大鼠室旁核微量注射GABA受体激动剂镇痛作用的研究
作者：胡宗礼 黄晓萍 但汉雄
单位：胡宗礼 但汉雄(咸宁医学院临床药学系药理学教研室，咸宁 437100)；黄晓萍(湖北省咸宁市卫生学校药理学教研室，咸宁 437100)
关键词：蝇蕈醇；氯苯氨丁酸；室旁核；镇痛
咸宁医学院学报990404 摘 要 目的：观察GABAa受体激动剂蝇蕈醇及GABAb受体激动剂氯苯氨丁酸的镇痛作用。方法：实验分生理盐水对照组、蝇蕈醇组及氯苯氨丁酸组，经室旁核微量注射药物，在大鼠甩尾测痛模型上测定大鼠的痛阈。结果：室旁核微量注射蝇蕈醇和氯苯氨丁酸均可不同程度地提高大鼠的痛阈(与生理盐水对照组相比，P<0.001)，最大提高痛阈分别为111.43±31.07%和124.24±29.44%，蝇蕈醇氯和苯氨丁酸间无显著性差异(P>0.05)。结论：GABA受体激动剂在室旁核能降低动物的痛感受，但与GABA受体功能状态无关。
, 百拇医药
中图分类号 R338.3
A Study On the Analgesic Effect of GABA Receptor Agonists Microinjected in Paraventricular Nucleus
HU Zongli1，HUANG Xiaoping2，DAN Hanxiong1
1 Department of pharmacology，Xianning medical college，Xianning 437100
2 Department of pharmacology,Xianning Health school,Xianning 437100
ABSTRACT Objective To investigate the analgesic effect of muscimol(Mus,a GABAa receptor agonist)and baclofen(Bac，a GABAb receptor agonist).Methods The study was divided into three groupsnormal saline (NS) control，Mus and Bac.The NS，Mus and Bac were microinjected in the paraventricular nucleus and the pain threshold(PT)was determined using tail flick test.Results Mus and Bac rasied the PT obviously(P<0.001 vs NS control).The PT was raised respectively 111.42±31.07%and 124.24±29.44% after administering the Mus and Bac,there was not marked different(P>0.05).Conclusion GABA receptor agonists can decrease the rat′s pain sensitivity,bnt this effect doesn′t relate to the functional state of GABA receptors.
, 百拇医药
KEY WORDS Muscimol；Baclofen；Paraventricular nucleus；Analgesia
有实验表明，在室旁核周期性放电神经元上存在GABAa和GABAb受体，并且GABA能调控室旁核的血管升压素参与针刺镇痛作用[1]。关于GABA与痛和镇痛的关系研究较多[2～5]，但是GABA受体激动剂在室旁核对大鼠痛觉的影响尚未见报道。本实验应用经室旁核微量注射GABAa受体激动剂蝇蕈醇(muscimol，Mus)及GABAb受体激动剂氯苯氨丁酸(baclofen，Bac)的方法，在大鼠甩尾测痛模型上，观察并比较GABA受体激动剂对大鼠的镇痛作用。
1 材料与方法
1.1 动物
雄性Sprague-Dawley大鼠，体重180～220g，本院动物室提供。
, http://www.100md.com
1.2 试剂
蝇蕈醇(muscimol，Mus)、氯苯氨丁酸(Baclofen，Bac)，美国Sigma公司产品。
1.3 痛阈测定
采用WQ-9E测痛仪测定痛阈(Pain Threshold,PT)，刺激电极在大鼠尾端1/3处给予电流刺激，以引起甩尾的最小电流值(mA)作为痛阈值[6]，分别测定给药前和给药后5、10、20、30、60分钟时的痛阈，每次连续测定三遍，取平均值，并计算痛阈变化值及百分率。
1.4 微量注射
大鼠在戊巴比妥钠(35mg/Kg，腹腔注射)麻醉下，按LJ.Pellegrine鼠脑定向图谱经立体定向仪引导，以前囟为中点在室旁核(P0.6、RL0.5、H7.5)埋植不锈钢导管，用牙托粉固定，术后5d进行实验。微量注射时，微量注射器与注射套管相连，在2min内分别将1μl(1μmol)生理盐水(NS)、Mus和Bac溶液注入室旁核。
, 百拇医药
1.5 数据处理
实验数据以
±s表示，用t检验进行统计学处理。
2 结果
生理盐水对照组痛阈稳定，注射Mus和Bac后大鼠痛阈明显提高，与NS组比较有显著性差异。20min时提高最为明显，痛阈提高值分别为0.307±0.039mA(P<0.001)和0.377±0.089mA(P<0.001)，然后逐渐降低，痛阈最大提高百分率分别为111.42±31.07%和124.24±29.44%，Mus与Bac间无明显差异(见表1)。可见，室旁核微量注射Mus和Bac能明显降低大鼠对痛的感受性，且与GABA受体功能状态无关。
表1 室旁核微量注射药物对痛阈的影响 药物
, 百拇医药
痛阈变化值(mA)
5
10
20
30
60(min)
NS
0.021±0.004
0.018±0.003
0.022±0.005
0.019±0.003
0.018±0.004
, 百拇医药
Mus
0.116±0.066*
0.245±0.064*
0.307±0.038*
0.211±0.046*
0.144±0.049*
Bac
0.193±0.043*
0.279±0.056*
0.377±0.089*
, 百拇医药
0.236±0.041*
0.178±0.047*
与生理盐水组比*P<0.001
3 讨论
GABA作为中枢神经系统重要的抑制性神经递质，广泛参与镇痛和针刺镇痛[2～5]，GABAa受体通过与Cl-通道相偶联，激活后可产生突触后抑制作用，GABAb受体通过G蛋白和胞内第二信使调节K+通道和Ca2+通道，可产生突触前和突触后抑制作用。已有研究显示，P物质对GABA受体介导的初级传入终末突触前抑制具有调制作用[7～8]，Bac提高痛阈可能是GABAb受体激活后P物质的释放减少[9]。本实验观察到经室旁核微量注射Mus和Bac均可不同程度地提高大鼠的痛阈，降低大鼠对痛的感受性。因此GABA可能作为痛觉信息通路中的一种重要递质或调质，抑制痛觉信号的传递，或者通过促进与镇痛有关的神经递质释放，或者是兴奋与镇痛有关的神经元而产生镇痛作用。关于GABAa受体激动剂Mus和GABAb受体激动剂Bac降低大鼠对痛的感受的确切机制还需进一步研究。
, 百拇医药
参考文献
1 李雯，郑灿，江文，等.γ-氨基丁酸对大鼠离体室旁核周期性放电神经元放电活动的影响.针刺研究，1993；18(1)：44
2 谷瑞明，马玉羡，孙明智.脑内注射γ-氨基丁酸对大鼠尾核痛反应神经元放电的影响.基础医学与临床，1991;11(2):49
3 张立新，刘祚延.微电泳GABA和5-HT对大鼠丘脑室旁核单位痛放电的影响.生理学报，1994;46(3):226
4 Skinner K.GABA immunoreactive synapese onto physiologically identified neuros in the cat rostral ventromedial medulla.Pain,1990;5:446
, 百拇医药 5 王春安，胡宗礼，严进，等.电针足三里所致CNS中氨基酸类递质的变化及NMDA受体在针刺镇痛中的作用.针刺研究，1997；22(1-2)：45
6 Zhang AZ. Endorphin and acupuncture analgesia research in the People's Republic of China (1975-1979). Acupuncture Electro Ther Res，1980;5:131
7 吴晓萍，李之望，樊友珍.P物质对大鼠分离的DRG细胞GABA激活电流的抑制作用.生理学报，1994；46(6)：586
8 周小平，关兵才，李之望.LHRH及P物质对大鼠神经节细胞膜GABAa受体介导反应的抑制作用.同济医科大学学报，1995；24(1)：1
9 高东明，马德玉.B型γ-氨基丁酸受体研究进展.生理科学进展，1995;26(3):246
1999-04-05收稿, http://www.100md.com
单位：胡宗礼 但汉雄(咸宁医学院临床药学系药理学教研室，咸宁 437100)；黄晓萍(湖北省咸宁市卫生学校药理学教研室，咸宁 437100)
关键词：蝇蕈醇；氯苯氨丁酸；室旁核；镇痛
咸宁医学院学报990404 摘 要 目的：观察GABAa受体激动剂蝇蕈醇及GABAb受体激动剂氯苯氨丁酸的镇痛作用。方法：实验分生理盐水对照组、蝇蕈醇组及氯苯氨丁酸组，经室旁核微量注射药物，在大鼠甩尾测痛模型上测定大鼠的痛阈。结果：室旁核微量注射蝇蕈醇和氯苯氨丁酸均可不同程度地提高大鼠的痛阈(与生理盐水对照组相比，P<0.001)，最大提高痛阈分别为111.43±31.07%和124.24±29.44%，蝇蕈醇氯和苯氨丁酸间无显著性差异(P>0.05)。结论：GABA受体激动剂在室旁核能降低动物的痛感受，但与GABA受体功能状态无关。
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中图分类号 R338.3
A Study On the Analgesic Effect of GABA Receptor Agonists Microinjected in Paraventricular Nucleus
HU Zongli1，HUANG Xiaoping2，DAN Hanxiong1
1 Department of pharmacology，Xianning medical college，Xianning 437100
2 Department of pharmacology,Xianning Health school,Xianning 437100
ABSTRACT Objective To investigate the analgesic effect of muscimol(Mus,a GABAa receptor agonist)and baclofen(Bac，a GABAb receptor agonist).Methods The study was divided into three groupsnormal saline (NS) control，Mus and Bac.The NS，Mus and Bac were microinjected in the paraventricular nucleus and the pain threshold(PT)was determined using tail flick test.Results Mus and Bac rasied the PT obviously(P<0.001 vs NS control).The PT was raised respectively 111.42±31.07%and 124.24±29.44% after administering the Mus and Bac,there was not marked different(P>0.05).Conclusion GABA receptor agonists can decrease the rat′s pain sensitivity,bnt this effect doesn′t relate to the functional state of GABA receptors.
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KEY WORDS Muscimol；Baclofen；Paraventricular nucleus；Analgesia
有实验表明，在室旁核周期性放电神经元上存在GABAa和GABAb受体，并且GABA能调控室旁核的血管升压素参与针刺镇痛作用[1]。关于GABA与痛和镇痛的关系研究较多[2～5]，但是GABA受体激动剂在室旁核对大鼠痛觉的影响尚未见报道。本实验应用经室旁核微量注射GABAa受体激动剂蝇蕈醇(muscimol，Mus)及GABAb受体激动剂氯苯氨丁酸(baclofen，Bac)的方法，在大鼠甩尾测痛模型上，观察并比较GABA受体激动剂对大鼠的镇痛作用。
1 材料与方法
1.1 动物
雄性Sprague-Dawley大鼠，体重180～220g，本院动物室提供。
, http://www.100md.com
1.2 试剂
蝇蕈醇(muscimol，Mus)、氯苯氨丁酸(Baclofen，Bac)，美国Sigma公司产品。
1.3 痛阈测定
采用WQ-9E测痛仪测定痛阈(Pain Threshold,PT)，刺激电极在大鼠尾端1/3处给予电流刺激，以引起甩尾的最小电流值(mA)作为痛阈值[6]，分别测定给药前和给药后5、10、20、30、60分钟时的痛阈，每次连续测定三遍，取平均值，并计算痛阈变化值及百分率。
1.4 微量注射
大鼠在戊巴比妥钠(35mg/Kg，腹腔注射)麻醉下，按LJ.Pellegrine鼠脑定向图谱经立体定向仪引导，以前囟为中点在室旁核(P0.6、RL0.5、H7.5)埋植不锈钢导管，用牙托粉固定，术后5d进行实验。微量注射时，微量注射器与注射套管相连，在2min内分别将1μl(1μmol)生理盐水(NS)、Mus和Bac溶液注入室旁核。
, 百拇医药
1.5 数据处理
实验数据以
±s表示，用t检验进行统计学处理。2 结果
生理盐水对照组痛阈稳定，注射Mus和Bac后大鼠痛阈明显提高，与NS组比较有显著性差异。20min时提高最为明显，痛阈提高值分别为0.307±0.039mA(P<0.001)和0.377±0.089mA(P<0.001)，然后逐渐降低，痛阈最大提高百分率分别为111.42±31.07%和124.24±29.44%，Mus与Bac间无明显差异(见表1)。可见，室旁核微量注射Mus和Bac能明显降低大鼠对痛的感受性，且与GABA受体功能状态无关。
表1 室旁核微量注射药物对痛阈的影响 药物
, 百拇医药
痛阈变化值(mA)
5
10
20
30
60(min)
NS
0.021±0.004
0.018±0.003
0.022±0.005
0.019±0.003
0.018±0.004
, 百拇医药
Mus
0.116±0.066*
0.245±0.064*
0.307±0.038*
0.211±0.046*
0.144±0.049*
Bac
0.193±0.043*
0.279±0.056*
0.377±0.089*
, 百拇医药
0.236±0.041*
0.178±0.047*
与生理盐水组比*P<0.001
3 讨论
GABA作为中枢神经系统重要的抑制性神经递质，广泛参与镇痛和针刺镇痛[2～5]，GABAa受体通过与Cl-通道相偶联，激活后可产生突触后抑制作用，GABAb受体通过G蛋白和胞内第二信使调节K+通道和Ca2+通道，可产生突触前和突触后抑制作用。已有研究显示，P物质对GABA受体介导的初级传入终末突触前抑制具有调制作用[7～8]，Bac提高痛阈可能是GABAb受体激活后P物质的释放减少[9]。本实验观察到经室旁核微量注射Mus和Bac均可不同程度地提高大鼠的痛阈，降低大鼠对痛的感受性。因此GABA可能作为痛觉信息通路中的一种重要递质或调质，抑制痛觉信号的传递，或者通过促进与镇痛有关的神经递质释放，或者是兴奋与镇痛有关的神经元而产生镇痛作用。关于GABAa受体激动剂Mus和GABAb受体激动剂Bac降低大鼠对痛的感受的确切机制还需进一步研究。
, 百拇医药
参考文献
1 李雯，郑灿，江文，等.γ-氨基丁酸对大鼠离体室旁核周期性放电神经元放电活动的影响.针刺研究，1993；18(1)：44
2 谷瑞明，马玉羡，孙明智.脑内注射γ-氨基丁酸对大鼠尾核痛反应神经元放电的影响.基础医学与临床，1991;11(2):49
3 张立新，刘祚延.微电泳GABA和5-HT对大鼠丘脑室旁核单位痛放电的影响.生理学报，1994;46(3):226
4 Skinner K.GABA immunoreactive synapese onto physiologically identified neuros in the cat rostral ventromedial medulla.Pain,1990;5:446
, 百拇医药 5 王春安，胡宗礼，严进，等.电针足三里所致CNS中氨基酸类递质的变化及NMDA受体在针刺镇痛中的作用.针刺研究，1997；22(1-2)：45
6 Zhang AZ. Endorphin and acupuncture analgesia research in the People's Republic of China (1975-1979). Acupuncture Electro Ther Res，1980;5:131
7 吴晓萍，李之望，樊友珍.P物质对大鼠分离的DRG细胞GABA激活电流的抑制作用.生理学报，1994；46(6)：586
8 周小平，关兵才，李之望.LHRH及P物质对大鼠神经节细胞膜GABAa受体介导反应的抑制作用.同济医科大学学报，1995；24(1)：1
9 高东明，马德玉.B型γ-氨基丁酸受体研究进展.生理科学进展，1995;26(3):246
1999-04-05收稿, http://www.100md.com