经皮冠状动脉腔内成形术对冠心病患者外周血白细胞膜表面粘附分子表达的影响
作者：梁 春 吴宗贵 黄 佐 仲人前 张玲珍 李 莉
单位：梁 春 吴宗贵 黄 佐 中国人民解放军第二军医大学附属长征医院，心内科，上海市，200003；仲人前 张玲珍 李 莉 实验科
关键词：血管成形术，经腔，经皮冠状动脉；白细胞；细胞粘附分子
中国循环杂志990510 摘要：目的：探讨经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)后白细胞膜表面粘附分子表达的变化。
方法：以行常规冠状动脉造影的11例冠心病患者为对照组，21例行单支冠状动脉选择性PTCA冠心病患者为PTCA组；用流式细胞仪直接免疫荧光法检测术前、术后30分钟中性粒细胞和单核细胞膜表面CD11b、CD49d和CD54表达。
结果：PTCA后中性粒细胞和单核细胞膜表面CD11b及CD49d表达明显升高(P均<0.01)，而CD54表达无明显变化；对照组冠状动脉造影前后细胞粘附分子表达无显著差异。
, http://www.100md.com
结论：PTCA可使冠心病患者外周血中性粒细胞和单核细胞激活，并上调粘附分子CD11b及CD49d的表达。
中图分类号：R541.4
文献标识码：A
文章编号：1000-3614(1999)05-0281-02
Effect of Percutaneous Transluminal Coronary Angioplasty on Expression of Adhesion Molecule on Leukocytes in Patients with Coronary Artery Disease
Liang Chun,Wu Zonggui,Huang Zuo,et al.
, http://www.100md.com
Department of Cardiology,Changzheng Hospital,Second Military Medical University,Shanghai(200003)
Abstract Objective:To investigate changes in the expression of adhesion molecule on leukocytes in patients with coronary artery disease(CAD) after percutaneous transluminal coronary angioplasty(PTCA).
Methods:The expression of adhesion molecule CD11b,CD54 and CD49d on neutrophils and monocytes were measured by direct immunofluorescence techniques associated with flow cytometry before and 30 min after PTCA in 21 patients undergoing elective coronary angioplasty,11 CAD patients who underwent coronary arteriography were served as control group.
, http://www.100md.com
Result:After PTCA,there were an increase in neutrophils and monocytes CD11b and CD49d expression(p<0.01),but no changes in CD54 expression.In the control subjects,no changes in adhesion molecule expression occurred.
Conclusion:These findings suggest that PTCA triggers leukocytes activation in circulation and upregulates adhesion molecule CD11b and CD49d expression.
Key words Angioplasty，transluminal,percutaneous coronary;Leukocyte；Adhesion molecule
, 百拇医药
(Chinese Circulation Journal,1999,14:281.)
经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)现已被广泛应用于治疗闭塞性冠状动脉疾病，虽已取得了巨大的成功，但随后的急性血管闭塞和较高的再狭窄率限制了它的疗效，目前尚缺乏有效的防治措施。PTCA后的一系列病理生理机制仍未完全阐明，白细胞跨内皮迁移至血管壁间隙是组织损伤和炎症反应的必要步骤，白细胞与血管内皮的粘附是此过程中早期重要的一步，而粘附分子介导此全过程。本研究旨在于观察PTCA后冠心病患者外周血白细胞膜表面粘附分子表达的变化。
1 对象与方法
病例选择：选择1997年6月～1998年3月期间，在我院行PTCA的21例冠心病患者为PTCA组，男15例，女6例，年龄34～80(平均62.9)岁；其中陈旧性心肌梗塞10例，不稳定性心绞痛6例，稳定性心绞痛5例。另以行常规冠状动脉造影的11例冠心病患者为对照组，男8例，女3例，年龄31～69(平均50.3)岁。所有受试者不停用包括阿司匹林、硝酸脂类、钙拮抗剂和受体阻滞剂在内的药物；近期均无感染性疾病和肿瘤新生物，未用过类固醇类药物，无肝肾疾病。
, 百拇医药
细胞表面粘附分子表达的测定：于行冠状动脉造影或PTCA前、PTCA后30分钟，在股动脉内取动脉血10ml，肝素抗凝，立即置4℃冰箱降温抑制白细胞的活性，30分钟内用流式细胞仪(EPICS-XL型美国Culter公司)直接免疫荧光法检测，计数5000个细胞，用平均荧光密度代表细胞CD表达水平。同时对各标本做阴性对照，阴性对照除了以等量PBS+CD单克隆抗体外，操作同前。所用的鼠抗人单克隆抗体包括：CD11b-FITC、CD49d-FITC、CD54-FITC(法国Immunotech公司)。
统计分析：数据用
±s表示，两组间比较用配对t检验。P<0.05为有显著性差异。
2 结果
PTCA组皆成功实施扩张且无明显并发症；冠状动脉狭窄明显减少〔狭窄程度从(85.7±2.1)%到(34.5±1.6)%，P<0.001〕，平均应用造影剂总量210±15ml。对照组中有2例3支病变、4例2支病变、3例单支病变和2例轻度冠状动脉狭窄<50%；平均应用造影剂总量190±20ml，与PTCA组比较无显著差异。
, 百拇医药
白细胞粘附分子表达：PTCA组与对照组间白细胞分类计数无显著差异(PTCA组中性粒细胞数：3826±221mm3，单核细胞数：308±53mm3；对照组中性粒细胞数：4011±145mm3，单核细胞数：325±47mm3，P>0.05)；流式细胞仪检查示两组中性粒细胞及单核细胞与CD-FITC单抗结合率均在95.8%以上，相互间差异无显著性意义；PTCA后中性粒细胞和单核细胞膜表面CD11b及CD49d表达明显高于PTCA前(P均<0.01)，而CD54表达无明显变化；对照组冠状动脉造影前后细胞粘附分子表达无显著差异(附表)。
附表 两组中性粒细胞、单核细胞膜表面粘附分子的表达(±s，平均荧光密度) 组别
例数
, 百拇医药
中性粒细胞
单核细胞
CD11b
CD49d
CD54
CD11b
CD49d
CD54
对照组
11
冠状动脉造影前
178±31
686±112
, 百拇医药
517±26
207±36
986±101
327±27
冠状动脉造影后
186±28
675±133
527±17
213±41
1084±119
346±15
PTCA组
, 百拇医药
21
PTCA前
194±25
668±98
509±19
212±38
1011±125
339±21
PTCA后
244±27*
972±103*
537±28
, 百拇医药
268±46*
1552±231*
323±26
注：与对照组及PTCA前比较*P<0.01。PTCA：经皮冠状动脉腔内成形术
3 讨论
现研究表明PTCA可导致急性炎症反应，其中白细胞起重要作用，白细胞表面可表达多种粘附分子，主要有β1(CD11/CD18)、β2整合素(CD49)及CD54、L-selectin等，介导单核-内皮细胞粘附主要是CD11b/CD18-细胞间粘附分子-1、CD49d-血管内皮细胞粘附分子-1配体间相互作用。我们观察到PTCA后中性粒细胞及单核细胞膜表面CD11b及CD49d表达明显升高(P均<0.01)，而CD54表达无明显变化；以行常规冠状动脉造影为对照组的冠心病患者无明显变化。表明PTCA可使冠心病患者循环血中性粒细胞及单核细胞激活，并上调粘附分子CD11b及CD49d的表达。
, 百拇医药
PTCA激活冠心病患者外周血白细胞的原因可能有以下两点：①PTCA本身可被看作心肌缺血/再灌注的临床模型[1]。白细胞尤其是中性粒细胞在心肌缺血再灌注损伤发生中具有重要作用，外周血中中性粒细胞激活和与血管内皮的粘附是其介导的心脏损伤过程中的重要起始步骤[2]。②PTCA导致斑块破裂、动脉壁和内皮损伤，触发某些炎症和趋化因子的释放，后者上调白细胞粘附分子表达和激活[3]。
虽然本研究不能明确是否在PTCA后>30分钟冠心病患者外周血中中性粒细胞及单核细胞表面粘附分子仍可持续高表达；但有实验证明，在球囊损伤的兔主动脉局部，其白细胞和内皮细胞的激活可持续30天[4]。因此，PTCA后白细胞的激活可能触发一系列病理生理级联反应，释放某些炎症介质，促进血管平滑肌增殖导致再狭窄；而针对白细胞激活为靶点进行干预有望改善PTCA的预后。
作者简介：梁春(1967-)，男，主治医师，博士，主要从事冠心病炎症机制的研究
, http://www.100md.com
参考文献
1 Ikeda H,Nakayama H,Oda T,et al.Neutrophil activition after percutaneous transluminal coronary angioplasty.Am Heart J,1994,82:140—146.
2 Lefer DJ,Shandelya SML,Serrano CV,et al.Cardioprotective action of a monoclonal antibody against CD18 in myocardial ishemia/reperfusion injury.Circulation,1993,88:1779—1787.
3 Berliner JAB,Navab M,Fogelman AM,et al.Atherosclerosis:basic mechanisms-oxidation,inflammation,and genetic.Circulation,1995,91:2488—2496.
4 Tanaka H,Sukhova GK,Swanson SJ,et al.Sustained activation of vascular cells and leukocytes in the rabbit aorta after balloon injury.Circulation,1993,88:1788—1803.
收稿：1999-04-24
修回：1999-07-26, http://www.100md.com
单位：梁 春 吴宗贵 黄 佐 中国人民解放军第二军医大学附属长征医院，心内科，上海市，200003；仲人前 张玲珍 李 莉 实验科
关键词：血管成形术，经腔，经皮冠状动脉；白细胞；细胞粘附分子
中国循环杂志990510 摘要：目的：探讨经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)后白细胞膜表面粘附分子表达的变化。
方法：以行常规冠状动脉造影的11例冠心病患者为对照组，21例行单支冠状动脉选择性PTCA冠心病患者为PTCA组；用流式细胞仪直接免疫荧光法检测术前、术后30分钟中性粒细胞和单核细胞膜表面CD11b、CD49d和CD54表达。
结果：PTCA后中性粒细胞和单核细胞膜表面CD11b及CD49d表达明显升高(P均<0.01)，而CD54表达无明显变化；对照组冠状动脉造影前后细胞粘附分子表达无显著差异。
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结论：PTCA可使冠心病患者外周血中性粒细胞和单核细胞激活，并上调粘附分子CD11b及CD49d的表达。
中图分类号：R541.4
文献标识码：A
文章编号：1000-3614(1999)05-0281-02
Effect of Percutaneous Transluminal Coronary Angioplasty on Expression of Adhesion Molecule on Leukocytes in Patients with Coronary Artery Disease
Liang Chun,Wu Zonggui,Huang Zuo,et al.
, http://www.100md.com
Department of Cardiology,Changzheng Hospital,Second Military Medical University,Shanghai(200003)
Abstract Objective:To investigate changes in the expression of adhesion molecule on leukocytes in patients with coronary artery disease(CAD) after percutaneous transluminal coronary angioplasty(PTCA).
Methods:The expression of adhesion molecule CD11b,CD54 and CD49d on neutrophils and monocytes were measured by direct immunofluorescence techniques associated with flow cytometry before and 30 min after PTCA in 21 patients undergoing elective coronary angioplasty,11 CAD patients who underwent coronary arteriography were served as control group.
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Result:After PTCA,there were an increase in neutrophils and monocytes CD11b and CD49d expression(p<0.01),but no changes in CD54 expression.In the control subjects,no changes in adhesion molecule expression occurred.
Conclusion:These findings suggest that PTCA triggers leukocytes activation in circulation and upregulates adhesion molecule CD11b and CD49d expression.
Key words Angioplasty，transluminal,percutaneous coronary;Leukocyte；Adhesion molecule
, 百拇医药
(Chinese Circulation Journal,1999,14:281.)
经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)现已被广泛应用于治疗闭塞性冠状动脉疾病，虽已取得了巨大的成功，但随后的急性血管闭塞和较高的再狭窄率限制了它的疗效，目前尚缺乏有效的防治措施。PTCA后的一系列病理生理机制仍未完全阐明，白细胞跨内皮迁移至血管壁间隙是组织损伤和炎症反应的必要步骤，白细胞与血管内皮的粘附是此过程中早期重要的一步，而粘附分子介导此全过程。本研究旨在于观察PTCA后冠心病患者外周血白细胞膜表面粘附分子表达的变化。
1 对象与方法
病例选择：选择1997年6月～1998年3月期间，在我院行PTCA的21例冠心病患者为PTCA组，男15例，女6例，年龄34～80(平均62.9)岁；其中陈旧性心肌梗塞10例，不稳定性心绞痛6例，稳定性心绞痛5例。另以行常规冠状动脉造影的11例冠心病患者为对照组，男8例，女3例，年龄31～69(平均50.3)岁。所有受试者不停用包括阿司匹林、硝酸脂类、钙拮抗剂和受体阻滞剂在内的药物；近期均无感染性疾病和肿瘤新生物，未用过类固醇类药物，无肝肾疾病。
, 百拇医药
细胞表面粘附分子表达的测定：于行冠状动脉造影或PTCA前、PTCA后30分钟，在股动脉内取动脉血10ml，肝素抗凝，立即置4℃冰箱降温抑制白细胞的活性，30分钟内用流式细胞仪(EPICS-XL型美国Culter公司)直接免疫荧光法检测，计数5000个细胞，用平均荧光密度代表细胞CD表达水平。同时对各标本做阴性对照，阴性对照除了以等量PBS+CD单克隆抗体外，操作同前。所用的鼠抗人单克隆抗体包括：CD11b-FITC、CD49d-FITC、CD54-FITC(法国Immunotech公司)。
统计分析：数据用
±s表示，两组间比较用配对t检验。P<0.05为有显著性差异。2 结果
PTCA组皆成功实施扩张且无明显并发症；冠状动脉狭窄明显减少〔狭窄程度从(85.7±2.1)%到(34.5±1.6)%，P<0.001〕，平均应用造影剂总量210±15ml。对照组中有2例3支病变、4例2支病变、3例单支病变和2例轻度冠状动脉狭窄<50%；平均应用造影剂总量190±20ml，与PTCA组比较无显著差异。
, 百拇医药
白细胞粘附分子表达：PTCA组与对照组间白细胞分类计数无显著差异(PTCA组中性粒细胞数：3826±221mm3，单核细胞数：308±53mm3；对照组中性粒细胞数：4011±145mm3，单核细胞数：325±47mm3，P>0.05)；流式细胞仪检查示两组中性粒细胞及单核细胞与CD-FITC单抗结合率均在95.8%以上，相互间差异无显著性意义；PTCA后中性粒细胞和单核细胞膜表面CD11b及CD49d表达明显高于PTCA前(P均<0.01)，而CD54表达无明显变化；对照组冠状动脉造影前后细胞粘附分子表达无显著差异(附表)。
附表 两组中性粒细胞、单核细胞膜表面粘附分子的表达(
±s，平均荧光密度) 组别例数
, 百拇医药
中性粒细胞
单核细胞
CD11b
CD49d
CD54
CD11b
CD49d
CD54
对照组
11
冠状动脉造影前
178±31
686±112
, 百拇医药
517±26
207±36
986±101
327±27
冠状动脉造影后
186±28
675±133
527±17
213±41
1084±119
346±15
PTCA组
, 百拇医药
21
PTCA前
194±25
668±98
509±19
212±38
1011±125
339±21
PTCA后
244±27*
972±103*
537±28
, 百拇医药
268±46*
1552±231*
323±26
注：与对照组及PTCA前比较*P<0.01。PTCA：经皮冠状动脉腔内成形术
3 讨论
现研究表明PTCA可导致急性炎症反应，其中白细胞起重要作用，白细胞表面可表达多种粘附分子，主要有β1(CD11/CD18)、β2整合素(CD49)及CD54、L-selectin等，介导单核-内皮细胞粘附主要是CD11b/CD18-细胞间粘附分子-1、CD49d-血管内皮细胞粘附分子-1配体间相互作用。我们观察到PTCA后中性粒细胞及单核细胞膜表面CD11b及CD49d表达明显升高(P均<0.01)，而CD54表达无明显变化；以行常规冠状动脉造影为对照组的冠心病患者无明显变化。表明PTCA可使冠心病患者循环血中性粒细胞及单核细胞激活，并上调粘附分子CD11b及CD49d的表达。
, 百拇医药
PTCA激活冠心病患者外周血白细胞的原因可能有以下两点：①PTCA本身可被看作心肌缺血/再灌注的临床模型[1]。白细胞尤其是中性粒细胞在心肌缺血再灌注损伤发生中具有重要作用，外周血中中性粒细胞激活和与血管内皮的粘附是其介导的心脏损伤过程中的重要起始步骤[2]。②PTCA导致斑块破裂、动脉壁和内皮损伤，触发某些炎症和趋化因子的释放，后者上调白细胞粘附分子表达和激活[3]。
虽然本研究不能明确是否在PTCA后>30分钟冠心病患者外周血中中性粒细胞及单核细胞表面粘附分子仍可持续高表达；但有实验证明，在球囊损伤的兔主动脉局部，其白细胞和内皮细胞的激活可持续30天[4]。因此，PTCA后白细胞的激活可能触发一系列病理生理级联反应，释放某些炎症介质，促进血管平滑肌增殖导致再狭窄；而针对白细胞激活为靶点进行干预有望改善PTCA的预后。
作者简介：梁春(1967-)，男，主治医师，博士，主要从事冠心病炎症机制的研究
, http://www.100md.com
参考文献
1 Ikeda H,Nakayama H,Oda T,et al.Neutrophil activition after percutaneous transluminal coronary angioplasty.Am Heart J,1994,82:140—146.
2 Lefer DJ,Shandelya SML,Serrano CV,et al.Cardioprotective action of a monoclonal antibody against CD18 in myocardial ishemia/reperfusion injury.Circulation,1993,88:1779—1787.
3 Berliner JAB,Navab M,Fogelman AM,et al.Atherosclerosis:basic mechanisms-oxidation,inflammation,and genetic.Circulation,1995,91:2488—2496.
4 Tanaka H,Sukhova GK,Swanson SJ,et al.Sustained activation of vascular cells and leukocytes in the rabbit aorta after balloon injury.Circulation,1993,88:1788—1803.
收稿：1999-04-24
修回：1999-07-26, http://www.100md.com