大鼠全脑缺血再灌模型的制作
作者：申峰 周强
单位：哈尔滨医科大学生物化学教研室
关键词：
本文介绍了制作大鼠全脑缺血再灌模型中大鼠的选择依据 本文介绍了制作大鼠全脑缺血再灌模型中大鼠的选择依据，质量控制要求，具体制作方法，及实验中应注意的几个影响因素。
1 大鼠的选择
1.1 选用大鼠的依据。
具备完整的脑底动脉环，其血管解剖接近人类；有大量的基础研究资料可供参考；主要生理功能无季节性变化；抗病力强；便于手术和管理，利于观察；价格低廉；
1.2 种系选择。
首选系统杂交大鼠，该鼠具有杂交优势，可克服近交衰退，具有遗传和表型上的一致性。
1.3 微生物控制
国外多用无菌动物或spf动物，可避免或减少微生物对实验的干扰。但鉴于国内现有条件，可采用清洁动物作为过渡，逐步采用spf动物。
2 模型制作
2.1 麻醉
2.1.1 吸入法：将大鼠头部或全身罩入内置吸有乙醚棉球的广口瓶内20～30s，即进入麻醉状态，若时程较长，可在鼻部放置吸有乙醚的棉球，不断滴加以维持麻醉状态。若出现角膜反射消失，瞳孔放大，应停止麻醉。此法易引起呼吸道分泌物增多，导致窒息。
2.1.2 腹腔麻醉：采用戊巴比妥钠4～5mg/100g，麻醉时程可持续60min，必要时可追加2mg/100g。此法麻醉过程平稳，气管分泌物少，适用于时程较长者，但过量易引起血压下降和呼吸抑制。
2.1.3 麻醉深度控制：规则胸腹式呼吸，血压，脉搏平稳，睑反射迟钝，对光反射迟钝，瞳孔稍大，肌松弛明显为适度。
2.2 手术。
固定麻醉大鼠，取颈前正中线切口，分离颈总动脉，放置手术线后缝皮。取颈后正中线切口，暴露第一颈椎双侧翼小孔，将电极插入翼小孔电凝阻断双侧椎动脉。24h后，关闭双侧颈总动脉造成全脑缺血，缺血达到各自时间要求后，放开颈总动脉，使脑血流再灌。
2.3 缺血状况判定。
意识消失，翻正反射消失。瞳孔颜色：缺血15min后完全苍白。再灌1～2min后转为鲜红色。脑电图：额，顶，枕双侧对称放置电极各一，参考电极可至于鼻部，四动脉阻断成功时，2～3min内成一直线，再灌后可恢复正常。
3 影响因素
3.1 应检测动物的血糖，若血糖高于正常水平，应于实验前禁食，防止因血糖过高加重乳酸酸中毒的损伤。
3.2 应检测动物的血压，于阻断双侧颈总动脉的同时，降低系统血压至10.7KPa水平，减轻因阻断颈总动脉时出现的一过性高血压对实验的影响。
3.3 应注意保温，大鼠正常体温39.3℃+0.5℃。
3.4 应监测脑实质温度，亚低温(低于30℃)时脑缺血损害明显减轻，34℃时脑缺血20min，则有20%的海马锥体细胞发生损害，36℃时海马锥体细胞有中至重度的损害。
3.5 电灼椎动脉时，应阻断完全，勿伤及脑干，否则导致制作失败。
3.6 手术分离颈总动脉时，勿伤及气管，否则引起喉部及气管水肿，迅速窒息。
(收稿日期：1999-04-20), 百拇医药
单位：哈尔滨医科大学生物化学教研室
关键词：
本文介绍了制作大鼠全脑缺血再灌模型中大鼠的选择依据 本文介绍了制作大鼠全脑缺血再灌模型中大鼠的选择依据，质量控制要求，具体制作方法，及实验中应注意的几个影响因素。
1 大鼠的选择
1.1 选用大鼠的依据。
具备完整的脑底动脉环，其血管解剖接近人类；有大量的基础研究资料可供参考；主要生理功能无季节性变化；抗病力强；便于手术和管理，利于观察；价格低廉；
1.2 种系选择。
首选系统杂交大鼠，该鼠具有杂交优势，可克服近交衰退，具有遗传和表型上的一致性。
1.3 微生物控制
国外多用无菌动物或spf动物，可避免或减少微生物对实验的干扰。但鉴于国内现有条件，可采用清洁动物作为过渡，逐步采用spf动物。
2 模型制作
2.1 麻醉
2.1.1 吸入法：将大鼠头部或全身罩入内置吸有乙醚棉球的广口瓶内20～30s，即进入麻醉状态，若时程较长，可在鼻部放置吸有乙醚的棉球，不断滴加以维持麻醉状态。若出现角膜反射消失，瞳孔放大，应停止麻醉。此法易引起呼吸道分泌物增多，导致窒息。
2.1.2 腹腔麻醉：采用戊巴比妥钠4～5mg/100g，麻醉时程可持续60min，必要时可追加2mg/100g。此法麻醉过程平稳，气管分泌物少，适用于时程较长者，但过量易引起血压下降和呼吸抑制。
2.1.3 麻醉深度控制：规则胸腹式呼吸，血压，脉搏平稳，睑反射迟钝，对光反射迟钝，瞳孔稍大，肌松弛明显为适度。
2.2 手术。
固定麻醉大鼠，取颈前正中线切口，分离颈总动脉，放置手术线后缝皮。取颈后正中线切口，暴露第一颈椎双侧翼小孔，将电极插入翼小孔电凝阻断双侧椎动脉。24h后，关闭双侧颈总动脉造成全脑缺血，缺血达到各自时间要求后，放开颈总动脉，使脑血流再灌。
2.3 缺血状况判定。
意识消失，翻正反射消失。瞳孔颜色：缺血15min后完全苍白。再灌1～2min后转为鲜红色。脑电图：额，顶，枕双侧对称放置电极各一，参考电极可至于鼻部，四动脉阻断成功时，2～3min内成一直线，再灌后可恢复正常。
3 影响因素
3.1 应检测动物的血糖，若血糖高于正常水平，应于实验前禁食，防止因血糖过高加重乳酸酸中毒的损伤。
3.2 应检测动物的血压，于阻断双侧颈总动脉的同时，降低系统血压至10.7KPa水平，减轻因阻断颈总动脉时出现的一过性高血压对实验的影响。
3.3 应注意保温，大鼠正常体温39.3℃+0.5℃。
3.4 应监测脑实质温度，亚低温(低于30℃)时脑缺血损害明显减轻，34℃时脑缺血20min，则有20%的海马锥体细胞发生损害，36℃时海马锥体细胞有中至重度的损害。
3.5 电灼椎动脉时，应阻断完全，勿伤及脑干，否则导致制作失败。
3.6 手术分离颈总动脉时，勿伤及气管，否则引起喉部及气管水肿，迅速窒息。
(收稿日期：1999-04-20), 百拇医药