铬酵母中铬的含量测定
作者：张爱华 王志敏 秦同文 周月绵 刘红莉
单位：河北医科大学药学院石家庄050017
关键词：铬，铬酵母；测定；光度法；方法；二苯氨基脲；显色剂
河北医科大学学报990514 摘 要 目的 研究铬酵母中铬的含量测定方法。方法 采用氧化-光度法。结果 铬的平均回收率及相对标准偏差分别为100.3 %、2.7 %(n=5)。结论 本方法可用于测定铬酵母中铬的含量,方法简便,易行。
中图号 R927.2
DETERMINATION OF CHROMIUM IN CHROMIUM YEAST
Zhang Aihua Wang Zhimin Qin Tongwen Zhou Yuemian Liu Hongli*
, 百拇医药
the School of Pharmaceutical Science,Hebei Medical University(Shijiazhuang 050017
ABSTRACT Objective To study the method for determination of chromium content in chromium yeast.Methods Oxided-spectrophotometry was adopted.Results The average recoveries and RSD of chromium were 100.3 % and 2.7 %.Conclusion This method could be used for determination of chromium in chromium yeast.It is easy and rapid.
MeSH chromium,chromium yeast/determination;spectrophotometry/methods;diphenyl carbazide/chromogenic reagent
, 百拇医药
3价铬(Cr3+)是人体必需的微量元素,它的作用主要是维持机体正常的糖代谢及脂类代谢,缺乏时会发生两种物质的代谢紊乱,形成高脂血症、糖尿病、动脉硬化性心脑血管疾病等[1～3]。自从Merts和Schwardz提出“葡萄糖耐量因子”(glucose tolerance factor,GTF)的概念以来,生物医学界的专家们一直没有停止对铬的研究。资料表明,铬酵母中含有丰富的3价铬(Cr3+),且多呈具有活性的GTF。酵母中各类营养物质含量丰富,对人体健康有着重要意义,通过微生物的作用将无机铬转化为有机铬,有人称之为微量元素载体酵母,如能准确地测定出本品中铬的含量,无疑对于指导生产、临床应用、药品质量控制都具有重要意义。鉴于目前各国药典未收入该药的测定方法,本文采用氧化-光度法测定铬酶母中铬的含量,现报告如下。
1 仪器与试剂
1.1 仪器:721型分光光度计(上海分析仪器厂)。
, http://www.100md.com
1.2 试剂
1.2.1 铬标准液:精密称取120 ℃干燥至恒重的基准重铬酸钾0.1415 g,溶于水中,并稀释至500 ml容量瓶,使用时,配成相当10 μg/ml Cr6+溶液。
1.2.2 二苯胺基脲溶液:称取0.1 g化学纯二苯胺基脲,溶于50 ml乙醇中,加入1∶9硫酸溶液200 ml,贮存于冰箱中保持低温。
1.2.3 实验中所用乙醇、高锰酸钾、硫酸均为分析纯,无水碳酸钠为化学纯。
1.2.4 铬酵母系由河北省地方病防治研究所提供。
2 方法[4]与 结 果
2.1 标准曲线的绘制:取150 ml三角瓶,分别加入10 μg/ml铬标准液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml,各加入2%碳酸钠液5 ml,加水至25 ml,加2 %高锰酸钾5滴,使呈紫红色,煮沸5～10 min,煮沸过程中应保持溶液呈紫红色,否则应补充2 %高锰酸钾溶液。然后沿瓶壁加入乙醇2 ml,继续加热至溶液变为黄棕色,冷却,用5 mol/L硫酸调节溶液呈酸性(pH=1～3),摇匀并过滤于50 ml容量瓶中,用水洗涤三角瓶和滤纸,合并滤液。溶液经Cr3+定性检查已不显色,证明Cr3+完全转化为Cr6+[5]。加入2.5 ml二苯胺基脲溶液摇匀,加水至刻度,10 min后于540±1 nm波长处测定其吸收度,将所得数据进行直线回归,得回归方程
, http://www.100md.com
A=0.108C-1.48×10-3
A:测得吸收度 C:标准溶液浓度(r=0.9992)。
2.2 样品的测定:精密称取80 ℃干燥至恒重的铬酵母1 g,置蒸发皿中,加入20 %碳酸钠溶液5 ml,使充分浸润,先低温炭化,待浓烟挥尽,移入580 ℃高温炉中灰化成白色灰烬,冷却,用25 ml水分次洗入150 ml三角瓶中,加2 %高锰酸钾溶液5滴,使成紫红色,以下操作同标准曲线的制备,于540±1 nm处测其吸收度,由回归方程计算含量,结果见表1。
表1 样品测定结果
Table 1 Result of the sample determination
(n=5,%)
, 百拇医药
Number
Chromium
Content
RSD
1
10.49×10-4
3.05
2
15.76×10-4
2.48
2.3 回收率实验:精密称取80 ℃干燥至恒重的铬酵母1.0 g,加入铬标准溶液1 ml,加入20%碳酸钠溶液5 ml,以下操作同样品测定。铬的平均回收率及RSD分别为100.3 %,2.7% (n=5)。
, http://www.100md.com
2.4 样品中游离铬的检查[6,7]:精密称取1 g样品,加入50 %乙醇6 ml,并加热至沸腾,冷却至室温,过滤,滤过液水洗涤,合并洗液和滤液,用10 mol/L HCl调至pH约3.5,加入0.5 g活性炭,振摇,1 h后过滤,水洗涤,合并洗液和滤液,加入高锰酸钾溶液20滴,使溶液呈紫红色,煮沸5～10 min,然后加入95 %乙醇2 ml,以下操作同样品测定。本实验重复6次,在540±1 nm处测定时均未见吸收,表明样品中不含有游离铬。
3 讨论
样品处理中,加入碳酸钠要充分浸泡,使成溶融状态,然后蒸干,否则,使灰化时间延长。
显色需在pH=1～2的强酸下进行,酸性太强或太弱都使显色不稳定,加入显色剂10～40 min显色稳定。
为了防止铬在高温条件下挥发,本文采用580 ℃干法灰化。并且对灰化前和灰化后分别加入标准铬测定回收率,结果表明,对回收率无显著影响。
, http://www.100md.com
处理铬酵母(2号)时,又采用硫酸-高氯酸法,精密称取样品1 g,加硫酸5 ml,置电炉上低温加热,至黑色粘稠状继续升温,滴加高氯酸1～2 ml,直至溶液透明为止,再加热20 min,冷却后加水10 ml,移入50 ml容量瓶,加水至刻度。测定方法仍用高锰酸钾在碱性条件下氧化,二苯胺基脲显色,结果显色正常,平均回收率为83%。
标准溶液在显色前用双氧水氧化,乙醚提取对Cr3+进行鉴定,结果证明溶液中没有3价铬离子,本方法在此条件下也不受其它离子的干扰[5]。
参考文献
1.孔祥瑞主编.必需微量元素的营养、生理及临床意义.合肥:安徽科学技术出版社,1982.284～295
2.姜桂荣,程南征,胡晓林,等.富铬酵母对糖尿病病人糖耐量的影响.营养学报,1988,10(3):253
, http://www.100md.com
3.何志谦主编.人类营养学.北京:人民卫生出版社,1988.328～332
4.上海商品检验局主编.食品化学分析.上海科学技术出版社,1997.78～79
5.王夔主编.无机化学.第2版.北京:人民卫生出版社,1995.446～449
6.刘福岭,戴行钧主编.食品物理与化学分析方法.北京:轻工业出版社,1987.303～305
7.Chao SS,Pickett EE.Trace chromium determination by furnace atomic absorption spectrometry following enrichment by extraction.Anal Chem,1980,52(2):335
收稿日期:1999-01-08, 百拇医药
单位：河北医科大学药学院石家庄050017
关键词：铬，铬酵母；测定；光度法；方法；二苯氨基脲；显色剂
河北医科大学学报990514 摘 要 目的 研究铬酵母中铬的含量测定方法。方法 采用氧化-光度法。结果 铬的平均回收率及相对标准偏差分别为100.3 %、2.7 %(n=5)。结论 本方法可用于测定铬酵母中铬的含量,方法简便,易行。
中图号 R927.2
DETERMINATION OF CHROMIUM IN CHROMIUM YEAST
Zhang Aihua Wang Zhimin Qin Tongwen Zhou Yuemian Liu Hongli*
, 百拇医药
the School of Pharmaceutical Science,Hebei Medical University(Shijiazhuang 050017
ABSTRACT Objective To study the method for determination of chromium content in chromium yeast.Methods Oxided-spectrophotometry was adopted.Results The average recoveries and RSD of chromium were 100.3 % and 2.7 %.Conclusion This method could be used for determination of chromium in chromium yeast.It is easy and rapid.
MeSH chromium,chromium yeast/determination;spectrophotometry/methods;diphenyl carbazide/chromogenic reagent
, 百拇医药
3价铬(Cr3+)是人体必需的微量元素,它的作用主要是维持机体正常的糖代谢及脂类代谢,缺乏时会发生两种物质的代谢紊乱,形成高脂血症、糖尿病、动脉硬化性心脑血管疾病等[1～3]。自从Merts和Schwardz提出“葡萄糖耐量因子”(glucose tolerance factor,GTF)的概念以来,生物医学界的专家们一直没有停止对铬的研究。资料表明,铬酵母中含有丰富的3价铬(Cr3+),且多呈具有活性的GTF。酵母中各类营养物质含量丰富,对人体健康有着重要意义,通过微生物的作用将无机铬转化为有机铬,有人称之为微量元素载体酵母,如能准确地测定出本品中铬的含量,无疑对于指导生产、临床应用、药品质量控制都具有重要意义。鉴于目前各国药典未收入该药的测定方法,本文采用氧化-光度法测定铬酶母中铬的含量,现报告如下。
1 仪器与试剂
1.1 仪器:721型分光光度计(上海分析仪器厂)。
, http://www.100md.com
1.2 试剂
1.2.1 铬标准液:精密称取120 ℃干燥至恒重的基准重铬酸钾0.1415 g,溶于水中,并稀释至500 ml容量瓶,使用时,配成相当10 μg/ml Cr6+溶液。
1.2.2 二苯胺基脲溶液:称取0.1 g化学纯二苯胺基脲,溶于50 ml乙醇中,加入1∶9硫酸溶液200 ml,贮存于冰箱中保持低温。
1.2.3 实验中所用乙醇、高锰酸钾、硫酸均为分析纯,无水碳酸钠为化学纯。
1.2.4 铬酵母系由河北省地方病防治研究所提供。
2 方法[4]与 结 果
2.1 标准曲线的绘制:取150 ml三角瓶,分别加入10 μg/ml铬标准液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml,各加入2%碳酸钠液5 ml,加水至25 ml,加2 %高锰酸钾5滴,使呈紫红色,煮沸5～10 min,煮沸过程中应保持溶液呈紫红色,否则应补充2 %高锰酸钾溶液。然后沿瓶壁加入乙醇2 ml,继续加热至溶液变为黄棕色,冷却,用5 mol/L硫酸调节溶液呈酸性(pH=1～3),摇匀并过滤于50 ml容量瓶中,用水洗涤三角瓶和滤纸,合并滤液。溶液经Cr3+定性检查已不显色,证明Cr3+完全转化为Cr6+[5]。加入2.5 ml二苯胺基脲溶液摇匀,加水至刻度,10 min后于540±1 nm波长处测定其吸收度,将所得数据进行直线回归,得回归方程
, http://www.100md.com
A=0.108C-1.48×10-3
A:测得吸收度 C:标准溶液浓度(r=0.9992)。
2.2 样品的测定:精密称取80 ℃干燥至恒重的铬酵母1 g,置蒸发皿中,加入20 %碳酸钠溶液5 ml,使充分浸润,先低温炭化,待浓烟挥尽,移入580 ℃高温炉中灰化成白色灰烬,冷却,用25 ml水分次洗入150 ml三角瓶中,加2 %高锰酸钾溶液5滴,使成紫红色,以下操作同标准曲线的制备,于540±1 nm处测其吸收度,由回归方程计算含量,结果见表1。
表1 样品测定结果
Table 1 Result of the sample determination
(n=5,%)
, 百拇医药
Number
Chromium
Content
RSD
1
10.49×10-4
3.05
2
15.76×10-4
2.48
2.3 回收率实验:精密称取80 ℃干燥至恒重的铬酵母1.0 g,加入铬标准溶液1 ml,加入20%碳酸钠溶液5 ml,以下操作同样品测定。铬的平均回收率及RSD分别为100.3 %,2.7% (n=5)。
, http://www.100md.com
2.4 样品中游离铬的检查[6,7]:精密称取1 g样品,加入50 %乙醇6 ml,并加热至沸腾,冷却至室温,过滤,滤过液水洗涤,合并洗液和滤液,用10 mol/L HCl调至pH约3.5,加入0.5 g活性炭,振摇,1 h后过滤,水洗涤,合并洗液和滤液,加入高锰酸钾溶液20滴,使溶液呈紫红色,煮沸5～10 min,然后加入95 %乙醇2 ml,以下操作同样品测定。本实验重复6次,在540±1 nm处测定时均未见吸收,表明样品中不含有游离铬。
3 讨论
样品处理中,加入碳酸钠要充分浸泡,使成溶融状态,然后蒸干,否则,使灰化时间延长。
显色需在pH=1～2的强酸下进行,酸性太强或太弱都使显色不稳定,加入显色剂10～40 min显色稳定。
为了防止铬在高温条件下挥发,本文采用580 ℃干法灰化。并且对灰化前和灰化后分别加入标准铬测定回收率,结果表明,对回收率无显著影响。
, http://www.100md.com
处理铬酵母(2号)时,又采用硫酸-高氯酸法,精密称取样品1 g,加硫酸5 ml,置电炉上低温加热,至黑色粘稠状继续升温,滴加高氯酸1～2 ml,直至溶液透明为止,再加热20 min,冷却后加水10 ml,移入50 ml容量瓶,加水至刻度。测定方法仍用高锰酸钾在碱性条件下氧化,二苯胺基脲显色,结果显色正常,平均回收率为83%。
标准溶液在显色前用双氧水氧化,乙醚提取对Cr3+进行鉴定,结果证明溶液中没有3价铬离子,本方法在此条件下也不受其它离子的干扰[5]。
参考文献
1.孔祥瑞主编.必需微量元素的营养、生理及临床意义.合肥:安徽科学技术出版社,1982.284～295
2.姜桂荣,程南征,胡晓林,等.富铬酵母对糖尿病病人糖耐量的影响.营养学报,1988,10(3):253
, http://www.100md.com
3.何志谦主编.人类营养学.北京:人民卫生出版社,1988.328～332
4.上海商品检验局主编.食品化学分析.上海科学技术出版社,1997.78～79
5.王夔主编.无机化学.第2版.北京:人民卫生出版社,1995.446～449
6.刘福岭,戴行钧主编.食品物理与化学分析方法.北京:轻工业出版社,1987.303～305
7.Chao SS,Pickett EE.Trace chromium determination by furnace atomic absorption spectrometry following enrichment by extraction.Anal Chem,1980,52(2):335
收稿日期:1999-01-08, 百拇医药