子宫内膜癌雌激素受体基因多态性的研究
作者：刘继红 黄胡信 Anabel Kearney Sujatha S.E.Fernando
单位：刘继红，中山医科大学肿瘤防治中心肿瘤医院妇科(广州，510060)；黄胡信，澳大利亚悉尼利物浦医院妇产科；Anabel Kearney Sujatha S.E.Fernando，澳大利亚悉尼利物浦医院病理科
关键词：子宫内膜癌；雌激素受体；基因多态性
癌症990520
【摘 要】 目的：探讨子宫内膜癌雌激素受体(ER)基因多态性表现的临床及病理学意义。方法：应用聚合酶链反应(PCR)和酶切电泳技术，检测33例原发性子宫内膜癌石蜡包埋切片中ER基因PvuⅡ限制性片段长度多态性(RELP)，分析其与免疫组织化学测定的ER表达状态、临床分期、肿瘤组织学类型和分化程度、肌层浸润深度、宫颈和血管受累情况，以及患者年龄之间的关系。结果：ER基因DNA为220bp，鉴别出三种ER基因型。4例为PvuⅡ纯合子220bp型；27型为杂合子220/186bp型，占82%；仅2例为纯合子186bp型。ER基因的RFLP与ER表达及上述临床病理学特征之间无显著相关(P>0.05)。结论：在子宫内膜癌中存在着ER的PvuⅡ基因多态性，并提示子宫内膜癌ER基因为杂合子型者，肿瘤的病理组织学分化好，通常无血管及宫颈侵犯。
, 百拇医药
中图分类号：R737.33；R730.2 文献标识码：A 文章编号：1000-467X(1999)05-0557-03
The study of DNA polymorphism in the estrogen receptor gene in endometrial carcinoma
LIU1 Ji-hong,Felix W.S.Wong,Anabel Kearney,et al.
Department of Gynaecology,Tumour Hospital of Sun Yat-sen University of Medical Sciences,Guangzhou 510060,P.R. China
Department of Obstetrics and Gynaecology,Liverpool Hospital,New South Wales 2170,Autralia
, 百拇医药
【Abstract】 Objective：To study the clinical signiticance of estrogen receptor (ER) gene in affecting the outcome on hormone-related endometrial carcinoma. Methods：PvuⅡ polymorphism of 33 primary endometrial cancer were examined and analysed by polymerase chain reaction (PCR) technique on the genomic DNA of ER extracted from paraffin-embedded tissue section. Results：Three genotypes of ER were identified and then correlated with ER immunohistochemistry (IHC),clinical stage,histological type and grade of tumour,depth of myometrial invasion and cervical involvement as well as the patient age at diagnosis. The homozygous PvuⅡ-ve (220 bp) pattern was present in 4 (12%) patients,the heterozygous PvuⅡ+ve/-ve (220/186bp) in 27 (82%) patients and the homozygous Pvu+ve (186 bp) only in 2 (6%) patients. PvuⅡ restriction fragment length polymorphism (RFLP) of the ER gene has no significant correlation with ER status by IHC method and clinicopatholoical features (P >0.05). Conclusion：The results of this small study indicated that there were PvuⅡ polymorphism of the ER gene in endometrial carcinoma and suggested a modest trend that the heterozygous PvuⅡ+ve/-ve was more frequently associated with histologicaly well-differentiated tumours and the absence of vascular and cervical inolvement.
, 百拇医药
Key words：Endometrial carcinoma;Estrogen receptor;Polymorphism
子宫内膜癌是一种激素相关性的恶性肿瘤，雌激素受体已被认为是内分泌治疗疗效的一个重要的预测因子及临床结局的预后因素。已有报道，肿瘤ER阳性的子宫内膜癌患者较ER阴性患者的生存期长〔1～3〕，对激素治疗的反应好。但临床上也发现一些ER阴性的病例激素治疗也可奏效。相反，ER阳性者并非总对激素敏感，不少复发性的肿瘤也呈ER阳性。其中的机理尚未阐明，因而促进了对ER基因的研究。
1 材料与方法
1.1 临床资料
自1993年～1995年，33例子宫内膜癌患者在澳大利亚悉尼利物浦医院接受全子宫或根治性子宫切除手术，手术标本由该院病理科检查并进行ER的免疫组织化学测定。本组全部病例的病理组织学特征由同一病理科医师复习，并记录免疫组化结果、组织学类型和分级、肌层浸润深度、宫颈有无侵犯及盆腔淋巴结转移情况。其他临床统计资料，包括患者年龄、FIGO分期(1988年手术病理分期)及手术方式等由病案记录获得。
, http://www.100md.com
1.2 实验方法
1.2.1 标本取材：全部标本取自利物浦医院病理科存档的石蜡块，每个石蜡标本切取10片，每片厚10μm,放入无菌的1.5ml离心管内，置室温下备DNA提取。
1.2.2 DNA抽提：用蛋白酶K溶液消化，每管内加入500μl，在50℃孵育1小时后，置37℃48小时。然后用酚—氯仿法提取DNA，具体方法为：每管内加入500μl苯酚混匀后离心1分钟，取水相上清。加入1∶1的酚—氯仿混合液500μl，混匀离心后取上清。再加氯仿500μl混匀，离心取上清。加入2.5Mol醋酸钠5μl及两倍体积的冰95%乙醇，置-20℃至少2小时，析出絮状DNA，离心15分钟沉淀之。70%乙醇洗涤一次，溶于无菌纯水中。
1.2.3 靶基因DNA的PCR扩增：引物由本研究组成员设计，澳大利亚Biotech international公司合成。其序列分别为ER2205’：GTCCATCAGTTCATCTGAG；ER2203’：ACTTACCTGCACCAGAATATG。靶基因在第一内含子。在PCR仪上热循环35次，条件为：93℃ 3分钟，52℃ 1分钟，72℃ 1分钟。
, 百拇医药
1.2.4 靶基因DNA的酶切及电泳：将PCR产物用酚—氯仿再次提取纯化，加入Pvull(Promega公司)限制性内切酶溶液，37℃孵育6小时。以8%Polyacrylamide电泳，溴化乙锭染色，紫外灯下拍照。
1.2.5 统计学方法：用卡方检验分析Pvull RFLP与ER表达状态及临床病理特征的关系，非参数检验法分析Pvull RFLP与患者年龄的关系。
2 结果
2.1 DNA分析结果
扩增后的ER基因DNA大小为220bp，酶切后可得到186bp和34bp两个片段，表现为三种基因型(图1)。即双链均无酶切位点的纯合子220bp，单链有酶切位点的杂合子220/186bp，以及双链均有该酶切位点的纯合子186bp。本研究中，4例为纯合子220bp，占12%；27例为杂合子，占82%；仅2例(6%)为纯合子186bp。杂合子为最常见的基因型。
, 百拇医药
图1 ER基因DNA酶切后的三种基因型
1 Marker=pUD19DNA/HpalⅡ;
2 阴性对照；3 纯合子186bp;
4 杂合子220/186bp;5 纯合子220bp
2.2 ER的PvuⅡ基因多态性与蛋白水平的表达
本组病例用免疫组化方法测定ER表达总的阳性率为58%，19例阳性，14例阴性。4例纯合子220bp中，2例ER表达阳性；而2例纯合子186bp均呈ER阳性表达；杂合子中15例ER阳性，12例阴性，阳性率56%，共差别无显著性(P>0.05)。
2.3 ER的PvuⅡ基因多态性与临床病理特征的关系(表1)
, 百拇医药
表1 ERPvuⅡRFLP与ER表达及临床病理特征 项 目
例数(%)
ER基因
P值
纯合子220bp
杂合子220/189bp
纯合子186bp
ER表达
0.45
阴性
14(42)
2
, 百拇医药
12
0
阳性
19(58)
2
15
2
临床分期
0.74
Ⅰ
26(79)
4
20
, 百拇医药 2
Ⅱ
3(9)
0
3
0
Ⅲ
4(12)
0
4
0
组织学类型
0.27
腺癌
, 百拇医药
26(79)
3
22
1
腺鳞癌
2(6)
1
1
0
乳头状腺癌
2(6)
0
2
0
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其他
3(9)
0
2
1
组织学分级
0.34
分化好
20(61)
1
18
1
中等分化
, http://www.100md.com 7(21)
2
5
0
分化差
6(18)
1
4
1
肌层浸润
0.60
无
11(33)
1
, 百拇医药
9
1
<1/2
15(46)
1
13
1
>1/2
7(21)
2
5
0
宫颈受累
, 百拇医药 0.60
无
29(88)
4
23
2
有
4(12)
0
4
0
侵犯血管
0.10
无
, 百拇医药
30(91)
4
25
1
有
3(9)
0
2
1
合 计
33
4
27
2
, 百拇医药
本组26例(79%)为临床Ⅰ期患者，其病理类型多为腺癌。而在26例腺癌中，分化好的肿瘤多为杂合子。在12例行淋巴切除的病例中，2例有淋巴结转移(17%)，均为杂合子。3例有血管浸润者，2例为杂合子，1例为纯合子186bp。27例杂合子中，93%和85%分别无血管和宫颈受累。ER基因的PvuⅡRFLP与临床手术分期、组织学类型、病理分级、肌层浸润和宫颈受累之间无显著相关性(P>0.05)。本组病例平均年龄及中位年龄分别为64.7岁和65岁，纯合子220bp组平均年龄为66.5岁，杂合子组为63.4岁，纯合子186bp组为74岁，其差别无统计学意义(P>0.05)。
3 讨论
人ER基因位于第六染色体长臂上(6q24～q27)，其第一内含子上的两个多态性等位基因已被描述，即用限制性内切酶PvuⅡ作用于易感DNA，可产生PvuⅡ-ve和PvuⅡ+ve两个不同长度的片段，鉴定出相应的两个等位基因，表现为三种基因型。在对乳腺癌的研究中，这些基因型已与在蛋白质水平测得的ER表达状态联系起来。Hill等〔4〕发现PvuⅡ-ve纯合子所患肿瘤很可能为ER阴性，而ER阳性的肿瘤67%为PvuⅡ+ve等位基因的纯合子，PvuⅡ等位基因的缺失可能与ER阴性相关。并发现ER的RFLP与患者被诊断时的年龄有很强的相关性。Yaich等〔5〕则报道PvuⅡ多态性与ER表达或患者年龄均无相关性。
, 百拇医药
对子宫内膜癌尚无类似的研究报道。目前，ER可在基因水平、转录水平、翻译(蛋白质)水平和功能水平被检测〔4〕。用免疫组化方法或酶联免疫酶标方法(ELIA)在蛋白质水平检测子宫内膜癌的ER，是手术后估计预后及预测激素治疗反应的重要指标。但子宫内膜癌患者的生存情况与ER表达并非变化一致。有报道生存时间达5年的患者的ER表达与死亡病例相比，并无显著差别〔3〕。因此，有必要探讨ER的基因型在影响临床及病理学进程方面的作用。本研究确定了人子宫内膜癌存在着ER的PvuⅡ基因多态性，但尚未能发现ER基因型与ER的免疫组化测定结果、患者年龄及其他临床病理特征之间有相关性。Parl等〔6〕对乳腺癌的类似研究中也未能发现PvuⅡRFLP与各种病理学特征的相关性，但观察到纯合子0.7kb(相当于本文的纯合子186bp)较其他两种基因型明显多见于年轻妇女，而另外两种基因型更多见于老年和绝经后妇女。此外，本组中仅少数病例行淋巴结清除，不足以评价PvuⅡPRLP与淋巴结转移的关系，有待进一步研究。
, http://www.100md.com
根据孟德尔遗传定律，人群中杂合子约占50%。本组中杂合子占82%，纯合子仅占18%。而在杂合子中，分化好的肿瘤占很高的比例，85%和93%的杂合子没有血管和宫颈受累，ER基因型为杂合子的子宫内膜癌患者可能较纯合子型患者的预后为好。
〔参考文献〕
〔1〕 Kauppila A. Oestrogen and progestin receptros as prognostic indicators in endometrial cancer. A review of the literature〔J〕. Acta Oncol,1989,28：561.
〔2〕 Creasman WT. Prognostic significance of hormone receptors in endometrial cancer〔J〕. Cancer,1993,71(4suppl)：1467～1470.
, http://www.100md.com
〔3〕 Friberg LG,Noren H. Prognostic value of steroid hormone receptors for 5-year survival in stage Ⅱ endometrial cancer〔J〕. Cancer,1993,71(11)：3570～3574.
〔4〕 Hill SM,Fuqua SA,Chamness GC,et al. Estrogen receptor expression in human breast cancer associated with an estrogen receptor gene restriction fragment length polymorphism〔J〕. Cancer Res,1989,49：145～148.
〔5〕 Yaich L,Dupont WD,Cavener DR,et al. Analysis of the PvuⅡ restriction fragment-length polymorphism and exon structure of the estrogen receptor gene in breast cancer and peripheral blood〔J〕. Cancer Res,1992,52：771～783.
〔6〕 Parl FF,Cavener DR,Dupont WD. Genomic DNA analysis of the estrogen receptor gene in breast cancer〔J〕. Breast Cancer Res Treat,1989,14：57～64.
收稿日期：1998-06-26；修回日期：1999-03-25, 百拇医药
单位：刘继红，中山医科大学肿瘤防治中心肿瘤医院妇科(广州，510060)；黄胡信，澳大利亚悉尼利物浦医院妇产科；Anabel Kearney Sujatha S.E.Fernando，澳大利亚悉尼利物浦医院病理科
关键词：子宫内膜癌；雌激素受体；基因多态性
癌症990520
【摘 要】 目的：探讨子宫内膜癌雌激素受体(ER)基因多态性表现的临床及病理学意义。方法：应用聚合酶链反应(PCR)和酶切电泳技术，检测33例原发性子宫内膜癌石蜡包埋切片中ER基因PvuⅡ限制性片段长度多态性(RELP)，分析其与免疫组织化学测定的ER表达状态、临床分期、肿瘤组织学类型和分化程度、肌层浸润深度、宫颈和血管受累情况，以及患者年龄之间的关系。结果：ER基因DNA为220bp，鉴别出三种ER基因型。4例为PvuⅡ纯合子220bp型；27型为杂合子220/186bp型，占82%；仅2例为纯合子186bp型。ER基因的RFLP与ER表达及上述临床病理学特征之间无显著相关(P>0.05)。结论：在子宫内膜癌中存在着ER的PvuⅡ基因多态性，并提示子宫内膜癌ER基因为杂合子型者，肿瘤的病理组织学分化好，通常无血管及宫颈侵犯。
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中图分类号：R737.33；R730.2 文献标识码：A 文章编号：1000-467X(1999)05-0557-03
The study of DNA polymorphism in the estrogen receptor gene in endometrial carcinoma
LIU1 Ji-hong,Felix W.S.Wong,Anabel Kearney,et al.
Department of Gynaecology,Tumour Hospital of Sun Yat-sen University of Medical Sciences,Guangzhou 510060,P.R. China
Department of Obstetrics and Gynaecology,Liverpool Hospital,New South Wales 2170,Autralia
, 百拇医药
【Abstract】 Objective：To study the clinical signiticance of estrogen receptor (ER) gene in affecting the outcome on hormone-related endometrial carcinoma. Methods：PvuⅡ polymorphism of 33 primary endometrial cancer were examined and analysed by polymerase chain reaction (PCR) technique on the genomic DNA of ER extracted from paraffin-embedded tissue section. Results：Three genotypes of ER were identified and then correlated with ER immunohistochemistry (IHC),clinical stage,histological type and grade of tumour,depth of myometrial invasion and cervical involvement as well as the patient age at diagnosis. The homozygous PvuⅡ-ve (220 bp) pattern was present in 4 (12%) patients,the heterozygous PvuⅡ+ve/-ve (220/186bp) in 27 (82%) patients and the homozygous Pvu+ve (186 bp) only in 2 (6%) patients. PvuⅡ restriction fragment length polymorphism (RFLP) of the ER gene has no significant correlation with ER status by IHC method and clinicopatholoical features (P >0.05). Conclusion：The results of this small study indicated that there were PvuⅡ polymorphism of the ER gene in endometrial carcinoma and suggested a modest trend that the heterozygous PvuⅡ+ve/-ve was more frequently associated with histologicaly well-differentiated tumours and the absence of vascular and cervical inolvement.
, 百拇医药
Key words：Endometrial carcinoma;Estrogen receptor;Polymorphism
子宫内膜癌是一种激素相关性的恶性肿瘤，雌激素受体已被认为是内分泌治疗疗效的一个重要的预测因子及临床结局的预后因素。已有报道，肿瘤ER阳性的子宫内膜癌患者较ER阴性患者的生存期长〔1～3〕，对激素治疗的反应好。但临床上也发现一些ER阴性的病例激素治疗也可奏效。相反，ER阳性者并非总对激素敏感，不少复发性的肿瘤也呈ER阳性。其中的机理尚未阐明，因而促进了对ER基因的研究。
1 材料与方法
1.1 临床资料
自1993年～1995年，33例子宫内膜癌患者在澳大利亚悉尼利物浦医院接受全子宫或根治性子宫切除手术，手术标本由该院病理科检查并进行ER的免疫组织化学测定。本组全部病例的病理组织学特征由同一病理科医师复习，并记录免疫组化结果、组织学类型和分级、肌层浸润深度、宫颈有无侵犯及盆腔淋巴结转移情况。其他临床统计资料，包括患者年龄、FIGO分期(1988年手术病理分期)及手术方式等由病案记录获得。
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1.2 实验方法
1.2.1 标本取材：全部标本取自利物浦医院病理科存档的石蜡块，每个石蜡标本切取10片，每片厚10μm,放入无菌的1.5ml离心管内，置室温下备DNA提取。
1.2.2 DNA抽提：用蛋白酶K溶液消化，每管内加入500μl，在50℃孵育1小时后，置37℃48小时。然后用酚—氯仿法提取DNA，具体方法为：每管内加入500μl苯酚混匀后离心1分钟，取水相上清。加入1∶1的酚—氯仿混合液500μl，混匀离心后取上清。再加氯仿500μl混匀，离心取上清。加入2.5Mol醋酸钠5μl及两倍体积的冰95%乙醇，置-20℃至少2小时，析出絮状DNA，离心15分钟沉淀之。70%乙醇洗涤一次，溶于无菌纯水中。
1.2.3 靶基因DNA的PCR扩增：引物由本研究组成员设计，澳大利亚Biotech international公司合成。其序列分别为ER2205’：GTCCATCAGTTCATCTGAG；ER2203’：ACTTACCTGCACCAGAATATG。靶基因在第一内含子。在PCR仪上热循环35次，条件为：93℃ 3分钟，52℃ 1分钟，72℃ 1分钟。
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1.2.4 靶基因DNA的酶切及电泳：将PCR产物用酚—氯仿再次提取纯化，加入Pvull(Promega公司)限制性内切酶溶液，37℃孵育6小时。以8%Polyacrylamide电泳，溴化乙锭染色，紫外灯下拍照。
1.2.5 统计学方法：用卡方检验分析Pvull RFLP与ER表达状态及临床病理特征的关系，非参数检验法分析Pvull RFLP与患者年龄的关系。
2 结果
2.1 DNA分析结果
扩增后的ER基因DNA大小为220bp，酶切后可得到186bp和34bp两个片段，表现为三种基因型(图1)。即双链均无酶切位点的纯合子220bp，单链有酶切位点的杂合子220/186bp，以及双链均有该酶切位点的纯合子186bp。本研究中，4例为纯合子220bp，占12%；27例为杂合子，占82%；仅2例(6%)为纯合子186bp。杂合子为最常见的基因型。
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图1 ER基因DNA酶切后的三种基因型
1 Marker=pUD19DNA/HpalⅡ;
2 阴性对照；3 纯合子186bp;
4 杂合子220/186bp;5 纯合子220bp
2.2 ER的PvuⅡ基因多态性与蛋白水平的表达
本组病例用免疫组化方法测定ER表达总的阳性率为58%，19例阳性，14例阴性。4例纯合子220bp中，2例ER表达阳性；而2例纯合子186bp均呈ER阳性表达；杂合子中15例ER阳性，12例阴性，阳性率56%，共差别无显著性(P>0.05)。
2.3 ER的PvuⅡ基因多态性与临床病理特征的关系(表1)
, 百拇医药
表1 ERPvuⅡRFLP与ER表达及临床病理特征 项 目
例数(%)
ER基因
P值
纯合子220bp
杂合子220/189bp
纯合子186bp
ER表达
0.45
阴性
14(42)
2
, 百拇医药
12
0
阳性
19(58)
2
15
2
临床分期
0.74
Ⅰ
26(79)
4
20
, 百拇医药 2
Ⅱ
3(9)
0
3
0
Ⅲ
4(12)
0
4
0
组织学类型
0.27
腺癌
, 百拇医药
26(79)
3
22
1
腺鳞癌
2(6)
1
1
0
乳头状腺癌
2(6)
0
2
0
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其他
3(9)
0
2
1
组织学分级
0.34
分化好
20(61)
1
18
1
中等分化
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2
5
0
分化差
6(18)
1
4
1
肌层浸润
0.60
无
11(33)
1
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9
1
<1/2
15(46)
1
13
1
>1/2
7(21)
2
5
0
宫颈受累
, 百拇医药 0.60
无
29(88)
4
23
2
有
4(12)
0
4
0
侵犯血管
0.10
无
, 百拇医药
30(91)
4
25
1
有
3(9)
0
2
1
合 计
33
4
27
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本组26例(79%)为临床Ⅰ期患者，其病理类型多为腺癌。而在26例腺癌中，分化好的肿瘤多为杂合子。在12例行淋巴切除的病例中，2例有淋巴结转移(17%)，均为杂合子。3例有血管浸润者，2例为杂合子，1例为纯合子186bp。27例杂合子中，93%和85%分别无血管和宫颈受累。ER基因的PvuⅡRFLP与临床手术分期、组织学类型、病理分级、肌层浸润和宫颈受累之间无显著相关性(P>0.05)。本组病例平均年龄及中位年龄分别为64.7岁和65岁，纯合子220bp组平均年龄为66.5岁，杂合子组为63.4岁，纯合子186bp组为74岁，其差别无统计学意义(P>0.05)。
3 讨论
人ER基因位于第六染色体长臂上(6q24～q27)，其第一内含子上的两个多态性等位基因已被描述，即用限制性内切酶PvuⅡ作用于易感DNA，可产生PvuⅡ-ve和PvuⅡ+ve两个不同长度的片段，鉴定出相应的两个等位基因，表现为三种基因型。在对乳腺癌的研究中，这些基因型已与在蛋白质水平测得的ER表达状态联系起来。Hill等〔4〕发现PvuⅡ-ve纯合子所患肿瘤很可能为ER阴性，而ER阳性的肿瘤67%为PvuⅡ+ve等位基因的纯合子，PvuⅡ等位基因的缺失可能与ER阴性相关。并发现ER的RFLP与患者被诊断时的年龄有很强的相关性。Yaich等〔5〕则报道PvuⅡ多态性与ER表达或患者年龄均无相关性。
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对子宫内膜癌尚无类似的研究报道。目前，ER可在基因水平、转录水平、翻译(蛋白质)水平和功能水平被检测〔4〕。用免疫组化方法或酶联免疫酶标方法(ELIA)在蛋白质水平检测子宫内膜癌的ER，是手术后估计预后及预测激素治疗反应的重要指标。但子宫内膜癌患者的生存情况与ER表达并非变化一致。有报道生存时间达5年的患者的ER表达与死亡病例相比，并无显著差别〔3〕。因此，有必要探讨ER的基因型在影响临床及病理学进程方面的作用。本研究确定了人子宫内膜癌存在着ER的PvuⅡ基因多态性，但尚未能发现ER基因型与ER的免疫组化测定结果、患者年龄及其他临床病理特征之间有相关性。Parl等〔6〕对乳腺癌的类似研究中也未能发现PvuⅡRFLP与各种病理学特征的相关性，但观察到纯合子0.7kb(相当于本文的纯合子186bp)较其他两种基因型明显多见于年轻妇女，而另外两种基因型更多见于老年和绝经后妇女。此外，本组中仅少数病例行淋巴结清除，不足以评价PvuⅡPRLP与淋巴结转移的关系，有待进一步研究。
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根据孟德尔遗传定律，人群中杂合子约占50%。本组中杂合子占82%，纯合子仅占18%。而在杂合子中，分化好的肿瘤占很高的比例，85%和93%的杂合子没有血管和宫颈受累，ER基因型为杂合子的子宫内膜癌患者可能较纯合子型患者的预后为好。
〔参考文献〕
〔1〕 Kauppila A. Oestrogen and progestin receptros as prognostic indicators in endometrial cancer. A review of the literature〔J〕. Acta Oncol,1989,28：561.
〔2〕 Creasman WT. Prognostic significance of hormone receptors in endometrial cancer〔J〕. Cancer,1993,71(4suppl)：1467～1470.
, http://www.100md.com
〔3〕 Friberg LG,Noren H. Prognostic value of steroid hormone receptors for 5-year survival in stage Ⅱ endometrial cancer〔J〕. Cancer,1993,71(11)：3570～3574.
〔4〕 Hill SM,Fuqua SA,Chamness GC,et al. Estrogen receptor expression in human breast cancer associated with an estrogen receptor gene restriction fragment length polymorphism〔J〕. Cancer Res,1989,49：145～148.
〔5〕 Yaich L,Dupont WD,Cavener DR,et al. Analysis of the PvuⅡ restriction fragment-length polymorphism and exon structure of the estrogen receptor gene in breast cancer and peripheral blood〔J〕. Cancer Res,1992,52：771～783.
〔6〕 Parl FF,Cavener DR,Dupont WD. Genomic DNA analysis of the estrogen receptor gene in breast cancer〔J〕. Breast Cancer Res Treat,1989,14：57～64.
收稿日期：1998-06-26；修回日期：1999-03-25, 百拇医药