

    0.24

    肾

    6.22±

    7.90±

    9.31±

    13.88±

    15.46±

    6.37±#

    7.32±#
, 百拇医药
    7.25±#

    7.45±#

    0.46

    0.62

    0.88

    0.74

    1.93

    0.60

    0.52

    0.38

    1.01

    与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.01表4 绞股蓝总皂甙对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织LDH的含量影响(±s,u/mg)
, 百拇医药
    对照组

    (n=5)

    烫 伤 组(n=10)

    治 疗 组(n=10)

    4h

    8h

    24h

    48h

    4h

    8h

    24h

    48h

    脑
, 百拇医药
    43.90±

    43.58±

    47.25±

    51.55±

    54.44±

    40.64#

    37.90±#

    35.49±#

    31.83±#

    1.83
, 百拇医药
    3.67

    0.65

    1.86

    1.92

    2.47

    0.55

    0.76±#

    4.52

    心

    25.53±

    25.80±

    26.36±
, 百拇医药
    26.86±

    27.64±

    23.93±#

    21.11±#

    19.71±#

    17.53±#

    0.98

    4.13

    2.75

    3.74

    3.74
, 百拇医药
    0.91

    0.63

    1.37±#

    0.98

    肾

    41.21±

    37.38±

    50.71±

    57.09±

    58±27

    40.14±#
, 百拇医药
    37.86±#

    35.33±#

    32.91±#

    2.54

    7.75

    11.34

    7.43

    5.31

    3.74

    1.08

    1.02

    0.79
, 百拇医药
    与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.01

    2.2 组织Na+-K+-ATPase,Ca2+-ATPase活性变化。

    大鼠烫伤后脑、心、肾组织ATPase活性呈进行性下降,与对照组比较有显著性差异(P<0.01),经治疗后,各时相点ATPase活性随治疗时间的延长逐渐回升,与烫伤组比较,有显著性差异(P<0.01)表5、6。

    表5 绞股蓝总皂甙对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织Na+-K+-ATPase影响(±s,nmol.pi-1 min-1 pro)

    对照组
, http://www.100md.com
    (n=5)

    烫 伤 组(n=10)

    治 疗 组(n=10)

    4h

    8h

    24h

    48h

    4h

    8h

    24h

    48h

    脑

    16.89±
, 百拇医药
    13.89±

    11.73±

    9.27±

    7.63±

    16.53±#

    16.84±#

    17.10±#

    17.54±#

    0.59

    0.55
, http://www.100md.com
    0.42

    0.51

    0.56

    0.42

    0.32

    0.50±#

    0.32

    心

    23.08±

    21.83±

    18.91±

    16.65±
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    13.01±

    23.28±#

    23.55±#

    24.11±#

    24.46±#

    0.43

    0.34

    0.34

    0.46

    0.50

    0.34
, http://www.100md.com
    0.67

    0.36±#

    0.32

    肾

    22.91±

    20.24±

    17.31±

    15.78±

    12.70±

    22.37±#

    22.95±#
, http://www.100md.com
    23.51±#

    23.78±#

    0.42

    0.62

    0.51

    0.43

    0.58

    0.36

    0.28

    0.40

    0.54

    与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.01表6 绞股蓝总皂甙对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织Ca2+-ATPase影响(±s,nmol.pi-1 min-1 pro)
, http://www.100md.com
    对照组

    (n=5)

    烫 伤 组(n=10)

    治 疗 组(n=10)

    4h

    8h

    24h

    48h

    4h

    8h

    24h

    48h

    脑
, 百拇医药
    32.27±

    30.08±

    27.79±

    25.43±

    23.03±

    32.15±#

    32.72±#

    33.96±#

    34.05±#

    0.35
, http://www.100md.com
    0.82

    0.77

    0.55

    0.57

    0.64

    0.39

    0.53

    0.33

    心

    34.18±

    31.73±

    29.38±
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    27.22±

    24.94±

    33.92±#

    34.51±#

    34.23±#

    35.64±#

    0.38

    0.59

    0.58

    0.29

    0.55
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    0.81

    0.56

    0.38±#

    0.47

    肾

    30.19±

    27.16±

    25.55±

    23.02±

    21.04±

    29.33±#
, 百拇医药
    30.39±#

    30.98±#

    31.16±#

    0.55

    0.56

    0.29

    0.34

    0.51

    0.71

    0.70

    0.31

    0.71
, http://www.100md.com
    与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.013 讨论

    严重烫伤不仅造成局部损伤,而且还可引起远隔部位重要器官的损伤。但其损伤机制尚不完全清楚。有研究表明,大面积热力损伤均可导致脏器中的氧自由基生成增加[8]。本实验观察到大鼠严重烫伤后,脑、心、肾组织中SOD、GSH-PX,ATPase含量下降,LDH、MDA含量升高。说明严重热力损伤后体内炎性介质(如肿瘤坏死因子等)生成增多[7],刺激中性粒细胞向血管外游走并释放氧自由基,使脏器中氧自由基含量增加,这可能是SOD,GSH-PX降低的原因之一。由此导致的脂质过氧化反应加重,结果MDA含量增加。LDH的酶促特异性是利用乳酸作为能源,使之继续氧化,再产生能量,当组织缺血缺氧时,LDH含量增加。

    然而氧自由基反应导致的脂质过氧化无疑会损伤细胞膜性结构,ATPase是普遍存在于组织细胞和细胞器膜上的一种蛋白酶,它在物质运送,能量转化以及信息传递方面具有重要作用。本实验观察到,大鼠严重烫伤后,脑、心、肾组织中ATPase活性呈进行性下降,表明热力损伤后组织缺血能引起细胞内还原性产物增多,线粒体内电子传递的紊乱,细胞ATP池很快耗竭,可能是酶活性下降的始发原因。Lin等[9]报道,烧伤后产生的烧伤毒素、肿瘤坏死因子等能明显抑制ATPase活性。表明烧伤后毒性代谢产物的堆积在损害酶功能中起重要作用。严重烫伤后ATPase活性下降,反映了重要器官的缺血性损害,可能与临床上多器官功能不全密切相关。
, 百拇医药
    采用绞股蓝总皂甙治疗后,SOD、GSH-PX、ATPase含量逐渐上升,同时脂质过氧化产物MDA含量明显降低。提示绞股蓝总皂甙能够提高机体的抗氧化能力,降低LDH的释放,减少脂质过氧化产物MDA的形成,同时对膜性结构有明显的保护作用,这可能是保护组织的又一机制。

    参考文献

    1 杨红林,盛志勇,郭振荣,等.严重烫伤大鼠延迟复苏后多器官损伤机制中的氧自由基作用.中华整形烧伤外科杂志,1995;11(2):106

    2 丁树利,朱兆仪.绞股蓝的研究进展.国外医药植物药分册,1991;6(3):99

    3 邓碧玉,彭勤生,李文杰.改良的连苯三酚自氧化测定超氧化物歧化酶活性的方法.生物化学与生物进展,1991;18(2):163

    4 夏奕明,朱连珍.血和组织中谷胱甘肽过氧化酶活力测定.卫生研究,1987;16(4):29
, http://www.100md.com
    5 向荣,王鼎年.过氧化脂质硫代比妥酸分光光度法的改进.生物化学与生物物理进展,1990;17(3):241

    6 Krawisz JE,Shovron P,Sfenson WF.Quanlitative assay for acute intestinal inflammation based on myeloperoxidase activity assessmant of inf-lammation in rat and hamster models.Gastroenterology,1984;87(6):1344

    7 徐友涵,宋逵华.一种简便、灵活的ATPase活性测定法.生物化学与生物物理进展,1986;13(4):64

    8 Deitch EA.Multiple organ failure:pathophysiology and potential future therapy.Ann Surg,1992;216:117

    9 Liu XS,Luo ZH,Yang ZC,et al.The significance of changes in serum tumor necrosis factor activity in severely burned patients.Burns,1994;20(1):40

    1999-08-26收稿, http://www.100md.com