酵母菌培养鉴定方法的比较
作者：张小卫 邵海枫 李珍大 王卫萍
单位：南京军区南京总医院检验科
关键词：酵母菌；鉴定；培养
临床检验杂志990523 为了综合判定酵母菌培养鉴定方法的优劣，我们采用常规鉴定法、生物梅里埃Vitek32-YBC鉴定卡和法国CHRO Mager念珠菌显色培养基培养鉴定法等三种方法对321株致病性酵母菌进行鉴定比较。
1 材料与方法
1.1 培养基 沙保弱培养基(沙保基)和手工鉴定培养基按常规自配，CHRO Mager念珠菌显色培养基(显色基)购自博赛公司，YBC鉴定卡为生物梅里埃公司产品。
1.2 标本 321株致病性酵母菌从748份痰、中段尿、粪、宫颈分泌物、血等临床标本中分离。
1.3 方法 每份标本同时划线接种沙保基和显色基，28°C培养每隔24 h观察一次，13天不生长判为阴性。
1.4 鉴定
1.4.1 手工鉴定法 沙保基上生长的菌落经涂片革兰染色确认为酵母菌孢子后，同时做血清芽管、尿素分解、菌膜及蔗糖发酵试验，芽管阳性为白色念珠菌，芽管阴性，菌膜、蔗糖阳性为热带念珠菌，其它情况作进一步生化鉴定。
1.4.2 YBC卡鉴定法 分离、染色同上，将菌液调至2.0麦氏单位，充满YBC卡后28°C孵育24 h，放入Vitek32分析，如未鉴定出继续孵育至48 h再上机分析，自动显示结果。
1.4.3 显色培养基鉴定法 在显色基上生长翠绿色菌落为白色念珠菌、兰灰色菌落为热带念珠菌，紫红色边缘模糊有微毛为克柔氏念珠菌，整个菌落显紫红色为光滑球拟酵母菌，白至紫色为其它念珠菌。
2 结果
2.1 两种培养基分离结果 真菌类在两种培养基上生长的阳性率相同，在沙保基上生长的霉菌如青霉菌、曲霉菌、镰刀菌、毛霉菌以及新型隐球菌等在显色基上均能生长。对细菌的抑菌率显色基强于沙保基，显色基上细菌生长率为1.1%，沙保基为9.9%。
2.2 三种方法鉴定差异 214株白色念珠菌三法鉴定无差异。手工法鉴定为热带念珠菌的67株菌中，58株显色基法和YBC卡也为热带念珠菌，另外9株显色法的结果为其它念珠菌，YBC卡鉴定其中5株为近平滑念珠菌，4株为季也蒙念珠菌。这9株菌的鉴定差异主要是因为出现了菌膜，因为在念珠菌的常规生化鉴定表中，仅有热带和克柔等念珠菌会出现菌膜。全部321株致病性酵母菌三种方法的鉴定结果见表1。
表1 321株致病酵母菌三种方法鉴定结果 菌名
手工法
显色法
YBC卡
白色念珠菌
214
214
214
热带念珠菌
67
58
58
光滑球拟酵母菌
20
20
20
近平滑念珠菌
6
6
11
季也蒙念珠菌
0
-
4
克柔氏念珠菌
3
3
3
酿酒酵母菌
0
-
3
新型隐球菌
2
-
2
异常汉逊酵母菌
0
-
2
葡萄牙念珠菌
0
-
2
红色酵母菌
1
1
1
伪热带念珠菌
0
-
1
其他*
8
19
0
*：表示用此法不能鉴定到种 -：表示用该法不能鉴定 (1998-12-22收稿，1999-06-13修回), 百拇医药
单位：南京军区南京总医院检验科
关键词：酵母菌；鉴定；培养
临床检验杂志990523 为了综合判定酵母菌培养鉴定方法的优劣，我们采用常规鉴定法、生物梅里埃Vitek32-YBC鉴定卡和法国CHRO Mager念珠菌显色培养基培养鉴定法等三种方法对321株致病性酵母菌进行鉴定比较。
1 材料与方法
1.1 培养基 沙保弱培养基(沙保基)和手工鉴定培养基按常规自配，CHRO Mager念珠菌显色培养基(显色基)购自博赛公司，YBC鉴定卡为生物梅里埃公司产品。
1.2 标本 321株致病性酵母菌从748份痰、中段尿、粪、宫颈分泌物、血等临床标本中分离。
1.3 方法 每份标本同时划线接种沙保基和显色基，28°C培养每隔24 h观察一次，13天不生长判为阴性。
1.4 鉴定
1.4.1 手工鉴定法 沙保基上生长的菌落经涂片革兰染色确认为酵母菌孢子后，同时做血清芽管、尿素分解、菌膜及蔗糖发酵试验，芽管阳性为白色念珠菌，芽管阴性，菌膜、蔗糖阳性为热带念珠菌，其它情况作进一步生化鉴定。
1.4.2 YBC卡鉴定法 分离、染色同上，将菌液调至2.0麦氏单位，充满YBC卡后28°C孵育24 h，放入Vitek32分析，如未鉴定出继续孵育至48 h再上机分析，自动显示结果。
1.4.3 显色培养基鉴定法 在显色基上生长翠绿色菌落为白色念珠菌、兰灰色菌落为热带念珠菌，紫红色边缘模糊有微毛为克柔氏念珠菌，整个菌落显紫红色为光滑球拟酵母菌，白至紫色为其它念珠菌。
2 结果
2.1 两种培养基分离结果 真菌类在两种培养基上生长的阳性率相同，在沙保基上生长的霉菌如青霉菌、曲霉菌、镰刀菌、毛霉菌以及新型隐球菌等在显色基上均能生长。对细菌的抑菌率显色基强于沙保基，显色基上细菌生长率为1.1%，沙保基为9.9%。
2.2 三种方法鉴定差异 214株白色念珠菌三法鉴定无差异。手工法鉴定为热带念珠菌的67株菌中，58株显色基法和YBC卡也为热带念珠菌，另外9株显色法的结果为其它念珠菌，YBC卡鉴定其中5株为近平滑念珠菌，4株为季也蒙念珠菌。这9株菌的鉴定差异主要是因为出现了菌膜，因为在念珠菌的常规生化鉴定表中，仅有热带和克柔等念珠菌会出现菌膜。全部321株致病性酵母菌三种方法的鉴定结果见表1。
表1 321株致病酵母菌三种方法鉴定结果 菌名
手工法
显色法
YBC卡
白色念珠菌
214
214
214
热带念珠菌
67
58
58
光滑球拟酵母菌
20
20
20
近平滑念珠菌
6
6
11
季也蒙念珠菌
0
-
4
克柔氏念珠菌
3
3
3
酿酒酵母菌
0
-
3
新型隐球菌
2
-
2
异常汉逊酵母菌
0
-
2
葡萄牙念珠菌
0
-
2
红色酵母菌
1
1
1
伪热带念珠菌
0
-
1
其他*
8
19
0
*：表示用此法不能鉴定到种 -：表示用该法不能鉴定 (1998-12-22收稿，1999-06-13修回), 百拇医药