丽春红S测定血清粘蛋白
作者：曹利民
单位：无锡市第三人民医院检验科
关键词：粘蛋白；丽春红S
丽春红S测定血清粘蛋白 丽春红S与蛋白质的结合率较强，利用该特性，我们用丽春红S作为显色剂测定血清粘蛋白，结果准确。现报告如下。
1 试剂
1.1 染料结合试剂 称取丽春红S 1.0 g溶解于8 ml浓盐酸中，再加5.0 g的磷钨酸，待溶解后加蒸馏水至100 ml，滤纸过滤后贮于棕色瓶中。
1.2 粘蛋白标准液 取无溶血、脂浊、黄疸的正常人新鲜血清20 ml，加生理盐水180 ml混匀后逐滴加入1.8 mol/L的高氯酸100 ml，边加边摇匀，放置10分钟，用双层优质滤纸过滤两次，放冰箱过夜，次日弃底层液体，用Lorry法反复测定蛋白，取均值，置4°C冰箱备用。
2 方法
取一支长试管，加血清0.5 ml及生理盐水4.5 ml，混匀后滴加1.8 mol/L高氯酸2.5 ml，混匀静置10分钟，过滤，取滤液4.0 ml作测定管，标准管加粘蛋白标准4.0 ml，空白管加蒸馏水4.0 ml，各管加染料结合试剂2.0 ml，混匀后，2 000 r/m离心5分钟，弃上清液，试管倒置滤纸除去多余染液，加0.5 mol/L氢氧化钠3.0 ml，37°C水浴10分钟，空白管调零，721分光光度计540 nm处读取吸光度。
3 实验结果与讨论
3.1 重复性试验 取一份正常人混合血清分成40份，分别进行批内，批间重复性试验n＝40，CV分别为2.3%和3.2%。
3.2 回收试验 取一已知粘蛋白浓度为370 mg/L的混合血清标本分三份各2.5 ml，分别加0.25 ml蒸馏水、315 mg/L标准液、402 mg/L标准液作为基础样品、低浓度样品、高浓度样品，用本法测定，回收率分别为97.2%、96.8%。
3.3 方法比较试验 用本法与Lorry法分别测定了42例健康人体检标本，本法
＝353±42.9 (mg/L)，Lorry法＝345±40.5 (mg/L)，其相关系数r为0.973，经t检验，t＝0.2682<0.684，P>0.5，故两法测定无显著性差异。
3.4 参考值 50名体检合格的男女成人，空腹静脉采血，用本法测得血清粘蛋白含量为350 mg/L，s为28 mg/L，x±2 s为294～406 (mg/L)。
(1998-10-26收稿), http://www.100md.com
单位：无锡市第三人民医院检验科
关键词：粘蛋白；丽春红S
丽春红S测定血清粘蛋白 丽春红S与蛋白质的结合率较强，利用该特性，我们用丽春红S作为显色剂测定血清粘蛋白，结果准确。现报告如下。
1 试剂
1.1 染料结合试剂 称取丽春红S 1.0 g溶解于8 ml浓盐酸中，再加5.0 g的磷钨酸，待溶解后加蒸馏水至100 ml，滤纸过滤后贮于棕色瓶中。
1.2 粘蛋白标准液 取无溶血、脂浊、黄疸的正常人新鲜血清20 ml，加生理盐水180 ml混匀后逐滴加入1.8 mol/L的高氯酸100 ml，边加边摇匀，放置10分钟，用双层优质滤纸过滤两次，放冰箱过夜，次日弃底层液体，用Lorry法反复测定蛋白，取均值，置4°C冰箱备用。
2 方法
取一支长试管，加血清0.5 ml及生理盐水4.5 ml，混匀后滴加1.8 mol/L高氯酸2.5 ml，混匀静置10分钟，过滤，取滤液4.0 ml作测定管，标准管加粘蛋白标准4.0 ml，空白管加蒸馏水4.0 ml，各管加染料结合试剂2.0 ml，混匀后，2 000 r/m离心5分钟，弃上清液，试管倒置滤纸除去多余染液，加0.5 mol/L氢氧化钠3.0 ml，37°C水浴10分钟，空白管调零，721分光光度计540 nm处读取吸光度。
3 实验结果与讨论
3.1 重复性试验 取一份正常人混合血清分成40份，分别进行批内，批间重复性试验n＝40，CV分别为2.3%和3.2%。
3.2 回收试验 取一已知粘蛋白浓度为370 mg/L的混合血清标本分三份各2.5 ml，分别加0.25 ml蒸馏水、315 mg/L标准液、402 mg/L标准液作为基础样品、低浓度样品、高浓度样品，用本法测定，回收率分别为97.2%、96.8%。
3.3 方法比较试验 用本法与Lorry法分别测定了42例健康人体检标本，本法
＝353±42.9 (mg/L)，Lorry法＝345±40.5 (mg/L)，其相关系数r为0.973，经t检验，t＝0.2682<0.684，P>0.5，故两法测定无显著性差异。3.4 参考值 50名体检合格的男女成人，空腹静脉采血，用本法测得血清粘蛋白含量
为350 mg/L，s为28 mg/L，x±2 s为294～406 (mg/L)。(1998-10-26收稿), http://www.100md.com