穿刺液细胞直接计数和分类的研究
作者：杨玉环 王艳萍 徐淑玲
单位：
杨玉环 王艳萍(哈尔滨市骨伤科医院)；徐淑玲(齐齐哈尔市梅里斯区卫生防疫站)
关键词：
黑龙江医学990677 穿刺液一般包括胸腔、腹腔、心包腔、脑脊髓和关节腔液。这些腔壁的循环障碍、营养障碍、炎症和肿瘤等疾患往往引起腔内积液和细胞数质量的改变。准确、快速报告穿刺液细胞的数质量，常可为临床提供诊断依据。
我们在67淋巴细胞计数液的基础上多次摸索，试验了一种穿刺液细胞计数和分类联合使用的染液。穿刺液细胞经染液染色后，具有着色快结构清楚，颜色明显易认的优点。除可直接计数外，尚能直接在计数池内清楚地区分淋巴细胞、中性细胞、酸性细胞、单核细胞、间皮细胞和其它异常细胞。现将方法介绍如下。
1 试剂配制
瑞氏原液的配制：取瑞氏粉0.3g，甘油3ml，加甲醇100ml按常法配制。姬氏原液的配制：取姬氏粉1.5g，甘油33ml，甲醇33ml，按常法配制。取瑞氏原液及姬氏原液各5ml，1%白皂素液10ml，蒸馏水10ml混匀，滤去沉渣置棕色瓶内，冰箱保存备用(可根据染液的质量酌量增减)。
2 操作方法和形态特点
2.1 直接计数。
取混匀的穿刺液少许，加入等量染液，混匀，滴入计算盘内。于低倍镜下计数10大格内细胞数，结果乘2，即为每mm3细胞数(如细胞过多可计数四角四大格细胞数结果乘5)。特点：红细胞完全破坏，视野清析，白细胞和其它细胞形态不缩小，呈明显紫蓝点。
2.2 分类。
计数后转换高倍镜进行分类。形态特点：淋巴细胞核染深紫蓝色，浆染淡蓝色，核、浆分明。中性粒子细胞核染深紫蓝色，浆染淡红色，颗粒可见，核形清楚可辨。嗜酸性粒子细胞颗染桔红色，可与中性粒子细胞区别。单核细胞核染紫蓝色，浆染灰蓝色，疏松的核，染质和扭曲的核形可见。间皮细胞，核呈圆或椭圆，染紫蓝色，胞浆丰富，染灰蓝或深蓝。胞体较淋巴细胞和中性粒子细胞为大，可见双核。此类细胞离体存放过久，可发生退行性变。如核肿胀、核偏位或形成空泡样间皮细胞。组织细胞染色同间皮细胞，核呈肾形，可有双核。胞体较间皮细胞小，但略大于中性细胞。浆内常可见空泡和吞噬物，有时可形成印环细胞。癌细胞，染色深蓝、灰蓝不等。可根据细胞大小悬殊，核大畸形，簇集等特点与离心沉淀法结合确定癌细胞。
3 有关因素
3.1 染色液配制后，4℃冰箱保存，2月内无沉淀，2月后可有针状结晶，但不影响分类。
3.2 穿刺液滴入染色液后，在室温下，细胞1min内即有着色。着色后至24h仍清晰可辨，不会过染。将染色标本置冰箱1周后，仍可辨别，因此操作不受时间限制。
4 小结
穿刺液细胞计数和直接分类，除常用的冰醋酸法外，国内外尚未见更好的方法报道。穿刺液细胞经本染液染色后，结构清晰，特点明显易认，减轻了视觉疲劳，增加了计数后的清晰度。同时本法对穿刺液内的癌细胞的检查，具有简便、快速、检出率高的优点。一般需离心沉淀涂片，即可直接在计数池内进行形态学辨认，而且试剂简便，便于保存，值得推广。
(收稿日期：1999-03-17), 百拇医药
单位：
杨玉环 王艳萍(哈尔滨市骨伤科医院)；徐淑玲(齐齐哈尔市梅里斯区卫生防疫站)
关键词：
黑龙江医学990677 穿刺液一般包括胸腔、腹腔、心包腔、脑脊髓和关节腔液。这些腔壁的循环障碍、营养障碍、炎症和肿瘤等疾患往往引起腔内积液和细胞数质量的改变。准确、快速报告穿刺液细胞的数质量，常可为临床提供诊断依据。
我们在67淋巴细胞计数液的基础上多次摸索，试验了一种穿刺液细胞计数和分类联合使用的染液。穿刺液细胞经染液染色后，具有着色快结构清楚，颜色明显易认的优点。除可直接计数外，尚能直接在计数池内清楚地区分淋巴细胞、中性细胞、酸性细胞、单核细胞、间皮细胞和其它异常细胞。现将方法介绍如下。
1 试剂配制
瑞氏原液的配制：取瑞氏粉0.3g，甘油3ml，加甲醇100ml按常法配制。姬氏原液的配制：取姬氏粉1.5g，甘油33ml，甲醇33ml，按常法配制。取瑞氏原液及姬氏原液各5ml，1%白皂素液10ml，蒸馏水10ml混匀，滤去沉渣置棕色瓶内，冰箱保存备用(可根据染液的质量酌量增减)。
2 操作方法和形态特点
2.1 直接计数。
取混匀的穿刺液少许，加入等量染液，混匀，滴入计算盘内。于低倍镜下计数10大格内细胞数，结果乘2，即为每mm3细胞数(如细胞过多可计数四角四大格细胞数结果乘5)。特点：红细胞完全破坏，视野清析，白细胞和其它细胞形态不缩小，呈明显紫蓝点。
2.2 分类。
计数后转换高倍镜进行分类。形态特点：淋巴细胞核染深紫蓝色，浆染淡蓝色，核、浆分明。中性粒子细胞核染深紫蓝色，浆染淡红色，颗粒可见，核形清楚可辨。嗜酸性粒子细胞颗染桔红色，可与中性粒子细胞区别。单核细胞核染紫蓝色，浆染灰蓝色，疏松的核，染质和扭曲的核形可见。间皮细胞，核呈圆或椭圆，染紫蓝色，胞浆丰富，染灰蓝或深蓝。胞体较淋巴细胞和中性粒子细胞为大，可见双核。此类细胞离体存放过久，可发生退行性变。如核肿胀、核偏位或形成空泡样间皮细胞。组织细胞染色同间皮细胞，核呈肾形，可有双核。胞体较间皮细胞小，但略大于中性细胞。浆内常可见空泡和吞噬物，有时可形成印环细胞。癌细胞，染色深蓝、灰蓝不等。可根据细胞大小悬殊，核大畸形，簇集等特点与离心沉淀法结合确定癌细胞。
3 有关因素
3.1 染色液配制后，4℃冰箱保存，2月内无沉淀，2月后可有针状结晶，但不影响分类。
3.2 穿刺液滴入染色液后，在室温下，细胞1min内即有着色。着色后至24h仍清晰可辨，不会过染。将染色标本置冰箱1周后，仍可辨别，因此操作不受时间限制。
4 小结
穿刺液细胞计数和直接分类，除常用的冰醋酸法外，国内外尚未见更好的方法报道。穿刺液细胞经本染液染色后，结构清晰，特点明显易认，减轻了视觉疲劳，增加了计数后的清晰度。同时本法对穿刺液内的癌细胞的检查，具有简便、快速、检出率高的优点。一般需离心沉淀涂片，即可直接在计数池内进行形态学辨认，而且试剂简便，便于保存，值得推广。
(收稿日期：1999-03-17), 百拇医药