普鲁卡因胺对肺血栓栓塞及6-酮-前列腺素F1a 和血栓素B2生成的影响
作者：林继红 单春文 顾为望
单位：作者单位：林继红 顾为望 第一军医大学1实验动物中心；单春文 药理教研室，广州，510515
关键词：普鲁卡因胺；胶原；肾上腺素；6-酮-前列腺素F1a；血栓素B2；放射
第一军医大学学报990513 摘要：目的 研究普鲁卡因胺抗血栓及其作用机理。方法 给小鼠注射胶原和肾上腺素混合液，制造肺血栓模型，用放免法测定6-keto-PGF1a 和TXB2含量。结果 普鲁卡因胺5 mg/kg，10 mg/kg和20 mg/kg使小鼠的幸存率增加33.3% ～ 80.0%；使6-keto-PGF1a 的产量提高70.8% ～ 223.9%；而同时抑制TXB2的产生，抑制率为20.5% ～ 44.7%，6-keto-PGF1a 与TXB2的比值明显提高，对照组为1.2，药物组为2.6，4.0和7.1。结论 普鲁卡因胺具有明显的抗肺血栓作用，其作用与6-keto-PGF1a 和TXB2的比值增加有关。
, 百拇医药
免疫测定法
中图分类号：R965.2
Effects of procainamide on the pulmonary thromboembolism and the production of 6-keto-prostaglandin F1a and thromboxane B2
Lin Jihong1, Shan Chunwen2, Gu Weiwang1
1Experimental Animal Center, 2Department of pharmacology, First Military Medical University, Guangzhou, 510515
, 百拇医药
Abstract: Objective To study antithrombosis and its mechanism by procainamide. Methods Thrombosis was induced by injecting a mixture containing collagen and adrenaline into the tail vein. Radioimmunoassay was used to examine the level of 6-keto-prostaglandin F1a (6-keto-PGF1a ) and thromboxane B2(TXB2). Results The survival rate increased by 33.3% to 80%, the level of 6-keto-PGF1a increased by 70.8% - 223.9%, and the product of TXB2 decreased by 20.5%- 44.7% by procainamide 5, 10 and 20mg/kg in mice. The ratios of 6-keto-PGF1a to TXB2 enhanced markedly in which the ratios were 1.2(control group), 2.6, 4.0 and 7.1(drug group). Conclusion Procainamide inhibited markedly pulmonary thromboembolism and its mechanism is relative to the ratio of 6-keto-PGF1a to TXB2.
, http://www.100md.com
Key words: procainamide; collagen; adrenaline; 6-keto-prostaglandin; thromboxane B2; radioimmunoassay
体内外实验证明，普鲁卡因胺(PA)对ADP、花生四烯酸(AA)、凝血酶、CaCl2、A23187、可乐定、肾上腺素、胶原、血小板激活因子等诱导的血小板聚集具有显著的抑制作用[1～6]，同时抑制血栓素B2(TXB2)的产生[7]，抑制血小板黏附作用[8]，改善小鼠肺栓塞和降低丙二醛(MDA)的产生[9]，对血小板的超微结构具有保护作用[10，11]。本实验旨在进一步研究PA抑制小鼠肺血栓栓塞作用及其与前列腺素的代谢产物6-酮-前列腺素F1a (6-keto-PGF1a )和血栓素A2的代谢产物TXB2的关系。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 试剂和仪器 PA购自北京制药厂。肾上腺素购自广东制药厂。胶原购自Sigma公司。6-keto-PGF1a 和TXB2放免测试药盒由解放军总医院东亚放免研究所提供。LS9800液体计数器由Beckman生产。
1.2 抗肺血栓栓塞实验[10] 取雄性昆明种小鼠90只，体质量30 ～ 35 g，随机分成6组，每组15只。第1组为生理盐水组，第2 ～ 5组为5 、10、20 mg/kg PA组，第6组为200 mg/kg甘露醇组。各组腹腔注射药物后1 h，尾静脉注射100 m l胶原(10 m g)和肾上腺素(5 m g)混合液。观察小鼠的存活数。
1.3 6-keto-PGF1a 和TXB2含量的测定 动物分组和给药方法同肺血栓栓塞实验。在小鼠给予胶原和肾上腺素混合液3 min后(在小鼠形成肺栓塞死亡前)进行乙醚麻醉，颈静脉取血，以枸橼酸钠抗凝，在4℃下以3 000 r/min离心，取上清，以乙酸乙酯提取6-keto-PGF1a 和TXB2。参照文献[12]和放免药盒说明书操作。根据标准曲线求出样品中6-keto-PGF1a 和TXB2的含量。
, 百拇医药
2 结果
PA 5、10和20 mg/kg显著地抑制由胶原和肾上腺素混合液引起的小鼠肺血栓栓塞，与生理盐水对照组比较，抑制率分别为33.3%、53.3%和80.0%。阳性对照药甘露醇的抑制率也为80.0%(表1)。
表1 普鲁卡因胺对小鼠肺血栓栓塞的抑制作用(mg/kg)
Tab.1 Inhibition of the pulmonary thromboembolism by procainamide in mice
Drugs
Animal
Survival
Livability(%)
, http://www.100md.com
Saline Procainamide(mg/kg)
15
0
0
5.0
15
5
33.3*
10.0
15
8
53.3*
20.0
, http://www.100md.com
15
12
80.0**
Mannitol(mg/kg)
200.0
15
12
80.0**
*P <0.05,**P<0.01 in comparison with saline groupP <0.05,**P<0.01 in comparison with saline group
, http://www.100md.com 分别测定肺血栓后血液中的6-keto-PGF1a 和TXB2的含量，PA三个剂量组明显升高6-keto-PGF1a 的血中浓度，升高率分别为70.8%、134.2%和223.9%，阳性对照药甘露醇升高率为228.8%。同时明显降低TXB2的产量，降低率分别为20.5%、28.0%和44.7%。阳性对照药甘露醇降低率为38.8%。三种浓度PA的6-keto-PGF1a 与TXB2的比值分别为2.6、4.0和7.1。甘露醇组二者的比值为6.5。生理盐水对照组二者的比值为1.2(表2)。
表2 普鲁卡因胺对小鼠生成6-酮-PGF1a (6-keto-PGF1a )和血栓素B2(TXB2)的影响(
±s)
Tab.2 Effects of procainamide on the production of 6-keto- prostaglandin F1a (6-keto-PGF1a ) and thromboxane B2(TXB2)in mice (Mean±SD)
, 百拇医药
Group
6-keto-PGF1a
TXB2
6-keto-PGF1a /TXB2
Dose(pg/ml)
Ascent(%)
Dose(pg/ml)
Ascent(%)
Saline Procainamide(mg/kg)
152.3±70.7
125.2±20.2
, 百拇医药
1.2
5.0
260.2±73.94*
70.8
99.5±16.9*
-20.5
2.6
10.0
356.7±172.5*
134.2
90.1±31.9*
-28.0
, 百拇医药
4.0
20.0
493.3±263.6**
223.9
69.2±19.2**
-44.7
7.1
Mannitol(mg/kg)
200.0
500.8±240.5**
228.8
76.7±23.6**
, 百拇医药
-38.8
6.5
n=6 mice. *P<0.05，**P<0.01 in comparison with saline group
3 讨论
肺血栓形成是血小板在肺微循环聚集的结果，许多血小板聚集抑制剂，如环氧酶抑制剂，钙拮抗剂和自由基清除剂等都具有抗血栓作用。本实验结果证明，PA具有明显的抗血栓作用，且随着小鼠成活率增加而6-keto-PGF1a 与TXB2的比值明显增加，相关性接近显著。我们以前的实验研究表明PA对各种血小板聚集诱导剂诱导的血小板聚集、黏附和释放反应有明显的抑制作用[1-8]，所以抗血栓作用与此有关。我们以前的实验也充分证明PA具有明显的抑制血小板中花生四烯酸代谢产物MDA和TXB2的产生[7，9]。TXB2的前体TXA2是强的血小板聚集和血管收缩诱导剂。本研究除证明在小鼠肺血栓栓塞中PA抑制TXB2产生外，还证明PA增加6-keto-PGF1a 的产量，其前体物前列环素(PGI2)具有强效的抗血小板聚集和松弛血管平滑肌的作用。因此，PA抗小鼠肺血栓栓塞的作用和增加6-keto-PGF1a 与TXB2的比值有直接的关系。我们以前实验证明的PA抑制富含血小板血浆(PRP)中的血小板聚集作用也应当与增加二者的比值有关。本研究具有明显的量效关系。在本研究中阳性对照药甘露醇减轻肺血栓栓塞，提高6-keto-PGF1a 与TXB2的比值都有明显作用。
, 百拇医药
本实验证明PA具有明显的抗小鼠肺栓塞和增加6-keto-PGF1a 与TXB2比值的作用，后者为其抗血栓的机理之一。
作者简介：林继红，女，1970年出生；1991年毕业于中山医科大学；主管技师；电话85148208
参考文献
1.单春文，胡志军，梁启兆等. 普鲁卡因胺对家兔和豚鼠血小板聚集的影响. 中国药理学报,1986，7(1)：63
2.单春文，梁启兆. 普鲁卡因胺对兔血小板聚集的影响. 中国药理学报,1988，9(4)：388
3.Pang JX, Shan CW. Procainamide inhibits A23187-induced human platelet aggregation and increase in cytosolic free-Ca2+ in the cells. J Med Coll PLA, 1996,11(4)：241
, http://www.100md.com
4.Shan CW, Yang JW, Yang SQ. Blockage of clonidine-induced platelet aggregation in rabbits by procainamide. Acta Pharmacologica Sinica,1993,14(2):127
5.Shan CW. Effects of procainamide on human blood platelet aggregation. J Med Coll PLA, 1989 4(2)：134
6.金云海，林继红，单春文. 普鲁卡因胺对胶原和血小板激活因子诱导血小板聚集的影响. 第一军医大学学报,1998，18(1)：7
7.Shan CW, Lin JH, Jin YH. Inhibitiory effects of procainamide on rabbit platelet aggregation and thromboxane B2 production in vitro. Acta Pharmacologica Sinica,1998，19(2)：164
, 百拇医药
8.Yang YS, Zhou YX, Ma FB et al. Effct of procainamide on platelet adhesion in rats. Acta Pharmacologica Sinica,1994，15(4)：339
9.Pang JX, Sun LS, Wang XH et al. Effect of procainamide on pulmonary thromboembolism and platelet malondialdelyde in mice. Acta Pharmacologica Sinica,1996，17(6)：5002
10.Liu LP, Shan CW, Liu XH et al. Effct of procainamide on ultrastructure of blood platelet in rabbits. Acta Pharmacologica Sinica,1998，19(4)：376
11.林继红，刘连璞，单春文等. 普鲁卡因胺对血小板及其开放管道系统形态结构改变的影响. 中国医学物理学杂志,1999，16(1)：56
12.单春文，杨淑琴，何菡萏等. 3，4，5-三羟基-3-b -单-D-葡萄糖苷在体外对兔血小板聚集和产生血栓素B2的影响. 中国药理学报,1990，11(6)：527
(收稿日期：1998-12-27), 百拇医药
单位：作者单位：林继红 顾为望 第一军医大学1实验动物中心；单春文 药理教研室，广州，510515
关键词：普鲁卡因胺；胶原；肾上腺素；6-酮-前列腺素F1a；血栓素B2；放射
第一军医大学学报990513 摘要：目的 研究普鲁卡因胺抗血栓及其作用机理。方法 给小鼠注射胶原和肾上腺素混合液，制造肺血栓模型，用放免法测定6-keto-PGF1a 和TXB2含量。结果 普鲁卡因胺5 mg/kg，10 mg/kg和20 mg/kg使小鼠的幸存率增加33.3% ～ 80.0%；使6-keto-PGF1a 的产量提高70.8% ～ 223.9%；而同时抑制TXB2的产生，抑制率为20.5% ～ 44.7%，6-keto-PGF1a 与TXB2的比值明显提高，对照组为1.2，药物组为2.6，4.0和7.1。结论 普鲁卡因胺具有明显的抗肺血栓作用，其作用与6-keto-PGF1a 和TXB2的比值增加有关。
, 百拇医药
免疫测定法
中图分类号：R965.2
Effects of procainamide on the pulmonary thromboembolism and the production of 6-keto-prostaglandin F1a and thromboxane B2
Lin Jihong1, Shan Chunwen2, Gu Weiwang1
1Experimental Animal Center, 2Department of pharmacology, First Military Medical University, Guangzhou, 510515
, 百拇医药
Abstract: Objective To study antithrombosis and its mechanism by procainamide. Methods Thrombosis was induced by injecting a mixture containing collagen and adrenaline into the tail vein. Radioimmunoassay was used to examine the level of 6-keto-prostaglandin F1a (6-keto-PGF1a ) and thromboxane B2(TXB2). Results The survival rate increased by 33.3% to 80%, the level of 6-keto-PGF1a increased by 70.8% - 223.9%, and the product of TXB2 decreased by 20.5%- 44.7% by procainamide 5, 10 and 20mg/kg in mice. The ratios of 6-keto-PGF1a to TXB2 enhanced markedly in which the ratios were 1.2(control group), 2.6, 4.0 and 7.1(drug group). Conclusion Procainamide inhibited markedly pulmonary thromboembolism and its mechanism is relative to the ratio of 6-keto-PGF1a to TXB2.
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Key words: procainamide; collagen; adrenaline; 6-keto-prostaglandin; thromboxane B2; radioimmunoassay
体内外实验证明，普鲁卡因胺(PA)对ADP、花生四烯酸(AA)、凝血酶、CaCl2、A23187、可乐定、肾上腺素、胶原、血小板激活因子等诱导的血小板聚集具有显著的抑制作用[1～6]，同时抑制血栓素B2(TXB2)的产生[7]，抑制血小板黏附作用[8]，改善小鼠肺栓塞和降低丙二醛(MDA)的产生[9]，对血小板的超微结构具有保护作用[10，11]。本实验旨在进一步研究PA抑制小鼠肺血栓栓塞作用及其与前列腺素的代谢产物6-酮-前列腺素F1a (6-keto-PGF1a )和血栓素A2的代谢产物TXB2的关系。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 试剂和仪器 PA购自北京制药厂。肾上腺素购自广东制药厂。胶原购自Sigma公司。6-keto-PGF1a 和TXB2放免测试药盒由解放军总医院东亚放免研究所提供。LS9800液体计数器由Beckman生产。
1.2 抗肺血栓栓塞实验[10] 取雄性昆明种小鼠90只，体质量30 ～ 35 g，随机分成6组，每组15只。第1组为生理盐水组，第2 ～ 5组为5 、10、20 mg/kg PA组，第6组为200 mg/kg甘露醇组。各组腹腔注射药物后1 h，尾静脉注射100 m l胶原(10 m g)和肾上腺素(5 m g)混合液。观察小鼠的存活数。
1.3 6-keto-PGF1a 和TXB2含量的测定 动物分组和给药方法同肺血栓栓塞实验。在小鼠给予胶原和肾上腺素混合液3 min后(在小鼠形成肺栓塞死亡前)进行乙醚麻醉，颈静脉取血，以枸橼酸钠抗凝，在4℃下以3 000 r/min离心，取上清，以乙酸乙酯提取6-keto-PGF1a 和TXB2。参照文献[12]和放免药盒说明书操作。根据标准曲线求出样品中6-keto-PGF1a 和TXB2的含量。
, 百拇医药
2 结果
PA 5、10和20 mg/kg显著地抑制由胶原和肾上腺素混合液引起的小鼠肺血栓栓塞，与生理盐水对照组比较，抑制率分别为33.3%、53.3%和80.0%。阳性对照药甘露醇的抑制率也为80.0%(表1)。
表1 普鲁卡因胺对小鼠肺血栓栓塞的抑制作用(mg/kg)
Tab.1 Inhibition of the pulmonary thromboembolism by procainamide in mice
Drugs
Animal
Survival
Livability(%)
, http://www.100md.com
Saline Procainamide(mg/kg)
15
0
0
5.0
15
5
33.3*
10.0
15
8
53.3*
20.0
, http://www.100md.com
15
12
80.0**
Mannitol(mg/kg)
200.0
15
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*P <0.05,**P<0.01 in comparison with saline groupP <0.05,**P<0.01 in comparison with saline group
, http://www.100md.com 分别测定肺血栓后血液中的6-keto-PGF1a 和TXB2的含量，PA三个剂量组明显升高6-keto-PGF1a 的血中浓度，升高率分别为70.8%、134.2%和223.9%，阳性对照药甘露醇升高率为228.8%。同时明显降低TXB2的产量，降低率分别为20.5%、28.0%和44.7%。阳性对照药甘露醇降低率为38.8%。三种浓度PA的6-keto-PGF1a 与TXB2的比值分别为2.6、4.0和7.1。甘露醇组二者的比值为6.5。生理盐水对照组二者的比值为1.2(表2)。
表2 普鲁卡因胺对小鼠生成6-酮-PGF1a (6-keto-PGF1a )和血栓素B2(TXB2)的影响(
±s)Tab.2 Effects of procainamide on the production of 6-keto- prostaglandin F1a (6-keto-PGF1a ) and thromboxane B2(TXB2)in mice (Mean±SD)
, 百拇医药
Group
6-keto-PGF1a
TXB2
6-keto-PGF1a /TXB2
Dose(pg/ml)
Ascent(%)
Dose(pg/ml)
Ascent(%)
Saline Procainamide(mg/kg)
152.3±70.7
125.2±20.2
, 百拇医药
1.2
5.0
260.2±73.94*
70.8
99.5±16.9*
-20.5
2.6
10.0
356.7±172.5*
134.2
90.1±31.9*
-28.0
, 百拇医药
4.0
20.0
493.3±263.6**
223.9
69.2±19.2**
-44.7
7.1
Mannitol(mg/kg)
200.0
500.8±240.5**
228.8
76.7±23.6**
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-38.8
6.5
n=6 mice. *P<0.05，**P<0.01 in comparison with saline group
3 讨论
肺血栓形成是血小板在肺微循环聚集的结果，许多血小板聚集抑制剂，如环氧酶抑制剂，钙拮抗剂和自由基清除剂等都具有抗血栓作用。本实验结果证明，PA具有明显的抗血栓作用，且随着小鼠成活率增加而6-keto-PGF1a 与TXB2的比值明显增加，相关性接近显著。我们以前的实验研究表明PA对各种血小板聚集诱导剂诱导的血小板聚集、黏附和释放反应有明显的抑制作用[1-8]，所以抗血栓作用与此有关。我们以前的实验也充分证明PA具有明显的抑制血小板中花生四烯酸代谢产物MDA和TXB2的产生[7，9]。TXB2的前体TXA2是强的血小板聚集和血管收缩诱导剂。本研究除证明在小鼠肺血栓栓塞中PA抑制TXB2产生外，还证明PA增加6-keto-PGF1a 的产量，其前体物前列环素(PGI2)具有强效的抗血小板聚集和松弛血管平滑肌的作用。因此，PA抗小鼠肺血栓栓塞的作用和增加6-keto-PGF1a 与TXB2的比值有直接的关系。我们以前实验证明的PA抑制富含血小板血浆(PRP)中的血小板聚集作用也应当与增加二者的比值有关。本研究具有明显的量效关系。在本研究中阳性对照药甘露醇减轻肺血栓栓塞，提高6-keto-PGF1a 与TXB2的比值都有明显作用。
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本实验证明PA具有明显的抗小鼠肺栓塞和增加6-keto-PGF1a 与TXB2比值的作用，后者为其抗血栓的机理之一。
作者简介：林继红，女，1970年出生；1991年毕业于中山医科大学；主管技师；电话85148208
参考文献
1.单春文，胡志军，梁启兆等. 普鲁卡因胺对家兔和豚鼠血小板聚集的影响. 中国药理学报,1986，7(1)：63
2.单春文，梁启兆. 普鲁卡因胺对兔血小板聚集的影响. 中国药理学报,1988，9(4)：388
3.Pang JX, Shan CW. Procainamide inhibits A23187-induced human platelet aggregation and increase in cytosolic free-Ca2+ in the cells. J Med Coll PLA, 1996,11(4)：241
, http://www.100md.com
4.Shan CW, Yang JW, Yang SQ. Blockage of clonidine-induced platelet aggregation in rabbits by procainamide. Acta Pharmacologica Sinica,1993,14(2):127
5.Shan CW. Effects of procainamide on human blood platelet aggregation. J Med Coll PLA, 1989 4(2)：134
6.金云海，林继红，单春文. 普鲁卡因胺对胶原和血小板激活因子诱导血小板聚集的影响. 第一军医大学学报,1998，18(1)：7
7.Shan CW, Lin JH, Jin YH. Inhibitiory effects of procainamide on rabbit platelet aggregation and thromboxane B2 production in vitro. Acta Pharmacologica Sinica,1998，19(2)：164
, 百拇医药
8.Yang YS, Zhou YX, Ma FB et al. Effct of procainamide on platelet adhesion in rats. Acta Pharmacologica Sinica,1994，15(4)：339
9.Pang JX, Sun LS, Wang XH et al. Effect of procainamide on pulmonary thromboembolism and platelet malondialdelyde in mice. Acta Pharmacologica Sinica,1996，17(6)：5002
10.Liu LP, Shan CW, Liu XH et al. Effct of procainamide on ultrastructure of blood platelet in rabbits. Acta Pharmacologica Sinica,1998，19(4)：376
11.林继红，刘连璞，单春文等. 普鲁卡因胺对血小板及其开放管道系统形态结构改变的影响. 中国医学物理学杂志,1999，16(1)：56
12.单春文，杨淑琴，何菡萏等. 3，4，5-三羟基-3-b -单-D-葡萄糖苷在体外对兔血小板聚集和产生血栓素B2的影响. 中国药理学报,1990，11(6)：527
(收稿日期：1998-12-27), 百拇医药