紫苏子质量标准规范化的研究△ II.α-亚麻酸乙酯的制备与鉴定
作者：王威 李曼杰 刘继华 闫喜英 王永奇
单位：吉林省中医中药研究院(长春 130021)
关键词：紫苏子；α-亚麻酸乙酯；尿素包合；硝酸银-硅胶柱层析
990412 摘 要 采用尿素包合与硝酸银-硅胶柱层析结合法，从紫苏Perilla frutescens(L.)Britt.的干燥成熟果实中分离、衍生化得到α-亚麻酸乙酯(all cis-9,12,15-octadecatrienoic acid ethyl ester).
紫苏子为唇形科植物紫苏Perilla frutescens (L.) Britt.的干燥成熟果实，其脂肪油中α-亚麻酸(all cis-9,12,15-octadecatrienoic acid)含量达69.77%[1，2]。α-亚麻酸具有降血脂、降血压、抗血栓、抗过敏、抗癌等作用[3～7]。为建立紫苏子规范化的质量标准，我们进行了其含量测定用对照品α-亚麻酸乙酯的制备和鉴定。
, 百拇医药
1 仪器和试剂
PE-9000型气相色谱仪；Varian Unity-400型核磁共振仪。原料药材紫苏子采自吉林省延吉市市郊，经本院生药研究室严仲铠研究员鉴定为唇形科紫苏属植物紫苏Perilla frutescens (L.) Britt.的干燥成熟果实。柱层析硅胶和薄层层析硅胶G为青岛海洋化工厂产品；硝酸银为吉林市龙潭试剂厂产品；展开剂：石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯-甲醇(68∶4∶1)；显色剂：10%磷钼酸乙醇溶液；所用试剂均为分析纯。
2 气相色谱条件
检测器为氢火焰离子化检测器。柱长2 m,内径3.2 mm，以丁二酸二乙二醇聚酯(DEGS)为固定相涂布于Chromosorb W(80～100 目)上，浓度15%。载气：氮气，流速40 mL/min，柱温190℃，进样口温度240℃，检测器温度240℃，H2：0.4 kPa,Air:0.5 kPa.含量测定采用峰面积归一化法。
, http://www.100md.com
3 提取和分离
3.1 总脂肪油的提取：取紫苏子200 g，石油醚(60℃～90℃)室温提取3次，每次24 h，合并提取液，减压回收石油醚至尽，得黄色透明油状液体88.48 g(收率44.24%)。相对体积质量0.930，n20℃D1.4880，气相色谱法测定α-亚麻酸含量为62.17%。
3.2 尿素包合法分离：取黄色透明油状液体50 g，加入5 倍量1 mol/L氢氧化钾乙醇溶液，回流2 h，减压回收乙醇至无醇味。缓慢加入稀盐酸并不断搅拌，调至pH=1，分液弃去酸水液。加入6 倍量乙醇，分3次加入2 倍量尿素包合，减压回收乙醇至无醇味。加入3 倍量2%硫酸乙醇溶液，70℃水浴回流4 h，减压回收乙醇至无醇味。加入等体积石油醚(60℃～90℃)萃取，分取石油醚层，水洗至中性，无水硫酸钠干燥，减压回收石油醚至尽，得红棕色油状液体16.67 g(收率33.35%)，气相色谱法测定α-亚麻酸乙酯含量为87.95%。
, http://www.100md.com
3.3 柱层析分离：在避光条件下，取红棕色油状液体3.3 g上制备好的20%硝酸银-硅胶柱，以石油醚(60℃～90℃)-醋酸乙酯-甲醇(34∶2∶1)洗脱，TLC检视流份55～91为单一斑点，合并，减压充氮回收溶剂，低温真空干燥得无色油状液体1.8 g，气相色谱法测定纯度为99.89%。
4 鉴定
α-亚麻酸乙酯经1H NMR、13C NMR测定数据与标准图谱对照基本一致。
致谢：中国科学院长春应用化学研究所代测核磁共振谱。
*Address:Wang Wei ,Jilin Academy of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica ,Changchun
, 百拇医药
△国家“九.五”中医药科技攻关项目
参 考 文 献
1 中华人民共和国药典(1995年版一部).广州：广东科技出版社，北京：化学工业出版社，1995：301
2 王永奇，等.中草药，1995，26(5)：236
3 郭 英，等.营养学报，1996，18(3)：268
4 Shimokawa,T.et al.Life Sciences,1988,43(25):2067
5 Hirano J，et al.Yukagaku,1991,40(10):942
6 Hashinoto A，et al.Prostaglandins,1988,36(1):3
7 Hirose M，et al.Carcinogenesis,1990,11(5):731
(1998-10-25收稿), http://www.100md.com
单位：吉林省中医中药研究院(长春 130021)
关键词：紫苏子；α-亚麻酸乙酯；尿素包合；硝酸银-硅胶柱层析
990412 摘 要 采用尿素包合与硝酸银-硅胶柱层析结合法，从紫苏Perilla frutescens(L.)Britt.的干燥成熟果实中分离、衍生化得到α-亚麻酸乙酯(all cis-9,12,15-octadecatrienoic acid ethyl ester).
紫苏子为唇形科植物紫苏Perilla frutescens (L.) Britt.的干燥成熟果实，其脂肪油中α-亚麻酸(all cis-9,12,15-octadecatrienoic acid)含量达69.77%[1，2]。α-亚麻酸具有降血脂、降血压、抗血栓、抗过敏、抗癌等作用[3～7]。为建立紫苏子规范化的质量标准，我们进行了其含量测定用对照品α-亚麻酸乙酯的制备和鉴定。
, 百拇医药
1 仪器和试剂
PE-9000型气相色谱仪；Varian Unity-400型核磁共振仪。原料药材紫苏子采自吉林省延吉市市郊，经本院生药研究室严仲铠研究员鉴定为唇形科紫苏属植物紫苏Perilla frutescens (L.) Britt.的干燥成熟果实。柱层析硅胶和薄层层析硅胶G为青岛海洋化工厂产品；硝酸银为吉林市龙潭试剂厂产品；展开剂：石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯-甲醇(68∶4∶1)；显色剂：10%磷钼酸乙醇溶液；所用试剂均为分析纯。
2 气相色谱条件
检测器为氢火焰离子化检测器。柱长2 m,内径3.2 mm，以丁二酸二乙二醇聚酯(DEGS)为固定相涂布于Chromosorb W(80～100 目)上，浓度15%。载气：氮气，流速40 mL/min，柱温190℃，进样口温度240℃，检测器温度240℃，H2：0.4 kPa,Air:0.5 kPa.含量测定采用峰面积归一化法。
, http://www.100md.com
3 提取和分离
3.1 总脂肪油的提取：取紫苏子200 g，石油醚(60℃～90℃)室温提取3次，每次24 h，合并提取液，减压回收石油醚至尽，得黄色透明油状液体88.48 g(收率44.24%)。相对体积质量0.930，n20℃D1.4880，气相色谱法测定α-亚麻酸含量为62.17%。
3.2 尿素包合法分离：取黄色透明油状液体50 g，加入5 倍量1 mol/L氢氧化钾乙醇溶液，回流2 h，减压回收乙醇至无醇味。缓慢加入稀盐酸并不断搅拌，调至pH=1，分液弃去酸水液。加入6 倍量乙醇，分3次加入2 倍量尿素包合，减压回收乙醇至无醇味。加入3 倍量2%硫酸乙醇溶液，70℃水浴回流4 h，减压回收乙醇至无醇味。加入等体积石油醚(60℃～90℃)萃取，分取石油醚层，水洗至中性，无水硫酸钠干燥，减压回收石油醚至尽，得红棕色油状液体16.67 g(收率33.35%)，气相色谱法测定α-亚麻酸乙酯含量为87.95%。
, http://www.100md.com
3.3 柱层析分离：在避光条件下，取红棕色油状液体3.3 g上制备好的20%硝酸银-硅胶柱，以石油醚(60℃～90℃)-醋酸乙酯-甲醇(34∶2∶1)洗脱，TLC检视流份55～91为单一斑点，合并，减压充氮回收溶剂，低温真空干燥得无色油状液体1.8 g，气相色谱法测定纯度为99.89%。
4 鉴定
α-亚麻酸乙酯经1H NMR、13C NMR测定数据与标准图谱对照基本一致。
致谢：中国科学院长春应用化学研究所代测核磁共振谱。
*Address:Wang Wei ,Jilin Academy of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica ,Changchun
, 百拇医药
△国家“九.五”中医药科技攻关项目
参 考 文 献
1 中华人民共和国药典(1995年版一部).广州：广东科技出版社，北京：化学工业出版社，1995：301
2 王永奇，等.中草药，1995，26(5)：236
3 郭 英，等.营养学报，1996，18(3)：268
4 Shimokawa,T.et al.Life Sciences,1988,43(25):2067
5 Hirano J，et al.Yukagaku,1991,40(10):942
6 Hashinoto A，et al.Prostaglandins,1988,36(1):3
7 Hirose M，et al.Carcinogenesis,1990,11(5):731
(1998-10-25收稿), http://www.100md.com