PCR法检测男性泌尿道感染的临床意义
作者：葛 波 杨燕伟 滕若冰
单位：桂林医学院附属医院泌尿外科 广西桂林市 541001
关键词：非淋菌性尿道炎；淋菌性尿道炎；混合感染；聚合酶链反应；诊断
华夏医学990606 摘要 应用聚合酶链反应(PCR)法，对门诊682例初诊为泌尿道感染男性患者进行了淋球菌(Gc)、沙眼衣原体(Ct)与解脲脲原体(Uu)检测。结果显示，非淋菌性尿道炎(NGU)287例(42.1%)；淋菌性尿道炎(GU)395例(57.9%)，其中单纯Gc阳性为118例(17.3%)， Ct阳性为111例(16.3%)，Uu阳性为170例(24.9%)， Ct+Uu阳性283例(41.5%)。本研究表明应用PCR检测Gc、 Ct和Uu具有快速、特异、灵敏等特点，能为临床男性泌尿道感染患者的早期诊断、治疗效果评价提供依据。
中图分类号 R695;R604
, 百拇医药
Clinical Significance of PCR Techique in Detecting the
Infection of Male Urinary Tract
Ge Bo,Yang Yanwei,Teng Ruobing
Department of Urinary Surgery,Affiliated Hospital,Guilin Medical College (541001)
Abstract Gc、Ct and Un were detected by polymerase chain reaction technique(PCR) from 682 patients with urogenitial infection in our clinic. The results showed that 395 were with gonococal urethritis (57.9%),287 with nongonococal urethritis (42.1%). Among them, positive rate of simple Gc was 17.3% (118/682), Ct 16.3%(111/682) Un 24.9%(170/682),Ct+Un 41.5%(283/682). The results suggested that it is a sensitive specific and rapid way to detect Gc, Ct and Un, These studies can provide experimental basis for the early diagnosis and evaluation of treatment in clinic male urogental infection.
, 百拇医药
Key words nongonococal urethritis;gonococal urethritis; mixed infection; polymerase chain reaction; diagnosis
1996年4月至1999年6月，我科应用聚合酶链反应(PCR)对682例尿道感染患者进行Gc、 Ct和Uu检测，由于诊断快速、准确，为男性泌尿道感染患者的治疗提供了可靠实验依据，而取得理想的治疗效果，现报告如下。
1 资料和方法
1.1 一般资料
男性患者682例，年龄17～63岁，平均29.4岁，病程2周至2年。652例有不洁性生活史，30例否认有不洁性生活史。临床表现：尿道口红肿、流脓性分泌物、排尿困难465例，尿道轻微痒痛、会阴不适、分泌液稀薄287例。
, 百拇医药
1.2 检测方法
1.2.1 材料 采用中山医科大学达安基因诊断中心Gc、Ct、Uu-PCR试剂盒，应用美国mJ RESARCH，InC所产PTC-100型DNA扩增仪。
1.2.2 标本的留取及处理 无菌棉拭子插入尿道内2～3cm转动获取分泌物或按摩前列腺液。将拭子置1ml生理盐水中，充分悬浮，挤干棉拭子中的水分，弃棉拭子。15 000r/min离心5min，弃尽上清液，在沉淀中的50μl DNA提取液充分混匀沉淀物，煮沸10min，10 000r/min离心5min，取上层2μl做PCR反应。
取PCR反应管加入提取好的标本DNA 2μl，6 000r/min离心数秒，用下列条件扩增：93℃3min预变性，然后按93℃45s→55℃45s→72℃60s,共做35个循环，最后置72℃保温5min。
1.2.3 结果判断 直接从PCR扩增后的反应管中取10μl下层蓝色液体加样，经2%的琼脂糖凝胶上电泳20～30min(5v/cm)后于紫外仪上观察。若在391bp、225bp和459bp处出现橙黄色条则为Gc、Ct、Uu阳性。
, 百拇医药
2 结果
检查结果见表1～4。
表1 682例尿道炎患者PCR检测结果(n) 组别
总数
Gc
Ct
Uu
Ct+Uu
GU
395
118
53
84
, 百拇医药
140
NGU
287
0
58
86
143
合计
682
118
111
170
283
, 百拇医药 表2 395例GU中各病原体感染率(%) 病种
Gc
Ct
Uu
Ct+Uu
GU
29.8%
13.4%
21.3%
35.4%
表3 287例NGU中各病原体感染率(%) 病种
Ct
, 百拇医药
Uu
Ct+Uu
NGU
20.2%
30.0%
49.8%
表4 682例尿道炎中各病原体感染率(%) 病种
Gc
Ct
Uu
Ct+Uu
GU+NGU
17.3%
, 百拇医药
16.3%
24.9%
41.5%
3 讨论
男性泌尿道感染是由多种病原体感染而引起的,而其中较为常见的为Gc、Ct、Uu。另外也存在着其它多种病原体感染。长期以来对Gc、 Ct、和Uu的诊断依靠临床表现、病原体分离培养、血清学检测和免疫组化，但均有不足之处[1]。 PCR技术检测Gc、Ct、和Uu，无论病原体生存状态如何，只要有完整的隐蔽性质粒，通过扩增都可检测出来[2]。相比传统方法，时间花费短，标本量少，因此具有快速、特异、灵敏等优点，能为男性泌尿道感染提供有效的实验数据。
本组应用PCR技术检测出GU中Ct感染占13.4%(53/395)；Uu为21.3%(84/395)；在NGU感染中Ct为20.2%(58/287)；Uu为30%(86/287)。GU和NGU患者中Ct与Uu混合感染分别为35.4%(140/395)和49.8%(143/287)，结果说明无论是GU或NGU，患者较多合并有Ct和Uu的混合感染。GU合并Ct、Uu感染患者都具有Gc引起的明显尿道口红肿、流脓性分泌物、排尿疼痛等症状，较易被认识，而由Ct、Uu产生的NGU患者主要症状为尿道内痒和烧灼感、疼痛、会阴不适。不少男性患者被误诊为慢性无菌性前列腺炎，延误治疗。提示在临床工作中典型的AGU患者治疗时，特别是那些经青霉素或淋必治正规治疗1～2周后，出现尿道炎症状的患者，以及在治疗NGU患者时应充分考虑混合感染的可能，防止患者长期携带Ct和Uu，而引起性传播疾病蔓延并且延误治疗。 PCR检测出Ct后可用四环素、红霉素、强力霉素治疗， Uu可以选用泰利必妥、红霉素、强力霉素等治疗[3]。阿奇霉素对Ct和Uu混合感染治疗效果好[4]。
, 百拇医药
男性泌尿道感染一般是由Gc、Ct、和Uu引起，通过正规治疗效果良好。但对长期规范治疗不愈或有反复者，有条件的还应作多种病原体如mh(支原体)、Tv(滴虫)、Cd(念珠菌)等检测，以明确病因，便于对因治疗，达到彻底治愈的目的[5]。
作者简介：葛波(1966-)，男，1990年毕业于广西医学院临床医学系，曾到卫生部湖南医科大学英语培训中心学习半年。任桂林医学院泌尿科主治医师，现为湖南医科大学99级研究生。
参考文献
1 刘定益.PCR诊断男性传播疾病156例报告.临床泌尿外科杂志，1996，11(5)：282
2 Palmer HM,Gilroy CB,Thomas BJ,et al.,Detection of chlamydia trachomatis by the polymerase chain reaction in swabs and urine from men with nongonococal urethritis.J clin Pathol,1991,44:321
3 李亚琴.泰利必妥治疗非淋菌性尿道炎临床观察.中国皮肤性病学杂志，1997，11(1)：60
4 吴文中.阿奇霉素治疗男性非淋菌性尿道炎95例疗效观察.临床皮肤科杂志，1997，26(6)：379～380
5 吴移谋.男性非淋菌性尿道炎患者性病病原体的研究.中国皮肤性病学杂志，1998，12(1)：9
收稿 1999-10-11, http://www.100md.com
单位：桂林医学院附属医院泌尿外科 广西桂林市 541001
关键词：非淋菌性尿道炎；淋菌性尿道炎；混合感染；聚合酶链反应；诊断
华夏医学990606 摘要 应用聚合酶链反应(PCR)法，对门诊682例初诊为泌尿道感染男性患者进行了淋球菌(Gc)、沙眼衣原体(Ct)与解脲脲原体(Uu)检测。结果显示，非淋菌性尿道炎(NGU)287例(42.1%)；淋菌性尿道炎(GU)395例(57.9%)，其中单纯Gc阳性为118例(17.3%)， Ct阳性为111例(16.3%)，Uu阳性为170例(24.9%)， Ct+Uu阳性283例(41.5%)。本研究表明应用PCR检测Gc、 Ct和Uu具有快速、特异、灵敏等特点，能为临床男性泌尿道感染患者的早期诊断、治疗效果评价提供依据。
中图分类号 R695;R604
, 百拇医药
Clinical Significance of PCR Techique in Detecting the
Infection of Male Urinary Tract
Ge Bo,Yang Yanwei,Teng Ruobing
Department of Urinary Surgery,Affiliated Hospital,Guilin Medical College (541001)
Abstract Gc、Ct and Un were detected by polymerase chain reaction technique(PCR) from 682 patients with urogenitial infection in our clinic. The results showed that 395 were with gonococal urethritis (57.9%),287 with nongonococal urethritis (42.1%). Among them, positive rate of simple Gc was 17.3% (118/682), Ct 16.3%(111/682) Un 24.9%(170/682),Ct+Un 41.5%(283/682). The results suggested that it is a sensitive specific and rapid way to detect Gc, Ct and Un, These studies can provide experimental basis for the early diagnosis and evaluation of treatment in clinic male urogental infection.
, 百拇医药
Key words nongonococal urethritis;gonococal urethritis; mixed infection; polymerase chain reaction; diagnosis
1996年4月至1999年6月，我科应用聚合酶链反应(PCR)对682例尿道感染患者进行Gc、 Ct和Uu检测，由于诊断快速、准确，为男性泌尿道感染患者的治疗提供了可靠实验依据，而取得理想的治疗效果，现报告如下。
1 资料和方法
1.1 一般资料
男性患者682例，年龄17～63岁，平均29.4岁，病程2周至2年。652例有不洁性生活史，30例否认有不洁性生活史。临床表现：尿道口红肿、流脓性分泌物、排尿困难465例，尿道轻微痒痛、会阴不适、分泌液稀薄287例。
, 百拇医药
1.2 检测方法
1.2.1 材料 采用中山医科大学达安基因诊断中心Gc、Ct、Uu-PCR试剂盒，应用美国mJ RESARCH，InC所产PTC-100型DNA扩增仪。
1.2.2 标本的留取及处理 无菌棉拭子插入尿道内2～3cm转动获取分泌物或按摩前列腺液。将拭子置1ml生理盐水中，充分悬浮，挤干棉拭子中的水分，弃棉拭子。15 000r/min离心5min，弃尽上清液，在沉淀中的50μl DNA提取液充分混匀沉淀物，煮沸10min，10 000r/min离心5min，取上层2μl做PCR反应。
取PCR反应管加入提取好的标本DNA 2μl，6 000r/min离心数秒，用下列条件扩增：93℃3min预变性，然后按93℃45s→55℃45s→72℃60s,共做35个循环，最后置72℃保温5min。
1.2.3 结果判断 直接从PCR扩增后的反应管中取10μl下层蓝色液体加样，经2%的琼脂糖凝胶上电泳20～30min(5v/cm)后于紫外仪上观察。若在391bp、225bp和459bp处出现橙黄色条则为Gc、Ct、Uu阳性。
, 百拇医药
2 结果
检查结果见表1～4。
表1 682例尿道炎患者PCR检测结果(n) 组别
总数
Gc
Ct
Uu
Ct+Uu
GU
395
118
53
84
, 百拇医药
140
NGU
287
0
58
86
143
合计
682
118
111
170
283
, 百拇医药 表2 395例GU中各病原体感染率(%) 病种
Gc
Ct
Uu
Ct+Uu
GU
29.8%
13.4%
21.3%
35.4%
表3 287例NGU中各病原体感染率(%) 病种
Ct
, 百拇医药
Uu
Ct+Uu
NGU
20.2%
30.0%
49.8%
表4 682例尿道炎中各病原体感染率(%) 病种
Gc
Ct
Uu
Ct+Uu
GU+NGU
17.3%
, 百拇医药
16.3%
24.9%
41.5%
3 讨论
男性泌尿道感染是由多种病原体感染而引起的,而其中较为常见的为Gc、Ct、Uu。另外也存在着其它多种病原体感染。长期以来对Gc、 Ct、和Uu的诊断依靠临床表现、病原体分离培养、血清学检测和免疫组化，但均有不足之处[1]。 PCR技术检测Gc、Ct、和Uu，无论病原体生存状态如何，只要有完整的隐蔽性质粒，通过扩增都可检测出来[2]。相比传统方法，时间花费短，标本量少，因此具有快速、特异、灵敏等优点，能为男性泌尿道感染提供有效的实验数据。
本组应用PCR技术检测出GU中Ct感染占13.4%(53/395)；Uu为21.3%(84/395)；在NGU感染中Ct为20.2%(58/287)；Uu为30%(86/287)。GU和NGU患者中Ct与Uu混合感染分别为35.4%(140/395)和49.8%(143/287)，结果说明无论是GU或NGU，患者较多合并有Ct和Uu的混合感染。GU合并Ct、Uu感染患者都具有Gc引起的明显尿道口红肿、流脓性分泌物、排尿疼痛等症状，较易被认识，而由Ct、Uu产生的NGU患者主要症状为尿道内痒和烧灼感、疼痛、会阴不适。不少男性患者被误诊为慢性无菌性前列腺炎，延误治疗。提示在临床工作中典型的AGU患者治疗时，特别是那些经青霉素或淋必治正规治疗1～2周后，出现尿道炎症状的患者，以及在治疗NGU患者时应充分考虑混合感染的可能，防止患者长期携带Ct和Uu，而引起性传播疾病蔓延并且延误治疗。 PCR检测出Ct后可用四环素、红霉素、强力霉素治疗， Uu可以选用泰利必妥、红霉素、强力霉素等治疗[3]。阿奇霉素对Ct和Uu混合感染治疗效果好[4]。
, 百拇医药
男性泌尿道感染一般是由Gc、Ct、和Uu引起，通过正规治疗效果良好。但对长期规范治疗不愈或有反复者，有条件的还应作多种病原体如mh(支原体)、Tv(滴虫)、Cd(念珠菌)等检测，以明确病因，便于对因治疗，达到彻底治愈的目的[5]。
作者简介：葛波(1966-)，男，1990年毕业于广西医学院临床医学系，曾到卫生部湖南医科大学英语培训中心学习半年。任桂林医学院泌尿科主治医师，现为湖南医科大学99级研究生。
参考文献
1 刘定益.PCR诊断男性传播疾病156例报告.临床泌尿外科杂志，1996，11(5)：282
2 Palmer HM,Gilroy CB,Thomas BJ,et al.,Detection of chlamydia trachomatis by the polymerase chain reaction in swabs and urine from men with nongonococal urethritis.J clin Pathol,1991,44:321
3 李亚琴.泰利必妥治疗非淋菌性尿道炎临床观察.中国皮肤性病学杂志，1997，11(1)：60
4 吴文中.阿奇霉素治疗男性非淋菌性尿道炎95例疗效观察.临床皮肤科杂志，1997，26(6)：379～380
5 吴移谋.男性非淋菌性尿道炎患者性病病原体的研究.中国皮肤性病学杂志，1998，12(1)：9
收稿 1999-10-11, http://www.100md.com