磁处理水对小鼠肝组织过氧化物酶活性的影响
作者：李小林 吕遐龄 樊颖婕 付妍 卫红军 刘吉民
单位：李小林 樊颖婕 卫红军 刘吉民 白求恩医科大学 生化教研室；吕遐龄 付妍 物理教研室, 吉林 长春 130021
关键词：过氧化物酶(POD)；磁处理水；抗氧化酶；自由基
中国医学物理学杂志990420 摘要： 目的：研究磁处理水对小鼠肝组织过氧化物酶(POD)活性的影响。方法：昆明种小鼠16只随机分成实验和对照二组，实验组小鼠自由饮用磁处理水，对照组小鼠饮用自来水，15天后采用愈创木酚比色法(I法)测定小鼠肝组织中过氧化物酶(POD)活性。结果：经测定，实验组小组肝组织过氧化物酶(POD)活性高于对照组。统计学处理采用t检验，二者差异有显著性(P<0.005)。结论：上述结果表明，小鼠饮用经一定强度磁场处理的水，经一定时间后其机体清除自由基的能力有显著提高。
, http://www.100md.com 中图分类号：R64 文献标识码：A
文章编号：1005-202X(1999)04-0256-02
Effects of magnetized water on the activities of liver POD in mice
LI Xiao-lin, LU Xia-ling, FAN Ying-jie, et al.
(Norman Bethune University of Medical sciences Dep. of
Biochemistry; Dep.of Physics,Jilin Changchun 130021,China)
Abstract: Purpose: Study the influence of the activities of liver peroxidase (POD) in the mice which drank the magnetized water. Method :The Kunming mice were divided randomly into experimental group and control group. The mice of experimental group drank magnetized water and the mice of control group drank common water. After 15 days the activities of liver POD were measured by using Guaiacol colorimetric methods (I). Result: The POD activities of experimental group are statistically higher than those of control group (P<0.005). Conclusions: The result show that after the mice have been drunk magnetized water with a certain intersity for a period of time, the abilities of the mice to remove free radicals were obviously enhanced.
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Key words: Peroxidase (POD); magnetized water; antioxidas; free radicals
磁处理水的生物效应是近年研究探讨的热点之一。我们曾研究过它对生物机体自由基代谢及某些抗氧化酶活性的影响[1]。目前尚未见磁处理水对机体过氧化物酶活性影响的研究报道。过氧化物酶(POD)是生物机体内主要的抗氧化酶之一，它协同超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及过氧化氢酶(CAT)一起分解体内自由基代谢产物H2O2，使其变成无害的水，保护机体免受氧自由基的损伤。作者在以往研究的基础上，进一步观察了磁处理水对机体POD活性的影响。
1 材料和方法
(1) 实验动物采用昆明种小白鼠共16只(由本校实验动物部提供)，雌性，体重为19～22克，1.5月龄。将其随机分成实验和对照两组，每组各8只。实验组小鼠自由饮用磁处理水，对照组小鼠饮用自来水，两组饲料相同。磁水器由哈尔滨磁应用研究所提供，H型场强磁水器，用CST-11A型特斯拉计测量，其中心磁场强度为35 mT，自来水预先在磁水器中放置4 h后并始终置于磁水器中供小鼠饮用，每天饮用新鲜磁处理水。
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(2)过氧化物酶测定采用愈创木酚比色法(I法)[2]。其原理为，在过氧化物酶存在的条件下，愈创木酚能被H2O2氧化成四愈创木酚，溶液呈橙色或橙红色。在20℃条件下经15 min后，POD活性变化符合在一定浓度下的[Ag+]标准曲线的浓度范围，因而根据[Ag+]标准曲线即可求出POD活性。
[Ag+]标准曲线的制作：在试管中分别加入硝酸银标准液(0.787 mg/ml)0.5，1.0，2.0，3.0，4.0 ml，每管分别补加蒸馏水至8 ml，再加入0.3%愈创木酚1 ml，混匀，当试管内温度达20℃时，迅速加入3%硫酸铵溶液1 ml，摇匀后，20℃，15 min水浴(从加过硫酸铵溶液计时)，再分别加入0.54N H2SO4溶液2 ml，以蒸馏水为空白参比，475 nm比色，用722型分光光度计(上海第三分析仪器厂)测定OD值。以OD值对[Ag+]浓度绘制标准曲线。
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酶液的提取：将饲养15天后的实验组、对照组小鼠处死每只鼠分别取肝组织1 g，加预冷5%CaCl2溶液少许冰水浴中匀浆，再加入20 ml预冷5%CaCl2溶液，于4℃，12000 r/min离心20 min，(KR20000T高速冷冻离心机,日本产)，上清即为酶液。
POD活力测定：在试管中加入适量酶提取液，每管中补加蒸馏水至8 ml，再加入0.3%愈创木酚1 ml，20℃下摇匀，然后加入0.5N H2O2 1 ml，20℃水浴中保温15 min(从加入H2O2时计时)，立即加入2 ml丙酮，摇匀。475 nm比色，OD值直接从标准曲线中查找相应的[Ag+]浓度，即可计算出POD的活性。酶活性单位为：1 g试样中所含有的酶在1 min内氧化愈创木酚的微摩尔数。
2 结果
, 百拇医药
表1 小鼠肝组织POD活性(μmol/g.min) 组 别
n
POD活性(
±SD)
实验组
8
0.9957±0.1251
对照组
8
0.7315±0.1626
t=3.6432 P<0.005
由上表可见，经饮用磁处理水15天后，小鼠肝组织中POD活性高于对照组，统计学处理采用t检验，二者差异有显著性(P<0.005)。
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3 讨论
近几十年来的研究表明，机体内的自由基代谢失调，必将导致各种疾病的发生、恶化及衰老过程的加速。机体内清除自由基的酶类，主要有超氧化物歧化酶(SOD)，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)及过氧化物酶(POD)。超氧化物歧化酶能将超氧负离子自由基歧化为H2O2和氧，而过氧化物酶通常与过氧化氢酶及谷胱甘肽过氧化物酶协同作用，将超氧化物歧化酶歧化自由基的产物H2O2转变成无害的水和氧，从而消除H2O2对机体造成的毒性。本研究结果提示我们饮用一定时间磁处理水可使机体中过氧化物酶的活性提高。我们以往的研究表明，饮用磁处理水的小鼠全血过氧化氢酶的活性实验组均高于对照组(P<0.05)，而全血谷胱甘肽过氧化物酶活性(雄性)实验组亦高于对照组(P<0.05)，雌性虽高于对照组，但无统计学上差异。而超氧化物歧化酶的活性实验组较对照组高(P<0.05)[1]。本文所报道的结果进一步表明，饮用磁处理水，在一定程度上可激活机体的抗氧化酶活性。
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近年来，磁处理水应用于临床某些疾病治疗及保健日益增多，其产生的生物效应的机理也十分复杂，涉及的因素亦很多，已报道经磁场处理后水的渗透压、粘滞系数、电导率等物理、化学性质均发生了一定的宏观以至于微观上的改变[3]，至于它为什么影响到机体某些抗氧化酶的活性，是否与其理化性质的改变有关，其机理尚待进一步实验研究证实。
参考文献：
1 刘吉民, 付妍, 谢绛利. 饮用磁化水小鼠抗氧化酶活力变化实验研究 [J]. 白求恩医科大学学报,1996，22(4):345-346.
2 陈勤.抗衰老研究实验方法[M].北京: 中国医药科技出版社,1996.462-463.
3 李国栋,周万松,郭立文.生物磁学--应用、技术、原理[M].北京:国防工业出版社,1993.226-229.
收稿日期：1999-02-25, 百拇医药
单位：李小林 樊颖婕 卫红军 刘吉民 白求恩医科大学 生化教研室；吕遐龄 付妍 物理教研室, 吉林 长春 130021
关键词：过氧化物酶(POD)；磁处理水；抗氧化酶；自由基
中国医学物理学杂志990420 摘要： 目的：研究磁处理水对小鼠肝组织过氧化物酶(POD)活性的影响。方法：昆明种小鼠16只随机分成实验和对照二组，实验组小鼠自由饮用磁处理水，对照组小鼠饮用自来水，15天后采用愈创木酚比色法(I法)测定小鼠肝组织中过氧化物酶(POD)活性。结果：经测定，实验组小组肝组织过氧化物酶(POD)活性高于对照组。统计学处理采用t检验，二者差异有显著性(P<0.005)。结论：上述结果表明，小鼠饮用经一定强度磁场处理的水，经一定时间后其机体清除自由基的能力有显著提高。
, http://www.100md.com 中图分类号：R64 文献标识码：A
文章编号：1005-202X(1999)04-0256-02
Effects of magnetized water on the activities of liver POD in mice
LI Xiao-lin, LU Xia-ling, FAN Ying-jie, et al.
(Norman Bethune University of Medical sciences Dep. of
Biochemistry; Dep.of Physics,Jilin Changchun 130021,China)
Abstract: Purpose: Study the influence of the activities of liver peroxidase (POD) in the mice which drank the magnetized water. Method :The Kunming mice were divided randomly into experimental group and control group. The mice of experimental group drank magnetized water and the mice of control group drank common water. After 15 days the activities of liver POD were measured by using Guaiacol colorimetric methods (I). Result: The POD activities of experimental group are statistically higher than those of control group (P<0.005). Conclusions: The result show that after the mice have been drunk magnetized water with a certain intersity for a period of time, the abilities of the mice to remove free radicals were obviously enhanced.
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Key words: Peroxidase (POD); magnetized water; antioxidas; free radicals
磁处理水的生物效应是近年研究探讨的热点之一。我们曾研究过它对生物机体自由基代谢及某些抗氧化酶活性的影响[1]。目前尚未见磁处理水对机体过氧化物酶活性影响的研究报道。过氧化物酶(POD)是生物机体内主要的抗氧化酶之一，它协同超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及过氧化氢酶(CAT)一起分解体内自由基代谢产物H2O2，使其变成无害的水，保护机体免受氧自由基的损伤。作者在以往研究的基础上，进一步观察了磁处理水对机体POD活性的影响。
1 材料和方法
(1) 实验动物采用昆明种小白鼠共16只(由本校实验动物部提供)，雌性，体重为19～22克，1.5月龄。将其随机分成实验和对照两组，每组各8只。实验组小鼠自由饮用磁处理水，对照组小鼠饮用自来水，两组饲料相同。磁水器由哈尔滨磁应用研究所提供，H型场强磁水器，用CST-11A型特斯拉计测量，其中心磁场强度为35 mT，自来水预先在磁水器中放置4 h后并始终置于磁水器中供小鼠饮用，每天饮用新鲜磁处理水。
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(2)过氧化物酶测定采用愈创木酚比色法(I法)[2]。其原理为，在过氧化物酶存在的条件下，愈创木酚能被H2O2氧化成四愈创木酚，溶液呈橙色或橙红色。在20℃条件下经15 min后，POD活性变化符合在一定浓度下的[Ag+]标准曲线的浓度范围，因而根据[Ag+]标准曲线即可求出POD活性。
[Ag+]标准曲线的制作：在试管中分别加入硝酸银标准液(0.787 mg/ml)0.5，1.0，2.0，3.0，4.0 ml，每管分别补加蒸馏水至8 ml，再加入0.3%愈创木酚1 ml，混匀，当试管内温度达20℃时，迅速加入3%硫酸铵溶液1 ml，摇匀后，20℃，15 min水浴(从加过硫酸铵溶液计时)，再分别加入0.54N H2SO4溶液2 ml，以蒸馏水为空白参比，475 nm比色，用722型分光光度计(上海第三分析仪器厂)测定OD值。以OD值对[Ag+]浓度绘制标准曲线。
, http://www.100md.com
酶液的提取：将饲养15天后的实验组、对照组小鼠处死每只鼠分别取肝组织1 g，加预冷5%CaCl2溶液少许冰水浴中匀浆，再加入20 ml预冷5%CaCl2溶液，于4℃，12000 r/min离心20 min，(KR20000T高速冷冻离心机,日本产)，上清即为酶液。
POD活力测定：在试管中加入适量酶提取液，每管中补加蒸馏水至8 ml，再加入0.3%愈创木酚1 ml，20℃下摇匀，然后加入0.5N H2O2 1 ml，20℃水浴中保温15 min(从加入H2O2时计时)，立即加入2 ml丙酮，摇匀。475 nm比色，OD值直接从标准曲线中查找相应的[Ag+]浓度，即可计算出POD的活性。酶活性单位为：1 g试样中所含有的酶在1 min内氧化愈创木酚的微摩尔数。
2 结果
, 百拇医药
表1 小鼠肝组织POD活性(μmol/g.min) 组 别
n
POD活性(
±SD)实验组
8
0.9957±0.1251
对照组
8
0.7315±0.1626
t=3.6432 P<0.005
由上表可见，经饮用磁处理水15天后，小鼠肝组织中POD活性高于对照组，统计学处理采用t检验，二者差异有显著性(P<0.005)。
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3 讨论
近几十年来的研究表明，机体内的自由基代谢失调，必将导致各种疾病的发生、恶化及衰老过程的加速。机体内清除自由基的酶类，主要有超氧化物歧化酶(SOD)，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)及过氧化物酶(POD)。超氧化物歧化酶能将超氧负离子自由基歧化为H2O2和氧，而过氧化物酶通常与过氧化氢酶及谷胱甘肽过氧化物酶协同作用，将超氧化物歧化酶歧化自由基的产物H2O2转变成无害的水和氧，从而消除H2O2对机体造成的毒性。本研究结果提示我们饮用一定时间磁处理水可使机体中过氧化物酶的活性提高。我们以往的研究表明，饮用磁处理水的小鼠全血过氧化氢酶的活性实验组均高于对照组(P<0.05)，而全血谷胱甘肽过氧化物酶活性(雄性)实验组亦高于对照组(P<0.05)，雌性虽高于对照组，但无统计学上差异。而超氧化物歧化酶的活性实验组较对照组高(P<0.05)[1]。本文所报道的结果进一步表明，饮用磁处理水，在一定程度上可激活机体的抗氧化酶活性。
, http://www.100md.com
近年来，磁处理水应用于临床某些疾病治疗及保健日益增多，其产生的生物效应的机理也十分复杂，涉及的因素亦很多，已报道经磁场处理后水的渗透压、粘滞系数、电导率等物理、化学性质均发生了一定的宏观以至于微观上的改变[3]，至于它为什么影响到机体某些抗氧化酶的活性，是否与其理化性质的改变有关，其机理尚待进一步实验研究证实。
参考文献：
1 刘吉民, 付妍, 谢绛利. 饮用磁化水小鼠抗氧化酶活力变化实验研究 [J]. 白求恩医科大学学报,1996，22(4):345-346.
2 陈勤.抗衰老研究实验方法[M].北京: 中国医药科技出版社,1996.462-463.
3 李国栋,周万松,郭立文.生物磁学--应用、技术、原理[M].北京:国防工业出版社,1993.226-229.
收稿日期：1999-02-25, 百拇医药