雾化吸入活血化痰中药对实验动物气管分泌和微循环的影响
作者：邓时贵 欧润妹 李云英 区勇全
单位：广州中医药大学第二附属医院中心实验室，广州 510120
关键词：金喉雾化剂；药理学；喉炎；中药疗法；活血祛瘀药；治疗应用；投药，吸入
广州中医药大学学报990418摘要：为寻找治疗慢性喉炎的有效办法，观察了超声雾化吸入金喉雾化剂(由毛冬青、瓜蒌、薄荷等活血化痰中药组成)对小鼠气管酚红分泌、对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增强的拮抗作用和对大鼠肠系膜微循环的影响。结果显示该制剂能增加酚红的分泌量(P<0.05或P<0.01)；降低血管通透性(P<0.05)；并能解除微血管痉挛，减轻红细胞(RBC)聚集(P<0.01)。提示雾化吸入该药对改善慢性喉炎症状可能有一定的作用。
分类号：R285.5 文献标识码：A
, http://www.100md.com 文章编号：1007-3213(1999)04-0311-03
Influence of Spray Inhalation of Blood-circulation Activating
and Phlegm Removing Herbal Medicine on Tracheo-secretion and
Microcirculation in Experimental Animal
DENG Shigui OU Runmei LI Yunying OU Yongquan
(Central Laboratory,the Second Affiliated Hospital,Guangzhou University of TCM,Guangzhou 510120,China)
, http://www.100md.com
Abstract:Jinhou Nebula(JN)is a herbal preparation with blood-circulation activating and phlegm removing actions,and is applied by ultrasonic spray inhalation for chronic laryngitis.To investigate its mechanism,the phenol red secretion from trachea in mice,the permeability of celiac capillary induced by acetic acid in mice and the mesenteric microcirculation in rats were observed.The results showed that JN could obviously increase the phenol red secretion (P<0.05 or P<0.01),reduce the permeability of celiac capillary in mice (P<0.05)，relieve the spasm of micrangium and decrease the aggregation of red blood cells induced by noradrenaline in rats(P<0.05).It is indicated that JN possesses a certain effect in improving the symptoms of chronic laryngitis.
, http://www.100md.com
Key words:@JINHOU NEBULA/pharmocology; LARYNGITIS/TCD therapy;
BLOOD ACT STASIS REMOV DRUGS/therapeutic use;
ADMINISTRATION,INHALATION
慢性喉炎为常见多发病，严重者可导致喉癌[1]。目前在治疗上缺乏特效药或治疗手段。以往中医药常采用清热解毒法，疗效均不理想。近来国内有报道使用活血祛瘀、化痰散结药治疗该病取得满意疗效[2，3]。但主要是口服药物起全身作用，而有关喉炎中药超声雾化吸入治疗国内的文献报道甚少。本研究就超声雾化吸入金喉雾化剂治疗慢性喉炎的药理作用作了探讨。
1 材料
, 百拇医药 1.1 动物 78 只雄性NIH小鼠，体重 20～24 g；40 只雄性SD大鼠，体重(200±20)g，广东省医学实验动物中心提供。
1.2 试剂 金喉雾化剂实验用药(生药含量为 4.6 kg/L)，批号：980317，实验时用生理盐水稀释至所需倍数；金喉雾化剂临床用药(生药含量为0.92 kg/L)，批号：9709090-1；生理盐水注射液，批号：9802033。以上 3 种试剂由广东省中医院制剂室提供。NH4Cl(AR)批号：971203-2，广州化学试剂厂生产；硫酸庆大霉素注射液(8×104 U/支)批号：970808-2，四川省长征制药厂生产；醋酸泼尼松龙注射液(125 g/L)，批号：970305，仙居制药股份有限公司生产；复方丹参注射液，批号：9801151，江苏常熟制药厂生产；重酒石酸去甲肾上腺素，批号：971002，武汉制药厂生产。
1.3 仪器 CSW-1 超声雾化器，汕头市光电研究所生产；7550 紫外可见分光光度计，上海分析仪器厂生产；松下录像机、显微镜、XUEFENG 黑白显示器。
, http://www.100md.com
2 方法
2.1 超声雾化吸入金喉雾化剂对小鼠气管酚红分泌的影响 36 只NIH雄性小鼠随机分成生理盐水组，10%NH4Cl组，金喉雾化剂 3、5 倍浓缩液组(简称低剂量组和高剂量组)。各组动物在 10 L 的半封闭容器中放入 3～4 只小鼠超声雾化吸入相应药液，每次雾化 20 min(共雾化药液 35 mL)，上下午各雾化给药 1 次，连用 3 d。其余方法参考文献[4]、[5]。
2.2 超声雾化吸入金喉雾化剂对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增强的拮抗作用 42 只NIH雄性小鼠随机分成生理盐水组、庆大+泼尼松组(庆大霉素2.8×105U+泼尼松3.5 mL加生理盐水至35 mL)、高剂量组、低剂量组。给药方法同 2.1，其余方法参考文献[6]。
2.3 金喉雾化剂对大鼠肠系膜微循环的影响 40 只动物随机分为金喉雾化剂临床用药组(简称等效剂量组)、高剂量组、生理盐水组和复方丹参组，每只动物第 1 次完成实验后，重新拉另外一段肠系膜重复实验 1 次。造模重酒石酸去甲肾上腺素(NA)量为 10 μg/只，给NA使肠系膜微循环血流停止 1 min后即刻给试药，其他具体方法参考文献[3]。
, http://www.100md.com
2.4 统计方法 采用华西医科大学黄志勇等设计的《中国医学科学全书。医学统计学》统计软件包(2.1版本，1996 年 1 月)进行统计。
3 结果
3.1 超声雾化吸入金喉雾化剂对小鼠气管酚红分泌的影响 由表 1 可见，与生理盐水组比较，金喉雾化剂能增加小鼠气管酚红分泌(P<0.05，P<0.01)，浓度越高作用越明显，但作用不及 10%NH4Cl强。
表 1 金喉雾化剂对小鼠气管酚红分泌的影响(
±s) 组 别
N/只
w剂量/(g。g-1)
, http://www.100md.com
ρ分泌/(mg。L-1)
生理盐水组
8
1.06 ml/g
0.760±10105
10%NH4Cl组
9
0.106
2.036±0.456。*
高剂量组
, 百拇医药
9
0.488
1.667±0.390*
低剂量组
9
0.293
1.200±0.433*△△
*与生理盐水组比较P<0.05，**P<0.01；△△与10%NH4Cl组比较P<0.01
3.2 超声雾化吸入金喉雾化剂对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增强的拮抗作用
由表 2 可见，与生理盐水组比较，庆大+泼尼松组以及高浓度金喉雾化剂组都能抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的改变(P<0.05)；低浓度金喉雾化剂组亦有抑制血管通透性的趋势，但与生理盐水组比较差异无显著性；金喉雾化剂高低剂量组与庆大+泼尼松组比较差异不显著，提示金喉雾化剂有抗醋酸所致的急性炎症作用，其抗炎强度与吸入浓度有关。
, http://www.100md.com
表 2 金喉雾化剂对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增强的拮抗作用(±s) 组 别
N/只
w剂量/(g。g-1)
吸收度A(546 nm)
生理盐水组
9
1.06 mL/g
0.135±0.134
庆大+泼尼松组
, 百拇医药
11
-①
0.041±0.020*
高剂量组
11
4.88
0.046±0.052*
低剂量组
10
2.93
0.058±0.031
①庆大+泼尼松组剂量：庆大霉素(2.8×105U)+泼尼松(3.5 mL)加生理盐水至 35 mL，按 2.1 方法雾化给药；*与生理盐水组比较P<0.053.3 金喉雾化剂对大鼠肠系膜微循环的影响 由表 3 可见，与生理盐水组比较，金喉雾剂及复方丹参注射液对NA所致的肠系膜微血管痉挛均有解痉作用。表 4 结果表明，金喉雾化剂及复方丹参注射液对NA所致大鼠肠系膜微循环障碍有改善作用，表现在减轻红细胞聚集及加快血流恢复(与生理盐水组药后比较P>0.05)。
, http://www.100md.com
表 3 金喉雾化剂对大鼠肠系膜毛细血管变化的影响(±s) 组 别
N/只
w剂量/
(g。kg-1)
生理盐水组
9
2.1 mL/kg
0.056±0.167
, http://www.100md.com
0.037±0.111
丹参组
10
2.1
0.592±0.334*
0.617±0.315*
高剂量组
10
9.7
0.590±0.321*
0.643±0.200*
, 百拇医药
等效剂量组
9
1.9
0.704±0.286*
0.786±0.309*
*与生理盐水组比较P<0.01；①恢复率=(l药后-lNA)/(lNA-lNA后)表 4 金喉雾化剂对大鼠肠系膜微循环的影响(±s) 组别
给药
顺序
, 百拇医药
w剂量/
(g。kg-1)
N血管
/条
s流态变化/分
sRBC聚集变化/分
生理盐水组
NA前
0.31±0.17
0.14±0.09
, 百拇医药 药后
2.1 mL/kg
17
1.27±1.81*
0.62±0.41*
丹参组
NA前
0.34±0.15
0.17±0.07
药后
2.1
20
, http://www.100md.com
0.32±0.16△
0.17±0.07△
高剂量组
NA前
0.33±0.16
0.14±0.09
药后
9.7
16
0.33±0.16△
0.21±0.22△
, 百拇医药
等效剂量组
NA前
0.38±0.10
0.18±0.07
药后
1.9
17
0.35±0.13
0.16±0.09△
*与同组NA前比较P<0.05； 各组药后与生理盐水组药后比较△P<0.054 讨论
慢性喉炎患者喉部干燥不适，干咳无痰，或痰少而粘；喉检则见粘膜弥漫性充血、肿胀等炎症反应，甚至有小结或息肉形成，可能是由于气血失和，使喉间气滞血瘀，痰浊凝滞所致。新近报道指出喉炎声带小结存在血液流变学异常，血瘀不仅发生于小结局部，在形成之前机体已处于瘀血状态[7]。故治疗上应全身与局部治疗并重，而局部治疗亦应着重活血祛瘀、清热化痰、散结消肿。
, 百拇医药
根据喉炎病变，本院 1990 年以来有目的地观察以活血祛瘀、化痰散结为主的中药复方的疗效，1992 年研制成的“金喉片”取得令人满意的效果。在此基础上结合超声雾化能破坏液体表面张力和惯性力而产生 1～5 μm雾滴，使药液能迅速吸收、渗入到病变部位而产生作用，部分吸收到全身的药液则起到维持作用[8]。根据这一原理，我们开发研制了超声雾化吸入治疗慢性喉炎的“金喉雾化剂”。该制剂方中重用毛冬青，长于活血祛瘀，旨在改善喉局部血液循环，促进炎症与角化、纤维组织的吸收，为君药；瓜蒌皮甘寒，可清热化痰，稀释稠痰，止咳清嗓，为臣药；再配以薄荷脑及其他具有祛风化痰散结，清利咽喉之药为佐使。君臣佐使各司其职，共奏活血祛瘀，化痰清热消肿之功。
本研究结果表明，金喉雾化剂超声雾化吸入能促进气管分泌物分泌，起稀释痰液作用，利于瘀积在喉部痰液的排除。而局部炎症的抑制、恢复和改善肠系膜微循环障碍，说明该药可以使局部炎症减轻和病变部位的恢复。以上结果说明金喉雾化剂组方选药的科学性，提示用活血化瘀药治疗慢性喉炎的可行性。该制剂对该症型动物模型治疗效果将是今后研究的重点。
, 百拇医药
基金项目：广东省中医药管理局资助课题，编号 96041
作者简介：邓时贵，男，药师；
参考文献：
[1] 李惠萍，崔秀娟，关超，等.喉癌前病变 100 例分析[J].中华耳鼻咽喉科杂志，1995(5)：302
[2] 张续功.活血化瘀治疗慢性喉炎[J].新中医，1993(6)：23
[3] 李云英，薛宗义，莫莉莉，等.“金喉片”治疗声带小结的临床及药理实验研究[J].广州中医药大学学报，1995，12(5)：10
[4] 陈奇.中药药理研究方法学[M].上海：人民卫生出版社，1993.643，565
[5] 李仪奎.中药药理实验方法学[M].北京：上海科学技术出版社，1991.430
[6] 苗明三.实验动物和动物实验技术[M].中国中医药出版社，1997.247
[7] 郑昌雄，忻耀杰，张剑华，等.散结开音冲剂治疗声带小结和声带息肉及对血液流变性的影响[J].中医杂志，1993(8)：486
[8] 吴岳云，朱春林，曹伟春.中药超声雾化剂的研制[J].中成药，1996，18(1)：6
收稿日期：1998-11-09, http://www.100md.com
单位：广州中医药大学第二附属医院中心实验室，广州 510120
关键词：金喉雾化剂；药理学；喉炎；中药疗法；活血祛瘀药；治疗应用；投药，吸入
广州中医药大学学报990418摘要：为寻找治疗慢性喉炎的有效办法，观察了超声雾化吸入金喉雾化剂(由毛冬青、瓜蒌、薄荷等活血化痰中药组成)对小鼠气管酚红分泌、对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增强的拮抗作用和对大鼠肠系膜微循环的影响。结果显示该制剂能增加酚红的分泌量(P<0.05或P<0.01)；降低血管通透性(P<0.05)；并能解除微血管痉挛，减轻红细胞(RBC)聚集(P<0.01)。提示雾化吸入该药对改善慢性喉炎症状可能有一定的作用。
分类号：R285.5 文献标识码：A
, http://www.100md.com 文章编号：1007-3213(1999)04-0311-03
Influence of Spray Inhalation of Blood-circulation Activating
and Phlegm Removing Herbal Medicine on Tracheo-secretion and
Microcirculation in Experimental Animal
DENG Shigui OU Runmei LI Yunying OU Yongquan
(Central Laboratory,the Second Affiliated Hospital,Guangzhou University of TCM,Guangzhou 510120,China)
, http://www.100md.com
Abstract:Jinhou Nebula(JN)is a herbal preparation with blood-circulation activating and phlegm removing actions,and is applied by ultrasonic spray inhalation for chronic laryngitis.To investigate its mechanism,the phenol red secretion from trachea in mice,the permeability of celiac capillary induced by acetic acid in mice and the mesenteric microcirculation in rats were observed.The results showed that JN could obviously increase the phenol red secretion (P<0.05 or P<0.01),reduce the permeability of celiac capillary in mice (P<0.05)，relieve the spasm of micrangium and decrease the aggregation of red blood cells induced by noradrenaline in rats(P<0.05).It is indicated that JN possesses a certain effect in improving the symptoms of chronic laryngitis.
, http://www.100md.com
Key words:@JINHOU NEBULA/pharmocology; LARYNGITIS/TCD therapy;
BLOOD ACT STASIS REMOV DRUGS/therapeutic use;
ADMINISTRATION,INHALATION
慢性喉炎为常见多发病，严重者可导致喉癌[1]。目前在治疗上缺乏特效药或治疗手段。以往中医药常采用清热解毒法，疗效均不理想。近来国内有报道使用活血祛瘀、化痰散结药治疗该病取得满意疗效[2，3]。但主要是口服药物起全身作用，而有关喉炎中药超声雾化吸入治疗国内的文献报道甚少。本研究就超声雾化吸入金喉雾化剂治疗慢性喉炎的药理作用作了探讨。
1 材料
, 百拇医药 1.1 动物 78 只雄性NIH小鼠，体重 20～24 g；40 只雄性SD大鼠，体重(200±20)g，广东省医学实验动物中心提供。
1.2 试剂 金喉雾化剂实验用药(生药含量为 4.6 kg/L)，批号：980317，实验时用生理盐水稀释至所需倍数；金喉雾化剂临床用药(生药含量为0.92 kg/L)，批号：9709090-1；生理盐水注射液，批号：9802033。以上 3 种试剂由广东省中医院制剂室提供。NH4Cl(AR)批号：971203-2，广州化学试剂厂生产；硫酸庆大霉素注射液(8×104 U/支)批号：970808-2，四川省长征制药厂生产；醋酸泼尼松龙注射液(125 g/L)，批号：970305，仙居制药股份有限公司生产；复方丹参注射液，批号：9801151，江苏常熟制药厂生产；重酒石酸去甲肾上腺素，批号：971002，武汉制药厂生产。
1.3 仪器 CSW-1 超声雾化器，汕头市光电研究所生产；7550 紫外可见分光光度计，上海分析仪器厂生产；松下录像机、显微镜、XUEFENG 黑白显示器。
, http://www.100md.com
2 方法
2.1 超声雾化吸入金喉雾化剂对小鼠气管酚红分泌的影响 36 只NIH雄性小鼠随机分成生理盐水组，10%NH4Cl组，金喉雾化剂 3、5 倍浓缩液组(简称低剂量组和高剂量组)。各组动物在 10 L 的半封闭容器中放入 3～4 只小鼠超声雾化吸入相应药液，每次雾化 20 min(共雾化药液 35 mL)，上下午各雾化给药 1 次，连用 3 d。其余方法参考文献[4]、[5]。
2.2 超声雾化吸入金喉雾化剂对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增强的拮抗作用 42 只NIH雄性小鼠随机分成生理盐水组、庆大+泼尼松组(庆大霉素2.8×105U+泼尼松3.5 mL加生理盐水至35 mL)、高剂量组、低剂量组。给药方法同 2.1，其余方法参考文献[6]。
2.3 金喉雾化剂对大鼠肠系膜微循环的影响 40 只动物随机分为金喉雾化剂临床用药组(简称等效剂量组)、高剂量组、生理盐水组和复方丹参组，每只动物第 1 次完成实验后，重新拉另外一段肠系膜重复实验 1 次。造模重酒石酸去甲肾上腺素(NA)量为 10 μg/只，给NA使肠系膜微循环血流停止 1 min后即刻给试药，其他具体方法参考文献[3]。
, http://www.100md.com
2.4 统计方法 采用华西医科大学黄志勇等设计的《中国医学科学全书。医学统计学》统计软件包(2.1版本，1996 年 1 月)进行统计。
3 结果
3.1 超声雾化吸入金喉雾化剂对小鼠气管酚红分泌的影响 由表 1 可见，与生理盐水组比较，金喉雾化剂能增加小鼠气管酚红分泌(P<0.05，P<0.01)，浓度越高作用越明显，但作用不及 10%NH4Cl强。
表 1 金喉雾化剂对小鼠气管酚红分泌的影响(
±s) 组 别N/只
w剂量/(g。g-1)
, http://www.100md.com
ρ分泌/(mg。L-1)
生理盐水组
8
1.06 ml/g
0.760±10105
10%NH4Cl组
9
0.106
2.036±0.456。*
高剂量组
, 百拇医药
9
0.488
1.667±0.390*
低剂量组
9
0.293
1.200±0.433*△△
*与生理盐水组比较P<0.05，**P<0.01；△△与10%NH4Cl组比较P<0.01
3.2 超声雾化吸入金喉雾化剂对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增强的拮抗作用
由表 2 可见，与生理盐水组比较，庆大+泼尼松组以及高浓度金喉雾化剂组都能抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的改变(P<0.05)；低浓度金喉雾化剂组亦有抑制血管通透性的趋势，但与生理盐水组比较差异无显著性；金喉雾化剂高低剂量组与庆大+泼尼松组比较差异不显著，提示金喉雾化剂有抗醋酸所致的急性炎症作用，其抗炎强度与吸入浓度有关。
, http://www.100md.com
表 2 金喉雾化剂对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增强的拮抗作用(
±s) 组 别N/只
w剂量/(g。g-1)
吸收度A(546 nm)
生理盐水组
9
1.06 mL/g
0.135±0.134
庆大+泼尼松组
, 百拇医药
11
-①
0.041±0.020*
高剂量组
11
4.88
0.046±0.052*
低剂量组
10
2.93
0.058±0.031
①庆大+泼尼松组剂量：庆大霉素(2.8×105U)+泼尼松(3.5 mL)加生理盐水至 35 mL，按 2.1 方法雾化给药；*与生理盐水组比较P<0.053.3 金喉雾化剂对大鼠肠系膜微循环的影响 由表 3 可见，与生理盐水组比较，金喉雾剂及复方丹参注射液对NA所致的肠系膜微血管痉挛均有解痉作用。表 4 结果表明，金喉雾化剂及复方丹参注射液对NA所致大鼠肠系膜微循环障碍有改善作用，表现在减轻红细胞聚集及加快血流恢复(与生理盐水组药后比较P>0.05)。
, http://www.100md.com
表 3 金喉雾化剂对大鼠肠系膜毛细血管变化的影响(
±s) 组 别N/只
w剂量/
(g。kg-1)
生理盐水组
9
2.1 mL/kg
0.056±0.167
, http://www.100md.com
0.037±0.111
丹参组
10
2.1
0.592±0.334*
0.617±0.315*
高剂量组
10
9.7
0.590±0.321*
0.643±0.200*
, 百拇医药
等效剂量组
9
1.9
0.704±0.286*
0.786±0.309*
*与生理盐水组比较P<0.01；①恢复率=(l药后-lNA)/(lNA-lNA后)表 4 金喉雾化剂对大鼠肠系膜微循环的影响(
±s) 组别给药
顺序
, 百拇医药
w剂量/
(g。kg-1)
N血管
/条
s流态变化/分
sRBC聚集变化/分
生理盐水组
NA前
0.31±0.17
0.14±0.09
, 百拇医药 药后
2.1 mL/kg
17
1.27±1.81*
0.62±0.41*
丹参组
NA前
0.34±0.15
0.17±0.07
药后
2.1
20
, http://www.100md.com
0.32±0.16△
0.17±0.07△
高剂量组
NA前
0.33±0.16
0.14±0.09
药后
9.7
16
0.33±0.16△
0.21±0.22△
, 百拇医药
等效剂量组
NA前
0.38±0.10
0.18±0.07
药后
1.9
17
0.35±0.13
0.16±0.09△
*与同组NA前比较P<0.05； 各组药后与生理盐水组药后比较△P<0.054 讨论
慢性喉炎患者喉部干燥不适，干咳无痰，或痰少而粘；喉检则见粘膜弥漫性充血、肿胀等炎症反应，甚至有小结或息肉形成，可能是由于气血失和，使喉间气滞血瘀，痰浊凝滞所致。新近报道指出喉炎声带小结存在血液流变学异常，血瘀不仅发生于小结局部，在形成之前机体已处于瘀血状态[7]。故治疗上应全身与局部治疗并重，而局部治疗亦应着重活血祛瘀、清热化痰、散结消肿。
, 百拇医药
根据喉炎病变，本院 1990 年以来有目的地观察以活血祛瘀、化痰散结为主的中药复方的疗效，1992 年研制成的“金喉片”取得令人满意的效果。在此基础上结合超声雾化能破坏液体表面张力和惯性力而产生 1～5 μm雾滴，使药液能迅速吸收、渗入到病变部位而产生作用，部分吸收到全身的药液则起到维持作用[8]。根据这一原理，我们开发研制了超声雾化吸入治疗慢性喉炎的“金喉雾化剂”。该制剂方中重用毛冬青，长于活血祛瘀，旨在改善喉局部血液循环，促进炎症与角化、纤维组织的吸收，为君药；瓜蒌皮甘寒，可清热化痰，稀释稠痰，止咳清嗓，为臣药；再配以薄荷脑及其他具有祛风化痰散结，清利咽喉之药为佐使。君臣佐使各司其职，共奏活血祛瘀，化痰清热消肿之功。
本研究结果表明，金喉雾化剂超声雾化吸入能促进气管分泌物分泌，起稀释痰液作用，利于瘀积在喉部痰液的排除。而局部炎症的抑制、恢复和改善肠系膜微循环障碍，说明该药可以使局部炎症减轻和病变部位的恢复。以上结果说明金喉雾化剂组方选药的科学性，提示用活血化瘀药治疗慢性喉炎的可行性。该制剂对该症型动物模型治疗效果将是今后研究的重点。
, 百拇医药
基金项目：广东省中医药管理局资助课题，编号 96041
作者简介：邓时贵，男，药师；
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收稿日期：1998-11-09, http://www.100md.com