磺胺嘧啶在肝损伤的小鼠体内药物动力学变化及益肝药的作用
作者：黄杰安 丁 虹 张燕华
单位：黄杰安 广西医科大学第一附属医院 南宁 530021(现在湖北医科大学攻读博士学位); 丁虹 湖北医科大学药理教研室 武汉 430071
关键词：阿魏酸钠；大蒜素；当归醇沉物；氢化泼尼松；磺胺嘧啶；药代动力学
广西医科大学学报990513
摘要 目的：观察了阿魏酸钠、大蒜素、当归醇沉物对磺胺嘧啶在肝损伤小鼠体内的药动学影响。方法：用氢化泼尼松建立小鼠肝损伤模型，测定ALT及GST活性，静脉注射磺胺嘧啶，测定血药浓度，计算动力学参数。结果：阿魏酸钠、大蒜素及当归醇沉物均能一定程度上改善氢化泼尼松所致的肝损伤，使血清ALT及GST活性明显下降，使肝匀浆中ALT、GST及苯胺羟化酶活性明显升高，并使磺胺嘧啶在体内α相参数恢复正常，但并不能缩短磺胺嘧啶在肝损伤小鼠体内的t1/2β的时间。结论：药物在体内的过程不仅取决于机体肝、肾功能的状态，而且受药物相互作用的影响。阿魏酸钠、大蒜素、当归醇沉物均可影响磺胺嘧啶在体内的动力学过程。
, 百拇医药
中国图书资料分类法分类号 R969.1
INFLUENCE OF THE THREE SUBSTANCES GOOD FOR LIVER ON THE PHARMACOKINETICS OF SULFADIAZINE IN LIVER DAMAGE MICES
Huang Jiean
(Department of Gastroenterology the First Affiliated Hsopitalof,Guangxi Medical University, 530021)
Ding Hong Zhang Yanhua
(Department of Pharmacology, Hubei Medical University, Wuhan, 430071)
, 百拇医药
Abstract Objective: Influence of the three substanes sodium ferulate (SF), allitridi (Adi), sediment from Angelica sinensis diels by Ethanol (ASP) good for liver on the pharmacokinetics of sulfadiazine (SD) in liver damage mice were observed. Methods: Predisone was used to made the model of liver damage and the ALT、, GST activities were determined; The blood concentration of SD were determined after iv SD to mice and the pharmacokinetics parameter of SD were calculated. Results: In liver damge mices, t1/2 of SD was obviously extended, ALT、, GST and aniline hydroxylase (ANH) acitivities in liver were reduced, SF, Adi, ASP can raise the ALT、, GST、, ANH activity, but can't shorten the t1/2β of SD. Conclusions: The changes of the pharmacokinetics were influnced not only by liver function and kidney function, but also by drug interaction.
, 百拇医药
Key words sodium ferulate;allitridi;sediment from Angelica sinesis diels by ethanol;sulfadiazine;pharmacokinetics;predisone
肝功能不全对药物代谢的影响众所周知，采用益肝剂后，药物的体内过程是否恢复正常?有关报道尚不多见，在我们以往实验中发现阿魏酸钠[1～3]、大蒜素、当归醇沉物(待发表)等物质能在一定程度上改善肝损伤，为此，我们建立了氢化泼尼松肝损伤模型，以观察上述物质在改善肝功能情况下，对药物在体内处置的影响，为临床合理用药提供参考。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂：阿魏酸钠，广东利民制药厂产品，批号：8807182，大蒜素(Adi)，湖北五三制药厂产品，批号950610，当归醇沉物(ASP)(当归经水煮醇沉后的产物)，由湖北医科大学附属二院制药厂提供，氢化泼尼松(Pred)，湖北制药厂产品，批号950721，磺胺嘧啶(SD)，湖南制药厂产品，批号890108，1-氯-2，4-二硝基苯(CDNB)、异柠檬酸、异柠檬酸脱氢酶、苯胺、还原型谷胱甘肽(GSH)，为Sigma公司产品，其余试制均为国产分析纯。
, 百拇医药
1.2 血药浓度测定：取20μl全血，加H2O至1ml，加三氯醋酸0.5ml沉淀，摇匀，离心10min(3500r.min-1)，取上清液加0.5% NaNO2、0.5%麝香草酚显色，于525nm处比色测定。
1.3 线性范围：分别于20μl空白全血中加入0.5，1.0，2.0，4.0，8.0，16.0，32.0μg SD，按上述方法提取测定，线性范围为25～1200mg/L，回归方程为Y=0.011+0.014X,r=0.9998。
1.4 方法回收率：分别于20μl空白血中加入4.0，8.0，16.0μg SD，按上述方法提取后测定，其方法回收率分别为(102.70±6.46)%，(101.50±1.37)%，(103.09±2.24)%。
1.5 精密度试验：分别于20μl空白血中加入2，4，8μg SD，按上述方法处理样品，测定日内与日间(5d内5次)精密度，3种浓度的日内变异系数≤3.43%，日间变异系数≤4.47%。
, 百拇医药
1.6 动物的选择：取健康家兔，昆明种小鼠各6只(由湖北医科大学动物实验中心提供)。静脉注射给予SD 400mg/kg，按上述方法测定血药浓度，用3P-87药代动力学程序，按一房室模型拟合计算药代动力学参数，结果家兔的t1/2为(0.67±0.35)h，小鼠的t1/2为(7.08±0.51)h，可见SD在小鼠体内的代谢半衰期与人相似(t1/2 10～12h)[2]，故选择小鼠作为实验动物。
1.7 实验方法：昆明种小鼠雌、雄各半，体质量22～69g，由湖北医科大学动物实验中心提供，小鼠36只，分为①正常组(12只)；②Pred组(皮下注射, 20mg/kg, 每天1次，共5d)；③Pred加SF组(灌胃,200mg/kg, 每天1次，共10d)；④Pred加Adi组(灌胃, 20mg/kg, 每天1次，共10d)；⑤Pred加ASP组(灌胃, 2.0g/kg, 每天1次，共10d)。①，②组灌胃给予蒸馏水0.2ml/10g，③，④，⑤组灌胃给予相应药物，5d后同时皮下注射Pred，连续5d，于末次注射后16h，进行SD药代动力学测定试验，试验前1h，③，④，⑤组分别灌胃给予相应药物，而后尾的静脉注射SD 400mg/kg，于注射后0.3，0.5，1.0，2.0，4.0，8.0，12.0，24.0h取血，测定血药浓度，试验完毕后，小鼠断头处死，取血清，测定丙氨酸转氨酶ALT、谷胱甘肽-S转移酶GST活性，取肝脏，用冰Tris-HCl 50mmol/L制备25%肝匀浆(W∶V)，测定ALT[4]、GST[5]及苯胺羟化酶(ANH)[6]活性。
, 百拇医药
2 结 果
2.1 几种益肝药物对肝功能及酶活性的影响：结果可见，三种物质均能改善Pred所致小鼠的肝损伤，使血清ALT、GST活性下降，其中以ASP组下降较为明显，并能部分恢复肝脏中Ⅰ相酶ANH的活性和Ⅱ相酶-GST的活性，结果见表1。
表1 几种益肝物对肝功能及药酶活性的影响 组别
n
血清
肝匀浆
ALT
GST
ALT
GST
, 百拇医药
ANH
(IU/L)
(μmol/min.L-1)
(nmol/min.mg-1 protein)
正常组
12
12.9±1.36
28.3±3.80
259±16.8
168±15.5
0.096±0.01
, 百拇医药
Pred组
6
49.9±2.00**
48.9±6.31**
213±27.9*
126±19.4**
0.09±0.007**
Pred+SF组
6
41.7±5.96△△
, 百拇医药
39.4±5.30△△
219±24.8
146±27.2△
0.069±0.007△
Pred+Adi组
6
44.5±8.45
36.3±9.27△△
222±39.7
139±210.7△
, http://www.100md.com 0.067±0.004△
Pred+ASP组
6
34.7±1.81△△
33.8±6.54△△
230±41.5
157±24.3△△
0.083±0.009△△
与正常组相比 *P<0.05, **P<0.01
与Pred组相比 △P<0.05, △△P<0.01表2 SD在小鼠体内的药代动力学参数 组 别
, 百拇医药
n
α
(1/h)
β
(1/h)
t1/2
(t/h)
t1/2
(t/h)
AUC
(g/L.h-1)
CL(s)
, 百拇医药
(L/kg.h-1)
正常组
12
1.12±0.14
0.052±0.002
0.63±0.61
12.6±2.01
15.7±3.01
0.026±0.002
Pred组
6
1.57±0.14**
, 百拇医药
0.037±0.002**
0.44±0.01**
17.9±1.33**
23.0±3.12**
0.017±0.002**
Pred+SF组
6
0.85±0.19*△△
0.034±0.006**
, http://www.100md.com
0.82±0.36△△
20.0±1.78**△
23.6±3.55**
0.017±0.002**
Pred+Adi组
6
1.11±0.21△
0.024±0.004**△△
0.62±0.23△△
, 百拇医药
28.7±4.33**△△
37.6±3.84**△△
0.011±0.003**△△
Pred+ASP组
6
1.11±0.11△
0.035±0.003**
0.62±0.27△△
19.9±2.14**△
, 百拇医药
23.6±2.36**
0.015±0.003**△
与正常组相比 *P<0.05, **P<0.01
与Pred组相比 △P<0.05, △△P<0.01
2.2 SD的药代动力学参数：用3P87软件拟合SD药-时曲线，以二房室模型计算动力学参数，结果可见，Pred组t1/2α、t1/2β明显延长，而SF组、Adi组、ASP组为t1/2α、, t1/2β与Pred组相比进一步延长，结果见表2。
3 讨 论
SD是临床常用的一种广谱抗菌药，近年来作为N-乙酰化的探针药物愈来愈受到人们的重视，本实验结果可见，SD在Pred所致肝损伤的小鼠体内，代谢速度明显下降，推断N-乙酰化酶活性下降，此外本实验还表明，Pred所致肝损伤，还可使Ⅰ相酶-苯胺羟化酶、Ⅱ相酶谷胱甘肽-S-转移酶活性下降，表明Pred对多种肝药酶活性均有一 定程度的影响。阿魏酸钠、大蒜素、当归醇沉物能改善小鼠的肝功能，提高肝药酶活性，但仅使SD在体内α相动力学参数恢复正常，其β相t1/2不仅未缩短，反而进一步延长，提示药物在体内的处置过程，不仅取决于机体肝、肾功能状况，同时也受药物相互作用的影响，临床用药应注意药物的相互作用。
, http://www.100md.com
参考文献
1 吴东方，彭仁.阿魏酸钠部分减轻氢化泼尼松引起的小鼠肝脏毒性.药学学报，1995，30(11)：301
2 徐叔云主编.现代实用临床药理学.北京：华夏出版社，1997.989
3 丁虹，彭仁.对乙酰氨基酚对小鼠原代培养肝细胞的损伤及阿魏酸钠的保护作用.中国药学杂志，1997，32(4)：210
4 汪晖，彭仁.阿魏酸钠减轻对乙酰氨基酚致小鼠肝损伤.中国药理学报，1994，15(1)：81
5 上海市立医学化验所主编.实用临床检验.上海：上海科技出版社，1965.401
6 Habig WH, Pabst MJ, Jakoby WB. Glutathione stransferase: the first enzymatic step in mercapturie acid formation. J Biol Chem, 1974, 249: 7130
7 Nash T.The colorimetric estimation of formadehyde by means of the Hantzsch reaction.BiochemJ,1953;55:416
收稿日期：1998-12-01, 百拇医药
单位：黄杰安 广西医科大学第一附属医院 南宁 530021(现在湖北医科大学攻读博士学位); 丁虹 湖北医科大学药理教研室 武汉 430071
关键词：阿魏酸钠；大蒜素；当归醇沉物；氢化泼尼松；磺胺嘧啶；药代动力学
广西医科大学学报990513
摘要 目的：观察了阿魏酸钠、大蒜素、当归醇沉物对磺胺嘧啶在肝损伤小鼠体内的药动学影响。方法：用氢化泼尼松建立小鼠肝损伤模型，测定ALT及GST活性，静脉注射磺胺嘧啶，测定血药浓度，计算动力学参数。结果：阿魏酸钠、大蒜素及当归醇沉物均能一定程度上改善氢化泼尼松所致的肝损伤，使血清ALT及GST活性明显下降，使肝匀浆中ALT、GST及苯胺羟化酶活性明显升高，并使磺胺嘧啶在体内α相参数恢复正常，但并不能缩短磺胺嘧啶在肝损伤小鼠体内的t1/2β的时间。结论：药物在体内的过程不仅取决于机体肝、肾功能的状态，而且受药物相互作用的影响。阿魏酸钠、大蒜素、当归醇沉物均可影响磺胺嘧啶在体内的动力学过程。
, 百拇医药
中国图书资料分类法分类号 R969.1
INFLUENCE OF THE THREE SUBSTANCES GOOD FOR LIVER ON THE PHARMACOKINETICS OF SULFADIAZINE IN LIVER DAMAGE MICES
Huang Jiean
(Department of Gastroenterology the First Affiliated Hsopitalof,Guangxi Medical University, 530021)
Ding Hong Zhang Yanhua
(Department of Pharmacology, Hubei Medical University, Wuhan, 430071)
, 百拇医药
Abstract Objective: Influence of the three substanes sodium ferulate (SF), allitridi (Adi), sediment from Angelica sinensis diels by Ethanol (ASP) good for liver on the pharmacokinetics of sulfadiazine (SD) in liver damage mice were observed. Methods: Predisone was used to made the model of liver damage and the ALT、, GST activities were determined; The blood concentration of SD were determined after iv SD to mice and the pharmacokinetics parameter of SD were calculated. Results: In liver damge mices, t1/2 of SD was obviously extended, ALT、, GST and aniline hydroxylase (ANH) acitivities in liver were reduced, SF, Adi, ASP can raise the ALT、, GST、, ANH activity, but can't shorten the t1/2β of SD. Conclusions: The changes of the pharmacokinetics were influnced not only by liver function and kidney function, but also by drug interaction.
, 百拇医药
Key words sodium ferulate;allitridi;sediment from Angelica sinesis diels by ethanol;sulfadiazine;pharmacokinetics;predisone
肝功能不全对药物代谢的影响众所周知，采用益肝剂后，药物的体内过程是否恢复正常?有关报道尚不多见，在我们以往实验中发现阿魏酸钠[1～3]、大蒜素、当归醇沉物(待发表)等物质能在一定程度上改善肝损伤，为此，我们建立了氢化泼尼松肝损伤模型，以观察上述物质在改善肝功能情况下，对药物在体内处置的影响，为临床合理用药提供参考。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂：阿魏酸钠，广东利民制药厂产品，批号：8807182，大蒜素(Adi)，湖北五三制药厂产品，批号950610，当归醇沉物(ASP)(当归经水煮醇沉后的产物)，由湖北医科大学附属二院制药厂提供，氢化泼尼松(Pred)，湖北制药厂产品，批号950721，磺胺嘧啶(SD)，湖南制药厂产品，批号890108，1-氯-2，4-二硝基苯(CDNB)、异柠檬酸、异柠檬酸脱氢酶、苯胺、还原型谷胱甘肽(GSH)，为Sigma公司产品，其余试制均为国产分析纯。
, 百拇医药
1.2 血药浓度测定：取20μl全血，加H2O至1ml，加三氯醋酸0.5ml沉淀，摇匀，离心10min(3500r.min-1)，取上清液加0.5% NaNO2、0.5%麝香草酚显色，于525nm处比色测定。
1.3 线性范围：分别于20μl空白全血中加入0.5，1.0，2.0，4.0，8.0，16.0，32.0μg SD，按上述方法提取测定，线性范围为25～1200mg/L，回归方程为Y=0.011+0.014X,r=0.9998。
1.4 方法回收率：分别于20μl空白血中加入4.0，8.0，16.0μg SD，按上述方法提取后测定，其方法回收率分别为(102.70±6.46)%，(101.50±1.37)%，(103.09±2.24)%。
1.5 精密度试验：分别于20μl空白血中加入2，4，8μg SD，按上述方法处理样品，测定日内与日间(5d内5次)精密度，3种浓度的日内变异系数≤3.43%，日间变异系数≤4.47%。
, 百拇医药
1.6 动物的选择：取健康家兔，昆明种小鼠各6只(由湖北医科大学动物实验中心提供)。静脉注射给予SD 400mg/kg，按上述方法测定血药浓度，用3P-87药代动力学程序，按一房室模型拟合计算药代动力学参数，结果家兔的t1/2为(0.67±0.35)h，小鼠的t1/2为(7.08±0.51)h，可见SD在小鼠体内的代谢半衰期与人相似(t1/2 10～12h)[2]，故选择小鼠作为实验动物。
1.7 实验方法：昆明种小鼠雌、雄各半，体质量22～69g，由湖北医科大学动物实验中心提供，小鼠36只，分为①正常组(12只)；②Pred组(皮下注射, 20mg/kg, 每天1次，共5d)；③Pred加SF组(灌胃,200mg/kg, 每天1次，共10d)；④Pred加Adi组(灌胃, 20mg/kg, 每天1次，共10d)；⑤Pred加ASP组(灌胃, 2.0g/kg, 每天1次，共10d)。①，②组灌胃给予蒸馏水0.2ml/10g，③，④，⑤组灌胃给予相应药物，5d后同时皮下注射Pred，连续5d，于末次注射后16h，进行SD药代动力学测定试验，试验前1h，③，④，⑤组分别灌胃给予相应药物，而后尾的静脉注射SD 400mg/kg，于注射后0.3，0.5，1.0，2.0，4.0，8.0，12.0，24.0h取血，测定血药浓度，试验完毕后，小鼠断头处死，取血清，测定丙氨酸转氨酶ALT、谷胱甘肽-S转移酶GST活性，取肝脏，用冰Tris-HCl 50mmol/L制备25%肝匀浆(W∶V)，测定ALT[4]、GST[5]及苯胺羟化酶(ANH)[6]活性。
, 百拇医药
2 结 果
2.1 几种益肝药物对肝功能及酶活性的影响：结果可见，三种物质均能改善Pred所致小鼠的肝损伤，使血清ALT、GST活性下降，其中以ASP组下降较为明显，并能部分恢复肝脏中Ⅰ相酶ANH的活性和Ⅱ相酶-GST的活性，结果见表1。
表1 几种益肝物对肝功能及药酶活性的影响 组别
n
血清
肝匀浆
ALT
GST
ALT
GST
, 百拇医药
ANH
(IU/L)
(μmol/min.L-1)
(nmol/min.mg-1 protein)
正常组
12
12.9±1.36
28.3±3.80
259±16.8
168±15.5
0.096±0.01
, 百拇医药
Pred组
6
49.9±2.00**
48.9±6.31**
213±27.9*
126±19.4**
0.09±0.007**
Pred+SF组
6
41.7±5.96△△
, 百拇医药
39.4±5.30△△
219±24.8
146±27.2△
0.069±0.007△
Pred+Adi组
6
44.5±8.45
36.3±9.27△△
222±39.7
139±210.7△
, http://www.100md.com 0.067±0.004△
Pred+ASP组
6
34.7±1.81△△
33.8±6.54△△
230±41.5
157±24.3△△
0.083±0.009△△
与正常组相比 *P<0.05, **P<0.01
与Pred组相比 △P<0.05, △△P<0.01表2 SD在小鼠体内的药代动力学参数 组 别
, 百拇医药
n
α
(1/h)
β
(1/h)
t1/2
(t/h)
t1/2
(t/h)
AUC
(g/L.h-1)
CL(s)
, 百拇医药
(L/kg.h-1)
正常组
12
1.12±0.14
0.052±0.002
0.63±0.61
12.6±2.01
15.7±3.01
0.026±0.002
Pred组
6
1.57±0.14**
, 百拇医药
0.037±0.002**
0.44±0.01**
17.9±1.33**
23.0±3.12**
0.017±0.002**
Pred+SF组
6
0.85±0.19*△△
0.034±0.006**
, http://www.100md.com
0.82±0.36△△
20.0±1.78**△
23.6±3.55**
0.017±0.002**
Pred+Adi组
6
1.11±0.21△
0.024±0.004**△△
0.62±0.23△△
, 百拇医药
28.7±4.33**△△
37.6±3.84**△△
0.011±0.003**△△
Pred+ASP组
6
1.11±0.11△
0.035±0.003**
0.62±0.27△△
19.9±2.14**△
, 百拇医药
23.6±2.36**
0.015±0.003**△
与正常组相比 *P<0.05, **P<0.01
与Pred组相比 △P<0.05, △△P<0.01
2.2 SD的药代动力学参数：用3P87软件拟合SD药-时曲线，以二房室模型计算动力学参数，结果可见，Pred组t1/2α、t1/2β明显延长，而SF组、Adi组、ASP组为t1/2α、, t1/2β与Pred组相比进一步延长，结果见表2。
3 讨 论
SD是临床常用的一种广谱抗菌药，近年来作为N-乙酰化的探针药物愈来愈受到人们的重视，本实验结果可见，SD在Pred所致肝损伤的小鼠体内，代谢速度明显下降，推断N-乙酰化酶活性下降，此外本实验还表明，Pred所致肝损伤，还可使Ⅰ相酶-苯胺羟化酶、Ⅱ相酶谷胱甘肽-S-转移酶活性下降，表明Pred对多种肝药酶活性均有一 定程度的影响。阿魏酸钠、大蒜素、当归醇沉物能改善小鼠的肝功能，提高肝药酶活性，但仅使SD在体内α相动力学参数恢复正常，其β相t1/2不仅未缩短，反而进一步延长，提示药物在体内的处置过程，不仅取决于机体肝、肾功能状况，同时也受药物相互作用的影响，临床用药应注意药物的相互作用。
, http://www.100md.com
参考文献
1 吴东方，彭仁.阿魏酸钠部分减轻氢化泼尼松引起的小鼠肝脏毒性.药学学报，1995，30(11)：301
2 徐叔云主编.现代实用临床药理学.北京：华夏出版社，1997.989
3 丁虹，彭仁.对乙酰氨基酚对小鼠原代培养肝细胞的损伤及阿魏酸钠的保护作用.中国药学杂志，1997，32(4)：210
4 汪晖，彭仁.阿魏酸钠减轻对乙酰氨基酚致小鼠肝损伤.中国药理学报，1994，15(1)：81
5 上海市立医学化验所主编.实用临床检验.上海：上海科技出版社，1965.401
6 Habig WH, Pabst MJ, Jakoby WB. Glutathione stransferase: the first enzymatic step in mercapturie acid formation. J Biol Chem, 1974, 249: 7130
7 Nash T.The colorimetric estimation of formadehyde by means of the Hantzsch reaction.BiochemJ,1953;55:416
收稿日期：1998-12-01, 百拇医药