丹参口服液制备工艺研究
作者：蔡中琴 杨亚胜 郑红琴 刘桂霞
单位：蔡中琴 杨亚胜 郑红琴 刘桂霞 河南省中药研究所(郑州 450004)
关键词：
990615 丹参系唇形科植物丹参 Salvia miltiorriza Bge.的干燥根及根茎，具有祛瘀止痛，活血通经，清心除烦的功效。主治月经不调，胸腹刺痛，心绞痛等病症。基于其活血化瘀和抗菌消炎两大功效，近年来，丹参的各种制剂广泛用于临床多种疾病，但尤以冠心病疗效更为显著。为了完善现有的丹参剂型，我们研制了丹参口服液，并对其制备工艺进行了探讨，以确定最佳制备工艺。
1 仪器与药品
UV-240紫外可见分光光度计(日本岛津)，pHS-25型数字式酸度计，微量进样器，丹参(河南产，河南省中药研究所临床药理门诊部购买，经本所药材室鉴定)，硅胶G(青岛海洋化工厂，薄层层析用)、三氯化铁、铁氰化钾(AR级)。
, 百拇医药
2 方法与结果
2.1 丹参饮片浸泡时间的考查：丹参饮片煎煮前浸泡时间的长短直接影响浸出液的质量及生产成本，因此我们以总固体浸出量为指标来优选浸泡时间；具体实验方法和结果如下：称取7份丹参饮片各10 g,各加80 mL水浸泡，水温(26±0.5)℃，浸泡时间分别为0.5、1、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 h，滤过，用同一比重瓶在室温下分别测定不同浸泡时间滤液的重量，结果表明：最佳浸泡时间为2.5 h,浸出量为 39.24 g (P<0.02) 。
2.2 煎煮时间的考查：为保证有效成分尽可能完全提出，优选适宜的煎煮时间。方法及结果如下：称取丹参饮片4份各10 g,每份加水80 mL，水温(26±0.5)℃，浸泡2.5 h后，分别煎煮0.5、1.0、1.5、2.0 h，边煎边补充蒸发的水分，滤过放冷，用同一比重瓶在室温下分别测定，结果表明，煎煮1.5 h，煎出液饱和，因此第一次煎煮时间应为1.5 h。总溶出量为39.34 g (P<0.01)。
, 百拇医药
2.3 煎煮次数的考查：按一般中药材的提取，第二次煎煮时间比第一次短0.5 h，故设计实验方案如下：称取10 g 药材，加80 mL水浸2.5 h后，煎1.5 h，边煎边补充水分，滤过，滤渣加60、50、50 mL水分别煎煮1 h ，边煎边补充水分，滤过，滤液作薄层层析，检查酚酸性成分。结果表明：煎煮3次即可提取完全。
2.4 除鞣质方法的考查：丹参中含有大量的鞣质，有强还原性，其水溶液因加热或长时间放置易氧化、聚合生成不溶于水的沉淀。丹参注射液除鞣质的方法报道较多。有醇沉法[1]，明胶法[2]，改良明胶法[3]和聚酰胺法[4]。聚酰胺法操作繁杂，生产成本高，不适合大生产，明胶法除鞣质虽然效果好，但因丹参中的有效成分为丹参素、原儿茶醛、原儿茶酸等酚酸性物质也能和明胶生成沉淀，影响产品有效成分的含量，而改良明胶法可减少明胶对有效成分的吸附。故我们考查了醇沉法和改良明胶法对口服液质量的影响。
, http://www.100md.com
a)改良明胶法：取浓缩比为1∶2的浓缩液25 mL 3份，加5%的明胶水溶液至上清液不产生沉淀为止。静置30 min，加95%的乙醇至含醇量达60%，冷藏24 h，滤过，减压回收乙醇至25 mL左右，加水至50 mL,滤过、灌封、100℃灭菌30 min，分别在0、72 h观察其澄清度，结果见表1。同时，取一定量的药液，稀释625倍，以蒸馏水作空白对照，在(282±1) nm处，测其吸收度，结果见表1。
b)醇沉法：取浓缩比为1∶2的浓缩液25 mL 3份，加95%的乙醇至含醇量达60%，冷藏24 h，滤过，减压回收乙醇至25 mL左右，加水稀释至50 mL。滤过、灌封、100℃灭菌30 min，分别在0、72 h观察其澄清度，同时，取一定量的药液，稀释625倍，以蒸馏水作空白对照，在(282±1) nm处测其吸收度，结果见表1。
表1 改良明胶法和醇沉法对样品质量的影响 方法
, 百拇医药 改良明胶法
醇沉法
次数
1
2
3
1
2
3
澄清度
0 h
澄清
澄清
澄清
, 百拇医药
澄清
澄清
澄清
72 h
澄清
澄清
澄清
有微量沉淀
吸收度
0.525
0.519
0.525
0.114
, http://www.100md.com
0.111
0.109
t=271 P<0.01
结果表明：改良明胶法所得样品有效成分含量高，样品澄明度好，故采用改良明胶法。
2.5 醇沉浓度的考察：改良明胶法所选择的醇沉浓度不同，可直接影响产品的质量。醇沉浓度过低，过量的明胶及药液中的淀粉、树胶、蛋白质、树脂、色素等杂质难以除尽，影响产品的澄清度；而醇沉浓度过高，即提高了生产成本，又降低有效成分的含量，因此我们对醇沉浓度进行了考察。
实验方法：取浓缩比为1∶2的药液5份，加5%的明胶至上清液不产生沉淀为止，静置30 min，每份加95%的乙醇至含量分别达到60%、65%、70%、75%、80%，冷藏24 h，滤过，5份调至同等量，分别在(282±1) nm处测其吸收度并观察其沉淀性状。结果表明，醇沉度低，样品液的吸收度大，通过留样观察，在不影响产品外在质量的前提下，我们选择60%的醇沉浓度。
, 百拇医药
2.6 pH值对制剂质量的影响：丹参的水溶性有效成分为丹参素、原儿茶醛等酚酸性化合物，在碱性或偏碱性条件下易被氧化[5]，在酸性条件下易产生沉淀，因此选择适宜的pH值可提高制剂的质量。
实验方法：分别取浓度1∶1(1 mg/mL)的药液0.25 mL，用不同 pH值的蒸馏水溶液稀释至50 mL,测其pH值，观察随pH值的变化，药液的澄清度和颜色的变化规律，结果如下：
通过上述实验，认为 pH值在4.0～5.0之间有效成分稳定，含量高。
同时我们又对活性炭的用量及使用方法进行了考查，选择加0.5%活性炭，煮沸15 min，即可提高样品的澄清度。
3 小结与讨论
, 百拇医药
综合上述实验结果：丹参口服液的制备工艺如下：取丹参饮片1 000 g,加8 倍量水，浸泡2 h,煎煮1.5 h，滤过，滤渣再分别以6.5倍量水煎煮两次，每次1 h，滤过，合并滤液，滤液浓缩至500 mL左右，冷却后，加5%明胶水溶液至上清液不产生沉淀止，静置30 min，加乙醇至含醇量达60%，静置24 h，滤过，滤液减压浓缩至稠膏状，加水至500 mL，冷却24 h，滤过，加0.5%活性炭煮沸15 min冷却24 h，滤过，加0.5%甜叶菊苷，加蒸馏水至1 000 mL，调节pH值至4.0～5.0之间，滤过、灌装、灭菌即得。
同时，我们对不同pH值条件下的样品液在其最大的吸收(282±1) nm处测其吸收度，结果表明：pH值在4.5～5.0范围内吸收度最大，故我们内控其口服液的pH值在4.5～5.0。
参 考 文 献
1 丛月珠，等.中成药研究，1985，(2)：5
2 樊志顺，等.中国医院药学杂志，1983，(3)：25
3 任日君，等.中成药研究，1987，(2)：6
4 樊志顺，等.中成药研究，1983，(4)：16
5 刘瑞玲，等.药物分析杂志，1983，(3)：163
(1998-11-11 收稿), http://www.100md.com
单位：蔡中琴 杨亚胜 郑红琴 刘桂霞 河南省中药研究所(郑州 450004)
关键词：
990615 丹参系唇形科植物丹参 Salvia miltiorriza Bge.的干燥根及根茎，具有祛瘀止痛，活血通经，清心除烦的功效。主治月经不调，胸腹刺痛，心绞痛等病症。基于其活血化瘀和抗菌消炎两大功效，近年来，丹参的各种制剂广泛用于临床多种疾病，但尤以冠心病疗效更为显著。为了完善现有的丹参剂型，我们研制了丹参口服液，并对其制备工艺进行了探讨，以确定最佳制备工艺。
1 仪器与药品
UV-240紫外可见分光光度计(日本岛津)，pHS-25型数字式酸度计，微量进样器，丹参(河南产，河南省中药研究所临床药理门诊部购买，经本所药材室鉴定)，硅胶G(青岛海洋化工厂，薄层层析用)、三氯化铁、铁氰化钾(AR级)。
, 百拇医药
2 方法与结果
2.1 丹参饮片浸泡时间的考查：丹参饮片煎煮前浸泡时间的长短直接影响浸出液的质量及生产成本，因此我们以总固体浸出量为指标来优选浸泡时间；具体实验方法和结果如下：称取7份丹参饮片各10 g,各加80 mL水浸泡，水温(26±0.5)℃，浸泡时间分别为0.5、1、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 h，滤过，用同一比重瓶在室温下分别测定不同浸泡时间滤液的重量，结果表明：最佳浸泡时间为2.5 h,浸出量为 39.24 g (P<0.02) 。
2.2 煎煮时间的考查：为保证有效成分尽可能完全提出，优选适宜的煎煮时间。方法及结果如下：称取丹参饮片4份各10 g,每份加水80 mL，水温(26±0.5)℃，浸泡2.5 h后，分别煎煮0.5、1.0、1.5、2.0 h，边煎边补充蒸发的水分，滤过放冷，用同一比重瓶在室温下分别测定，结果表明，煎煮1.5 h，煎出液饱和，因此第一次煎煮时间应为1.5 h。总溶出量为39.34 g (P<0.01)。
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2.3 煎煮次数的考查：按一般中药材的提取，第二次煎煮时间比第一次短0.5 h，故设计实验方案如下：称取10 g 药材，加80 mL水浸2.5 h后，煎1.5 h，边煎边补充水分，滤过，滤渣加60、50、50 mL水分别煎煮1 h ，边煎边补充水分，滤过，滤液作薄层层析，检查酚酸性成分。结果表明：煎煮3次即可提取完全。
2.4 除鞣质方法的考查：丹参中含有大量的鞣质，有强还原性，其水溶液因加热或长时间放置易氧化、聚合生成不溶于水的沉淀。丹参注射液除鞣质的方法报道较多。有醇沉法[1]，明胶法[2]，改良明胶法[3]和聚酰胺法[4]。聚酰胺法操作繁杂，生产成本高，不适合大生产，明胶法除鞣质虽然效果好，但因丹参中的有效成分为丹参素、原儿茶醛、原儿茶酸等酚酸性物质也能和明胶生成沉淀，影响产品有效成分的含量，而改良明胶法可减少明胶对有效成分的吸附。故我们考查了醇沉法和改良明胶法对口服液质量的影响。
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a)改良明胶法：取浓缩比为1∶2的浓缩液25 mL 3份，加5%的明胶水溶液至上清液不产生沉淀为止。静置30 min，加95%的乙醇至含醇量达60%，冷藏24 h，滤过，减压回收乙醇至25 mL左右，加水至50 mL,滤过、灌封、100℃灭菌30 min，分别在0、72 h观察其澄清度，结果见表1。同时，取一定量的药液，稀释625倍，以蒸馏水作空白对照，在(282±1) nm处，测其吸收度，结果见表1。
b)醇沉法：取浓缩比为1∶2的浓缩液25 mL 3份，加95%的乙醇至含醇量达60%，冷藏24 h，滤过，减压回收乙醇至25 mL左右，加水稀释至50 mL。滤过、灌封、100℃灭菌30 min，分别在0、72 h观察其澄清度，同时，取一定量的药液，稀释625倍，以蒸馏水作空白对照，在(282±1) nm处测其吸收度，结果见表1。
表1 改良明胶法和醇沉法对样品质量的影响 方法
, 百拇医药 改良明胶法
醇沉法
次数
1
2
3
1
2
3
澄清度
0 h
澄清
澄清
澄清
, 百拇医药
澄清
澄清
澄清
72 h
澄清
澄清
澄清
有微量沉淀
吸收度
0.525
0.519
0.525
0.114
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0.111
0.109
t=271 P<0.01
结果表明：改良明胶法所得样品有效成分含量高，样品澄明度好，故采用改良明胶法。
2.5 醇沉浓度的考察：改良明胶法所选择的醇沉浓度不同，可直接影响产品的质量。醇沉浓度过低，过量的明胶及药液中的淀粉、树胶、蛋白质、树脂、色素等杂质难以除尽，影响产品的澄清度；而醇沉浓度过高，即提高了生产成本，又降低有效成分的含量，因此我们对醇沉浓度进行了考察。
实验方法：取浓缩比为1∶2的药液5份，加5%的明胶至上清液不产生沉淀为止，静置30 min，每份加95%的乙醇至含量分别达到60%、65%、70%、75%、80%，冷藏24 h，滤过，5份调至同等量，分别在(282±1) nm处测其吸收度并观察其沉淀性状。结果表明，醇沉度低，样品液的吸收度大，通过留样观察，在不影响产品外在质量的前提下，我们选择60%的醇沉浓度。
, 百拇医药
2.6 pH值对制剂质量的影响：丹参的水溶性有效成分为丹参素、原儿茶醛等酚酸性化合物，在碱性或偏碱性条件下易被氧化[5]，在酸性条件下易产生沉淀，因此选择适宜的pH值可提高制剂的质量。
实验方法：分别取浓度1∶1(1 mg/mL)的药液0.25 mL，用不同 pH值的蒸馏水溶液稀释至50 mL,测其pH值，观察随pH值的变化，药液的澄清度和颜色的变化规律，结果如下：
通过上述实验，认为 pH值在4.0～5.0之间有效成分稳定，含量高。
同时我们又对活性炭的用量及使用方法进行了考查，选择加0.5%活性炭，煮沸15 min，即可提高样品的澄清度。
3 小结与讨论
, 百拇医药
综合上述实验结果：丹参口服液的制备工艺如下：取丹参饮片1 000 g,加8 倍量水，浸泡2 h,煎煮1.5 h，滤过，滤渣再分别以6.5倍量水煎煮两次，每次1 h，滤过，合并滤液，滤液浓缩至500 mL左右，冷却后，加5%明胶水溶液至上清液不产生沉淀止，静置30 min，加乙醇至含醇量达60%，静置24 h，滤过，滤液减压浓缩至稠膏状，加水至500 mL，冷却24 h，滤过，加0.5%活性炭煮沸15 min冷却24 h，滤过，加0.5%甜叶菊苷，加蒸馏水至1 000 mL，调节pH值至4.0～5.0之间，滤过、灌装、灭菌即得。
同时，我们对不同pH值条件下的样品液在其最大的吸收(282±1) nm处测其吸收度，结果表明：pH值在4.5～5.0范围内吸收度最大，故我们内控其口服液的pH值在4.5～5.0。
参 考 文 献
1 丛月珠，等.中成药研究，1985，(2)：5
2 樊志顺，等.中国医院药学杂志，1983，(3)：25
3 任日君，等.中成药研究，1987，(2)：6
4 樊志顺，等.中成药研究，1983，(4)：16
5 刘瑞玲，等.药物分析杂志，1983，(3)：163
(1998-11-11 收稿), http://www.100md.com