肺泡巨噬细胞产生前列腺素与肺气虚证本质*
作者：宋卫东 赵江云 刘中本 吴华强 张安成 庞玉英 刘丽华
单位：宋卫东 张安成 庞玉英 刘丽华(安徽医科大学第一附属医院呼吸内科)；赵江云 刘中本 吴华强(安徽中医学院)
关键词：肺气虚证；肺泡巨噬细胞；前列腺素；血栓素
中国中医基础医学杂志990505 摘 要 目的 检测76例慢性支气管炎患者及36例正常人血，支气管肺灌洗液(BALF)和肺泡巨噬细胞(AM)分泌TXB2和PGF1a，及与其中医辨证分型的关系进行探讨。结果表明 (1)正常人与肺气虚证患者外周血，BALF中或AM分泌TXB2和PGF1a具有明显差异。(2)肺气虚证或隐性肺证患者皮质激素抑制AM分泌TXB2和PGF1a抑制率明显低于正常人。总之，本文从整体，局部及细胞水平阐明肺气虚证患者TXB2及PGF1a代谢特点，以及它们的作用。
肺泡巨噬细胞(AM)是肺组织中的主要细胞，它通过分泌多种介质对肺脏局部病理生理等方面产生重要调节作用。由于AM有多种细胞膜受体，因而神经-内分泌-免疫网络系统可以通过膜受体调节AM的功能，影响肺脏局部病理生理变化。因此，AM是联系整体系统功能与肺脏局部病理改变的桥梁。本文通过研究整体的肺脏局部及肺泡巨噬细胞产生的前列腺素变化，以阐明肺气虚证与前列腺素之间的联系。
, http://www.100md.com
资料与方法
1 诊断标准
慢性支气管炎诊断参照文献[1]，中医辨证分型参照1986年中国中西医结合研究会郑州会议制定的诊断标准，同时符合肺虚及气虚证者诊断为肺气虚证，如不符合上述标准而有肺虚、气虚或阴虚临床证候的慢性支气管炎病人为隐性肺证。患者在进行支气管肺灌洗(BAL)检查前一天进行辨证分型及分组。
2 病例选择标准
所有病例均来自门诊及住院患者，病例选择标准为：①慢性支气管炎患者；②中医辨证分型无其他兼证；③经抗感染对症治疗，咳嗽、咳痰、气喘明显好转，近2周内无感染征象，即慢性支气管炎缓解期；④患者1周内未使用激素类药物及支气管扩张剂、营养滋补药及能明显影响机体植物神经、内分泌及免疫功能的药物。
3 一般资料
, 百拇医药
实验分为3组，共115例。①正常人组：36例，男性30例，女性6例，年龄43.8岁(20岁～60岁)；②隐性肺证组：39例，男性31例，女性8例，年龄45.0岁(18岁～60岁)；③肺气虚证组：40例，男性33例，女性7例，年龄45.0岁(24岁～65岁)。
4 方法
检查方法基本按Reynolds & Newbell方法[2]。Olympus BF-10型纤维支气管镜嵌入舌叶或中叶管口，快速注入50ml37℃生理盐水，在100～150mmHg负压下吸引回收液(BALF)共4次，总量为200ml，离心，上清液-70℃保存待测。细胞悬液倒入玻璃平皿中，37℃温箱内孵育1小时，收集贴壁细胞为AM，方法参见Liggett[10]，用RPMI-1640培养液调整至1×106/ml，美蓝染色示活性细胞>95%。分成2管，分别加入LPS(1 ug/ml)和强的松(Cort 1 mM)。在37℃培养箱中培养6小时。离心后收集上清液-70℃保存待测。TXB2和PGF1a采用放射免疫分析法。试验盒来源于苏州医学院。
, 百拇医药
5 资料处理
采用计算机做统计和检验。本文计量资料均以x±s
表示。
结果
表中显示，隐性肺证及肺气虚证存在不同程度TXB2及PGF1a代谢紊乱，外周血中肺气虚证组变化明显，表现为TX/PG比值升高，BALF中TXB2及PGF1a均升高，而TX/PG比值无明显变化。
表1 正常人及慢支各证型血清及BALF中TXB2，PGF1a含量比较
外周血
BALF
例数
, 百拇医药
TXB2
(pg/ml)
PGF1a
(pg/ml)
TX/PG
例数
TXB2
(pg/ml)
PGF1a
(pg/ml)
TX/PG
正常人
36
, 百拇医药
136.0±5.9ΔΔ
103.2±4.8Δ
1.4±0.1ΔΔ
24
77.8±5.6*
30.4±3.2*
2.6±0.2
隐性肺证
39
124.2±5.6**
, 百拇医药 99.0±5.3
1.3±0.1*
32
89.7±4.6*
51.8±4.5*
2.3±0.3
肺气虚证
40
193.6±10.7
113.6±4.1
1.8±0.1
31
, http://www.100md.com
90.2±6.1
46.3±4.5
2.6±0.3
注：与正常人比较：*P<0.05，**P<0.01；与肺气虚组比较：ΔP<0.05，ΔΔP<0.01表2 正常人及慢支各证型AM分泌TXB2及PGF1a比较
例数
LPS组
Cort组
抑制组
TXB2
(ng/106 AM)
, http://www.100md.com PGF1a
(ng/106 AM)
TX/PG
TXB2
(ng/106 AM)
PGF1a
(ng/106 AM)
TX/PG
TXB2
(ng/106 AM)
PGF1a
, 百拇医药
(ng/106 AM)
正常人
11
334.3±35.3
101.7±6.4
3.5±0.5
125.4±7.9*ΔΔ
54.6±3.6**
2.4±0.2
59.2±3.7*Δ
44.7±4.7*
, http://www.100md.com
隐性肺证
23
357.5±25.8
115.4±7.0
3.4±0.4
168.7±10.6**
72.4±3.3**
2.4±0.2
51.0±1.9**
34.5±2.9**
肺气虚证
, 百拇医药
24
406.6±36.6
119.5±7.5
3.8±0.4
217.1±12.0
80.8±4.8
3.0±0.3
43.1±2.1
30.7±2.8
注：抑制率=(LPS刺激TXB2或PGF1a分泌量-糖皮质激素刺激TXB2或PGF1a分泌量)/LPS刺激TXB2或PGF1a分泌量。
与正常人比较：*P<0.05，**P<0.01；与肺气虚组比较：ΔP<0.05，ΔΔP<0.01。
, 百拇医药
表中显示，LPS刺激AM分泌TXB2或PGF1a在肺气虚或隐性肺证组均有上升趋势。Cort抑制AM分泌TSB2或PGF1a抑制率各组差异较明显，其中隐性肺证及肺气虚证组明显低于正常人组。
PGI2松驰血管平滑肌，并使支气管扩张，而TXA2作用相反[3]。TXA2及PGI2作为炎症介质在肺脏局部炎症反应过程中发挥重要作用[4]，如TXA2具有溶解细胞作用，使组织细胞中水解酶释放，加重局部的炎症性损伤。PG在炎症中的作用主要时抑制一些细胞的功能，如抑制淋巴细胞和成纤维细胞分化，抑制中性细胞趋化作用[5～7]。此外PG在局部植物神经功能及免疫反应过程中也发挥作用，如PG可抑制T淋巴细胞增殖和抗体的合成[8]。PGI2具有对抗交感神经作用，减少神经末梢递质释放[9]。本文表1显示慢支各证型BALF中TXB2和PGF1a均明显升高，提示患者局部血栓素和前列腺素代谢活跃，以调节局部炎症、免疫及植物神经功能。表1还发现，BALF中肺气虚证患者TXB2升高，肺脏局部以炎症损伤性改变为主，而隐性肺证患者PGF1a升高，以抗炎症损伤性改变为主，同时具有扩张支气管作用。
, 百拇医药
表2中AM分泌TXB2及PGF1a正常人及慢支各证型无明显差异，但Cort抑制TXB2及PGF1a的抑制率有明显降低。表明在肺脏局部炎症环境中AM保持分泌TXB2或PGF1a在正常水平是由于各种介质刺激的综合结果，而肺虚证患者AM本身功能已受到不同程度损害。
*本研究得到国家自然科学基金和国家中医药管理局资助
参考文献
[1] 陈灏珠，等.内科学.第3版.北京：人民卫生出版社，1989：5
[2] Reynolds HY et al.Analysis of proteins and respiratory cells obtained from human lungs by bronchoalveolar lavage.J Lab Clin Med 1974;84:559
, 百拇医药
[3] Whittle BJR et al.Pharmacological interactions between prostacyclin and thromboxane.Brit Med Bull 1983;39(3):232
[4] Henderson WR.Lipid-derived and other chemical mediators of inflammation in the lung.J Allergy Clin Immunol 1987;79:543
[5] Elias JA et al.blood and lung monouclear cell inhibition of fibroblast growth in sarcoidosis.Am Rev Respir Dis 1984;130:1050
[6] Rivken I et al.The role of cyclic AMP in the chemotactic responsiveness and spontaneous motility of rabbit peritoneal neutrophils.J Immunol 1975;115:1126
, 百拇医药
[7] Kunkel SL et al.Modulation by prostaglandins.Prog Lipid Res 1981;20:633
[8] Rappaport VS et al.J Exp Med 1982;155:943
[9] Armstrong JM et al.Effects of PGI2,6-Keto-PGF1a,PGE2 on sympathetic nerve function in mesenteric arteries and veins of rabbit in vitro.Hypertension 1979;1:309
[10] Liggett SB.Identification and characterization of a homogeneous population of B2-Adrenergic receptors on human alveolar macrophage.Am Rev Respir Dis 1989;139:552～555
(收稿日期 1998—10—16 修回日期 1999—12—26), http://www.100md.com
单位：宋卫东 张安成 庞玉英 刘丽华(安徽医科大学第一附属医院呼吸内科)；赵江云 刘中本 吴华强(安徽中医学院)
关键词：肺气虚证；肺泡巨噬细胞；前列腺素；血栓素
中国中医基础医学杂志990505 摘 要 目的 检测76例慢性支气管炎患者及36例正常人血，支气管肺灌洗液(BALF)和肺泡巨噬细胞(AM)分泌TXB2和PGF1a，及与其中医辨证分型的关系进行探讨。结果表明 (1)正常人与肺气虚证患者外周血，BALF中或AM分泌TXB2和PGF1a具有明显差异。(2)肺气虚证或隐性肺证患者皮质激素抑制AM分泌TXB2和PGF1a抑制率明显低于正常人。总之，本文从整体，局部及细胞水平阐明肺气虚证患者TXB2及PGF1a代谢特点，以及它们的作用。
肺泡巨噬细胞(AM)是肺组织中的主要细胞，它通过分泌多种介质对肺脏局部病理生理等方面产生重要调节作用。由于AM有多种细胞膜受体，因而神经-内分泌-免疫网络系统可以通过膜受体调节AM的功能，影响肺脏局部病理生理变化。因此，AM是联系整体系统功能与肺脏局部病理改变的桥梁。本文通过研究整体的肺脏局部及肺泡巨噬细胞产生的前列腺素变化，以阐明肺气虚证与前列腺素之间的联系。
, http://www.100md.com
资料与方法
1 诊断标准
慢性支气管炎诊断参照文献[1]，中医辨证分型参照1986年中国中西医结合研究会郑州会议制定的诊断标准，同时符合肺虚及气虚证者诊断为肺气虚证，如不符合上述标准而有肺虚、气虚或阴虚临床证候的慢性支气管炎病人为隐性肺证。患者在进行支气管肺灌洗(BAL)检查前一天进行辨证分型及分组。
2 病例选择标准
所有病例均来自门诊及住院患者，病例选择标准为：①慢性支气管炎患者；②中医辨证分型无其他兼证；③经抗感染对症治疗，咳嗽、咳痰、气喘明显好转，近2周内无感染征象，即慢性支气管炎缓解期；④患者1周内未使用激素类药物及支气管扩张剂、营养滋补药及能明显影响机体植物神经、内分泌及免疫功能的药物。
3 一般资料
, 百拇医药
实验分为3组，共115例。①正常人组：36例，男性30例，女性6例，年龄43.8岁(20岁～60岁)；②隐性肺证组：39例，男性31例，女性8例，年龄45.0岁(18岁～60岁)；③肺气虚证组：40例，男性33例，女性7例，年龄45.0岁(24岁～65岁)。
4 方法
检查方法基本按Reynolds & Newbell方法[2]。Olympus BF-10型纤维支气管镜嵌入舌叶或中叶管口，快速注入50ml37℃生理盐水，在100～150mmHg负压下吸引回收液(BALF)共4次，总量为200ml，离心，上清液-70℃保存待测。细胞悬液倒入玻璃平皿中，37℃温箱内孵育1小时，收集贴壁细胞为AM，方法参见Liggett[10]，用RPMI-1640培养液调整至1×106/ml，美蓝染色示活性细胞>95%。分成2管，分别加入LPS(1 ug/ml)和强的松(Cort 1 mM)。在37℃培养箱中培养6小时。离心后收集上清液-70℃保存待测。TXB2和PGF1a采用放射免疫分析法。试验盒来源于苏州医学院。
, 百拇医药
5 资料处理
采用计算机做统计和检验。本文计量资料均以x±s
表示。结果
表中显示，隐性肺证及肺气虚证存在不同程度TXB2及PGF1a代谢紊乱，外周血中肺气虚证组变化明显，表现为TX/PG比值升高，BALF中TXB2及PGF1a均升高，而TX/PG比值无明显变化。
表1 正常人及慢支各证型血清及BALF中TXB2，PGF1a含量比较
外周血
BALF
例数
, 百拇医药
TXB2
(pg/ml)
PGF1a
(pg/ml)
TX/PG
例数
TXB2
(pg/ml)
PGF1a
(pg/ml)
TX/PG
正常人
36
, 百拇医药
136.0±5.9ΔΔ
103.2±4.8Δ
1.4±0.1ΔΔ
24
77.8±5.6*
30.4±3.2*
2.6±0.2
隐性肺证
39
124.2±5.6**
, 百拇医药 99.0±5.3
1.3±0.1*
32
89.7±4.6*
51.8±4.5*
2.3±0.3
肺气虚证
40
193.6±10.7
113.6±4.1
1.8±0.1
31
, http://www.100md.com
90.2±6.1
46.3±4.5
2.6±0.3
注：与正常人比较：*P<0.05，**P<0.01；与肺气虚组比较：ΔP<0.05，ΔΔP<0.01表2 正常人及慢支各证型AM分泌TXB2及PGF1a比较
例数
LPS组
Cort组
抑制组
TXB2
(ng/106 AM)
, http://www.100md.com PGF1a
(ng/106 AM)
TX/PG
TXB2
(ng/106 AM)
PGF1a
(ng/106 AM)
TX/PG
TXB2
(ng/106 AM)
PGF1a
, 百拇医药
(ng/106 AM)
正常人
11
334.3±35.3
101.7±6.4
3.5±0.5
125.4±7.9*ΔΔ
54.6±3.6**
2.4±0.2
59.2±3.7*Δ
44.7±4.7*
, http://www.100md.com
隐性肺证
23
357.5±25.8
115.4±7.0
3.4±0.4
168.7±10.6**
72.4±3.3**
2.4±0.2
51.0±1.9**
34.5±2.9**
肺气虚证
, 百拇医药
24
406.6±36.6
119.5±7.5
3.8±0.4
217.1±12.0
80.8±4.8
3.0±0.3
43.1±2.1
30.7±2.8
注：抑制率=(LPS刺激TXB2或PGF1a分泌量-糖皮质激素刺激TXB2或PGF1a分泌量)/LPS刺激TXB2或PGF1a分泌量。
与正常人比较：*P<0.05，**P<0.01；与肺气虚组比较：ΔP<0.05，ΔΔP<0.01。
, 百拇医药
表中显示，LPS刺激AM分泌TXB2或PGF1a在肺气虚或隐性肺证组均有上升趋势。Cort抑制AM分泌TSB2或PGF1a抑制率各组差异较明显，其中隐性肺证及肺气虚证组明显低于正常人组。
PGI2松驰血管平滑肌，并使支气管扩张，而TXA2作用相反[3]。TXA2及PGI2作为炎症介质在肺脏局部炎症反应过程中发挥重要作用[4]，如TXA2具有溶解细胞作用，使组织细胞中水解酶释放，加重局部的炎症性损伤。PG在炎症中的作用主要时抑制一些细胞的功能，如抑制淋巴细胞和成纤维细胞分化，抑制中性细胞趋化作用[5～7]。此外PG在局部植物神经功能及免疫反应过程中也发挥作用，如PG可抑制T淋巴细胞增殖和抗体的合成[8]。PGI2具有对抗交感神经作用，减少神经末梢递质释放[9]。本文表1显示慢支各证型BALF中TXB2和PGF1a均明显升高，提示患者局部血栓素和前列腺素代谢活跃，以调节局部炎症、免疫及植物神经功能。表1还发现，BALF中肺气虚证患者TXB2升高，肺脏局部以炎症损伤性改变为主，而隐性肺证患者PGF1a升高，以抗炎症损伤性改变为主，同时具有扩张支气管作用。
, 百拇医药
表2中AM分泌TXB2及PGF1a正常人及慢支各证型无明显差异，但Cort抑制TXB2及PGF1a的抑制率有明显降低。表明在肺脏局部炎症环境中AM保持分泌TXB2或PGF1a在正常水平是由于各种介质刺激的综合结果，而肺虚证患者AM本身功能已受到不同程度损害。
*本研究得到国家自然科学基金和国家中医药管理局资助
参考文献
[1] 陈灏珠，等.内科学.第3版.北京：人民卫生出版社，1989：5
[2] Reynolds HY et al.Analysis of proteins and respiratory cells obtained from human lungs by bronchoalveolar lavage.J Lab Clin Med 1974;84:559
, 百拇医药
[3] Whittle BJR et al.Pharmacological interactions between prostacyclin and thromboxane.Brit Med Bull 1983;39(3):232
[4] Henderson WR.Lipid-derived and other chemical mediators of inflammation in the lung.J Allergy Clin Immunol 1987;79:543
[5] Elias JA et al.blood and lung monouclear cell inhibition of fibroblast growth in sarcoidosis.Am Rev Respir Dis 1984;130:1050
[6] Rivken I et al.The role of cyclic AMP in the chemotactic responsiveness and spontaneous motility of rabbit peritoneal neutrophils.J Immunol 1975;115:1126
, 百拇医药
[7] Kunkel SL et al.Modulation by prostaglandins.Prog Lipid Res 1981;20:633
[8] Rappaport VS et al.J Exp Med 1982;155:943
[9] Armstrong JM et al.Effects of PGI2,6-Keto-PGF1a,PGE2 on sympathetic nerve function in mesenteric arteries and veins of rabbit in vitro.Hypertension 1979;1:309
[10] Liggett SB.Identification and characterization of a homogeneous population of B2-Adrenergic receptors on human alveolar macrophage.Am Rev Respir Dis 1989;139:552～555
(收稿日期 1998—10—16 修回日期 1999—12—26), http://www.100md.com