哮喘患者血浆肾上腺髓质素浓度测定及临床意义
作者：李贤峰 郑 红 杨 晔 周 峥
单位：李贤峰：第二军医大学长征医院心内科(上海，200003)；郑 红 杨 晔 周 峥：解放军海军总医院心内科(北京，100037)
关键词：哮喘；肾上骨髓质素；内皮素
中国急救医学990509 [摘 要] 目的 探讨肾上腺髓质素(adrenomedullin,AM)在哮喘急性发作期的病理生理作用。方法 用放射免疫测定的方法对哮喘急性发作期患者及健康对照组血浆AM和ET-1含量进行测定，并做相关分析。结果 哮喘急性发作期血浆AM及ET-1浓度均较健康对照组显著升高(P<0.01，P<0.05)，AM与ET-1浓度呈显著正相关(r＝0.45，P<0.05)。结论 哮喘急性发作期血浆AM浓度显著升高，这对于扩张支气管和抑制气道炎症可能起重要作用。
Plasma adrenomedullin and its clinical evaluation in patients with asthma Li Xianfeng ,Zheng Hong , Yang Ye ,et al .Department of cardiology ,Long March Hospital ,Shanghai 200003
, 百拇医药
[Abstract] Objective To study the pathophysiogical role of adrenomedullin (AM) in patients of acute attack of asthma .Methods Plasma ltvels of AM and endothelin (ET)-1 were determined by radioimmunoussay in patients of acute attack of asthma and normal subjects ,And their correlationship was analysed .Results Plasma levels of AM and ET-1 were significantly incteased in patients with asthma than those in normal subjects (P<0.01，P<0.05，respective).AM levels significanthy correlated with ET-1 levels (r＝0.45，P<0.05)。Conclusion Plasma levels of AM were significantly increased in patients of acute attack of asthma ,which probably played an important role in dilating bronchia and supressing airway inflammation.
, 百拇医药
[Key words] Adrenomedullin Endothelin Asthma
AM是日本学者Kitamura等人[1]1993年从人的嗜铬细胞瘤中分离出的一种新的多肽，由52个氨基酸组成，具有强烈的扩血管和利尿作用，它广泛分布于多种组织和器官中，并能在其中合成与分泌。随后的动物实验发现，AM对支气管也有明显而持久的扩张作用[2]。目前认为，AM在扩张支气管和抑制气道炎症方面有非常重要的作用。我们的实验旨在通过观察哮喘急性发作期血浆AM浓度及其与ET-1的相关性，探讨AM在哮喘中的病理生理作用。
1 资料与方法
1.1 一般资料 哮喘组：符合1997年中华医学会呼吸系病学会制订的诊断标准[3]的急性发作期的门诊或住院病人16例，男10例，女6例，年龄20～65岁，近3个月未使用激素治疗，排除心、脑、肾疾病和原发性、继发性高血压病。对照组为健康人20例，男12例，女8例，年龄20～55岁。
, 百拇医药
1.2 标本采集 哮喘患者就诊后即时静脉取血5 ml，注入含有EbTA-Na2(1g/L)和抑肽酶(5×105 KIU/L)的冷凝管中，摇匀后在4℃离心(3 500 r/min)10分钟。抽取血浆保存在-40℃下。对照组在基础状态下取血，方法同上。
1.3 测定方法 采用特异性放免法。AM药盒由美国Phoenix Pharmaceuticals Inc惠赠，ET-1药盒购于北京东亚免疫技术研究所。
1.4 统计学处理 各组均数均以
±s表示，两样本均数比较采用t检验和直线相关分析。P<0.05定义为差异显著。
2 结果
2.1 血浆AM与ET-1浓度
, 百拇医药
哮喘组急性发作期血浆AM与ET-1浓度显著高于对照组(P<0.01，P<0.05)。参见附表。
附表 哮喘组急性发作期血浆AM与ET-1浓度(mg/L)
AM
ET-1
哮喘急性发作期
32.6±3.4*
84.7±16.8**
正常对照
10.4±2.3
63.9±18.9
, 百拇医药
与对照组比，*P<0.01，**P<0.05
2.2 血浆AM与ET-1相关性
哮喘急性发作期血浆AM与ET-1值呈显著性正相关(r＝0.45，P<0.05)
3 讨论
自AM被发现以来，对其在心血管疾病中的研究最为广泛和深入。随着对AM扩张支气管作用的研究[2]，人们对其在呼吸系统中的作用也越来越重视。我们研究中发现哮喘急性发作期血浆AM浓度升高与Kohno等人[4]的研究结果一致，而它在哮喘中与ET-1的相关性则是我们首次报道，并为AM在哮喘急性发作期的病理生理作用提供进一步的解释。
AM在哮喘中的升高具有重要的临床价值。首先，它具有显著的支气管扩张作用，能显著抑制组织胺和乙酰胆碱诱发的支气管收缩[2]，AM可能直接作用于支气管平滑肌上的特异性受体而扩张支气管，在肺内已发现了它的特异性受体[5]。其次，AM能够抑制气道炎症，它能抑制肺泡巨噬细胞分泌CINC(cytokine - induced neutrophil chemoattractant) ，一种白介素-8家族的化学趋化因子，是一种重要的气道炎症介质[6]。
, 百拇医药
不仅如此，AM还通过直接或间接抑制哮喘中的某此炎症介质而发挥作用。已经证实，ET-1是支气管哮喘中最重要的炎症介质，也是迄今所知的最强的支气管平滑肌收缩剂，它既能引起支气管平滑肌的强烈痉挛，又能刺激多种炎症介质的释放，引起气道炎症。ET-1被认为在哮喘发病机制中起重要作用。我们实验中发现ET-1浓度显著升高，与其他众多学者报道一致，AM不但能直接抑制ET-1的合成与释放[7]，它还可能抑制由ET-1诱发的气道痉挛和气道炎症，但这种作用有待于进一步研究。我们实验中AM与ET-1显著正相关支持这种对抗作用。
降钙素基因相关肽(CGRP)是另一种重要的气道炎症介质，它可以直接作用于支气管平滑肌收缩支气管。几乎AM的所有生物学作用都可被CGRP或CGRP受体拮抗剂CGRP8-37所抑制，目前以为AM与CGRP竞争结合受体，所以哮喘中AM升高还可以通过拮抗CGRP受体而扩张支气管[8]。
AM对哮喘的重要作用不仅表现在气道上，还表现在肺循环中。在肺动脉高压的患者中血浆AM显著升高[9]，给动物注射AM可引起肺动脉压显著下降[10]。所以，AM升高有助于减轻哮喘急性发作时肺动脉的痉挛，降低肺循环阻力，改善缺氧和毛细血管渗出。
, 百拇医药
需要指出的是，AM的分泌方式是自分泌/旁分泌，这可以使其在局部形成很高的浓度，作用也更直接、准确和高效。我们实验中测定的只是血浆中的AM，它的作用可能只是为了对抗循环中的炎症介质，而真正起到扩张支气管和抑制气道炎症作用的可能只是气道局部以自分泌/旁分泌形式分泌的那部分AM，这有待于对支气管肺泡灌洗液的进一步研究。随着对AM在哮喘中的分泌部位、合成与释放机制的深入研究，外源性AM必将在哮喘治疗中发挥重要作用。
参考文献
1 Kitamura K,Kangawa k,kawamoto M,et al.Adrenomedullin:a novel hypotensive peptide isolated from human phaeochroma.Biochem Biophys Res Commun,1993,192(2):553-560
2 Kanazawa H , Kurihara N , hirata K , et al . Adrenomedullin , a newly
, 百拇医药
discovered hypotensive peptide,is a potent bronchodilator.Biochem biophys Res Commun,1994,205(1)：251-254
3 中华医学会呼吸系病学会.支气管哮喘防治指南.中华结核和呼吸杂志，1997，20(5)：261-265
4 Kohno M,Hanehira T,Hirata K,et al.An accelerated increase of plasma adrenomedullin in acute asthma.Metabolism,1996,45(11):1323-1325
5 Owji A,Smith D,Coppock H,et al.An abundant and specific binding site fot the novel vasodilator adrenomedullin in the rat.Endocrinology(Baltimore),1995,136(5):2127-2134
, 百拇医药
6 Kamoi H , Kanazawa H , Hirata K , et al . Adrenomedullin inhibits
the secretion of cytokine-induced neutrophil chemoattractant,a member of interleukin-8 family,from rat alveolar macrophages.Biochem Biophys Res Commun,1995,211(3):1031-1035
7 Kohno M,Kano H,Horio T,et al.Inhibition of endothelin production by adrenomedullin in vascular smooth muscle cells.Hyperten,1995,25(6)1185-1190
8 Kanazawa H,Kawaguchi T,Kamoi H,et al.Calcitonin gene-related peptide antagonizes the protective effect of adrenomedullin on histamine-induced bronchoconstriction.Clin Exp Pharmacol Physiol,1996,23(6-7):472-475
, http://www.100md.com
9 Yoshibayashi M,Kamiyo T,Kitamura K,et al.Plasma levels of adrenomedullin in primary and secondary pulmonary hypertension in patients<20 years of age.Am J Cardiol,1997,79(11):1156-1158
10 Nossaman B,Feng C,Cheng D,et al.Comparative effects of adrenomedullin,an adrenomedullin analog,and CGRP in the pulmonary vascular bde of the cat and rat.Life Sci,1994,56(3):63-66
(收稿：1998-05-07，修回：1999-03-25), 百拇医药
单位：李贤峰：第二军医大学长征医院心内科(上海，200003)；郑 红 杨 晔 周 峥：解放军海军总医院心内科(北京，100037)
关键词：哮喘；肾上骨髓质素；内皮素
中国急救医学990509 [摘 要] 目的 探讨肾上腺髓质素(adrenomedullin,AM)在哮喘急性发作期的病理生理作用。方法 用放射免疫测定的方法对哮喘急性发作期患者及健康对照组血浆AM和ET-1含量进行测定，并做相关分析。结果 哮喘急性发作期血浆AM及ET-1浓度均较健康对照组显著升高(P<0.01，P<0.05)，AM与ET-1浓度呈显著正相关(r＝0.45，P<0.05)。结论 哮喘急性发作期血浆AM浓度显著升高，这对于扩张支气管和抑制气道炎症可能起重要作用。
Plasma adrenomedullin and its clinical evaluation in patients with asthma Li Xianfeng ,Zheng Hong , Yang Ye ,et al .Department of cardiology ,Long March Hospital ,Shanghai 200003
, 百拇医药
[Abstract] Objective To study the pathophysiogical role of adrenomedullin (AM) in patients of acute attack of asthma .Methods Plasma ltvels of AM and endothelin (ET)-1 were determined by radioimmunoussay in patients of acute attack of asthma and normal subjects ,And their correlationship was analysed .Results Plasma levels of AM and ET-1 were significantly incteased in patients with asthma than those in normal subjects (P<0.01，P<0.05，respective).AM levels significanthy correlated with ET-1 levels (r＝0.45，P<0.05)。Conclusion Plasma levels of AM were significantly increased in patients of acute attack of asthma ,which probably played an important role in dilating bronchia and supressing airway inflammation.
, 百拇医药
[Key words] Adrenomedullin Endothelin Asthma
AM是日本学者Kitamura等人[1]1993年从人的嗜铬细胞瘤中分离出的一种新的多肽，由52个氨基酸组成，具有强烈的扩血管和利尿作用，它广泛分布于多种组织和器官中，并能在其中合成与分泌。随后的动物实验发现，AM对支气管也有明显而持久的扩张作用[2]。目前认为，AM在扩张支气管和抑制气道炎症方面有非常重要的作用。我们的实验旨在通过观察哮喘急性发作期血浆AM浓度及其与ET-1的相关性，探讨AM在哮喘中的病理生理作用。
1 资料与方法
1.1 一般资料 哮喘组：符合1997年中华医学会呼吸系病学会制订的诊断标准[3]的急性发作期的门诊或住院病人16例，男10例，女6例，年龄20～65岁，近3个月未使用激素治疗，排除心、脑、肾疾病和原发性、继发性高血压病。对照组为健康人20例，男12例，女8例，年龄20～55岁。
, 百拇医药
1.2 标本采集 哮喘患者就诊后即时静脉取血5 ml，注入含有EbTA-Na2(1g/L)和抑肽酶(5×105 KIU/L)的冷凝管中，摇匀后在4℃离心(3 500 r/min)10分钟。抽取血浆保存在-40℃下。对照组在基础状态下取血，方法同上。
1.3 测定方法 采用特异性放免法。AM药盒由美国Phoenix Pharmaceuticals Inc惠赠，ET-1药盒购于北京东亚免疫技术研究所。
1.4 统计学处理 各组均数均以
±s表示，两样本均数比较采用t检验和直线相关分析。P<0.05定义为差异显著。2 结果
2.1 血浆AM与ET-1浓度
, 百拇医药
哮喘组急性发作期血浆AM与ET-1浓度显著高于对照组(P<0.01，P<0.05)。参见附表。
附表 哮喘组急性发作期血浆AM与ET-1浓度(mg/L)
AM
ET-1
哮喘急性发作期
32.6±3.4*
84.7±16.8**
正常对照
10.4±2.3
63.9±18.9
, 百拇医药
与对照组比，*P<0.01，**P<0.05
2.2 血浆AM与ET-1相关性
哮喘急性发作期血浆AM与ET-1值呈显著性正相关(r＝0.45，P<0.05)
3 讨论
自AM被发现以来，对其在心血管疾病中的研究最为广泛和深入。随着对AM扩张支气管作用的研究[2]，人们对其在呼吸系统中的作用也越来越重视。我们研究中发现哮喘急性发作期血浆AM浓度升高与Kohno等人[4]的研究结果一致，而它在哮喘中与ET-1的相关性则是我们首次报道，并为AM在哮喘急性发作期的病理生理作用提供进一步的解释。
AM在哮喘中的升高具有重要的临床价值。首先，它具有显著的支气管扩张作用，能显著抑制组织胺和乙酰胆碱诱发的支气管收缩[2]，AM可能直接作用于支气管平滑肌上的特异性受体而扩张支气管，在肺内已发现了它的特异性受体[5]。其次，AM能够抑制气道炎症，它能抑制肺泡巨噬细胞分泌CINC(cytokine - induced neutrophil chemoattractant) ，一种白介素-8家族的化学趋化因子，是一种重要的气道炎症介质[6]。
, 百拇医药
不仅如此，AM还通过直接或间接抑制哮喘中的某此炎症介质而发挥作用。已经证实，ET-1是支气管哮喘中最重要的炎症介质，也是迄今所知的最强的支气管平滑肌收缩剂，它既能引起支气管平滑肌的强烈痉挛，又能刺激多种炎症介质的释放，引起气道炎症。ET-1被认为在哮喘发病机制中起重要作用。我们实验中发现ET-1浓度显著升高，与其他众多学者报道一致，AM不但能直接抑制ET-1的合成与释放[7]，它还可能抑制由ET-1诱发的气道痉挛和气道炎症，但这种作用有待于进一步研究。我们实验中AM与ET-1显著正相关支持这种对抗作用。
降钙素基因相关肽(CGRP)是另一种重要的气道炎症介质，它可以直接作用于支气管平滑肌收缩支气管。几乎AM的所有生物学作用都可被CGRP或CGRP受体拮抗剂CGRP8-37所抑制，目前以为AM与CGRP竞争结合受体，所以哮喘中AM升高还可以通过拮抗CGRP受体而扩张支气管[8]。
AM对哮喘的重要作用不仅表现在气道上，还表现在肺循环中。在肺动脉高压的患者中血浆AM显著升高[9]，给动物注射AM可引起肺动脉压显著下降[10]。所以，AM升高有助于减轻哮喘急性发作时肺动脉的痉挛，降低肺循环阻力，改善缺氧和毛细血管渗出。
, 百拇医药
需要指出的是，AM的分泌方式是自分泌/旁分泌，这可以使其在局部形成很高的浓度，作用也更直接、准确和高效。我们实验中测定的只是血浆中的AM，它的作用可能只是为了对抗循环中的炎症介质，而真正起到扩张支气管和抑制气道炎症作用的可能只是气道局部以自分泌/旁分泌形式分泌的那部分AM，这有待于对支气管肺泡灌洗液的进一步研究。随着对AM在哮喘中的分泌部位、合成与释放机制的深入研究，外源性AM必将在哮喘治疗中发挥重要作用。
参考文献
1 Kitamura K,Kangawa k,kawamoto M,et al.Adrenomedullin:a novel hypotensive peptide isolated from human phaeochroma.Biochem Biophys Res Commun,1993,192(2):553-560
2 Kanazawa H , Kurihara N , hirata K , et al . Adrenomedullin , a newly
, 百拇医药
discovered hypotensive peptide,is a potent bronchodilator.Biochem biophys Res Commun,1994,205(1)：251-254
3 中华医学会呼吸系病学会.支气管哮喘防治指南.中华结核和呼吸杂志，1997，20(5)：261-265
4 Kohno M,Hanehira T,Hirata K,et al.An accelerated increase of plasma adrenomedullin in acute asthma.Metabolism,1996,45(11):1323-1325
5 Owji A,Smith D,Coppock H,et al.An abundant and specific binding site fot the novel vasodilator adrenomedullin in the rat.Endocrinology(Baltimore),1995,136(5):2127-2134
, 百拇医药
6 Kamoi H , Kanazawa H , Hirata K , et al . Adrenomedullin inhibits
the secretion of cytokine-induced neutrophil chemoattractant,a member of interleukin-8 family,from rat alveolar macrophages.Biochem Biophys Res Commun,1995,211(3):1031-1035
7 Kohno M,Kano H,Horio T,et al.Inhibition of endothelin production by adrenomedullin in vascular smooth muscle cells.Hyperten,1995,25(6)1185-1190
8 Kanazawa H,Kawaguchi T,Kamoi H,et al.Calcitonin gene-related peptide antagonizes the protective effect of adrenomedullin on histamine-induced bronchoconstriction.Clin Exp Pharmacol Physiol,1996,23(6-7):472-475
, http://www.100md.com
9 Yoshibayashi M,Kamiyo T,Kitamura K,et al.Plasma levels of adrenomedullin in primary and secondary pulmonary hypertension in patients<20 years of age.Am J Cardiol,1997,79(11):1156-1158
10 Nossaman B,Feng C,Cheng D,et al.Comparative effects of adrenomedullin,an adrenomedullin analog,and CGRP in the pulmonary vascular bde of the cat and rat.Life Sci,1994,56(3):63-66
(收稿：1998-05-07，修回：1999-03-25), 百拇医药