抗结核菌抗体3种测定方法临床应用评价
作者：胡忠义 靳安佳 殷扣福 王惠峰
单位：胡忠义 靳安佳上海市结核病防治中心，上海 200031；殷扣福 上海闵行区结防院；王惠 上海奉贤结防院
关键词：肺结核；抗结核菌抗体；免疫色谱层析法；斑点免疫金渗滤法；酶联免疫吸附试验
临床检验杂志990413 用进口免疫色谱层析抗结核菌抗体测试卡(ICT-TB卡)对128例肺结核病人血清和103份对照血清进行测试，并与国产免疫金渗滤法(DIGFA)和38 kD抗原酶联免疫试剂(ELISA)进行比较。
1 材料与方法
1.1 标本 128份活动性肺结核病人血清取自本院及闵行、奉贤结防院住院病人(肺结核的诊断依据为痰涂片抗酸杆菌检查及痰培养、胸部X线、结核菌素试验和临床表现等)。53份其它呼吸系统疾病(包括肺癌、气管炎、哮喘、支气管扩张等)血清取自我院门诊病人。50份健康人血清取自献血员。
, http://www.100md.com
1.2 试剂 ICT-TB卡为澳大利亚ICT诊断试剂公司产品，LOT 021857；DIGFA试剂为上海福达生物制品公司产品，批号980216；ELISA试剂为上海晶莹生物制品公司研制的结核杆菌重组38 kD抗原ELISA测试盒，批号984010。
1.3 方法 抗结核菌抗体测定采用双盲法，操作按说明书进行。痰结核菌检查按《全国临床检验操作规程》进行。
2 结果
2.1 3种方法测定抗结核菌抗体结果比较
231份血清标本，3种方法测定结果见表1。3种方法的敏感性、特异性、阳性和阴性预测值及符合率见表2。经统计学处理，3种方法的检测结果差异均无显著性(均P>0.05)。
表1 3种方法测定血清抗结核菌抗体阳性数比较 组 别
, 百拇医药
血清份数
ICT-TB卡
DIGFA-福达
ELISA-38 kD
肺结核组
128
89
98
95
疾病对照组
53
2
4
, 百拇医药
3
健康对照组
50
2
3
2
2.2 3种方法测定结果与痰菌检查比较
128例肺结核，痰菌检查阳性58例(45.3%)，阴性70例(54.7%)，同时用3种方法测定血清抗结核菌抗体结果见表3。3种方法的测定结果与痰菌检查的总符合率分别为60.2%、60.9%和60.2%。表2 3种方法的敏感性、特异性、阳性和阴性预测值及符合率(%) 方 法
血清份数
敏感性
, 百拇医药
特异性
阳性预测值
阴性预测值
符合率
ICT-TB卡
231
69.5
96.1
95.7
71.7
81.4
DIGFA
231
, 百拇医药
76.6
93.2
93.3
76.2
84.0
ELISA
231
74.2
95.1
95.0
74.8
83.5
表3 痰涂片与抗结核菌抗体测定结果比较 方 法
, 百拇医药
涂片阳性
涂片阴性
血清份数
阳性数(%)
血清份数
阳性数(%)
ICT-TB卡
58
48(82.9)
70
41(58.6)
DIGFA-福达
58
, 百拇医药
53(91.4)
70
45(64.3)
ELISA-38 kD
58
51(87.9)
70
44(62.9)
2.3 3种方法联合测定结果分析
128份肺结核者血清，3种方法测定结果均为阳性58份，均为阴性14份，其余56份则为1种或2种方法测定阳性而另外方法为阴性。因此，用2种或3种方法联合测定可提高抗结核菌抗体阳性检出率，而其假阳性无明显升高，见表4。表4 3种方法联合测定抗结核菌抗体结果* 测 定 方 法
, 百拇医药
肺结核
对照
份数
阳性数(%)
份数
阳性数(%)
ICT-TB卡+DIGFA
128
104(81.3)
103
8(7.8)
ICT-TB卡+ELISA
, http://www.100md.com 128
102(79.7)
103
6(5.8)
DIGFA+ELISA
128
109(85.2)
103
9(8.7)
ICT-TB卡+DIGFA+ELISA
128
114(89.1)
, http://www.100md.com
103
10(9.7)
*1种方法测定结果阳性，此组结果即为阳性
2.4 3种方法的重复性试验
5份抗结核菌抗体阳性血清，分别用3种方法在同一天内各测定3次，结果均为阳性；同样的血清，每天测定一次，连续5天，结果3种方法测定结果均为阳性。
3 讨论
ICT-TB卡采用5种结核菌抗原(1种为38 kD、两种分泌蛋白和两种标记蛋白)[1]包被层析条，故可同时检测5种结核菌抗原的抗体，同时又因这5种重组抗原纯度很高，所以检测特异性很强；而DIGFA(福达)试剂采用结核菌脂阿拉伯甘露聚糖为抗原，具有属特异性[2]；ELISA(晶莹)试剂采用结核菌重组38 kD为抗原，同样具有很强的敏感性和特异性。本文3种方法所用试剂的抗原成份不同，因此检测结果可能不同。但应用结果表明，尽管敏感性和特异性有所差异，但差异均无显著性(均P>0.05)，说明这3种试剂的测定性能近似。因此，用户可根据实际情况，选用价廉、操作简便的国产试剂。同时又因联合应用2种或3种试剂测定可获得更高的阳性率，所以在临床高度怀疑为结核的患者可采用联合测定法；而对于需进行鉴别诊断的患者，可采用高特异性的试剂进行测定，以减少假阳性。另外，无论采用哪种试剂测定，均需注意选用新鲜血清，同时加样剂量必须严格控制，否则将影响结果的准确性。
, 百拇医药
参考文献
1 Zhou A T,Ma W L,Zhang P Y,et al.Detection of pulmonary and extrapulmonary tuberculosis patients with the 38-kilodalton antigen from Mycobacterium tuberculosis in a rapid membrane-based assay.Clin Diag Lab Immun,1996，3：337～341
2 鲁启超，董云秋.血清抗结核分支杆菌抗体对结核病的诊断价值.中华结核和呼吸杂志，1998,21:84
(1998-07-10收稿，1998-11-03修回), 百拇医药
单位：胡忠义 靳安佳上海市结核病防治中心，上海 200031；殷扣福 上海闵行区结防院；王惠 上海奉贤结防院
关键词：肺结核；抗结核菌抗体；免疫色谱层析法；斑点免疫金渗滤法；酶联免疫吸附试验
临床检验杂志990413 用进口免疫色谱层析抗结核菌抗体测试卡(ICT-TB卡)对128例肺结核病人血清和103份对照血清进行测试，并与国产免疫金渗滤法(DIGFA)和38 kD抗原酶联免疫试剂(ELISA)进行比较。
1 材料与方法
1.1 标本 128份活动性肺结核病人血清取自本院及闵行、奉贤结防院住院病人(肺结核的诊断依据为痰涂片抗酸杆菌检查及痰培养、胸部X线、结核菌素试验和临床表现等)。53份其它呼吸系统疾病(包括肺癌、气管炎、哮喘、支气管扩张等)血清取自我院门诊病人。50份健康人血清取自献血员。
, http://www.100md.com
1.2 试剂 ICT-TB卡为澳大利亚ICT诊断试剂公司产品，LOT 021857；DIGFA试剂为上海福达生物制品公司产品，批号980216；ELISA试剂为上海晶莹生物制品公司研制的结核杆菌重组38 kD抗原ELISA测试盒，批号984010。
1.3 方法 抗结核菌抗体测定采用双盲法，操作按说明书进行。痰结核菌检查按《全国临床检验操作规程》进行。
2 结果
2.1 3种方法测定抗结核菌抗体结果比较
231份血清标本，3种方法测定结果见表1。3种方法的敏感性、特异性、阳性和阴性预测值及符合率见表2。经统计学处理，3种方法的检测结果差异均无显著性(均P>0.05)。
表1 3种方法测定血清抗结核菌抗体阳性数比较 组 别
, 百拇医药
血清份数
ICT-TB卡
DIGFA-福达
ELISA-38 kD
肺结核组
128
89
98
95
疾病对照组
53
2
4
, 百拇医药
3
健康对照组
50
2
3
2
2.2 3种方法测定结果与痰菌检查比较
128例肺结核，痰菌检查阳性58例(45.3%)，阴性70例(54.7%)，同时用3种方法测定血清抗结核菌抗体结果见表3。3种方法的测定结果与痰菌检查的总符合率分别为60.2%、60.9%和60.2%。表2 3种方法的敏感性、特异性、阳性和阴性预测值及符合率(%) 方 法
血清份数
敏感性
, 百拇医药
特异性
阳性预测值
阴性预测值
符合率
ICT-TB卡
231
69.5
96.1
95.7
71.7
81.4
DIGFA
231
, 百拇医药
76.6
93.2
93.3
76.2
84.0
ELISA
231
74.2
95.1
95.0
74.8
83.5
表3 痰涂片与抗结核菌抗体测定结果比较 方 法
, 百拇医药
涂片阳性
涂片阴性
血清份数
阳性数(%)
血清份数
阳性数(%)
ICT-TB卡
58
48(82.9)
70
41(58.6)
DIGFA-福达
58
, 百拇医药
53(91.4)
70
45(64.3)
ELISA-38 kD
58
51(87.9)
70
44(62.9)
2.3 3种方法联合测定结果分析
128份肺结核者血清，3种方法测定结果均为阳性58份，均为阴性14份，其余56份则为1种或2种方法测定阳性而另外方法为阴性。因此，用2种或3种方法联合测定可提高抗结核菌抗体阳性检出率，而其假阳性无明显升高，见表4。表4 3种方法联合测定抗结核菌抗体结果* 测 定 方 法
, 百拇医药
肺结核
对照
份数
阳性数(%)
份数
阳性数(%)
ICT-TB卡+DIGFA
128
104(81.3)
103
8(7.8)
ICT-TB卡+ELISA
, http://www.100md.com 128
102(79.7)
103
6(5.8)
DIGFA+ELISA
128
109(85.2)
103
9(8.7)
ICT-TB卡+DIGFA+ELISA
128
114(89.1)
, http://www.100md.com
103
10(9.7)
*1种方法测定结果阳性，此组结果即为阳性
2.4 3种方法的重复性试验
5份抗结核菌抗体阳性血清，分别用3种方法在同一天内各测定3次，结果均为阳性；同样的血清，每天测定一次，连续5天，结果3种方法测定结果均为阳性。
3 讨论
ICT-TB卡采用5种结核菌抗原(1种为38 kD、两种分泌蛋白和两种标记蛋白)[1]包被层析条，故可同时检测5种结核菌抗原的抗体，同时又因这5种重组抗原纯度很高，所以检测特异性很强；而DIGFA(福达)试剂采用结核菌脂阿拉伯甘露聚糖为抗原，具有属特异性[2]；ELISA(晶莹)试剂采用结核菌重组38 kD为抗原，同样具有很强的敏感性和特异性。本文3种方法所用试剂的抗原成份不同，因此检测结果可能不同。但应用结果表明，尽管敏感性和特异性有所差异，但差异均无显著性(均P>0.05)，说明这3种试剂的测定性能近似。因此，用户可根据实际情况，选用价廉、操作简便的国产试剂。同时又因联合应用2种或3种试剂测定可获得更高的阳性率，所以在临床高度怀疑为结核的患者可采用联合测定法；而对于需进行鉴别诊断的患者，可采用高特异性的试剂进行测定，以减少假阳性。另外，无论采用哪种试剂测定，均需注意选用新鲜血清，同时加样剂量必须严格控制，否则将影响结果的准确性。
, 百拇医药
参考文献
1 Zhou A T,Ma W L,Zhang P Y,et al.Detection of pulmonary and extrapulmonary tuberculosis patients with the 38-kilodalton antigen from Mycobacterium tuberculosis in a rapid membrane-based assay.Clin Diag Lab Immun,1996，3：337～341
2 鲁启超，董云秋.血清抗结核分支杆菌抗体对结核病的诊断价值.中华结核和呼吸杂志，1998,21:84
(1998-07-10收稿，1998-11-03修回), 百拇医药