日本七叶树化学成分的研究Ⅰ.七叶皂苷Ⅰa和Ⅰb的分离和鉴定
作者：赵静；杨秀伟
单位：赵静 杨秀伟，北京医科大学天然药物及仿生药物国家重点实验室(100083)
关键词：日本七叶树；七叶树科；三萜；七叶皂苷Ⅰa和Ⅰb
990503 摘 要 从日本七叶树Aesculus turbinata Blume. 种子的70%乙醇提取物中分得4个三萜皂苷化合物，经光谱学分析鉴定了其中2个化合物的结构，它们分别为：七叶皂苷Ⅰa：21β-巴豆酰基-22α-乙酰基原七叶皂苷配基-3β-O-[β-D-吡喃葡萄糖基(1-2)][β-D-吡喃葡萄糖基(1-4)]-β-D-吡喃葡萄糖醛酸(21β-tigloyl-22α-acetylprotoaescigenin-3β-O-[β-D-glucopyranosyl(1-2)][β-D-glucopyranosyl (1-4)]-β-D-glucopyra-nosiduronic acid) 和七叶皂苷Ⅰb：21β-当归酰基-22α-乙酰基原七叶皂苷配基-3β-O-[β-D-吡喃葡萄糖基(1-2)][β-D-吡喃葡萄糖基(1-4)]-β-D-吡喃葡萄糖醛酸(21β-angeloyl-22α-acetylprotoaescigenin-3β-O-[β-D-glucopyranosyl (1-2)][β-D-glucopyranosyl (1-4)]-β-D-glucopyranosiduronic acid), 均为首次从日本七叶树种子中分得。
, 百拇医药
Studies on the Chemical Constituents of Japanese Buckeye Seed
(Aesculus turbinata).Isolation and Identification
of Escins Ⅰa and Ⅰb
Zhao Jing and Yang Xiuwei
(National Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs, Beijing University
of Medical Sciences, Beijing 100083)
Abstract Four triterpenoid saponins were isolated from 70% ethanolic extract of the seeds of Aesculus turbinata Bl.. Two of them were identified by spectroscopic and chemical methods as escinⅠa:21β-tigloyl-22α-acetyl-protoaescigenin-3β-O-[β-D-glucopyranosyl (1-2)][β-D-glucopyranosyl (1-4)]-β-D-glucopyranosiduronic acid, and escin Ⅰb: 21β-angeloyl-22α-acetylprotoaescigenin-3β-O-[β-D-glucopyranosyl (1-2)][β-D-glucopyranosyl (1-4)]-β-D-glucopyranosiduronic acid. Both were obtained from A.turbinata for the first time.
, http://www.100md.com
Key words Aesculus turbinata Bl. Hippocastanaceae triterpenes escins Ⅰa and Ⅰb
日本七叶树Aesculus turbinata Blume.为七叶树科七叶树属植物，日本民间药用其种子，治疗咽喉肿痛和眼疾[1]。我国有栽培。此药化学成分曾报道[2，3]从总皂苷的水解产物中分离出玉蕊醇 C(barringtogenol C)、 七叶皂苷配基(aescigenin)、原七叶皂苷配基(protoaescigenin)和16-去氧玉蕊醇 C(16-desoxybarringtogenol C)。 迄今未见对其所含皂苷成分的报道。在对七叶树属药用植物化学成分的系统研究里，我们对日本七叶树种子的化学成分进行了研究，从中分离得到4个三萜皂苷化合物，经光谱学分析鉴定了其中2个化合物的结构，现将结果报道如下。
化合物Ⅰ在甲醇中为无色片状结晶，mp253℃～256℃。正源FAB-MS给出分子离子峰为1 153[M++Na]，相当于分子组成为C55H86O24。化合物Ⅰ的Ⅰ R光谱1 731、1 708、1 638cm-1示分子中含有羧基和α，β-不饱和内酯结构；3 404和1 072cm-1示分子中含有成苷低聚糖链。在化合物Ⅰ的1H和13CNMR光谱中，δ1.61(3H，d,J=7.0 Hz, Tig - 4″″)，1.92(3 H, s, Tig-5″″),7.40(1 H, dq-like, Tig-3″″)和δ167.8(C1″″)、136.8(C3″″)、129.1(C2″″)、12.1(C5″″)归属于分子结构中的巴豆酰基[4～6]；δ1.87(3H，s, OAc-Me)和δ170.8(C1″″)、20.6(C2″″)是属于分子结构的乙酰基。从化合物Ⅰ的1H，13CNMR 以及其 HMQC和HMBC谱推测有3，16，21β，22α，24，28-六氧化基团取代的齐墩果烷母核[7]。将化合物Ⅰ用温和酸回流水解，可得到葡萄糖、葡萄糖醛酸，原七叶皂苷配基-21β-巴豆酸酯( protoaescigenin-21β-tiglate,Ⅲ)[8]、七叶皂苷配基(aes-cigenin,Ⅳ)[9]和原七叶皂苷配基(protoaesc-
, http://www.100md.com
igenin, Ⅴ)[7]。综合分析化合物Ⅰ的1H，13C-NMR 以及其2D1H-1H 相关谱(COSY)，1H-1HNOESY，1H-13CCOSY，HMQC和HMBC，确定化合物Ⅰ的结构为21β-巴豆酰基-22α-乙酰基原七叶皂苷配基-3β-O-[β-D-吡喃葡萄糖基(1-2)][β-D-吡喃葡萄糖基(1-4)]-β-D-吡喃葡萄糖醛酸 (21β-tigloyl-22α-acetylprotoaescigenin-3β-O-[β-D-glucopyranosyl(1-2)][β-D-glucopyranosyl (1-4)]-β-D-glucopyra-nosiduronic acid)。最终，通过化合物Ⅰ的单晶X-衍射分析(另文发表)确证了其结构。该化合物与从欧马栗A.hippocastanum L. 种子中得到的七叶皂苷 Ⅰa(escin Ⅰa)[10～12]为同一化合物。
, 百拇医药
化合物Ⅱ为白色粉末，正源FAB-MS给出的分子离子峰与化合物Ⅰ相同，为1 153[M++Na]，相当于分子组成为C55H86O24。化合物Ⅱ的 IR 光谱1 735、1 711、1 639 cm-1示分子中含有羧基和 α，β-不饱和内酯结构；3 410和1 073 cm-1示分子中含有成苷低聚糖链。将化合物Ⅱ的1HNMR 和13CNMR 光谱进行比较，化合物Ⅰ分子结构中巴豆酰基的信号消失，而被当归酰基取代，即：1HNMR δ1.96(3 H,s,Ang-5″″),2.05 (3 H,d,J=7.0Hz,Ang-4″″)和 5.94(1 H，dq-like,Ang-3″″);13CNMR δ 167.6(C1″″), 128.6(C2″″),137.0(C3″″),15.3(C4″″)和20.8(C5″″)归属于分子结构中的当归酰基[4～6]，其它信号相同。将化合物Ⅱ用温和酸回流水解，可得到葡萄糖，葡萄糖醛酸，原七叶皂苷配基-21β-当归酸酯 (protoaescigenin-21β-angelate,Ⅲ)[13]，七叶皂苷配基(Ⅳ)和原七叶皂苷配基(Ⅴ)。综上分析，确定化合物Ⅱ的结构为：21β-当归酰基-22α-乙酰基原七叶皂苷配基-3β-O-[β-D-吡喃葡萄糖基(1-2)][β-D-吡喃葡萄糖基(1-4)]-β-D-吡喃葡萄糖醛酸(21β-angeloyl-22α-acetyl-protoaescigenin-3β-O-[β-D-glucopyranosyl(1-2)][β-D-glucopyranosyl(1-4)]-β-D-glucopyranosiduronic acid)。该化合物与从欧马栗A.hippocastanum L.种子中得到的七叶皂苷Ⅰb(escinⅠb)[10～12]为同一化合物。
, 百拇医药
七叶皂式Ⅰa 和Ⅰb 均为首次从日本七叶树种子中分得的三萜皂苷类化合物。七叶皂苷Ⅰa和Ⅰb 均具有抗炎活性。构效关系研究表明[13，14]：C21和 C22酰基是发挥其药效所必须的，而 C21-当归酰基取代化合物七叶皂苷Ⅰb的活性强于C21-巴豆酰基取代化合物七叶皂苷Ⅰa。它们是有发展前途的植物性抗炎药物。七叶皂苷Ⅰa和Ⅰb及化合物Ⅲ～Ⅵ的化学结构式见图1。
图1 七叶皂苷Ⅰa 和Ⅰb 及Ⅲ～Ⅵ的化学结构式
1 仪器、试剂与材料
熔点测定用北京电光科学仪器厂产XT-4A显微熔点测定仪，温度计未校正。IR 光谱用 Perkin-Elmer 983型红外光谱仪测定，KBr 压片。1HNMR和13CNMR用日本电子 JEOL GX-400(1H，400 MHz,13C, 100 MHz)和美国Varian INOVA-500(1H, 500 MHz, 13C, 125 MHz) 核磁共振仪，TMS 为内标。1H-1H 相关谱 (COSY)，1H-1HNOE-
, http://www.100md.com
SY，1H-13CCOSY， HMQC 和 HMBC 用标准脉冲系列。FAB-MS 用英国 VG 公司产 ZAB HS 质谱仪。
高效液相色谱仪用美国 Varian 公司生产的，2510型色谱泵，2550型紫外检测器，检测波长为220 nm。高效液相制备柱用美国 Phenomenex LUNA 10 μ C18(2)柱，250×21.2 id。流动相为 MeCN-1%HOAc 水溶液，流速为3.5 mL/min。
日本七叶树种子于1998年9月采自日本秋田县，经日本国立富山医科药科大学和汉药研究所资源开发部门山路诚一博士鉴定为A.turbinata Blume. 的种子，标本存放在富山科药科大学和汉药研究所药学资料馆，标本号No.17710。
2 提取与分离
, 百拇医药
日本七叶树种子粗粉3.0 kg 用3倍量70%乙醇回流提取2 h，共提取4次。合并提取液，减压浓缩至无醇味。然后，将其溶于1 000 mL 水中，依次用3倍量乙酸乙酯和水饱和正丁醇分别萃取3次，合并乙酸乙酯和正丁醇萃取液，减压浓缩至干，分别得乙酸乙酯萃取物(26.8 g，收率0.9%)和正丁醇萃取物(454.2 g，15.1%)。将正丁醇萃取物450 g 溶于800 mL水中，加在预处理好的 D101大孔树脂柱的顶端，依次用水(10 L)，20%乙醇(10 L)，40%乙醇(12 L)和95%乙醇(10 L)解吸，分别得解吸物15.2 g(0.51%)， 10.5 g(0.35%)， 19.1 g(0.64%)和66.7 g(2.22%)。将40%乙醇解吸物脱色溶于甲醇中，使成100 mg/mL 浓度，进行 HPLC 制备分离、纯化，分别得化合物Ⅰ(3.2 g)和Ⅱ(1.6 g)。
3 鉴定
七叶皂苷Ⅰa(Ⅰ)：无色片晶(MeOH)，mp 253℃～256℃, dec 260℃； Positive-mode FAB-MS: m/z 1 153[M+Na]+；IR(KBr):3 404,1 731,1 708,1 653,1 649,1 638,1 604,1 381,1 072cm-1；1HNMR(500 MHz,pyridine-d5) δppm：0.60(3 H，s,C25-Me),0.69(1 H,d,J=12.5 Hz,C5-H),0.74(3 H,s,C29-Me),1.16(1 H,d,J=10.0 Hz,C7-Ha),1.20(1 H,d,J=10.0 Hz,C7-Hb),1.29(3 H,s,C23-Me),1.29(3 H,s,C30-Me),1.47(2 H,m,C6- Hab)， 1.56(1 H,m,C9-H),1.61(3 H,d,J=7.0 Hz,Tig-4″″),1.79(3 H,s,C27-Me),1.87(3 H,s,OAc-Me),1.92(3 H,s,Tig-5″″),3.00(1 H,br s,C18-H),3.34(1 H,d,J=11.0 Hz，C3α-H),4.41(1 H,br,s,C16β-H),4.89(1 H,d,J=8.0 Hz,Glc A-1′-H),5.19(1 H,d,J=8.0 Hz ,Glc-1-H),5.35(1 H,br,s,C12-H),5.61(1 H,d,J=8.0 Hz,Glc-1″-H),6.24(1 H,d,J=10.5 Hz,C22-H),6.56(1 H,d,J=10.0 Hz,C21-H),7.04(1 H,dq-like,Tig-3″″)。13CNMR 数据见表1和2。
, 百拇医药
表1 七叶皂苷Ⅰa(Ⅰ)Ⅰb(Ⅱ)配基部分及其水解产物Ⅲ～Ⅵ的13CNMR数据 C
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Ⅴ
Ⅵ
1
38.1
38.1
38.9
38.2
, 百拇医药
38.9
39.0
2
26.2
26.2
28.4
28.6
28.4
28.4
3
90.8
90.8
80.0
, 百拇医药
80.3
80.1
80.1
4
43.3
43.3
43.1
43.3
43.2
43.2
5
55.8
55.8
, 百拇医药
56.3
56.4
56.4
56.4
6
18.2
18.2
19.0
19.2
19.1
19.1
7
32.9
, 百拇医药
32.9
33.5
32.9
33.6
33.6
8
39.6
39.8
40.0
40.4
40.1
40.1
9
, http://www.100md.com
46.4
46.4
47.1
47.5
47.3
47.9
10
36.2
36.0
36.9
37.2
37.0
37.0
, http://www.100md.com
11
23.7
23.7
24.1
24.2
24.1
24.2
12
123.1
123.1
123.3
122.7
122.9
, http://www.100md.com
123.3
13
142.5
142.5
143.5
144.5
143.9
143.5
14
41.3
41.3
41.8
41.1
, 百拇医药
42.0
41.9
15
34.2
34.3
34.3
31.1
34.3
34.4
16
67.8
67.7
67.9
, 百拇医药
76.4
67.8
67.9
17
47.6
47.7
48.2
41.1
47.2
48.2
18
39.7
39.6
, 百拇医药
40.3
41.2
41.2
40.6
19
46.9
46.9
47.8
49.9
48.2
47.2
20
36.0
, http://www.100md.com
36.0
36.3
38.2
36.4
36.1
21
79.1
79.3
81.9
90.8
78.7
81.7
22
, http://www.100md.com
74.0
74.6
72.7
76.8
77.3
73.3
23
22.2
22.2
23.5
23.7
23.5
23.6
, http://www.100md.com
24
63.0
63.0
64.5
64.7
64.6
64.6
25
15.3
15.7
16.8
17.2
16.9
, 百拇医药
16.9
26
16.4
16.4
16.2
16.1
16.3
16.2
27
27.1
27.1
27.3
28.9
, 百拇医药
27.4
27.4
28
63.4
63.5
65.7
61.0
68.4
66.2
29
29.2
29.2
29.8
, http://www.100md.com
29.1
30.6
29.8
30
19.9
20.0
20.3
19.2
19.4
20.4
T or A-1″″
167.8
167.6
, http://www.100md.com
168.6
168.6
T or A-2″″
129.1
128.6
129.8
129.6
T or A-3″″
136.8
137.0
136.2
135.9
, http://www.100md.com T or A-4″″
14.0
15.3
14.1
15.9
T or A-5″″
12.1
20.8
12.4
20.4
Acetyl-1″″
170.8
170.9
, http://www.100md.com
Acetyl-2″″
20.6
20.8
表2 七叶皂苷Ⅰa(Ⅰ)和Ⅰb(Ⅱ)糖基部分的13CNMR数据 C
Ⅰ
Ⅱ
glcA-1′
104.3
104.3
glcA-2′
79.3
78.6
, 百拇医药
glcA-3′
76.3
76.3
glcA-4′
81.9
81.9
glcA-5′
75.9
75.3
glcA-6′
172.9
170.9
2′-glc-1″
, http://www.100md.com
103.8
103.8
2′-glc-2″
75.3
75.3
2′-glc-3″
78.2
78.1
2′-glc-4″
69.4
69.4
2′-glc-5″
, 百拇医药 77.7
77.7
2′-glc-6″
61.3
61.3
4′-glc-1
104.3
104.3
4′-glc-2
74.6
74.6
4′-glc-3
77.9
, 百拇医药
77.9
4′-glc-4
71.1
71.1
4′-glc-5
77.9
77.5
4′-glc-6
62.0
61.9
七叶皂苷Ⅰa 的温和酸水解：将含七叶皂苷Ⅰa (200 mg) EtOH 溶液1.5 mL与4 mol/L HCl 1 mL混合，加热回流2 h。产物再用H2O 稀释后再用 EtOAc 萃取3次。合并EtOAc 液、浓缩至干并用H2O反复洗至无HCl，共得沉淀物53 mg。经常压柱层析分离(CHCl3-MeOH=9.5∶0.5)，得化合物Ⅲ～Ⅴ。水层浓缩后经 TLC 检识 (n-BuOH-HOAc-H2O=4∶1∶2)含葡萄糖和葡萄糖醛酸。
, 百拇医药
化合物Ⅲ：白色粉末，Positive-mode FAB-MS: m/z 611[M++Na]；EI-MS：m/z 588 [M+],470[M+-tiglic acid (CH3CH=C(CH3)CO2O)-H2O],440[M+-tiglic acid-H2O-Me×2],100[tiglic acid(M+)],83[tiglic acid (M+)-H2O]。1HNMR (500 MHz,pyridine-d5) δppm∶0.86(3 H,s,C25-Me),0.89(3 H,s,C26-Me),0.97(1 H,d,J=12.0 Hz,C5-H),1.08(3 H,s,C29-Me),1.33(3 H,s,C30-Me),1.42(1 H,dd,J=4.0,12.5 Hz,C19-Ha),1.53(3 H,s,C23-Me),1.57(3 H,d,J=8.0 Hz,Tig-4″″-Me),1.76(1 H,d,J=5.5 Hz,C9-H),1.80(3 H,s,C27-Me),1.82(3 H,s,Tig-5″″-Me),2.97(1 H,dd,J=3.0,13.5 Hz,C18-H)，3.08(1 H,dd,J=12.5,12.5 Hz,C19-Hb),3.66(1 H,d,J=4.4,13.2 Hz,C3α-H),3.68(1 H,d,J=10.0 Hz,C24-Ha),3.69(1 H,d,J=10.5 Hz,C28-Ha),3.96(1 H,d,J=10.5 Hz,C28-Hb),4.49(1 H,d,J=11.0 Hz, C24-Hb),4.84(1 H,d,J=9.5 Hz,C21-H),4.85(1 H,br s,C16β-H),5.41(1 H,br s,C12-H),6.41(1 H d,J=9.5 Hz,C22-H),6.98(1 H dq,J=5.5,14.3 Hz,Tig-3″″-H)。
, http://www.100md.com
化合物Ⅳ：白色粉末，EI-MS：m/z 488[M+],470[M+-H2O]。1HNMR(400MHz,pyridine-d5) δppm: 0.82(3 H,s,C25-Me),0.87(3 H,s,C26-Me),0.96(3 H,s,C29-Me),1.14(3 H,s,C30- Me),1.51(3 H,s,C23-Me),1.67(3 H,s,C27-Me),2.98(1 H,dd,J=6.3,11.6 Hz,C18-H),3.58(1 H,s,C28-Ha),3.61(1 H,dd,J=4.4,11.6 Hz,C3α-H),3.67(1 H,d,J=10.9 Hz,C24-Ha),3.83(1 H,d,J=10.6 Hz,C21-H),3.90(1 H,s,C28-Hb),4.19(1 H,d,J=10.6 Hz,C22-H),4.48(1 H,d,J=10.9 Hz,C24-Hb),4.88(1 H,d,J=2.7 Hz,C16β-H),5.31(1 H,dd,J=3.2 Hz,C12-H)。
, 百拇医药
化合物Ⅴ：白色粉末，EI-MS：m/z 506[M+],470[M+-2H2O]，440[M+-CH2OH+H]。1HNMR(400 MHz, pyridine-d5) δppm:0.93(3 H,s,C25-Me),0.94(3 H,s,C25-Me),1.00(1 H,d,J=12.0 Hz,C5-H),1.33(3 H,s,C29-Me),1.39(3 H,s,C30-Me),1.44(1 H,dd,J=4.4,13.1 Hz,C19-Ha),1.54(3 H,s,C23-Me),1.84(3 H,s,C27-Me),2.81(1 H,dd,J=3.9,14.2 Hz,C18-H),3.03(1 H,dd,J=13.6,13.6Hz, C19-Hb),3.64(1 H,d,J=4.4 Hz,C3α-H),3.69(1 H,d,J=12.4 Hz,C24-Ha),3.72(1 H,d,J=11.0 Hz,C28-Ha),4.01(1 H,d,J=10.5 Hz, C28-Hb), 4.51(1 H, d, J=11.0 Hz, C24-Hb), 4.63(1 H,d,J=9.8 Hz, C22-H), 4.78(1 H, d, J=9.8 Hz, C21-H), 5.02(1 H,br s,C16β-H), 5.43(1 H, dd, J=2.2, 3.3 Hz, C12-H), 5.79(1 H,d,J=4.2 Hz, C16α-OH)。
, 百拇医药
七叶皂苷Ⅰb(Ⅱ)：白色粉末，Positive- mode FAB-MS: m/z 1153[M+Na]+；IR(KBr):3 410,1 735,1 711,1 653,1 649,1 639,1 604,1 381,1 073 cm-1；1HNMR (500 MHz, pyridine-d5) δppm: 0.57(3 H,s,C25-Me),0.68(1 H,d,J=12.5 Hz,C5-H),0.73(3 H,s,C26-Me),1.01(3 H,s,C29-Me),1.13(1 H,d,J=10.0 Hz,C7-Ha),1.18(1 H,d,J=10.0 Hz,C7-Hb),1.24(6 H,s,23,C30-Me),1.42(2 H,m,C6-Hab),1.56(1 H,m,C9-H),1.75(3 H,s,C27-Me),1.88(3 H,s,OAc-Me),1.96(3 H,s,Ang-5″″),2.05(3 H,d,J=7.0 Hz,Ang-4″″), 2.99(1 H, dd, J=12.0, 12.0 Hz, C18-H), 3.32(1 H, d, J=9.5 Hz, C3α-H), 4.40(1 H, br s, C16β-H), 4.83(1 H, d, J=5.0 Hz, Glc A-1′-H), 5.14(1 H, br s, Glc-1-H), 5.34(1 H, br s, C12-H), 5.53(1 H, d, J=6.5 Hz, Glc-1″-H), 5.94(1 H, dq-like, Ang-3″″), 6.15(1 H, d, J=10.5 Hz,C22-H), 6.35(1 H, d, J=10.5 Hz,C21-H)。13CNMR 数据见表1和2。
, 百拇医药
七叶皂苷Ⅰb的温和酸水解：将含七叶皂苷Ⅰb(200 mg) EtOH 溶液1.5 mL与4 mol/L HCl 1 mL 混合，加热回流2 h。产物用 H2O稀释后再用 EtOAc萃取3次。合并EtOAc溶液浓缩至干并用H2O反复洗涤至无HCl。共得沉淀物47 mg。经常压柱层析分离(CHCl3-MeOH=9.5∶0.5)得化合物Ⅵ、Ⅳ和Ⅴ。水层浓缩后经TLC检识(n-BuOH-HOAc-H2O＝4∶1∶2)含葡萄糖和葡萄糖醛酸。
化合物Ⅵ：Positive-mode FAB-MS: m/z 611 [M++Na]; EI-MS: m/z 506[M+-angeloyl (CH3 CH = C(CH3)CO-H)], 470[M+-angelic acid (CH3CH=C(CH3)CO2H)-H2O]，440[M+-angelic acid-H2O-Me×2]，81[angelic acid (M+)-H2O-H]。1H NMR(500 MHz, pyridine-d5) δppm: 0.86(3 H,s, C25-Me), 0.89(3 H, s, C26-Me), 0.97(1 H, d, J=12.0 Hz,C5-H), 1.09(3 H, s, C29-Me), 1.31(3 H, s, C30-Me), 1.42(1 H, dd, J=4.5, 12.5 Hz, C19-Ha), 1.53(3 H, s, C23-Me), 1.76(1 H, d, J=5.5 Hz, C9-H), 1.80(3 H, s, C27-Me), 1.95(3 H, s, Tig-5″″-Me), 2.03(3 H, d, J=7.0 Hz, Tig-4″″-Me), 2.94(1 H, dd, J=3.5, 13.8 Hz, C18-H), 3.07(1 H, dd, J=13.0, 13.5 Hz, C19-Hb), 3.65(1 H, d, J=12.5 Hz, C3α-H), 3.68(1 H, d, J=10.0 Hz, C24-Ha), 3.69(1 H, d, J=10.5 Hz, C28-Ha), 3.94 (1 H, d, J=10.5 Hz, C28-Hb), 4.49 (1 H, d, J=11.0 Hz, C24-Hb), 4.79(1 H, d, J=10.5 Hz, C21-H), 4.84(1 H, br s, C16β-H), 5.39(1 H, br s, C12-H), 5.87(1H, dq, J=7.0, 14.5 Hz, Tig-3″″-H), 6.45(1 H, d, J=10.0 Hz, C22-H) 。
, 百拇医药
参 考 文 献
1 富士川英郎编.富士川 游著作集5：民间药.京都：思文阁出版，1981
2 Yosioka I, et al.Chem Pharm Bull, 1967, 15(1):135
3 Yosiokal et al.Chem Pharm Bull, 1971,19(6):1200
4 杨秀伟，等.长白山中医药研究与开发，1993，2(2)：33
5 Yang X W, et al.Chem Pharm Bull, 1992,40(6):1510
6 Chen D F, et al.Phytochemistry,1992,31(2):629
, http://www.100md.com
7 Mahato S B, et al.Phytochemistry, 1994,37(6):1517
8 Prakash D et al.J Indian Chem Soc,1983,60:806 (Ahmad VU and Rahman AU Eds. Handbook of Natural Products Data,vol.2:Pentacyclic Triterpenoids, Amsterdam: Elsevief, 1994:464)
9 Kapundu M, et al.Bull Soc Chim Belg, 1980,89:1001 (Ahmad VU and Rahman AU Eds. Handbook of Natural Products Data,vol.2:Pentacyclic Triterpenoids, Amsterdam: Elsevief, 1994:317)
, 百拇医药
10 Yoshikawa M, et al.Chem Pharm Bull, 1996,44(8):1454
11 Wagner V J, et al.Arzneim-Forsch(Drug Res), 20(2):205
12 Griffini A, et al.Fitoterapia, 1997,LXVⅢ(6)：520
13 Rechtenstamm R S, et al.Pharmazie, 1988, 43:208(Ahmad VU and Rahman AU Eds. Handbook of Natural Products Data,vol.2:Pentacyclic Triterpenoids, Amsterdam:Elsevief, 1994:464)
14 Matsuda H, et al.Bioorganic & Medicinal Chemistry Lettets, 1997,7(13):1611
15 Matsuda H, et al.Biol Pharm Bull, 1997,20(10):1092
(1998-12-21收稿), http://www.100md.com
单位：赵静 杨秀伟，北京医科大学天然药物及仿生药物国家重点实验室(100083)
关键词：日本七叶树；七叶树科；三萜；七叶皂苷Ⅰa和Ⅰb
990503 摘 要 从日本七叶树Aesculus turbinata Blume. 种子的70%乙醇提取物中分得4个三萜皂苷化合物，经光谱学分析鉴定了其中2个化合物的结构，它们分别为：七叶皂苷Ⅰa：21β-巴豆酰基-22α-乙酰基原七叶皂苷配基-3β-O-[β-D-吡喃葡萄糖基(1-2)][β-D-吡喃葡萄糖基(1-4)]-β-D-吡喃葡萄糖醛酸(21β-tigloyl-22α-acetylprotoaescigenin-3β-O-[β-D-glucopyranosyl(1-2)][β-D-glucopyranosyl (1-4)]-β-D-glucopyra-nosiduronic acid) 和七叶皂苷Ⅰb：21β-当归酰基-22α-乙酰基原七叶皂苷配基-3β-O-[β-D-吡喃葡萄糖基(1-2)][β-D-吡喃葡萄糖基(1-4)]-β-D-吡喃葡萄糖醛酸(21β-angeloyl-22α-acetylprotoaescigenin-3β-O-[β-D-glucopyranosyl (1-2)][β-D-glucopyranosyl (1-4)]-β-D-glucopyranosiduronic acid), 均为首次从日本七叶树种子中分得。
, 百拇医药
Studies on the Chemical Constituents of Japanese Buckeye Seed
(Aesculus turbinata).Isolation and Identification
of Escins Ⅰa and Ⅰb
Zhao Jing and Yang Xiuwei
(National Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs, Beijing University
of Medical Sciences, Beijing 100083)
Abstract Four triterpenoid saponins were isolated from 70% ethanolic extract of the seeds of Aesculus turbinata Bl.. Two of them were identified by spectroscopic and chemical methods as escinⅠa:21β-tigloyl-22α-acetyl-protoaescigenin-3β-O-[β-D-glucopyranosyl (1-2)][β-D-glucopyranosyl (1-4)]-β-D-glucopyranosiduronic acid, and escin Ⅰb: 21β-angeloyl-22α-acetylprotoaescigenin-3β-O-[β-D-glucopyranosyl (1-2)][β-D-glucopyranosyl (1-4)]-β-D-glucopyranosiduronic acid. Both were obtained from A.turbinata for the first time.
, http://www.100md.com
Key words Aesculus turbinata Bl. Hippocastanaceae triterpenes escins Ⅰa and Ⅰb
日本七叶树Aesculus turbinata Blume.为七叶树科七叶树属植物，日本民间药用其种子，治疗咽喉肿痛和眼疾[1]。我国有栽培。此药化学成分曾报道[2，3]从总皂苷的水解产物中分离出玉蕊醇 C(barringtogenol C)、 七叶皂苷配基(aescigenin)、原七叶皂苷配基(protoaescigenin)和16-去氧玉蕊醇 C(16-desoxybarringtogenol C)。 迄今未见对其所含皂苷成分的报道。在对七叶树属药用植物化学成分的系统研究里，我们对日本七叶树种子的化学成分进行了研究，从中分离得到4个三萜皂苷化合物，经光谱学分析鉴定了其中2个化合物的结构，现将结果报道如下。
化合物Ⅰ在甲醇中为无色片状结晶，mp253℃～256℃。正源FAB-MS给出分子离子峰为1 153[M++Na]，相当于分子组成为C55H86O24。化合物Ⅰ的Ⅰ R光谱1 731、1 708、1 638cm-1示分子中含有羧基和α，β-不饱和内酯结构；3 404和1 072cm-1示分子中含有成苷低聚糖链。在化合物Ⅰ的1H和13CNMR光谱中，δ1.61(3H，d,J=7.0 Hz, Tig - 4″″)，1.92(3 H, s, Tig-5″″),7.40(1 H, dq-like, Tig-3″″)和δ167.8(C1″″)、136.8(C3″″)、129.1(C2″″)、12.1(C5″″)归属于分子结构中的巴豆酰基[4～6]；δ1.87(3H，s, OAc-Me)和δ170.8(C1″″)、20.6(C2″″)是属于分子结构的乙酰基。从化合物Ⅰ的1H，13CNMR 以及其 HMQC和HMBC谱推测有3，16，21β，22α，24，28-六氧化基团取代的齐墩果烷母核[7]。将化合物Ⅰ用温和酸回流水解，可得到葡萄糖、葡萄糖醛酸，原七叶皂苷配基-21β-巴豆酸酯( protoaescigenin-21β-tiglate,Ⅲ)[8]、七叶皂苷配基(aes-cigenin,Ⅳ)[9]和原七叶皂苷配基(protoaesc-
, http://www.100md.com
igenin, Ⅴ)[7]。综合分析化合物Ⅰ的1H，13C-NMR 以及其2D1H-1H 相关谱(COSY)，1H-1HNOESY，1H-13CCOSY，HMQC和HMBC，确定化合物Ⅰ的结构为21β-巴豆酰基-22α-乙酰基原七叶皂苷配基-3β-O-[β-D-吡喃葡萄糖基(1-2)][β-D-吡喃葡萄糖基(1-4)]-β-D-吡喃葡萄糖醛酸 (21β-tigloyl-22α-acetylprotoaescigenin-3β-O-[β-D-glucopyranosyl(1-2)][β-D-glucopyranosyl (1-4)]-β-D-glucopyra-nosiduronic acid)。最终，通过化合物Ⅰ的单晶X-衍射分析(另文发表)确证了其结构。该化合物与从欧马栗A.hippocastanum L. 种子中得到的七叶皂苷 Ⅰa(escin Ⅰa)[10～12]为同一化合物。
, 百拇医药
化合物Ⅱ为白色粉末，正源FAB-MS给出的分子离子峰与化合物Ⅰ相同，为1 153[M++Na]，相当于分子组成为C55H86O24。化合物Ⅱ的 IR 光谱1 735、1 711、1 639 cm-1示分子中含有羧基和 α，β-不饱和内酯结构；3 410和1 073 cm-1示分子中含有成苷低聚糖链。将化合物Ⅱ的1HNMR 和13CNMR 光谱进行比较，化合物Ⅰ分子结构中巴豆酰基的信号消失，而被当归酰基取代，即：1HNMR δ1.96(3 H,s,Ang-5″″),2.05 (3 H,d,J=7.0Hz,Ang-4″″)和 5.94(1 H，dq-like,Ang-3″″);13CNMR δ 167.6(C1″″), 128.6(C2″″),137.0(C3″″),15.3(C4″″)和20.8(C5″″)归属于分子结构中的当归酰基[4～6]，其它信号相同。将化合物Ⅱ用温和酸回流水解，可得到葡萄糖，葡萄糖醛酸，原七叶皂苷配基-21β-当归酸酯 (protoaescigenin-21β-angelate,Ⅲ)[13]，七叶皂苷配基(Ⅳ)和原七叶皂苷配基(Ⅴ)。综上分析，确定化合物Ⅱ的结构为：21β-当归酰基-22α-乙酰基原七叶皂苷配基-3β-O-[β-D-吡喃葡萄糖基(1-2)][β-D-吡喃葡萄糖基(1-4)]-β-D-吡喃葡萄糖醛酸(21β-angeloyl-22α-acetyl-protoaescigenin-3β-O-[β-D-glucopyranosyl(1-2)][β-D-glucopyranosyl(1-4)]-β-D-glucopyranosiduronic acid)。该化合物与从欧马栗A.hippocastanum L.种子中得到的七叶皂苷Ⅰb(escinⅠb)[10～12]为同一化合物。
, 百拇医药
七叶皂式Ⅰa 和Ⅰb 均为首次从日本七叶树种子中分得的三萜皂苷类化合物。七叶皂苷Ⅰa和Ⅰb 均具有抗炎活性。构效关系研究表明[13，14]：C21和 C22酰基是发挥其药效所必须的，而 C21-当归酰基取代化合物七叶皂苷Ⅰb的活性强于C21-巴豆酰基取代化合物七叶皂苷Ⅰa。它们是有发展前途的植物性抗炎药物。七叶皂苷Ⅰa和Ⅰb及化合物Ⅲ～Ⅵ的化学结构式见图1。
图1 七叶皂苷Ⅰa 和Ⅰb 及Ⅲ～Ⅵ的化学结构式
1 仪器、试剂与材料
熔点测定用北京电光科学仪器厂产XT-4A显微熔点测定仪，温度计未校正。IR 光谱用 Perkin-Elmer 983型红外光谱仪测定，KBr 压片。1HNMR和13CNMR用日本电子 JEOL GX-400(1H，400 MHz,13C, 100 MHz)和美国Varian INOVA-500(1H, 500 MHz, 13C, 125 MHz) 核磁共振仪，TMS 为内标。1H-1H 相关谱 (COSY)，1H-1HNOE-
, http://www.100md.com
SY，1H-13CCOSY， HMQC 和 HMBC 用标准脉冲系列。FAB-MS 用英国 VG 公司产 ZAB HS 质谱仪。
高效液相色谱仪用美国 Varian 公司生产的，2510型色谱泵，2550型紫外检测器，检测波长为220 nm。高效液相制备柱用美国 Phenomenex LUNA 10 μ C18(2)柱，250×21.2 id。流动相为 MeCN-1%HOAc 水溶液，流速为3.5 mL/min。
日本七叶树种子于1998年9月采自日本秋田县，经日本国立富山医科药科大学和汉药研究所资源开发部门山路诚一博士鉴定为A.turbinata Blume. 的种子，标本存放在富山科药科大学和汉药研究所药学资料馆，标本号No.17710。
2 提取与分离
, 百拇医药
日本七叶树种子粗粉3.0 kg 用3倍量70%乙醇回流提取2 h，共提取4次。合并提取液，减压浓缩至无醇味。然后，将其溶于1 000 mL 水中，依次用3倍量乙酸乙酯和水饱和正丁醇分别萃取3次，合并乙酸乙酯和正丁醇萃取液，减压浓缩至干，分别得乙酸乙酯萃取物(26.8 g，收率0.9%)和正丁醇萃取物(454.2 g，15.1%)。将正丁醇萃取物450 g 溶于800 mL水中，加在预处理好的 D101大孔树脂柱的顶端，依次用水(10 L)，20%乙醇(10 L)，40%乙醇(12 L)和95%乙醇(10 L)解吸，分别得解吸物15.2 g(0.51%)， 10.5 g(0.35%)， 19.1 g(0.64%)和66.7 g(2.22%)。将40%乙醇解吸物脱色溶于甲醇中，使成100 mg/mL 浓度，进行 HPLC 制备分离、纯化，分别得化合物Ⅰ(3.2 g)和Ⅱ(1.6 g)。
3 鉴定
七叶皂苷Ⅰa(Ⅰ)：无色片晶(MeOH)，mp 253℃～256℃, dec 260℃； Positive-mode FAB-MS: m/z 1 153[M+Na]+；IR(KBr):3 404,1 731,1 708,1 653,1 649,1 638,1 604,1 381,1 072cm-1；1HNMR(500 MHz,pyridine-d5) δppm：0.60(3 H，s,C25-Me),0.69(1 H,d,J=12.5 Hz,C5-H),0.74(3 H,s,C29-Me),1.16(1 H,d,J=10.0 Hz,C7-Ha),1.20(1 H,d,J=10.0 Hz,C7-Hb),1.29(3 H,s,C23-Me),1.29(3 H,s,C30-Me),1.47(2 H,m,C6- Hab)， 1.56(1 H,m,C9-H),1.61(3 H,d,J=7.0 Hz,Tig-4″″),1.79(3 H,s,C27-Me),1.87(3 H,s,OAc-Me),1.92(3 H,s,Tig-5″″),3.00(1 H,br s,C18-H),3.34(1 H,d,J=11.0 Hz，C3α-H),4.41(1 H,br,s,C16β-H),4.89(1 H,d,J=8.0 Hz,Glc A-1′-H),5.19(1 H,d,J=8.0 Hz ,Glc-1-H),5.35(1 H,br,s,C12-H),5.61(1 H,d,J=8.0 Hz,Glc-1″-H),6.24(1 H,d,J=10.5 Hz,C22-H),6.56(1 H,d,J=10.0 Hz,C21-H),7.04(1 H,dq-like,Tig-3″″)。13CNMR 数据见表1和2。
, 百拇医药
表1 七叶皂苷Ⅰa(Ⅰ)Ⅰb(Ⅱ)配基部分及其水解产物Ⅲ～Ⅵ的13CNMR数据 C
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Ⅴ
Ⅵ
1
38.1
38.1
38.9
38.2
, 百拇医药
38.9
39.0
2
26.2
26.2
28.4
28.6
28.4
28.4
3
90.8
90.8
80.0
, 百拇医药
80.3
80.1
80.1
4
43.3
43.3
43.1
43.3
43.2
43.2
5
55.8
55.8
, 百拇医药
56.3
56.4
56.4
56.4
6
18.2
18.2
19.0
19.2
19.1
19.1
7
32.9
, 百拇医药
32.9
33.5
32.9
33.6
33.6
8
39.6
39.8
40.0
40.4
40.1
40.1
9
, http://www.100md.com
46.4
46.4
47.1
47.5
47.3
47.9
10
36.2
36.0
36.9
37.2
37.0
37.0
, http://www.100md.com
11
23.7
23.7
24.1
24.2
24.1
24.2
12
123.1
123.1
123.3
122.7
122.9
, http://www.100md.com
123.3
13
142.5
142.5
143.5
144.5
143.9
143.5
14
41.3
41.3
41.8
41.1
, 百拇医药
42.0
41.9
15
34.2
34.3
34.3
31.1
34.3
34.4
16
67.8
67.7
67.9
, 百拇医药
76.4
67.8
67.9
17
47.6
47.7
48.2
41.1
47.2
48.2
18
39.7
39.6
, 百拇医药
40.3
41.2
41.2
40.6
19
46.9
46.9
47.8
49.9
48.2
47.2
20
36.0
, http://www.100md.com
36.0
36.3
38.2
36.4
36.1
21
79.1
79.3
81.9
90.8
78.7
81.7
22
, http://www.100md.com
74.0
74.6
72.7
76.8
77.3
73.3
23
22.2
22.2
23.5
23.7
23.5
23.6
, http://www.100md.com
24
63.0
63.0
64.5
64.7
64.6
64.6
25
15.3
15.7
16.8
17.2
16.9
, 百拇医药
16.9
26
16.4
16.4
16.2
16.1
16.3
16.2
27
27.1
27.1
27.3
28.9
, 百拇医药
27.4
27.4
28
63.4
63.5
65.7
61.0
68.4
66.2
29
29.2
29.2
29.8
, http://www.100md.com
29.1
30.6
29.8
30
19.9
20.0
20.3
19.2
19.4
20.4
T or A-1″″
167.8
167.6
, http://www.100md.com
168.6
168.6
T or A-2″″
129.1
128.6
129.8
129.6
T or A-3″″
136.8
137.0
136.2
135.9
, http://www.100md.com T or A-4″″
14.0
15.3
14.1
15.9
T or A-5″″
12.1
20.8
12.4
20.4
Acetyl-1″″
170.8
170.9
, http://www.100md.com
Acetyl-2″″
20.6
20.8
表2 七叶皂苷Ⅰa(Ⅰ)和Ⅰb(Ⅱ)糖基部分的13CNMR数据 C
Ⅰ
Ⅱ
glcA-1′
104.3
104.3
glcA-2′
79.3
78.6
, 百拇医药
glcA-3′
76.3
76.3
glcA-4′
81.9
81.9
glcA-5′
75.9
75.3
glcA-6′
172.9
170.9
2′-glc-1″
, http://www.100md.com
103.8
103.8
2′-glc-2″
75.3
75.3
2′-glc-3″
78.2
78.1
2′-glc-4″
69.4
69.4
2′-glc-5″
, 百拇医药 77.7
77.7
2′-glc-6″
61.3
61.3
4′-glc-1
104.3
104.3
4′-glc-2
74.6
74.6
4′-glc-3
77.9
, 百拇医药
77.9
4′-glc-4
71.1
71.1
4′-glc-5
77.9
77.5
4′-glc-6
62.0
61.9
七叶皂苷Ⅰa 的温和酸水解：将含七叶皂苷Ⅰa (200 mg) EtOH 溶液1.5 mL与4 mol/L HCl 1 mL混合，加热回流2 h。产物再用H2O 稀释后再用 EtOAc 萃取3次。合并EtOAc 液、浓缩至干并用H2O反复洗至无HCl，共得沉淀物53 mg。经常压柱层析分离(CHCl3-MeOH=9.5∶0.5)，得化合物Ⅲ～Ⅴ。水层浓缩后经 TLC 检识 (n-BuOH-HOAc-H2O=4∶1∶2)含葡萄糖和葡萄糖醛酸。
, 百拇医药
化合物Ⅲ：白色粉末，Positive-mode FAB-MS: m/z 611[M++Na]；EI-MS：m/z 588 [M+],470[M+-tiglic acid (CH3CH=C(CH3)CO2O)-H2O],440[M+-tiglic acid-H2O-Me×2],100[tiglic acid(M+)],83[tiglic acid (M+)-H2O]。1HNMR (500 MHz,pyridine-d5) δppm∶0.86(3 H,s,C25-Me),0.89(3 H,s,C26-Me),0.97(1 H,d,J=12.0 Hz,C5-H),1.08(3 H,s,C29-Me),1.33(3 H,s,C30-Me),1.42(1 H,dd,J=4.0,12.5 Hz,C19-Ha),1.53(3 H,s,C23-Me),1.57(3 H,d,J=8.0 Hz,Tig-4″″-Me),1.76(1 H,d,J=5.5 Hz,C9-H),1.80(3 H,s,C27-Me),1.82(3 H,s,Tig-5″″-Me),2.97(1 H,dd,J=3.0,13.5 Hz,C18-H)，3.08(1 H,dd,J=12.5,12.5 Hz,C19-Hb),3.66(1 H,d,J=4.4,13.2 Hz,C3α-H),3.68(1 H,d,J=10.0 Hz,C24-Ha),3.69(1 H,d,J=10.5 Hz,C28-Ha),3.96(1 H,d,J=10.5 Hz,C28-Hb),4.49(1 H,d,J=11.0 Hz, C24-Hb),4.84(1 H,d,J=9.5 Hz,C21-H),4.85(1 H,br s,C16β-H),5.41(1 H,br s,C12-H),6.41(1 H d,J=9.5 Hz,C22-H),6.98(1 H dq,J=5.5,14.3 Hz,Tig-3″″-H)。
, http://www.100md.com
化合物Ⅳ：白色粉末，EI-MS：m/z 488[M+],470[M+-H2O]。1HNMR(400MHz,pyridine-d5) δppm: 0.82(3 H,s,C25-Me),0.87(3 H,s,C26-Me),0.96(3 H,s,C29-Me),1.14(3 H,s,C30- Me),1.51(3 H,s,C23-Me),1.67(3 H,s,C27-Me),2.98(1 H,dd,J=6.3,11.6 Hz,C18-H),3.58(1 H,s,C28-Ha),3.61(1 H,dd,J=4.4,11.6 Hz,C3α-H),3.67(1 H,d,J=10.9 Hz,C24-Ha),3.83(1 H,d,J=10.6 Hz,C21-H),3.90(1 H,s,C28-Hb),4.19(1 H,d,J=10.6 Hz,C22-H),4.48(1 H,d,J=10.9 Hz,C24-Hb),4.88(1 H,d,J=2.7 Hz,C16β-H),5.31(1 H,dd,J=3.2 Hz,C12-H)。
, 百拇医药
化合物Ⅴ：白色粉末，EI-MS：m/z 506[M+],470[M+-2H2O]，440[M+-CH2OH+H]。1HNMR(400 MHz, pyridine-d5) δppm:0.93(3 H,s,C25-Me),0.94(3 H,s,C25-Me),1.00(1 H,d,J=12.0 Hz,C5-H),1.33(3 H,s,C29-Me),1.39(3 H,s,C30-Me),1.44(1 H,dd,J=4.4,13.1 Hz,C19-Ha),1.54(3 H,s,C23-Me),1.84(3 H,s,C27-Me),2.81(1 H,dd,J=3.9,14.2 Hz,C18-H),3.03(1 H,dd,J=13.6,13.6Hz, C19-Hb),3.64(1 H,d,J=4.4 Hz,C3α-H),3.69(1 H,d,J=12.4 Hz,C24-Ha),3.72(1 H,d,J=11.0 Hz,C28-Ha),4.01(1 H,d,J=10.5 Hz, C28-Hb), 4.51(1 H, d, J=11.0 Hz, C24-Hb), 4.63(1 H,d,J=9.8 Hz, C22-H), 4.78(1 H, d, J=9.8 Hz, C21-H), 5.02(1 H,br s,C16β-H), 5.43(1 H, dd, J=2.2, 3.3 Hz, C12-H), 5.79(1 H,d,J=4.2 Hz, C16α-OH)。
, 百拇医药
七叶皂苷Ⅰb(Ⅱ)：白色粉末，Positive- mode FAB-MS: m/z 1153[M+Na]+；IR(KBr):3 410,1 735,1 711,1 653,1 649,1 639,1 604,1 381,1 073 cm-1；1HNMR (500 MHz, pyridine-d5) δppm: 0.57(3 H,s,C25-Me),0.68(1 H,d,J=12.5 Hz,C5-H),0.73(3 H,s,C26-Me),1.01(3 H,s,C29-Me),1.13(1 H,d,J=10.0 Hz,C7-Ha),1.18(1 H,d,J=10.0 Hz,C7-Hb),1.24(6 H,s,23,C30-Me),1.42(2 H,m,C6-Hab),1.56(1 H,m,C9-H),1.75(3 H,s,C27-Me),1.88(3 H,s,OAc-Me),1.96(3 H,s,Ang-5″″),2.05(3 H,d,J=7.0 Hz,Ang-4″″), 2.99(1 H, dd, J=12.0, 12.0 Hz, C18-H), 3.32(1 H, d, J=9.5 Hz, C3α-H), 4.40(1 H, br s, C16β-H), 4.83(1 H, d, J=5.0 Hz, Glc A-1′-H), 5.14(1 H, br s, Glc-1-H), 5.34(1 H, br s, C12-H), 5.53(1 H, d, J=6.5 Hz, Glc-1″-H), 5.94(1 H, dq-like, Ang-3″″), 6.15(1 H, d, J=10.5 Hz,C22-H), 6.35(1 H, d, J=10.5 Hz,C21-H)。13CNMR 数据见表1和2。
, 百拇医药
七叶皂苷Ⅰb的温和酸水解：将含七叶皂苷Ⅰb(200 mg) EtOH 溶液1.5 mL与4 mol/L HCl 1 mL 混合，加热回流2 h。产物用 H2O稀释后再用 EtOAc萃取3次。合并EtOAc溶液浓缩至干并用H2O反复洗涤至无HCl。共得沉淀物47 mg。经常压柱层析分离(CHCl3-MeOH=9.5∶0.5)得化合物Ⅵ、Ⅳ和Ⅴ。水层浓缩后经TLC检识(n-BuOH-HOAc-H2O＝4∶1∶2)含葡萄糖和葡萄糖醛酸。
化合物Ⅵ：Positive-mode FAB-MS: m/z 611 [M++Na]; EI-MS: m/z 506[M+-angeloyl (CH3 CH = C(CH3)CO-H)], 470[M+-angelic acid (CH3CH=C(CH3)CO2H)-H2O]，440[M+-angelic acid-H2O-Me×2]，81[angelic acid (M+)-H2O-H]。1H NMR(500 MHz, pyridine-d5) δppm: 0.86(3 H,s, C25-Me), 0.89(3 H, s, C26-Me), 0.97(1 H, d, J=12.0 Hz,C5-H), 1.09(3 H, s, C29-Me), 1.31(3 H, s, C30-Me), 1.42(1 H, dd, J=4.5, 12.5 Hz, C19-Ha), 1.53(3 H, s, C23-Me), 1.76(1 H, d, J=5.5 Hz, C9-H), 1.80(3 H, s, C27-Me), 1.95(3 H, s, Tig-5″″-Me), 2.03(3 H, d, J=7.0 Hz, Tig-4″″-Me), 2.94(1 H, dd, J=3.5, 13.8 Hz, C18-H), 3.07(1 H, dd, J=13.0, 13.5 Hz, C19-Hb), 3.65(1 H, d, J=12.5 Hz, C3α-H), 3.68(1 H, d, J=10.0 Hz, C24-Ha), 3.69(1 H, d, J=10.5 Hz, C28-Ha), 3.94 (1 H, d, J=10.5 Hz, C28-Hb), 4.49 (1 H, d, J=11.0 Hz, C24-Hb), 4.79(1 H, d, J=10.5 Hz, C21-H), 4.84(1 H, br s, C16β-H), 5.39(1 H, br s, C12-H), 5.87(1H, dq, J=7.0, 14.5 Hz, Tig-3″″-H), 6.45(1 H, d, J=10.0 Hz, C22-H) 。
, 百拇医药
参 考 文 献
1 富士川英郎编.富士川 游著作集5：民间药.京都：思文阁出版，1981
2 Yosioka I, et al.Chem Pharm Bull, 1967, 15(1):135
3 Yosiokal et al.Chem Pharm Bull, 1971,19(6):1200
4 杨秀伟，等.长白山中医药研究与开发，1993，2(2)：33
5 Yang X W, et al.Chem Pharm Bull, 1992,40(6):1510
6 Chen D F, et al.Phytochemistry,1992,31(2):629
, http://www.100md.com
7 Mahato S B, et al.Phytochemistry, 1994,37(6):1517
8 Prakash D et al.J Indian Chem Soc,1983,60:806 (Ahmad VU and Rahman AU Eds. Handbook of Natural Products Data,vol.2:Pentacyclic Triterpenoids, Amsterdam: Elsevief, 1994:464)
9 Kapundu M, et al.Bull Soc Chim Belg, 1980,89:1001 (Ahmad VU and Rahman AU Eds. Handbook of Natural Products Data,vol.2:Pentacyclic Triterpenoids, Amsterdam: Elsevief, 1994:317)
, 百拇医药
10 Yoshikawa M, et al.Chem Pharm Bull, 1996,44(8):1454
11 Wagner V J, et al.Arzneim-Forsch(Drug Res), 20(2):205
12 Griffini A, et al.Fitoterapia, 1997,LXVⅢ(6)：520
13 Rechtenstamm R S, et al.Pharmazie, 1988, 43:208(Ahmad VU and Rahman AU Eds. Handbook of Natural Products Data,vol.2:Pentacyclic Triterpenoids, Amsterdam:Elsevief, 1994:464)
14 Matsuda H, et al.Bioorganic & Medicinal Chemistry Lettets, 1997,7(13):1611
15 Matsuda H, et al.Biol Pharm Bull, 1997,20(10):1092
(1998-12-21收稿), http://www.100md.com