口腔粘膜癌前损害过程中Bax蛋白表达水平的免疫组化初步观察
作者：曾昕 陈谦明 李秉琦 罗刚 聂敏海
单位：610041 成都，华西医科大学口腔医学院
关键词：
中华口腔医学杂志990627 Bax基因是重要的细胞凋亡促进基因，我们采用酶标链亲和素生物素法(LSAB)对正常口腔粘膜、上皮单纯增生、上皮轻、中、重度异常增生，鳞状细胞癌标本共50例进行免疫组织化学染色及光镜下观察，以初步探讨Bax基因蛋白产物Bax蛋白在口腔粘膜癌前损害发生、发展过程中的作用及变化的规律。
1.材料与方法：用鼠抗人Bax蛋白多克隆抗体(DAKO)对上述病例的石蜡组织切片进行Bax蛋白的免疫组织化学染色，以PBS液代替一抗作为空白对照。采用立体网格计数(6×6)观察10个高倍视野，计数黑点上的阳性细胞数，取平均值。将立体网格计数法结果采用SPSS 6.0软件校正t检验处理。
2.结果：Bax免疫组织化学染色统计结果为上皮单纯增生、轻度和中度异常增生中Bax表达阳性的细胞数高于其他各组(P<0.05)，重度上皮异常增生中Bax表达阳性的细胞数低于异常增生其他组(P<0.05)，其他各组差异无显著性。从镜下观察可见，Bax蛋白在各阶段组织的细胞胞浆中均出现阳性反应。正常口腔粘膜组织中，棘层有部分细胞胞浆阳性，未见基底层细胞有明显阳性反应。上皮单纯增生组中，粒层阳性反应少，棘层中表达阳性的细胞多，表达强阳性的细胞多位于接近表层处，部分基底层的细胞胞浆亦呈阳性反应。轻度、中度和重度异常增生组中，全层均可见阳性反应，其中，尤以轻、中度异常增生组阳性反应更强。鳞癌组织各层均可见阳性反应，强度略低。综上，Bax在各组组织的细胞中均见阳性表达，阳性染色反应均见于胞浆，就染色强度而言，异常增生各组最强；就表达阳性的细胞数量而言，上皮单纯增生、轻度和中度异常增生高于其他各组，差异有显著性(P<0.05)。
3.讨论：Bax基因与细胞凋亡有密切关系，它主要通过与bcl-2蛋白形成bcl-2-Bax异源二聚体复合物、与bcl-2蛋白竞争作用靶、Bax蛋白本身形成同源二聚体这3个途径来促进细胞凋亡。本研究结果提示，Bax蛋白在口腔粘膜癌前损害的发生、发展过程中，表达出现一定的波动，在上皮单纯增生、轻度和中度异常增生阶段，Bax蛋白表达的范围及强度增加可能是对细胞所接受到的内外增殖信号的一种代偿反应，试图维持细胞增殖与凋亡之间的平衡，使病变组织细胞恢复至正常状态。鳞癌组织Bax蛋白表达强度的减弱，可能是此期Bax蛋白的生物合成已受损，不能正常发挥促进细胞凋亡的作用。重度异常增生组织与鳞癌组织表现类似，可能是由于光镜下重度异常增生难与原位癌鉴别。综上，在人类口腔粘膜癌前损害的发生、发展过程中，Bax蛋白表达水平代偿性增高是早期事件，由于它与bcl-2的关系密切，在今后的研究中还须将上述结果与bcl-2蛋白的相关研究结果结合起来进行分析。
卫生部科学研究基金资助课题(96-1-237)
(收稿：1998-11-19 修回：1999-03-18), 百拇医药
单位：610041 成都，华西医科大学口腔医学院
关键词：
中华口腔医学杂志990627 Bax基因是重要的细胞凋亡促进基因，我们采用酶标链亲和素生物素法(LSAB)对正常口腔粘膜、上皮单纯增生、上皮轻、中、重度异常增生，鳞状细胞癌标本共50例进行免疫组织化学染色及光镜下观察，以初步探讨Bax基因蛋白产物Bax蛋白在口腔粘膜癌前损害发生、发展过程中的作用及变化的规律。
1.材料与方法：用鼠抗人Bax蛋白多克隆抗体(DAKO)对上述病例的石蜡组织切片进行Bax蛋白的免疫组织化学染色，以PBS液代替一抗作为空白对照。采用立体网格计数(6×6)观察10个高倍视野，计数黑点上的阳性细胞数，取平均值。将立体网格计数法结果采用SPSS 6.0软件校正t检验处理。
2.结果：Bax免疫组织化学染色统计结果为上皮单纯增生、轻度和中度异常增生中Bax表达阳性的细胞数高于其他各组(P<0.05)，重度上皮异常增生中Bax表达阳性的细胞数低于异常增生其他组(P<0.05)，其他各组差异无显著性。从镜下观察可见，Bax蛋白在各阶段组织的细胞胞浆中均出现阳性反应。正常口腔粘膜组织中，棘层有部分细胞胞浆阳性，未见基底层细胞有明显阳性反应。上皮单纯增生组中，粒层阳性反应少，棘层中表达阳性的细胞多，表达强阳性的细胞多位于接近表层处，部分基底层的细胞胞浆亦呈阳性反应。轻度、中度和重度异常增生组中，全层均可见阳性反应，其中，尤以轻、中度异常增生组阳性反应更强。鳞癌组织各层均可见阳性反应，强度略低。综上，Bax在各组组织的细胞中均见阳性表达，阳性染色反应均见于胞浆，就染色强度而言，异常增生各组最强；就表达阳性的细胞数量而言，上皮单纯增生、轻度和中度异常增生高于其他各组，差异有显著性(P<0.05)。
3.讨论：Bax基因与细胞凋亡有密切关系，它主要通过与bcl-2蛋白形成bcl-2-Bax异源二聚体复合物、与bcl-2蛋白竞争作用靶、Bax蛋白本身形成同源二聚体这3个途径来促进细胞凋亡。本研究结果提示，Bax蛋白在口腔粘膜癌前损害的发生、发展过程中，表达出现一定的波动，在上皮单纯增生、轻度和中度异常增生阶段，Bax蛋白表达的范围及强度增加可能是对细胞所接受到的内外增殖信号的一种代偿反应，试图维持细胞增殖与凋亡之间的平衡，使病变组织细胞恢复至正常状态。鳞癌组织Bax蛋白表达强度的减弱，可能是此期Bax蛋白的生物合成已受损，不能正常发挥促进细胞凋亡的作用。重度异常增生组织与鳞癌组织表现类似，可能是由于光镜下重度异常增生难与原位癌鉴别。综上，在人类口腔粘膜癌前损害的发生、发展过程中，Bax蛋白表达水平代偿性增高是早期事件，由于它与bcl-2的关系密切，在今后的研究中还须将上述结果与bcl-2蛋白的相关研究结果结合起来进行分析。
卫生部科学研究基金资助课题(96-1-237)
(收稿：1998-11-19 修回：1999-03-18), 百拇医药