绞股蓝总皂甙对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织SOD、GSH-PX、MDA、LDH和ATPase含量的影响
作者:王秋桂 何丽娅 陈业文 吴基良
单位:王秋桂 陈业文(咸宁医学院组织胚胎研教室,咸宁 437100);何丽娅(咸宁医学院生物化学研教室,咸宁 437100);吴基良(咸宁医学院药学系药理学研教室,咸宁 437100)
关键词:烫伤;过氧化脂质;绞股蓝;腺苷三磷酸类
咸宁医学院学报990402 摘 要 目的:观察严重烫伤大鼠脑、心、肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、ATPase含量的变化及绞股蓝总皂甙(GP)防治作用。方法:选用健康Wistar大鼠85只,随机分成①正常对照组(5只);②烫伤对照组(40只,10%水合氯醛腹腔麻醉,颈、背部脱毛,浸入100℃沸水中16s造成40%Ⅲ度烫伤);③烫伤治疗组(40只,烫伤后立即腹腔注射GP(50mg/kg),以后每8小时重复一次)。烫伤后分别于4、8、24、48h几个不同时相点(每个时相点10只)取出脑、心、肾组织分别制成匀浆,测定SOD、GSH-PX、LDH、MDA、ATPase的含量。结果:烫伤后脑、心、肾组织中SOD、GSH-PX、ATPase含量呈进行性下降,LDH、MDA的含量明显上升,各时相点与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01)。采用绞股蓝治疗后,SOD、GSH-PX、ATPase逐渐回升,LDH、MDA的含量明显下降,各时相点与烫伤对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:严重烫伤对脑、心、肾组织有损害作用。胶股蓝能够提高机体的抗氧化能力,降低LDH的释放,抑制脂质过氧化产物的形成,对膜结构有明显保护作用。
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中图分类号 R285.5
Effects of Gynostemma Pentaphyllum on the Contents of SOD、GSH-PX、MDA、LDH and ATPase in Brain、Heart and Kidney of Severely Burned Rrats
WANG Qiugui1,HE Liya2,CHENG Yewen1 et al
1 Department of Histology and Embryology,Xianning Medical College,Xianning 437100
2 Department of Biochemistry,Xianning Medical College,Xianning 437100
, http://www.100md.com
ABSTRACT Objective To observe the effects of gynostemma pentaphyllum (GP) on the contents of SOD、GSH-PX、LDA,ATPase and MDA in brain,heart and kidney of severely burned rats.Methods Divide the rats randomly into three groups:①normal group.②non-treated burned group (inflicted with 40%TBSA,full thickness burn injury).③treated burned group (intraabdominal injection of GP immediately after burn,and then repeated q8h).Tissues of brain,heart and kidney were gathered and homogenized respectively at 4、8、、24、48h after burn,then the contents of SOD,GSH-PX,LDH ATPase and MDA were assayed.Result Comparing with normal group,in brin,heart and kidney tissues of burned group the contents of SOD,GSH-PX,and ATPase were significantly decreased (P<0.01) but LDH and MDA variously enhanced(P<0.01).After the treatment of GP,the SOD,GSH-PX and ATPase contents were significantly higher but the LDH and MDA lower than that of the burned group (P<0.01).Conclusion Decrease of SOD GSH-PX、and ATPase may reflect the damage of distent organ caused by severe burn,and GP can enhance the activity of SOD,GSH-PXm and ATPase but reduce lipid peroxide in brain,heart,kidney of severely burned rats.
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KEY WORDS Burn;Gynostemma pentaphyllum;Lipid peroxide;Adenosine-triphophatase
严重烧伤所致消化系统损害的首要因素为血液灌流不良,尤其是胃肠道缺血[1]。胃肠缺血对全身的影响是广泛而深刻的,其不仅能造成肠道通透性增加,肠腔内细菌和毒素移位,还释放大量炎症介质。针对严重热损伤的这一特征,本文根据绞股蓝总皂甙能扩张外周血管,增加脏器的血流量,抗缺氧等药物作用[2]。观察了严重烫伤大鼠脑、心、肾组织SOD、GSG—PX、MDA、LDH、ATPase的变化及绞股蓝总皂甙的防治效果,以期为GP的临床合理应用提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物
选用健康Wistar大鼠85只,雌雄不拘,体重250g,实验前禁食24h,自由饮水。
, 百拇医药
1.2 动物分组与模型
动物随机分成①正常对照组(5只);②烫伤对照组(40只);③烫伤治疗组(40只);②③两组动物均以10%水合氯醛(300mg/kg)腹腔麻醉,用8%Na2S对颈、背、体侧部脱毛,待动物清醒后,脱毛区浸入100℃沸水中16s,造成40%Ⅲ度烫伤模型。其中②组烫伤后不作任何处理,分别于烫后4、8、24、48h等几个不同时相点抽血处死,取脑、心、肾组织,匀浆,而③组立即腹腔注射GP(50mg/kg,此后每8小时重复一次。其它方法同②组。
1.3 生化指标测定
各组动物分别在烫伤后和治疗后按不同时相经麻醉抽血处死,然后取脑、心、肾组织制成匀浆,测定SOD[3]、GSH-PX[4]、MDA[5]、LDH[6]ATPase[7]的含量。
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1.4 统计学处理
实验数据以均数±标准差(±s)表示,进行t检验。
2 结果
2.1 组织SOD、GSH-PX、LDH、MDA含量的变化
烫伤后脑、心、肾组织SOD、GSH-PX含量呈进行性下降,各时相点与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。经GP治疗后,各时相点SOD、GSH-PX含量随治疗时间延长逐渐回升,与烫伤组比较,有明显差异(P<0.01)。(表1、2)
表1 绞股蓝对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织SOD活性影响(±s,u/ml)
, http://www.100md.com
对照组
(n=5)
烫 伤 组(n=10)
治 疗 组(n=10)
4h
8h
24h
48h
4h
8h
24h
48h
脑
, http://www.100md.com
4.48±
3.58±△
2.66±△
1.99±△
0.83±△
4.20±#
4.52±#
4.58±#
4.85±#
0.57
, 百拇医药
0.59
0.51
0.28
0.52
0.33
0.57
0.56±#
0.61
心
6.13±
5.05±△
4.21±△
, http://www.100md.com
3.09±△
1.98±△
5.87±#
5.64±#
6.09±#
6.26±#
1.13
0.32
0.47
0.95
0.71
, 百拇医药
0.61
0.35
0.21±#
0.33
肾
6.17±
4.16±△
3.00±△
2.43±△
1.32±△
5.94±#
, http://www.100md.com
6.28±#
6.51±#
6.68±#
0.82
0.78
0.98
0.58
0.57
0.50
0.35
0.35
0.29
, http://www.100md.com
与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.01表2 绞股蓝对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织GSH-PX活性影响(±s,ng/mg)
对照组
(n=5)
烫 伤 组(n=10)
治 疗 组(n=10)
4h
8h
24h
48h
4h
, 百拇医药
8h
24h
48h
脑
58.61±
55.44±△
52.56±△
49.08±△
46.56±△
58.02±#
61.09±#
, 百拇医药
63.58±#
65.77±#
0.83
0.86
1.11
0.87
0.83
1.28
0.81
1.11±#
0.93
心
, 百拇医药
52.17±
49.34±△
45.32±△
42.68±△
40.03±△
52.14±#
54.15±#
59.54±#
66.81±#
16.30
, 百拇医药
4.03
1.65
2.62
1.96
1.37
7.03
6.03±#
3.25
肾
55.05±
51.88±△
47.84±△
, http://www.100md.com
44.51±△
41.47±△
54.56±#
57.19±#
60.37±#
62.69±#
2.15
1.33
0.88
0.75
0.76
, 百拇医药
1.98
0.77
1.11
0.82
与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.01
烫伤后脑、心、肾组织LDA、MDA含量均高于对照组,经治疗后,各时相点LDH、MDA值均显著降低,尤以治疗后24和48h明显,与烫伤组比较有显著差异(P<0.01),见表3、4。
表3 绞股蓝总皂甙对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织MDA含量影响(±s,nmol/mg)
对照组
, 百拇医药
(n=5)
烫 伤 组(n=10)
治 疗 组(n=10)
4h
8h
24h
48h
4h
8h
24h
48h
脑
6.05±
, http://www.100md.com
6.58±△
7.75±△
9.23±△
13.36±△
6.36±#
4.56±#
6.76±#
7.01±#
0.19
0.13
, 百拇医药
1.64
1.47
1.87
0.62
0.20
0.36±#
0.59
心
3.99±
5.88±△
7.65±△
10.02±△
, 百拇医药
12.75±△
4.30±#
3.97±#
3.99±#
3.93±#
0.53
0.59
0.58
1.35
0.64
0.12
, 百拇医药
0.73
0.43±#
0.24
肾
6.22±
7.90±△
9.31±△
13.88±△
15.46±△
6.37±#
7.32±#
, 百拇医药
7.25±#
7.45±#
0.46
0.62
0.88
0.74
1.93
0.60
0.52
0.38
1.01
与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.01表4 绞股蓝总皂甙对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织LDH的含量影响(±s,u/mg)
, 百拇医药
对照组
(n=5)
烫 伤 组(n=10)
治 疗 组(n=10)
4h
8h
24h
48h
4h
8h
24h
48h
脑
, 百拇医药
43.90±
43.58±△
47.25±△
51.55±△
54.44±△
40.64#
37.90±#
35.49±#
31.83±#
1.83
, 百拇医药
3.67
0.65
1.86
1.92
2.47
0.55
0.76±#
4.52
心
25.53±
25.80±△
26.36±△
, 百拇医药
26.86±
27.64±△
23.93±#
21.11±#
19.71±#
17.53±#
0.98
4.13
2.75
3.74
3.74
, 百拇医药
0.91
0.63
1.37±#
0.98
肾
41.21±
37.38±△
50.71±△
57.09±△
58±27△
40.14±#
, 百拇医药
37.86±#
35.33±#
32.91±#
2.54
7.75
11.34
7.43
5.31
3.74
1.08
1.02
0.79
, 百拇医药
与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.01
2.2 组织Na+-K+-ATPase,Ca2+-ATPase活性变化。
大鼠烫伤后脑、心、肾组织ATPase活性呈进行性下降,与对照组比较有显著性差异(P<0.01),经治疗后,各时相点ATPase活性随治疗时间的延长逐渐回升,与烫伤组比较,有显著性差异(P<0.01)表5、6。
表5 绞股蓝总皂甙对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织Na+-K+-ATPase影响(±s,nmol.pi-1 min-1 pro)
对照组
, http://www.100md.com
(n=5)
烫 伤 组(n=10)
治 疗 组(n=10)
4h
8h
24h
48h
4h
8h
24h
48h
脑
16.89±
, 百拇医药
13.89±△
11.73±△
9.27±△
7.63±△
16.53±#
16.84±#
17.10±#
17.54±#
0.59
0.55
, http://www.100md.com
0.42
0.51
0.56
0.42
0.32
0.50±#
0.32
心
23.08±
21.83±△
18.91±△
16.65±△
, http://www.100md.com
13.01±△
23.28±#
23.55±#
24.11±#
24.46±#
0.43
0.34
0.34
0.46
0.50
0.34
, http://www.100md.com
0.67
0.36±#
0.32
肾
22.91±
20.24±△
17.31±△
15.78±△
12.70±△
22.37±#
22.95±#
, http://www.100md.com
23.51±#
23.78±#
0.42
0.62
0.51
0.43
0.58
0.36
0.28
0.40
0.54
与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.01表6 绞股蓝总皂甙对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织Ca2+-ATPase影响(±s,nmol.pi-1 min-1 pro)
, http://www.100md.com
对照组
(n=5)
烫 伤 组(n=10)
治 疗 组(n=10)
4h
8h
24h
48h
4h
8h
24h
48h
脑
, 百拇医药
32.27±
30.08±△
27.79±△
25.43±△
23.03±△
32.15±#
32.72±#
33.96±#
34.05±#
0.35
, http://www.100md.com
0.82
0.77
0.55
0.57
0.64
0.39
0.53
0.33
心
34.18±
31.73±△
29.38±△
, http://www.100md.com
27.22±△
24.94±△
33.92±#
34.51±#
34.23±#
35.64±#
0.38
0.59
0.58
0.29
0.55
, http://www.100md.com
0.81
0.56
0.38±#
0.47
肾
30.19±
27.16±△
25.55±△
23.02±△
21.04±△
29.33±#
, 百拇医药
30.39±#
30.98±#
31.16±#
0.55
0.56
0.29
0.34
0.51
0.71
0.70
0.31
0.71
, http://www.100md.com
与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.013 讨论
严重烫伤不仅造成局部损伤,而且还可引起远隔部位重要器官的损伤。但其损伤机制尚不完全清楚。有研究表明,大面积热力损伤均可导致脏器中的氧自由基生成增加[8]。本实验观察到大鼠严重烫伤后,脑、心、肾组织中SOD、GSH-PX,ATPase含量下降,LDH、MDA含量升高。说明严重热力损伤后体内炎性介质(如肿瘤坏死因子等)生成增多[7],刺激中性粒细胞向血管外游走并释放氧自由基,使脏器中氧自由基含量增加,这可能是SOD,GSH-PX降低的原因之一。由此导致的脂质过氧化反应加重,结果MDA含量增加。LDH的酶促特异性是利用乳酸作为能源,使之继续氧化,再产生能量,当组织缺血缺氧时,LDH含量增加。
然而氧自由基反应导致的脂质过氧化无疑会损伤细胞膜性结构,ATPase是普遍存在于组织细胞和细胞器膜上的一种蛋白酶,它在物质运送,能量转化以及信息传递方面具有重要作用。本实验观察到,大鼠严重烫伤后,脑、心、肾组织中ATPase活性呈进行性下降,表明热力损伤后组织缺血能引起细胞内还原性产物增多,线粒体内电子传递的紊乱,细胞ATP池很快耗竭,可能是酶活性下降的始发原因。Lin等[9]报道,烧伤后产生的烧伤毒素、肿瘤坏死因子等能明显抑制ATPase活性。表明烧伤后毒性代谢产物的堆积在损害酶功能中起重要作用。严重烫伤后ATPase活性下降,反映了重要器官的缺血性损害,可能与临床上多器官功能不全密切相关。
, 百拇医药
采用绞股蓝总皂甙治疗后,SOD、GSH-PX、ATPase含量逐渐上升,同时脂质过氧化产物MDA含量明显降低。提示绞股蓝总皂甙能够提高机体的抗氧化能力,降低LDH的释放,减少脂质过氧化产物MDA的形成,同时对膜性结构有明显的保护作用,这可能是保护组织的又一机制。
参考文献
1 杨红林,盛志勇,郭振荣,等.严重烫伤大鼠延迟复苏后多器官损伤机制中的氧自由基作用.中华整形烧伤外科杂志,1995;11(2):106
2 丁树利,朱兆仪.绞股蓝的研究进展.国外医药植物药分册,1991;6(3):99
3 邓碧玉,彭勤生,李文杰.改良的连苯三酚自氧化测定超氧化物歧化酶活性的方法.生物化学与生物进展,1991;18(2):163
4 夏奕明,朱连珍.血和组织中谷胱甘肽过氧化酶活力测定.卫生研究,1987;16(4):29
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5 向荣,王鼎年.过氧化脂质硫代比妥酸分光光度法的改进.生物化学与生物物理进展,1990;17(3):241
6 Krawisz JE,Shovron P,Sfenson WF.Quanlitative assay for acute intestinal inflammation based on myeloperoxidase activity assessmant of inf-lammation in rat and hamster models.Gastroenterology,1984;87(6):1344
7 徐友涵,宋逵华.一种简便、灵活的ATPase活性测定法.生物化学与生物物理进展,1986;13(4):64
8 Deitch EA.Multiple organ failure:pathophysiology and potential future therapy.Ann Surg,1992;216:117
9 Liu XS,Luo ZH,Yang ZC,et al.The significance of changes in serum tumor necrosis factor activity in severely burned patients.Burns,1994;20(1):40
1999-08-26收稿, http://www.100md.com
单位:王秋桂 陈业文(咸宁医学院组织胚胎研教室,咸宁 437100);何丽娅(咸宁医学院生物化学研教室,咸宁 437100);吴基良(咸宁医学院药学系药理学研教室,咸宁 437100)
关键词:烫伤;过氧化脂质;绞股蓝;腺苷三磷酸类
咸宁医学院学报990402 摘 要 目的:观察严重烫伤大鼠脑、心、肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、ATPase含量的变化及绞股蓝总皂甙(GP)防治作用。方法:选用健康Wistar大鼠85只,随机分成①正常对照组(5只);②烫伤对照组(40只,10%水合氯醛腹腔麻醉,颈、背部脱毛,浸入100℃沸水中16s造成40%Ⅲ度烫伤);③烫伤治疗组(40只,烫伤后立即腹腔注射GP(50mg/kg),以后每8小时重复一次)。烫伤后分别于4、8、24、48h几个不同时相点(每个时相点10只)取出脑、心、肾组织分别制成匀浆,测定SOD、GSH-PX、LDH、MDA、ATPase的含量。结果:烫伤后脑、心、肾组织中SOD、GSH-PX、ATPase含量呈进行性下降,LDH、MDA的含量明显上升,各时相点与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01)。采用绞股蓝治疗后,SOD、GSH-PX、ATPase逐渐回升,LDH、MDA的含量明显下降,各时相点与烫伤对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:严重烫伤对脑、心、肾组织有损害作用。胶股蓝能够提高机体的抗氧化能力,降低LDH的释放,抑制脂质过氧化产物的形成,对膜结构有明显保护作用。
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中图分类号 R285.5
Effects of Gynostemma Pentaphyllum on the Contents of SOD、GSH-PX、MDA、LDH and ATPase in Brain、Heart and Kidney of Severely Burned Rrats
WANG Qiugui1,HE Liya2,CHENG Yewen1 et al
1 Department of Histology and Embryology,Xianning Medical College,Xianning 437100
2 Department of Biochemistry,Xianning Medical College,Xianning 437100
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ABSTRACT Objective To observe the effects of gynostemma pentaphyllum (GP) on the contents of SOD、GSH-PX、LDA,ATPase and MDA in brain,heart and kidney of severely burned rats.Methods Divide the rats randomly into three groups:①normal group.②non-treated burned group (inflicted with 40%TBSA,full thickness burn injury).③treated burned group (intraabdominal injection of GP immediately after burn,and then repeated q8h).Tissues of brain,heart and kidney were gathered and homogenized respectively at 4、8、、24、48h after burn,then the contents of SOD,GSH-PX,LDH ATPase and MDA were assayed.Result Comparing with normal group,in brin,heart and kidney tissues of burned group the contents of SOD,GSH-PX,and ATPase were significantly decreased (P<0.01) but LDH and MDA variously enhanced(P<0.01).After the treatment of GP,the SOD,GSH-PX and ATPase contents were significantly higher but the LDH and MDA lower than that of the burned group (P<0.01).Conclusion Decrease of SOD GSH-PX、and ATPase may reflect the damage of distent organ caused by severe burn,and GP can enhance the activity of SOD,GSH-PXm and ATPase but reduce lipid peroxide in brain,heart,kidney of severely burned rats.
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KEY WORDS Burn;Gynostemma pentaphyllum;Lipid peroxide;Adenosine-triphophatase
严重烧伤所致消化系统损害的首要因素为血液灌流不良,尤其是胃肠道缺血[1]。胃肠缺血对全身的影响是广泛而深刻的,其不仅能造成肠道通透性增加,肠腔内细菌和毒素移位,还释放大量炎症介质。针对严重热损伤的这一特征,本文根据绞股蓝总皂甙能扩张外周血管,增加脏器的血流量,抗缺氧等药物作用[2]。观察了严重烫伤大鼠脑、心、肾组织SOD、GSG—PX、MDA、LDH、ATPase的变化及绞股蓝总皂甙的防治效果,以期为GP的临床合理应用提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物
选用健康Wistar大鼠85只,雌雄不拘,体重250g,实验前禁食24h,自由饮水。
, 百拇医药
1.2 动物分组与模型
动物随机分成①正常对照组(5只);②烫伤对照组(40只);③烫伤治疗组(40只);②③两组动物均以10%水合氯醛(300mg/kg)腹腔麻醉,用8%Na2S对颈、背、体侧部脱毛,待动物清醒后,脱毛区浸入100℃沸水中16s,造成40%Ⅲ度烫伤模型。其中②组烫伤后不作任何处理,分别于烫后4、8、24、48h等几个不同时相点抽血处死,取脑、心、肾组织,匀浆,而③组立即腹腔注射GP(50mg/kg,此后每8小时重复一次。其它方法同②组。
1.3 生化指标测定
各组动物分别在烫伤后和治疗后按不同时相经麻醉抽血处死,然后取脑、心、肾组织制成匀浆,测定SOD[3]、GSH-PX[4]、MDA[5]、LDH[6]ATPase[7]的含量。
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1.4 统计学处理
实验数据以均数±标准差(±s)表示,进行t检验。
2 结果
2.1 组织SOD、GSH-PX、LDH、MDA含量的变化
烫伤后脑、心、肾组织SOD、GSH-PX含量呈进行性下降,各时相点与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。经GP治疗后,各时相点SOD、GSH-PX含量随治疗时间延长逐渐回升,与烫伤组比较,有明显差异(P<0.01)。(表1、2)
表1 绞股蓝对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织SOD活性影响(±s,u/ml)
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对照组
(n=5)
烫 伤 组(n=10)
治 疗 组(n=10)
4h
8h
24h
48h
4h
8h
24h
48h
脑
, http://www.100md.com
4.48±
3.58±△
2.66±△
1.99±△
0.83±△
4.20±#
4.52±#
4.58±#
4.85±#
0.57
, 百拇医药
0.59
0.51
0.28
0.52
0.33
0.57
0.56±#
0.61
心
6.13±
5.05±△
4.21±△
, http://www.100md.com
3.09±△
1.98±△
5.87±#
5.64±#
6.09±#
6.26±#
1.13
0.32
0.47
0.95
0.71
, 百拇医药
0.61
0.35
0.21±#
0.33
肾
6.17±
4.16±△
3.00±△
2.43±△
1.32±△
5.94±#
, http://www.100md.com
6.28±#
6.51±#
6.68±#
0.82
0.78
0.98
0.58
0.57
0.50
0.35
0.35
0.29
, http://www.100md.com
与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.01表2 绞股蓝对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织GSH-PX活性影响(±s,ng/mg)
对照组
(n=5)
烫 伤 组(n=10)
治 疗 组(n=10)
4h
8h
24h
48h
4h
, 百拇医药
8h
24h
48h
脑
58.61±
55.44±△
52.56±△
49.08±△
46.56±△
58.02±#
61.09±#
, 百拇医药
63.58±#
65.77±#
0.83
0.86
1.11
0.87
0.83
1.28
0.81
1.11±#
0.93
心
, 百拇医药
52.17±
49.34±△
45.32±△
42.68±△
40.03±△
52.14±#
54.15±#
59.54±#
66.81±#
16.30
, 百拇医药
4.03
1.65
2.62
1.96
1.37
7.03
6.03±#
3.25
肾
55.05±
51.88±△
47.84±△
, http://www.100md.com
44.51±△
41.47±△
54.56±#
57.19±#
60.37±#
62.69±#
2.15
1.33
0.88
0.75
0.76
, 百拇医药
1.98
0.77
1.11
0.82
与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.01
烫伤后脑、心、肾组织LDA、MDA含量均高于对照组,经治疗后,各时相点LDH、MDA值均显著降低,尤以治疗后24和48h明显,与烫伤组比较有显著差异(P<0.01),见表3、4。
表3 绞股蓝总皂甙对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织MDA含量影响(±s,nmol/mg)
对照组
, 百拇医药
(n=5)
烫 伤 组(n=10)
治 疗 组(n=10)
4h
8h
24h
48h
4h
8h
24h
48h
脑
6.05±
, http://www.100md.com
6.58±△
7.75±△
9.23±△
13.36±△
6.36±#
4.56±#
6.76±#
7.01±#
0.19
0.13
, 百拇医药
1.64
1.47
1.87
0.62
0.20
0.36±#
0.59
心
3.99±
5.88±△
7.65±△
10.02±△
, 百拇医药
12.75±△
4.30±#
3.97±#
3.99±#
3.93±#
0.53
0.59
0.58
1.35
0.64
0.12
, 百拇医药
0.73
0.43±#
0.24
肾
6.22±
7.90±△
9.31±△
13.88±△
15.46±△
6.37±#
7.32±#
, 百拇医药
7.25±#
7.45±#
0.46
0.62
0.88
0.74
1.93
0.60
0.52
0.38
1.01
与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.01表4 绞股蓝总皂甙对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织LDH的含量影响(±s,u/mg)
, 百拇医药
对照组
(n=5)
烫 伤 组(n=10)
治 疗 组(n=10)
4h
8h
24h
48h
4h
8h
24h
48h
脑
, 百拇医药
43.90±
43.58±△
47.25±△
51.55±△
54.44±△
40.64#
37.90±#
35.49±#
31.83±#
1.83
, 百拇医药
3.67
0.65
1.86
1.92
2.47
0.55
0.76±#
4.52
心
25.53±
25.80±△
26.36±△
, 百拇医药
26.86±
27.64±△
23.93±#
21.11±#
19.71±#
17.53±#
0.98
4.13
2.75
3.74
3.74
, 百拇医药
0.91
0.63
1.37±#
0.98
肾
41.21±
37.38±△
50.71±△
57.09±△
58±27△
40.14±#
, 百拇医药
37.86±#
35.33±#
32.91±#
2.54
7.75
11.34
7.43
5.31
3.74
1.08
1.02
0.79
, 百拇医药
与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.01
2.2 组织Na+-K+-ATPase,Ca2+-ATPase活性变化。
大鼠烫伤后脑、心、肾组织ATPase活性呈进行性下降,与对照组比较有显著性差异(P<0.01),经治疗后,各时相点ATPase活性随治疗时间的延长逐渐回升,与烫伤组比较,有显著性差异(P<0.01)表5、6。
表5 绞股蓝总皂甙对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织Na+-K+-ATPase影响(±s,nmol.pi-1 min-1 pro)
对照组
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(n=5)
烫 伤 组(n=10)
治 疗 组(n=10)
4h
8h
24h
48h
4h
8h
24h
48h
脑
16.89±
, 百拇医药
13.89±△
11.73±△
9.27±△
7.63±△
16.53±#
16.84±#
17.10±#
17.54±#
0.59
0.55
, http://www.100md.com
0.42
0.51
0.56
0.42
0.32
0.50±#
0.32
心
23.08±
21.83±△
18.91±△
16.65±△
, http://www.100md.com
13.01±△
23.28±#
23.55±#
24.11±#
24.46±#
0.43
0.34
0.34
0.46
0.50
0.34
, http://www.100md.com
0.67
0.36±#
0.32
肾
22.91±
20.24±△
17.31±△
15.78±△
12.70±△
22.37±#
22.95±#
, http://www.100md.com
23.51±#
23.78±#
0.42
0.62
0.51
0.43
0.58
0.36
0.28
0.40
0.54
与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.01表6 绞股蓝总皂甙对严重烫伤大鼠脑、心、肾组织Ca2+-ATPase影响(±s,nmol.pi-1 min-1 pro)
, http://www.100md.com
对照组
(n=5)
烫 伤 组(n=10)
治 疗 组(n=10)
4h
8h
24h
48h
4h
8h
24h
48h
脑
, 百拇医药
32.27±
30.08±△
27.79±△
25.43±△
23.03±△
32.15±#
32.72±#
33.96±#
34.05±#
0.35
, http://www.100md.com
0.82
0.77
0.55
0.57
0.64
0.39
0.53
0.33
心
34.18±
31.73±△
29.38±△
, http://www.100md.com
27.22±△
24.94±△
33.92±#
34.51±#
34.23±#
35.64±#
0.38
0.59
0.58
0.29
0.55
, http://www.100md.com
0.81
0.56
0.38±#
0.47
肾
30.19±
27.16±△
25.55±△
23.02±△
21.04±△
29.33±#
, 百拇医药
30.39±#
30.98±#
31.16±#
0.55
0.56
0.29
0.34
0.51
0.71
0.70
0.31
0.71
, http://www.100md.com
与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较#P<0.013 讨论
严重烫伤不仅造成局部损伤,而且还可引起远隔部位重要器官的损伤。但其损伤机制尚不完全清楚。有研究表明,大面积热力损伤均可导致脏器中的氧自由基生成增加[8]。本实验观察到大鼠严重烫伤后,脑、心、肾组织中SOD、GSH-PX,ATPase含量下降,LDH、MDA含量升高。说明严重热力损伤后体内炎性介质(如肿瘤坏死因子等)生成增多[7],刺激中性粒细胞向血管外游走并释放氧自由基,使脏器中氧自由基含量增加,这可能是SOD,GSH-PX降低的原因之一。由此导致的脂质过氧化反应加重,结果MDA含量增加。LDH的酶促特异性是利用乳酸作为能源,使之继续氧化,再产生能量,当组织缺血缺氧时,LDH含量增加。
然而氧自由基反应导致的脂质过氧化无疑会损伤细胞膜性结构,ATPase是普遍存在于组织细胞和细胞器膜上的一种蛋白酶,它在物质运送,能量转化以及信息传递方面具有重要作用。本实验观察到,大鼠严重烫伤后,脑、心、肾组织中ATPase活性呈进行性下降,表明热力损伤后组织缺血能引起细胞内还原性产物增多,线粒体内电子传递的紊乱,细胞ATP池很快耗竭,可能是酶活性下降的始发原因。Lin等[9]报道,烧伤后产生的烧伤毒素、肿瘤坏死因子等能明显抑制ATPase活性。表明烧伤后毒性代谢产物的堆积在损害酶功能中起重要作用。严重烫伤后ATPase活性下降,反映了重要器官的缺血性损害,可能与临床上多器官功能不全密切相关。
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采用绞股蓝总皂甙治疗后,SOD、GSH-PX、ATPase含量逐渐上升,同时脂质过氧化产物MDA含量明显降低。提示绞股蓝总皂甙能够提高机体的抗氧化能力,降低LDH的释放,减少脂质过氧化产物MDA的形成,同时对膜性结构有明显的保护作用,这可能是保护组织的又一机制。
参考文献
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1999-08-26收稿, http://www.100md.com