涎腺肌上皮瘤与肌上皮癌发生中的c-myc癌基因与Rb抗癌基因的研究
作者:王洁 董福生 李荷香 焦建平
单位:050017 石家庄,河北医科大学口腔医学院
关键词:
中华口腔医学杂志990623 我们采用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术,对c-myc癌基因与Rb 抗癌基因的蛋白表达进行定量分析。
一、材料和方法
1.标本来源:从存档蜡块中挑选涎腺肌上皮瘤20例,肌上皮癌13例。6例正常颌下腺组织为对照。
2.流式免疫荧光染色方法:制备单细胞样品,c-myc单抗和Rb多抗(由北京中山公司提供,Santu Cruz公司生产)标记,采用间接免疫荧光法染色。c-myc和Rb阳性细胞均发出绿色荧光。
3.流式细胞检测方法:使用FACS-420 型流式细胞仪(美国BD公司),采用FITC荧光染料。测量数据及图形,同时输入HP-300 Consort 30计算机,用Single Histogram Statistics软件进行资料处理。
4.测量资料的分析方法:采用荧光指数(fluorescence index, FI)表示,c-myc和Rb基因蛋白表达相对含量FI > 1.0为表达阳性,FI≤1.0为表达阴性,所有资料均经t检验。
二、结果与讨论
1.c-myc基因的表达:6例正常颌下腺组织1例弱阳性,5例阴性。20例肌上皮瘤中阳性16例(80%),阴性4例(20%),肌上皮瘤平均表达量(FI值)与颌下腺组织间差异有显著性(P<0.05)。15例肌上皮癌全部表达阳性(100%),平均表达量(FI值)与肌上皮瘤之间差异有显著性(P< 0.05),表明c-myc癌基因在肌上皮瘤与肌上皮癌的发生过程中具有激活和过度表达。
2.Rb基因的表达:6例颌下腺组织均为阴性。20例肌上皮瘤阳性11例(55%),阴性9例,但其二者平均表达量(FI值)差异无显著性(P>0.05),13例肌上皮癌阳性10例(77%),阴性3例,平均表达量(FI值)分别与颌下腺组织、与肌上皮瘤之间差异有显著性(P<0.05),说明 Rb基因的异常表达与肌上皮癌的发生关系更为密切。Rb抗癌基因在正常情况下对细胞分裂周期起着重要的抑制作用,当这种抑制作用减弱(功能缺乏或基因突变)时,将会导致细胞异常增生和恶性转化。本实验结果表明在肌上皮癌的发生中Rb基因具有突变和异常表达,提示抗癌基因的失活对涎腺肌上皮癌的发生具有重要的意义。
卫生部优秀青年科技人才专项科研基金资助课题(96Q-061)
(收稿:1998-07-07 修回:1999-04-01), http://www.100md.com
单位:050017 石家庄,河北医科大学口腔医学院
关键词:
中华口腔医学杂志990623 我们采用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术,对c-myc癌基因与Rb 抗癌基因的蛋白表达进行定量分析。
一、材料和方法
1.标本来源:从存档蜡块中挑选涎腺肌上皮瘤20例,肌上皮癌13例。6例正常颌下腺组织为对照。
2.流式免疫荧光染色方法:制备单细胞样品,c-myc单抗和Rb多抗(由北京中山公司提供,Santu Cruz公司生产)标记,采用间接免疫荧光法染色。c-myc和Rb阳性细胞均发出绿色荧光。
3.流式细胞检测方法:使用FACS-420 型流式细胞仪(美国BD公司),采用FITC荧光染料。测量数据及图形,同时输入HP-300 Consort 30计算机,用Single Histogram Statistics软件进行资料处理。
4.测量资料的分析方法:采用荧光指数(fluorescence index, FI)表示,c-myc和Rb基因蛋白表达相对含量FI > 1.0为表达阳性,FI≤1.0为表达阴性,所有资料均经t检验。
二、结果与讨论
1.c-myc基因的表达:6例正常颌下腺组织1例弱阳性,5例阴性。20例肌上皮瘤中阳性16例(80%),阴性4例(20%),肌上皮瘤平均表达量(FI值)与颌下腺组织间差异有显著性(P<0.05)。15例肌上皮癌全部表达阳性(100%),平均表达量(FI值)与肌上皮瘤之间差异有显著性(P< 0.05),表明c-myc癌基因在肌上皮瘤与肌上皮癌的发生过程中具有激活和过度表达。
2.Rb基因的表达:6例颌下腺组织均为阴性。20例肌上皮瘤阳性11例(55%),阴性9例,但其二者平均表达量(FI值)差异无显著性(P>0.05),13例肌上皮癌阳性10例(77%),阴性3例,平均表达量(FI值)分别与颌下腺组织、与肌上皮瘤之间差异有显著性(P<0.05),说明 Rb基因的异常表达与肌上皮癌的发生关系更为密切。Rb抗癌基因在正常情况下对细胞分裂周期起着重要的抑制作用,当这种抑制作用减弱(功能缺乏或基因突变)时,将会导致细胞异常增生和恶性转化。本实验结果表明在肌上皮癌的发生中Rb基因具有突变和异常表达,提示抗癌基因的失活对涎腺肌上皮癌的发生具有重要的意义。
卫生部优秀青年科技人才专项科研基金资助课题(96Q-061)
(收稿:1998-07-07 修回:1999-04-01), http://www.100md.com