卵巢粘液性肿瘤的神经内分泌分化
作者：江昌新 谭郁彬 李恩鸿 张大卫
单位：300070 天津医科大学病理教研室
关键词：卵巢肿瘤；免疫组织化学
中国医科990514 摘要 目的：探讨可溶性细胞间粘附分子(sICAM-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)在多发性硬化(MS)发生、发展中的作用。方法：采用ELISA方法，测定了30例MS患者血清中sICAM-1和TGF-β1的水平。结果：与对照组和NIND组相比，MS患者血清TGF-β1水平明显下降(P<0.01)，而sICAM-1水平则明显升高(P<0.01)。动态观察显示，随着病情的好转，TGF-β1水平逐渐升高，而sICAM-1水平则逐渐下降。MS患者头MRI上病灶越大，sICAM-1水平升高也越明显。结论：血清TGF-β1和sICAM-1的检测对判断MS患者的病情变化具有重要的临床实用价值。
, http://www.100md.com
Determining Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1 and Transforming Growth Factor-β1 in Serum from Multiple Sclerosis
He Zhiyi, L
Changlong, Liu Fengzhi, et al
Department of Neurology, The First Clinical College, China Medical University, Shenyang, 110001
ABSTRACT Objective: We were to explore the effects of soluble intercellular adhesion molecule-1 (sICAM-1) and transforming growth factor-β1 (TGF-β1) on the development of multiple sclerosis (MS). Methods: Levels of sICAM-1 and TGF-β1 in serum were measured in 30 patients with MS by ELISA method. Results: The level of TGF-β1 decreased, and the level of sICAM-1 increased significantly in the serum of MS, as compared with those in normal and non-inflammatory neurologic disease (NIND) groups (P<0.01). The level of sICAM-1 decreased, and the TGF-β1 levels increased after treatment of MS. The larger the sizes of foci in MRI were, the more obviously, the level of sICAM-1 increased. Conclusion: Measuring serum sICAM-1 and TGF-β1 might be important parameters for clinical evaluation in patients with MS.
, 百拇医药
KEY WORDS multiple sclerosis; sICAM-1; TGF-β1
细胞因子和粘附分子在多发性硬化(multiple sclerosis, MS)中的作用日益受到人们的重视[1]。本文对30例MS患者血清转化生长因子-β1(TGF-β1)和可溶性细胞间粘附分子(sICAM-1)的水平进行了研究，旨在探讨二者在MS发生、发展中的作用。
1 对象与方法
1.1 对象 MS患者30例，男17例，女13例。年龄16～50岁，平均年龄(30.5±15.8)岁。其中，良好型(stable MS)8例，缓解-复发型(relapsing-remitting MS, RRMS)14例，慢性进展型(chronic progressive MS, CPMS)8例。头颅MRI按受累部位依次为视神经、脑室旁、基底节、大脑半球、小脑、脑干及脊髓；病灶呈点状或融合成片两种。按病灶累积面积大小分为3组：(1)小灶组(病灶<5mm2)；(2)中灶组(病灶5～20mm2)；(3)大灶组(病灶>20mm2)。上述病例均符合Poser[2]等修订的诊断标准。
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对RRMS 14例中的10例患者给予甲基强的松龙500mg/d冲击治疗5d,氢化考的松100mg/d 7d，然后用强的松30mg/d口服治疗1个月后进行第2次采血。上述病例在采血前2周均未用过激素或其它免疫抑制剂。
非炎症性神经疾病对照组(NIND)30例，男16例，女14例，平均年龄(31.8±16.5)岁。包括脑血管病5例，震颤麻痹6例，周期性麻痹2例，脊髓空洞症4例，运动神经元病6例，癔病3例，偏头痛4例。
正常对照组(NC)30例，健康献血员，年龄、性别等均与MS组相匹配。
1.2 方法 采取空腹肘静脉血5ml，分离血清，-70℃保存备用。血清TGF-β1和sICAM-1的测定采用ELISA方法，试剂盒分别购于深圳市晶生实业有限公司和法国国际技术有限公司(Immunotech)，TGF-β1和sICAM-1的全部操作均按上述试剂盒说明书进行，OD值由美国产EL-309全自动酶标检测仪(Bio-TEK instruments, USA)测定。
, 百拇医药
根据各稀释标准品TGF-β1和sICAM-1的单位及OD值绘制各自的参考标准曲线，再根据标准曲线算出待测标本TGF-β1和sICAM-1的浓度。
2 结果
2.1 MS患者血清TGF-β1和sICAM-1水平的变化 与NC和NIND组相比，MS患者血清的TGF-β1水平明显下降(P<0.01)，而sICAM-1水平则明显升高(P<0.01)，见表1。
表1 MS患者血清TGF-β1和sICAM-1水平的变化(
±s) 组别
n
TGF-β1(μg/L)
, 百拇医药
sICAM-1(μg/L)
MS
30
20.5±9.2*
587.6±201.6
NIND
30
31.2±10.3
301.5±109.6
NC
30
34.5±12.5
, http://www.100md.com
265.5±90.7
与NC组和NIND组比较*P<0.01
2.2 MS各型血清中TGF-β1及sICAM-1水平的比较 与stable MS组相比，RRMS组和CPMS组的TGF-β1含量明显降低(P<0.05)，而sICAM-1水平则明显升高(P<0.01)，见表2。
表2 MS各型患者血清TGF-β1和sICAM-1水平的比较(±s) 组别
n
TGF-β1(μg/L)
, http://www.100md.com sICAM-1(μg/L)
RRMS
14
16.5±8.7*
596.5±201.3**
CPMS
8
18.9±9.5*
501.3±189.4**
Stable MS
8
, http://www.100md.com
30.3±14.1
289.6±107.6
与Stable MS组比较*P<0.05**P<0.01
2.3 MS患者血清TGF-β1和sICAM-1水平的相关性分析 TGF-β1和sICAM-1水平的相关系数
r=0.032，P>0.05，表明2者无明显相关关系。
2.4 MS患者治疗前、后血清TGF-β1和sICAM-1的水平变化 MS患者治疗前血清TGF-β1和sICAM-1水平分别为(21.1±8.6) μg/L和(706.6±
189.7) μg/L，与治疗后的(35.9±10.8) μg/L和(520.6±139.8) μg/L相比，前者明显升高(P<0.01)，而后者则明显下降(P<0.01)。
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2.5 MS患者头MRI病灶部位、大小与sICAM-1和TGF-β1的相关性分析 MS患者头MRI病灶大小与sICAM-1和TGF-β1水平的相关系数分别为
r1 =0.689，P<0.01；r2 =0.029，P>0.05。说明sICAM-1含量与头MRI病灶大小呈显著正相关关系，而与TGF-β1未见显著相关关系。另外，头MRI病灶部位与sICAM-1和TGF-β1水平均未见显著相关性。
3 讨论
随着分子生物学技术的发展，细胞因子和粘附分子在MS中的重要作用已引起众多学者们的关注。为探明其详细的作用机理，作者对MS患者血清TGF-β1和sICAM-1的水平进行了检测，结果显示，与NC组和NIND组相比，MS患者血清TGF-β1水平明显降低，而sICAM-1水平则明显升高。经用激素治疗后TGF-β1水平明显上升，而sICAM-1水平则与之相反，呈明显下降趋势。另外，从MS各分型结果来看，与stable MS组相比，RRMS和CPMS组中的TGF-β1的水平显著减少，而sICAM-1水平则明显升高。上述结果表明，TGF-β1和sICAM-1水平的高低可作为判断MS患者病情变化和疗效的指标之一。
, http://www.100md.com
于国平[3]等报道，免疫调节细胞因子TGF-β1在MS急性期病灶中的巨噬细胞、胶质细胞和脑血管内皮细胞中呈阳性表达。我们的结果也显示RRMS和CPMS的水平明显下降，说明TGF-β1的变化可以反映MS缓解或复发时的免疫状态，提示TGF-β1的降低可能参与MS的发生，并与疾病的活动有关。TGF-β1在MS的主要作用机理包括[4]：(1)抑制T细胞及B细胞功能；(2)介导IgM和IgG转换；(3)降低MHC-Ⅱ类抗原表达；(4)调节整合素表达；(5)抑制炎症反应及脑水肿。此外，TGF-β1还参与血管反应，影响细胞外基质蛋白酶的活性，从而对机体组织损伤的修复亦起重要的作用。
Dore-Dutty[5]等报告MS患者中可溶性细胞间粘附分子(sICAM-1)水平在活动期明显高于稳定期和正常对照，随着病情的好转，该值也逐渐下降。我们的结果也与之相类似。血清sICAM-1水平升高的临床意义尚不十分清楚，Tsukada[6]认为sICAM-1受某些介质(如TNF、IL-8、H2O2)等作用后，其活性可明显增强，将白细胞牢固地粘附于血管内皮细胞表面。结果，一方面可堵塞微循环通道，影响局部血液供应；另一方面活化的白细胞可释放大量的毒性氧自由基和蛋白水解酶，造成脑组织水肿，加重脑损伤。Hartung[7]等报道在MRI上显示有活动病灶的MS患者血清的sICAM-1水平明显升高。我们的结果也提示，MRI上病灶的大小与sICAM-1的水平呈显著的正相相关性，这表明血清sICAM-1的高低可能会在一定程度上反映病灶损害的严重程度。
, 百拇医药
目前人们正在探索如何发挥TGF-β1在中枢神经系统损伤中的保护和修复作用来达到治疗MS的目的。与此同时，也有学者[8]提出，应用抗粘附分子抗体以阻断粘附过程，或阻断粘附发生机制中的某一共同环节，减少或抑制T细胞介导的组织损伤，也有望成为自身免疫性疾病MS治疗中有效的方法。这些研究都可能会为今后临床治疗MS开辟一条新的途径。
参考文献
1 戚晓昆，朱克.粘附分子在炎性脱髓鞘病中的作用.中华神经科杂志，1997，30：375—378
2 Poser CM, Paty DW, Scheinberg L, et al. New diagnostic criteria for MS: guidelines for research protocols. Ann Neurol, 1983,13:227—231
, 百拇医药
3 于国平，朱克，田东华，等.多发性硬化症脑脱髓鞘病灶TGF-β1和bFGF的表达.中华神经科杂志，1998，31(2)：86—88
4 杜静，龚非力.TGF-β1与中枢神经系统疾病.国外医学免疫学分册，1997，20(2)：98—101
5 Dore-Duffy P, Newman W, Balabanov R, et al. Circulating, soluble adhesion proteins in cerebrospinal fluid and serum of patients with multiple sclerosis: correlation with clinical activity. Ann Neurol, 1995,37：55—62
6 Tsukada N, Matsuda M, Miyagi K, et al. Increased levels of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and tumor necrosis factor receptor in the cerebrospinal fluid of patients with multiple sclerosis. Neurology, 1993,43:2679—2682
7 Hartung HP, Micheal M, Reiners K, et al. Soluble ICAM-1 serum levels in multiple sclerosis and viral encephalitis. Neurology, 1993,43:2331—2335
8 杨欢，李静，肖波，等.T细胞亚群及粘附分子在实验性变态反应性神经炎中的作用.中华神经科杂志，1998，31：44—47
1998-05-29收稿, http://www.100md.com
单位：300070 天津医科大学病理教研室
关键词：卵巢肿瘤；免疫组织化学
中国医科990514 摘要 目的：探讨可溶性细胞间粘附分子(sICAM-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)在多发性硬化(MS)发生、发展中的作用。方法：采用ELISA方法，测定了30例MS患者血清中sICAM-1和TGF-β1的水平。结果：与对照组和NIND组相比，MS患者血清TGF-β1水平明显下降(P<0.01)，而sICAM-1水平则明显升高(P<0.01)。动态观察显示，随着病情的好转，TGF-β1水平逐渐升高，而sICAM-1水平则逐渐下降。MS患者头MRI上病灶越大，sICAM-1水平升高也越明显。结论：血清TGF-β1和sICAM-1的检测对判断MS患者的病情变化具有重要的临床实用价值。
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Determining Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1 and Transforming Growth Factor-β1 in Serum from Multiple Sclerosis
He Zhiyi, L
Changlong, Liu Fengzhi, et alDepartment of Neurology, The First Clinical College, China Medical University, Shenyang, 110001
ABSTRACT Objective: We were to explore the effects of soluble intercellular adhesion molecule-1 (sICAM-1) and transforming growth factor-β1 (TGF-β1) on the development of multiple sclerosis (MS). Methods: Levels of sICAM-1 and TGF-β1 in serum were measured in 30 patients with MS by ELISA method. Results: The level of TGF-β1 decreased, and the level of sICAM-1 increased significantly in the serum of MS, as compared with those in normal and non-inflammatory neurologic disease (NIND) groups (P<0.01). The level of sICAM-1 decreased, and the TGF-β1 levels increased after treatment of MS. The larger the sizes of foci in MRI were, the more obviously, the level of sICAM-1 increased. Conclusion: Measuring serum sICAM-1 and TGF-β1 might be important parameters for clinical evaluation in patients with MS.
, 百拇医药
KEY WORDS multiple sclerosis; sICAM-1; TGF-β1
细胞因子和粘附分子在多发性硬化(multiple sclerosis, MS)中的作用日益受到人们的重视[1]。本文对30例MS患者血清转化生长因子-β1(TGF-β1)和可溶性细胞间粘附分子(sICAM-1)的水平进行了研究，旨在探讨二者在MS发生、发展中的作用。
1 对象与方法
1.1 对象 MS患者30例，男17例，女13例。年龄16～50岁，平均年龄(30.5±15.8)岁。其中，良好型(stable MS)8例，缓解-复发型(relapsing-remitting MS, RRMS)14例，慢性进展型(chronic progressive MS, CPMS)8例。头颅MRI按受累部位依次为视神经、脑室旁、基底节、大脑半球、小脑、脑干及脊髓；病灶呈点状或融合成片两种。按病灶累积面积大小分为3组：(1)小灶组(病灶<5mm2)；(2)中灶组(病灶5～20mm2)；(3)大灶组(病灶>20mm2)。上述病例均符合Poser[2]等修订的诊断标准。
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对RRMS 14例中的10例患者给予甲基强的松龙500mg/d冲击治疗5d,氢化考的松100mg/d 7d，然后用强的松30mg/d口服治疗1个月后进行第2次采血。上述病例在采血前2周均未用过激素或其它免疫抑制剂。
非炎症性神经疾病对照组(NIND)30例，男16例，女14例，平均年龄(31.8±16.5)岁。包括脑血管病5例，震颤麻痹6例，周期性麻痹2例，脊髓空洞症4例，运动神经元病6例，癔病3例，偏头痛4例。
正常对照组(NC)30例，健康献血员，年龄、性别等均与MS组相匹配。
1.2 方法 采取空腹肘静脉血5ml，分离血清，-70℃保存备用。血清TGF-β1和sICAM-1的测定采用ELISA方法，试剂盒分别购于深圳市晶生实业有限公司和法国国际技术有限公司(Immunotech)，TGF-β1和sICAM-1的全部操作均按上述试剂盒说明书进行，OD值由美国产EL-309全自动酶标检测仪(Bio-TEK instruments, USA)测定。
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根据各稀释标准品TGF-β1和sICAM-1的单位及OD值绘制各自的参考标准曲线，再根据标准曲线算出待测标本TGF-β1和sICAM-1的浓度。
2 结果
2.1 MS患者血清TGF-β1和sICAM-1水平的变化 与NC和NIND组相比，MS患者血清的TGF-β1水平明显下降(P<0.01)，而sICAM-1水平则明显升高(P<0.01)，见表1。
表1 MS患者血清TGF-β1和sICAM-1水平的变化(
±s) 组别n
TGF-β1(μg/L)
, 百拇医药
sICAM-1(μg/L)
MS
30
20.5±9.2*
587.6±201.6
NIND
30
31.2±10.3
301.5±109.6
NC
30
34.5±12.5
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265.5±90.7
与NC组和NIND组比较*P<0.01
2.2 MS各型血清中TGF-β1及sICAM-1水平的比较 与stable MS组相比，RRMS组和CPMS组的TGF-β1含量明显降低(P<0.05)，而sICAM-1水平则明显升高(P<0.01)，见表2。
表2 MS各型患者血清TGF-β1和sICAM-1水平的比较(
±s) 组别n
TGF-β1(μg/L)
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RRMS
14
16.5±8.7*
596.5±201.3**
CPMS
8
18.9±9.5*
501.3±189.4**
Stable MS
8
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30.3±14.1
289.6±107.6
与Stable MS组比较*P<0.05**P<0.01
2.3 MS患者血清TGF-β1和sICAM-1水平的相关性分析 TGF-β1和sICAM-1水平的相关系数
r=0.032，P>0.05，表明2者无明显相关关系。
2.4 MS患者治疗前、后血清TGF-β1和sICAM-1的水平变化 MS患者治疗前血清TGF-β1和sICAM-1水平分别为(21.1±8.6) μg/L和(706.6±
189.7) μg/L，与治疗后的(35.9±10.8) μg/L和(520.6±139.8) μg/L相比，前者明显升高(P<0.01)，而后者则明显下降(P<0.01)。
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2.5 MS患者头MRI病灶部位、大小与sICAM-1和TGF-β1的相关性分析 MS患者头MRI病灶大小与sICAM-1和TGF-β1水平的相关系数分别为
r1 =0.689，P<0.01；r2 =0.029，P>0.05。说明sICAM-1含量与头MRI病灶大小呈显著正相关关系，而与TGF-β1未见显著相关关系。另外，头MRI病灶部位与sICAM-1和TGF-β1水平均未见显著相关性。
3 讨论
随着分子生物学技术的发展，细胞因子和粘附分子在MS中的重要作用已引起众多学者们的关注。为探明其详细的作用机理，作者对MS患者血清TGF-β1和sICAM-1的水平进行了检测，结果显示，与NC组和NIND组相比，MS患者血清TGF-β1水平明显降低，而sICAM-1水平则明显升高。经用激素治疗后TGF-β1水平明显上升，而sICAM-1水平则与之相反，呈明显下降趋势。另外，从MS各分型结果来看，与stable MS组相比，RRMS和CPMS组中的TGF-β1的水平显著减少，而sICAM-1水平则明显升高。上述结果表明，TGF-β1和sICAM-1水平的高低可作为判断MS患者病情变化和疗效的指标之一。
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于国平[3]等报道，免疫调节细胞因子TGF-β1在MS急性期病灶中的巨噬细胞、胶质细胞和脑血管内皮细胞中呈阳性表达。我们的结果也显示RRMS和CPMS的水平明显下降，说明TGF-β1的变化可以反映MS缓解或复发时的免疫状态，提示TGF-β1的降低可能参与MS的发生，并与疾病的活动有关。TGF-β1在MS的主要作用机理包括[4]：(1)抑制T细胞及B细胞功能；(2)介导IgM和IgG转换；(3)降低MHC-Ⅱ类抗原表达；(4)调节整合素表达；(5)抑制炎症反应及脑水肿。此外，TGF-β1还参与血管反应，影响细胞外基质蛋白酶的活性，从而对机体组织损伤的修复亦起重要的作用。
Dore-Dutty[5]等报告MS患者中可溶性细胞间粘附分子(sICAM-1)水平在活动期明显高于稳定期和正常对照，随着病情的好转，该值也逐渐下降。我们的结果也与之相类似。血清sICAM-1水平升高的临床意义尚不十分清楚，Tsukada[6]认为sICAM-1受某些介质(如TNF、IL-8、H2O2)等作用后，其活性可明显增强，将白细胞牢固地粘附于血管内皮细胞表面。结果，一方面可堵塞微循环通道，影响局部血液供应；另一方面活化的白细胞可释放大量的毒性氧自由基和蛋白水解酶，造成脑组织水肿，加重脑损伤。Hartung[7]等报道在MRI上显示有活动病灶的MS患者血清的sICAM-1水平明显升高。我们的结果也提示，MRI上病灶的大小与sICAM-1的水平呈显著的正相相关性，这表明血清sICAM-1的高低可能会在一定程度上反映病灶损害的严重程度。
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目前人们正在探索如何发挥TGF-β1在中枢神经系统损伤中的保护和修复作用来达到治疗MS的目的。与此同时，也有学者[8]提出，应用抗粘附分子抗体以阻断粘附过程，或阻断粘附发生机制中的某一共同环节，减少或抑制T细胞介导的组织损伤，也有望成为自身免疫性疾病MS治疗中有效的方法。这些研究都可能会为今后临床治疗MS开辟一条新的途径。
参考文献
1 戚晓昆，朱克.粘附分子在炎性脱髓鞘病中的作用.中华神经科杂志，1997，30：375—378
2 Poser CM, Paty DW, Scheinberg L, et al. New diagnostic criteria for MS: guidelines for research protocols. Ann Neurol, 1983,13:227—231
, 百拇医药
3 于国平，朱克，田东华，等.多发性硬化症脑脱髓鞘病灶TGF-β1和bFGF的表达.中华神经科杂志，1998，31(2)：86—88
4 杜静，龚非力.TGF-β1与中枢神经系统疾病.国外医学免疫学分册，1997，20(2)：98—101
5 Dore-Duffy P, Newman W, Balabanov R, et al. Circulating, soluble adhesion proteins in cerebrospinal fluid and serum of patients with multiple sclerosis: correlation with clinical activity. Ann Neurol, 1995,37：55—62
6 Tsukada N, Matsuda M, Miyagi K, et al. Increased levels of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and tumor necrosis factor receptor in the cerebrospinal fluid of patients with multiple sclerosis. Neurology, 1993,43:2679—2682
7 Hartung HP, Micheal M, Reiners K, et al. Soluble ICAM-1 serum levels in multiple sclerosis and viral encephalitis. Neurology, 1993,43:2331—2335
8 杨欢，李静，肖波，等.T细胞亚群及粘附分子在实验性变态反应性神经炎中的作用.中华神经科杂志，1998，31：44—47
1998-05-29收稿, http://www.100md.com