沙棘油栓对宫颈糜烂患者免疫功能的影响
作者：牛健民 吴霭如
单位：牛健民 广东省妇幼保健院妇产科(510010)；吴霭如 西安医科大学第一附属医院(710061)
关键词：沙棘油栓；宫颈糜烂；ADCC活性；SIgA水平
广东医学990515摘要：目的 探讨沙棘油栓治疗宫颈糜烂的免疫学机制。方法 采用血红蛋白酶释放法测定正常对照组及实验组外周血ADCC活性；采用双抗体-PEG法测定正常对照组及实验组宫颈粘液SIgA水平。结果 宫颈糜烂患者外周血ADCC活性为37.88±4.74,较正常对照组显著降低(P<0.01)；宫颈糜烂患者宫颈粘液SIgA水平为639.6±135.63 μg/mL，较正常对照组显著增高(P<0.001)。实验组经沙棘油栓治疗2～3个疗程后，宫颈糜烂患者外周血ADCC活性明显增高(42.13±5.85)，宫颈粘液SIgA水平显著降低(468.28±105.25 μg/mL)，与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论 宫颈糜烂患者免疫功能紊乱，细胞免疫功能受损，局部体液免疫功能失调。沙棘油栓作为免疫调节剂，对于改善宫颈糜烂患者的免疫紊乱及免疫病理状态，具有一定的作用。
, 百拇医药
近年来，有关沙棘及其提取物的研究和应用已经深入到医学各基础和临床学科[1]。利用沙棘提取物研制成的沙棘油栓(HOS，主要成份为沙棘油)治疗妇科常见疾病——宫颈糜烂，也取得了较为满意的临床效果[2]。为了探讨HOS治疗宫颈糜烂的机理，本文从免疫学角度出发，对宫颈糜烂患者局部及全身免疫机制的改变，以及HOS对于改善宫颈糜烂患者免疫紊乱及免疫病理状态的作用进行了研究，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
1.1.1 正常对照组 排除宫颈炎等急、慢性疾病之健康女性31例，年龄21～48岁，平均年龄36.5岁。
1.1.2 实验组 宫颈糜烂患者33例(均来源于西安医科大学第一附属医院妇产科门诊就诊患者)，年龄22～50岁，平均年龄38.2岁，其中宫颈糜烂Ⅲ度者8例，Ⅱ度者19例，Ⅰ度者6例。本组患者均经沙棘油栓治疗2～3个疗程。
, 百拇医药
1.2 药品及治疗方法 沙棘油栓(每枚含沙棘油50%以上)，由西安医科大学第一附属医院妇科肿瘤实验室提供。实验组患者月经后第5天开始应用沙棘油栓，隔日1次，每次1枚，睡前置于阴道后穹隆部，6次为一疗程。
1.3 标本采集与制备
1.3.1 外周血效应细胞 无菌下取对照组及实验组治疗前、后外周静脉血5 mL，分离淋巴细胞，洗涤弃上清，加10% FCSRPMI 1640液调整浓度至1.25×107/mL细胞悬液(效应细胞)。
1.3.2 宫颈粘液 窥阴器直视下取对照组及实验组治疗前、后月经中期之宫颈粘液0.5 mL，置-20℃低温保存，检测前加入1% α-ME 0.2 mL处理标本，以1 000 r/min离心10 min，吸取上清待测。
, 百拇医药
1.4 实验方法
1.4.1 外周血抗体依赖性细胞毒(ADCC)活性测定 采用血红蛋白酶释放法测定ADCC活性，具体根据Jun Hou等[3]方法略加改进。
1.4.2 宫颈粘液分泌型IgA(SIgA)水平测定 采用双抗体-PEG法测定SIgA水平，药盒由上海放射免疫技术研究所提供，具体方法按说明书进行。
1.5 统计学处理方法 采用t检验。
2 结果
2.1 沙棘油栓对宫颈糜烂患者外周血ADCC活性的影响 结果见表1。表1显示，宫颈糜烂患者外周血ADCC活性较正常对照组显著降低(P<0.01)；经沙棘油栓治疗后ADCC活性明显增高，与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。
, http://www.100md.com
表1 HOS对宫颈糜烂患者外周血ADCC活性的影响(
±s) 分组
例数
ADCC活性
P值*
正常对照组
31
44.73±5.49
治疗组
治疗前
33
37.88±4.74
, 百拇医药
<0.01
治疗后
33
42.13±5.85
>0.05
*分别与正常对照组比较
2.2 沙棘油栓对宫颈糜烂患者宫颈粘液SIgA水平的影响 结果见表2。
表2 HOS对宫颈糜烂患者宫颈粘液SIgA水平的影响(±s，μg/mL) 分组
例数
, 百拇医药 SIgA水平
P值*
正常对照组
31
456.48±130.18
实验组
治疗前
33
639.6±135.63
<0.001
治疗后
33
468.28±105.25
, 百拇医药
>0.05
*分别与正常对照组比较3 讨论
宫颈糜烂病因复杂，顽固难治易复发，近年来研究表明：人乳头瘤病毒16型(HPV-16)、人疱疹病毒2型(HSV-2)、巨细胞病毒(CMV)和沙眼衣原体(CT)的感染与宫颈糜烂的发生密切相关[4]。当病毒感染机体细胞后，可以直接对机体免疫性产生影响，此影响主要包括两个方面：一是免疫抑制，二是免疫促进，且以免疫抑制为主。本研究结果显示：宫颈糜烂患者的ADCC活性为37.88±4.74，明显低于正常对照组的ADCC活性(P<0.01)。ADCC活性是一种携带Fc受体的细胞在抗体协助下破坏靶细胞的细胞毒效应。关于病毒感染后造成细胞免疫抑制，诸如ADCC活性降低的原因，目前尚不清楚，可能是因为病毒感染妨碍了巨嗜细胞和(或)淋巴细胞的受体性质，从而减弱了接受其他免疫原的能力。
本文对宫颈糜烂患者的局部免疫状态也做了观察，研究结果显示：宫颈糜烂患者的宫颈粘液SIgA水平为639.6±135.63 μg/mL，较正常对照组SIgA水平显著增高(P<0.001)。现已证实，宫颈粘液中的SIgA是宫颈局部免疫反应的主要抗体成份。当宫颈组织遭受致病性抗原物质(病毒、衣原体等)刺激后，宫颈外分泌腺局部的浆细胞合成更多的SIgA，分泌至宫颈粘液中。
, 百拇医药
关于宫颈糜烂的治疗方法，目前临床上多采用物理疗法，由于物理疗法不能彻底根除HPV等病毒，无法改善和调节免疫病理状态，因此治疗后复发率较高。也正是基于此因，近年来有不少学者根据宫颈糜烂患者局部及全身免疫机制改变的原理，在临床上试用免疫调节剂治疗宫颈糜烂，并收到了较好的疗效[5]。西安医科大学第一附属医院妇科肿瘤实验室自1989年起利用沙棘油栓治疗宫颈糜烂及宫颈癌前病变(CIN)，总有效率达90%以上。关于沙棘油栓治疗宫颈糜烂的原理，除沙棘油栓具有较强的杀菌作用及促进组织再生能力等因素以外，本文就其免疫机制做了初步探讨，结果提示：沙棘油栓作为免疫调节剂可以增强宫颈糜烂患者的细胞免疫功能和局部体液免疫功能，对于改善和调节宫颈糜烂患者的免疫紊乱及免疫病理状态，确有一定的作用。
参考文献
1 钟 飞.沙棘提取物的免疫药理学观察研究.国际沙棘学术交流会议论文集，1989，268
, 百拇医药
2 吴霭如.沙棘油栓治疗宫颈糜烂及宫颈癌前病变的临床观察.西安医科大学学报，1991，12(3)：361
3 Jum H, Wu FZ. Measurement of antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity by Hb-enzyme release assay (Hb-ERA). J Immunol Methods, 1985,85(2):325
4 王 群，徐 华，龙建秋，等.多重聚合酶链反应检测人子宫颈病毒感染.中华医学检验杂志，1996，19(2)：86
5 姚 堏，陈伟丽，金 杨，等.用PCR研究干扰素对宫颈糜烂患者人乳头瘤病毒感染的疗效.中国免疫学杂志，1997，13(3)：175, 百拇医药
单位：牛健民 广东省妇幼保健院妇产科(510010)；吴霭如 西安医科大学第一附属医院(710061)
关键词：沙棘油栓；宫颈糜烂；ADCC活性；SIgA水平
广东医学990515摘要：目的 探讨沙棘油栓治疗宫颈糜烂的免疫学机制。方法 采用血红蛋白酶释放法测定正常对照组及实验组外周血ADCC活性；采用双抗体-PEG法测定正常对照组及实验组宫颈粘液SIgA水平。结果 宫颈糜烂患者外周血ADCC活性为37.88±4.74,较正常对照组显著降低(P<0.01)；宫颈糜烂患者宫颈粘液SIgA水平为639.6±135.63 μg/mL，较正常对照组显著增高(P<0.001)。实验组经沙棘油栓治疗2～3个疗程后，宫颈糜烂患者外周血ADCC活性明显增高(42.13±5.85)，宫颈粘液SIgA水平显著降低(468.28±105.25 μg/mL)，与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论 宫颈糜烂患者免疫功能紊乱，细胞免疫功能受损，局部体液免疫功能失调。沙棘油栓作为免疫调节剂，对于改善宫颈糜烂患者的免疫紊乱及免疫病理状态，具有一定的作用。
, 百拇医药
近年来，有关沙棘及其提取物的研究和应用已经深入到医学各基础和临床学科[1]。利用沙棘提取物研制成的沙棘油栓(HOS，主要成份为沙棘油)治疗妇科常见疾病——宫颈糜烂，也取得了较为满意的临床效果[2]。为了探讨HOS治疗宫颈糜烂的机理，本文从免疫学角度出发，对宫颈糜烂患者局部及全身免疫机制的改变，以及HOS对于改善宫颈糜烂患者免疫紊乱及免疫病理状态的作用进行了研究，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
1.1.1 正常对照组 排除宫颈炎等急、慢性疾病之健康女性31例，年龄21～48岁，平均年龄36.5岁。
1.1.2 实验组 宫颈糜烂患者33例(均来源于西安医科大学第一附属医院妇产科门诊就诊患者)，年龄22～50岁，平均年龄38.2岁，其中宫颈糜烂Ⅲ度者8例，Ⅱ度者19例，Ⅰ度者6例。本组患者均经沙棘油栓治疗2～3个疗程。
, 百拇医药
1.2 药品及治疗方法 沙棘油栓(每枚含沙棘油50%以上)，由西安医科大学第一附属医院妇科肿瘤实验室提供。实验组患者月经后第5天开始应用沙棘油栓，隔日1次，每次1枚，睡前置于阴道后穹隆部，6次为一疗程。
1.3 标本采集与制备
1.3.1 外周血效应细胞 无菌下取对照组及实验组治疗前、后外周静脉血5 mL，分离淋巴细胞，洗涤弃上清，加10% FCSRPMI 1640液调整浓度至1.25×107/mL细胞悬液(效应细胞)。
1.3.2 宫颈粘液 窥阴器直视下取对照组及实验组治疗前、后月经中期之宫颈粘液0.5 mL，置-20℃低温保存，检测前加入1% α-ME 0.2 mL处理标本，以1 000 r/min离心10 min，吸取上清待测。
, 百拇医药
1.4 实验方法
1.4.1 外周血抗体依赖性细胞毒(ADCC)活性测定 采用血红蛋白酶释放法测定ADCC活性，具体根据Jun Hou等[3]方法略加改进。
1.4.2 宫颈粘液分泌型IgA(SIgA)水平测定 采用双抗体-PEG法测定SIgA水平，药盒由上海放射免疫技术研究所提供，具体方法按说明书进行。
1.5 统计学处理方法 采用t检验。
2 结果
2.1 沙棘油栓对宫颈糜烂患者外周血ADCC活性的影响 结果见表1。表1显示，宫颈糜烂患者外周血ADCC活性较正常对照组显著降低(P<0.01)；经沙棘油栓治疗后ADCC活性明显增高，与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。
, http://www.100md.com
表1 HOS对宫颈糜烂患者外周血ADCC活性的影响(
±s) 分组例数
ADCC活性
P值*
正常对照组
31
44.73±5.49
治疗组
治疗前
33
37.88±4.74
, 百拇医药
<0.01
治疗后
33
42.13±5.85
>0.05
*分别与正常对照组比较
2.2 沙棘油栓对宫颈糜烂患者宫颈粘液SIgA水平的影响 结果见表2。
表2 HOS对宫颈糜烂患者宫颈粘液SIgA水平的影响(
±s，μg/mL) 分组例数
, 百拇医药 SIgA水平
P值*
正常对照组
31
456.48±130.18
实验组
治疗前
33
639.6±135.63
<0.001
治疗后
33
468.28±105.25
, 百拇医药
>0.05
*分别与正常对照组比较3 讨论
宫颈糜烂病因复杂，顽固难治易复发，近年来研究表明：人乳头瘤病毒16型(HPV-16)、人疱疹病毒2型(HSV-2)、巨细胞病毒(CMV)和沙眼衣原体(CT)的感染与宫颈糜烂的发生密切相关[4]。当病毒感染机体细胞后，可以直接对机体免疫性产生影响，此影响主要包括两个方面：一是免疫抑制，二是免疫促进，且以免疫抑制为主。本研究结果显示：宫颈糜烂患者的ADCC活性为37.88±4.74，明显低于正常对照组的ADCC活性(P<0.01)。ADCC活性是一种携带Fc受体的细胞在抗体协助下破坏靶细胞的细胞毒效应。关于病毒感染后造成细胞免疫抑制，诸如ADCC活性降低的原因，目前尚不清楚，可能是因为病毒感染妨碍了巨嗜细胞和(或)淋巴细胞的受体性质，从而减弱了接受其他免疫原的能力。
本文对宫颈糜烂患者的局部免疫状态也做了观察，研究结果显示：宫颈糜烂患者的宫颈粘液SIgA水平为639.6±135.63 μg/mL，较正常对照组SIgA水平显著增高(P<0.001)。现已证实，宫颈粘液中的SIgA是宫颈局部免疫反应的主要抗体成份。当宫颈组织遭受致病性抗原物质(病毒、衣原体等)刺激后，宫颈外分泌腺局部的浆细胞合成更多的SIgA，分泌至宫颈粘液中。
, 百拇医药
关于宫颈糜烂的治疗方法，目前临床上多采用物理疗法，由于物理疗法不能彻底根除HPV等病毒，无法改善和调节免疫病理状态，因此治疗后复发率较高。也正是基于此因，近年来有不少学者根据宫颈糜烂患者局部及全身免疫机制改变的原理，在临床上试用免疫调节剂治疗宫颈糜烂，并收到了较好的疗效[5]。西安医科大学第一附属医院妇科肿瘤实验室自1989年起利用沙棘油栓治疗宫颈糜烂及宫颈癌前病变(CIN)，总有效率达90%以上。关于沙棘油栓治疗宫颈糜烂的原理，除沙棘油栓具有较强的杀菌作用及促进组织再生能力等因素以外，本文就其免疫机制做了初步探讨，结果提示：沙棘油栓作为免疫调节剂可以增强宫颈糜烂患者的细胞免疫功能和局部体液免疫功能，对于改善和调节宫颈糜烂患者的免疫紊乱及免疫病理状态，确有一定的作用。
参考文献
1 钟 飞.沙棘提取物的免疫药理学观察研究.国际沙棘学术交流会议论文集，1989，268
, 百拇医药
2 吴霭如.沙棘油栓治疗宫颈糜烂及宫颈癌前病变的临床观察.西安医科大学学报，1991，12(3)：361
3 Jum H, Wu FZ. Measurement of antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity by Hb-enzyme release assay (Hb-ERA). J Immunol Methods, 1985,85(2):325
4 王 群，徐 华，龙建秋，等.多重聚合酶链反应检测人子宫颈病毒感染.中华医学检验杂志，1996，19(2)：86
5 姚 堏，陈伟丽，金 杨，等.用PCR研究干扰素对宫颈糜烂患者人乳头瘤病毒感染的疗效.中国免疫学杂志，1997，13(3)：175, 百拇医药