同一牙上不同破坏部位的龈沟液中酶水平观察
作者：和璐 曹采方 沙月琴
单位：100081 北京医科大学口腔医学院
关键词：牙周组织；酶类；牙周疾病
中华口腔医学杂志990606 【摘要】 目的 指导临床科研中合理选择取样方法和部位。方法 取同一颗牙上破坏程度不同的近、远中颊侧两部位的龈沟液样本，并记录该位点及其相邻位点的临床指标，探讨破坏程度不同部位的龈沟液中天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)的关系，以及取样部位该酶水平与其临床指标和相邻部位临床指标的关系。结果 同一牙上破坏重侧的AST和ALP总水平显著高于破坏轻侧(P<0.001)，取样部位酶水平与取样部位舌侧的探诊深度(probing depth, PD)及附着水平(attachment level, AL)呈强正相关(P< 0.001, r>0.5)，但该部位的ALP总量仅与邻牙的PD呈弱正相关(P<0.05, r=0.275), AST总量与邻牙PD、AL以及ALP总量与邻牙AL均无明显相关关系(P>0.05)。结论 同一牙上不同破坏程度的部位各项指标均有差异，一个邻面部位的龈沟液对另一侧无明显影响，而易受到与其直接相邻部位的影响，尤其是同侧部位的影响。提示临床科研中应慎重选择研究部位和取样。
, 百拇医药
Gingival crevicular fluid enzyme levels at different destruction sites in the same teeth
HE Lu，CAO Caifang，SHA Yueqin.
School of Stomatology, Beijing Medical University, Beijing 100081
【Abstract】 Objective To direct selecting proper sampling methods and sites in clinical research. Methods Gingival crevicular fluid (GCF) was sampled separately at the mesial-buccal and distal-buccal sites in the same teeth, which were destroyed differently. Clinical parameters were recorded in the subject sites and its adjacent sites. Aspartate Aminotransferase (AST) and Alkaline Phosphatase (ALP) in the GCF were determined. Difference of the enzyme levels between the two sampling sites，and relations between the enzyme level and all the clinical parameters were assessed. Results GCF-AST、ALP per sample at severely diseased sites were much higher than that from healthy and/or mild sites in the same teeth. Significant positive correlation (P< 0.001, r>0.5) was demonstrated between enzyme levels in the sampling sites and probing depth (PD) and attachment level (AL) of the lingual sites. However, there was mild significant correlation (P<0.05, r=0.275) between ALP level in the sampling sites and PD of the proximal-buccal sites of its adjacent teeth. No significant correlation (P>0.05)was found between AST level in the sampling sites and PD、AL of the adjacent teeth sites, and also between ALP level in the sampling sites and AL of the adjacent teeth sites.Conclusion Site-specificity of periodontal disease was further demonstrated. GCF components were influenced reciprocally more obviously in the same proximal than by other sites.
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【Key words】 Periodontium Enzymes Periodontal diseases
同一颗牙不同部位的炎症状态、牙槽骨吸收情况、病程进展及局部宿主对炎症的反映均不相同，可用龈沟液(gingival crevicular fluid，GCF)内容物的变化来反映。GCF中天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase，AST)和碱性磷酸酶(alkaline phospatase，ALP)被认为是反映上述变化的敏感指标[1,2]。对同一部位的GCF信息与相邻部位或同一牙上不相邻部位的关系的认识报道较少，这使得取样中方法较为混乱[2-4]。为此我们分析了同一牙中不同破坏程度的部位间AST及ALP的关系，以期指导GCF取样部位的特异性选择。
材料和方法
1. 病例选择：从北京医科大学口腔医学院牙周科选择未经治疗的牙周炎患者14例，男7例，女7例，年龄22～56岁，全身健康(妇女未妊娠)且3个月内未服用任何抗生素。选择牙位：选一颗牙的近中和远中颊侧两位点。要求一侧为牙周健康或牙龈炎或轻度牙周炎，探诊深度(probing depth, PD)≤4 mm，X线根尖片示邻面无牙槽骨吸收或吸收不超过根长的1/3；另一侧为中、重度牙周炎,PD为≥5 mm，X线片示牙槽骨吸收超过根长的1/3；且两侧PD差别大于2 mm，邻面牙槽骨高度差别≥3 mm。患者有一颗牙符合以上条件即可入选。本研究共纳入29颗牙。
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2.取样与临床指标的记录[5]：先在病变轻侧取样，20分钟后在该牙的重侧取样，均采用袋内法取30 s GCF样本。如取出的滤纸条上带血则弃去该牙。记录菌斑指数(plaque index, PLI)、出血指数(bleeding index,BI)、PD和附着丧失(attachment level, AL)，以及该位点相邻牙齿的相邻位点(简称邻牙)、取样部位舌侧位点的PD和AL。
3.测定 GCF中AST和ALP的水平[5] 。
4.统计学处理：各指标以位点为观察单位, 所有资料用SPSS软件包进行统计分析。①不同临床指标的分布状况用频数表统计。②同一颗牙病变轻重两侧的各生化指标和临床指标除PD用配对t检验外，其余均用配对秩和检验，取样部位、取样部位邻牙和取样部位舌侧临床指标的比较用One-way ANOVA。③取样部位的生化指标与临床指标之间的关系采用Spearman等级相关分析。
, 百拇医药
结果
1.取样部位的临床指标分布情况：由表1可见，轻侧基本属于龈炎和轻度牙周炎；重侧基本属于中、重度牙周炎，重度偏多。
表1 轻侧和重侧取样部位的临床指标分布 临床指标
轻侧位点数
重侧位点数
附着丧失(mm)
0
12
0
0.5～2
11
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0
2.5～3
6
2
3.5～6
0
10
6.5～13
0
17
探诊深度(mm)
1～3
26
, 百拇医药
0
3.5～4
3
0
5～7
0
15
7.5～11
0
14
出血指数
0
3
0
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1,2
23
0
3,4
3
29
菌斑指数
0
10
0
1
4
4
2
, 百拇医药
12
10
3
3
15
2.取样部位与其邻牙和相邻舌侧部位的临床指标比较：由表2可见，在轻侧，取样部位破坏最轻，而取样部位舌侧和邻牙的牙周破坏状况则较为一致。在重侧，取样部位及其舌侧的破坏程度都明显重于邻牙，而取样部位舌侧的破坏程度基本与取样部位相一致。
表2 取样部位与其邻牙和相邻舌侧部位
探诊深度、附着丧失的比较 (mm，
±s) 部位
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探诊深度
附着丧失
轻侧
重侧
轻侧
重侧
取样部位
2.59±
0.13
7.48±
0.33**
1.03±
0.21
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6.98±
0.53**
邻牙
3.10±
0.31
4.36±
0.34
2.05±
0.41*
3.71±
0.49
舌侧
, 百拇医药
3.50±
0.19*
7.05±
0.40**
2.16±
0.33*
7.00±
0.50**
注：*取样部位比较，P<0.05；**与取样部位的邻牙比较，P<0.05
3.牙周组织破坏重，其各项临床指标都比破坏轻的相应指标水平高(P<0.001)；重侧每样本的ALP和AST总量也明显高于轻侧(P<0.001)，见表3。表3 病变轻侧和重侧各指标的比较(±s) 指标
, 百拇医药
牙数
轻侧
重侧
附着丧失(mm)
29
1.03±0.21
6.98±0.53*
探诊深度(mm)
29
2.59±0.13
7.48±0.33*
出血指数
, 百拇医药
29
1.55±0.17
3.86±0.07*
菌斑指数
29
1.28±0.20
2.38±0.14*
龈沟液量(unit)
27
37.63±5.31
178.63±5.68*
, 百拇医药
碱性磷酸酶(mIU)
28
71.03±6.95
300.03±42.84*
天冬氨酸转氨酶
(mIU)
20
447.06±127.67
5 011.72±724.94*
注：*重侧与轻侧比较，P<0.001
4.取样部位每样本AST和ALP总量及GCF量也都与其舌侧的PD、AL显著正相关(P<0.001)，但仅GCF量与邻牙的AL、PD正相关(P<0.05)，ALP总量和邻牙的PD也呈正相关(P<0.05)，见表4。表4 取样部位相邻位点的临床指标与取样部位的
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生化指标及龈沟液量的相关系数(r) 指标
邻牙(n)
舌侧(n)
附着丧失
探诊深度
附着丧失
探诊深度
天冬氨酸
转氨酶
0.311 (37)
0.304 (41)
0.711**(37)
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0.657**(41)
碱性磷
酸酶
0.250 (50)
0.275*(56)
0.565**(48)
0.541**(54)
龈沟液
0.288*(49)
0.337*(55)
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0.657**(47)
0.824**(53)
注：*P<0.05, **P<0.001
讨论
本研究结果证实，在同一颗牙上，不同部位的各项指标均可以有差异, 破坏重侧的GCF-AST、ALP总量水平明显高于轻侧。闫福华等[2]曾检测同一牙上临床指标相似的近、远中两部位的GCF-AST，处于活动性破坏的一侧AST水平明显高于相对静止的另一侧，说明一个部位酶水平的高低与取样时该部位的牙周状态相关。本研究的近远中部位是否处于活动性破坏并不清楚，但临床指标差别明显，而曹采方和闫福华[6]的研究发现深牙周袋发生活动性破坏的可能性更大，因此本结果从另一角度证实一个部位GCF中的AST、ALP水平的高低与其自身的牙周组织炎症和破坏状态密切相关，不能代表所取牙齿的总体水平，也表明一颗牙齿的一个邻面部位即使重度破坏，对其另一邻面部位不会产生明显影响。而且, 本研究选择一颗牙的两个对应的邻面部位严格配对，消除了个体差异的影响，更证实了牙周破坏的部位特异性。
, 百拇医药
Lamster等[7]发现同一牙同一邻面的颊点和舌点间的β葡萄糖醛酸转移酶(β-glucuronidase，βG)关系最为密切，表明此两点的相互影响大。AST和ALP与βG一样，主要受牙周组织局部因素的影响，与GCF流率无明显关系[1,8]，推测此两种酶与解剖部位的关系可能近似于βG。结果表明，取样部位的AST、ALP总量与取样部位舌侧的PD、AL的相关关系，明显强于与取样部位邻牙的PD和AL的相关关系。近一步证实，在一个龈乳头区域，同侧舌点对取样部位(颊点)的影响比邻牙的影响更大。在临床科研中，由于GCF量极微，有学者[3,4,9]用2个或3个滤纸条分别从同一面的颊舌侧或近远中侧甚至颊侧中央取样并混合起来，以代表该牙或该取样邻面部位的牙周状况，本研究则提示若选择如此取样方法，就要根据研究目的慎重选择取样牙，即取样的龈乳头区域或患牙各部位的临床指标近似较好。
参考文献
1 Binder TA, Goodson JM, Socransky SS. Gingival fluid levels of acid and alkaline phosphatase. J Periodontal Res，1987，22:14-19.
, 百拇医药
2 闫福华, 曹采方, 李晓新. 龈沟液中天冬氨酸转氨酶水平与牙周炎活动性的关系. 中华口腔医学杂志, 1995 ,30: 40-42.
3 黎芮, 曹采方, 李晓新. 龈沟液中天冬氨酸转氨酶水平的变化.中华口腔医学杂志, 1992, 27:70-73.
4 谢昊，曹采方，马大龙. 龈沟液中的炎症调节因子——白细胞介素8.中华口腔医学杂志 ,1997,32：136-138.
5 和璐，沙月琴，曹采方. 取样方法的比较及其对龈沟液酶水平的影响. 中华口腔医学杂志,1998,33：100-102.
6 曹采方, 闫福华. 牙周炎维护治疗期中活动性破坏的发生特征.中华口腔医学杂志, 1994,29：272-274.
7 Lamster IB, Oshhrain RL, Celenti R, et al. Correlation analysis for clinical and gingival crevicular fluid parameters at anatomically related gingival sites. J Clin Periodontol , 1991,18:272-277.
, 百拇医药
8 Chambers DA, Crawford JM, Mukherjee S, et al. Aspartate aminotransferase increase in crevicular fluid during experimental periodontitis in beagle dogs . J Periodontol, 1984,55:526-530.
9 Nakashima K, Roehrich N, Cimasoni G. Osteocalcin, prostaglandin E2 and alkaline phosphatase in gingival crevicular fluid: their relations to periodontal status. J Clin Periodontol ,1994,21: 327-333.
(收稿：1999-01-29 修回：1999-05-20), http://www.100md.com
单位：100081 北京医科大学口腔医学院
关键词：牙周组织；酶类；牙周疾病
中华口腔医学杂志990606 【摘要】 目的 指导临床科研中合理选择取样方法和部位。方法 取同一颗牙上破坏程度不同的近、远中颊侧两部位的龈沟液样本，并记录该位点及其相邻位点的临床指标，探讨破坏程度不同部位的龈沟液中天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)的关系，以及取样部位该酶水平与其临床指标和相邻部位临床指标的关系。结果 同一牙上破坏重侧的AST和ALP总水平显著高于破坏轻侧(P<0.001)，取样部位酶水平与取样部位舌侧的探诊深度(probing depth, PD)及附着水平(attachment level, AL)呈强正相关(P< 0.001, r>0.5)，但该部位的ALP总量仅与邻牙的PD呈弱正相关(P<0.05, r=0.275), AST总量与邻牙PD、AL以及ALP总量与邻牙AL均无明显相关关系(P>0.05)。结论 同一牙上不同破坏程度的部位各项指标均有差异，一个邻面部位的龈沟液对另一侧无明显影响，而易受到与其直接相邻部位的影响，尤其是同侧部位的影响。提示临床科研中应慎重选择研究部位和取样。
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Gingival crevicular fluid enzyme levels at different destruction sites in the same teeth
HE Lu，CAO Caifang，SHA Yueqin.
School of Stomatology, Beijing Medical University, Beijing 100081
【Abstract】 Objective To direct selecting proper sampling methods and sites in clinical research. Methods Gingival crevicular fluid (GCF) was sampled separately at the mesial-buccal and distal-buccal sites in the same teeth, which were destroyed differently. Clinical parameters were recorded in the subject sites and its adjacent sites. Aspartate Aminotransferase (AST) and Alkaline Phosphatase (ALP) in the GCF were determined. Difference of the enzyme levels between the two sampling sites，and relations between the enzyme level and all the clinical parameters were assessed. Results GCF-AST、ALP per sample at severely diseased sites were much higher than that from healthy and/or mild sites in the same teeth. Significant positive correlation (P< 0.001, r>0.5) was demonstrated between enzyme levels in the sampling sites and probing depth (PD) and attachment level (AL) of the lingual sites. However, there was mild significant correlation (P<0.05, r=0.275) between ALP level in the sampling sites and PD of the proximal-buccal sites of its adjacent teeth. No significant correlation (P>0.05)was found between AST level in the sampling sites and PD、AL of the adjacent teeth sites, and also between ALP level in the sampling sites and AL of the adjacent teeth sites.Conclusion Site-specificity of periodontal disease was further demonstrated. GCF components were influenced reciprocally more obviously in the same proximal than by other sites.
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【Key words】 Periodontium Enzymes Periodontal diseases
同一颗牙不同部位的炎症状态、牙槽骨吸收情况、病程进展及局部宿主对炎症的反映均不相同，可用龈沟液(gingival crevicular fluid，GCF)内容物的变化来反映。GCF中天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase，AST)和碱性磷酸酶(alkaline phospatase，ALP)被认为是反映上述变化的敏感指标[1,2]。对同一部位的GCF信息与相邻部位或同一牙上不相邻部位的关系的认识报道较少，这使得取样中方法较为混乱[2-4]。为此我们分析了同一牙中不同破坏程度的部位间AST及ALP的关系，以期指导GCF取样部位的特异性选择。
材料和方法
1. 病例选择：从北京医科大学口腔医学院牙周科选择未经治疗的牙周炎患者14例，男7例，女7例，年龄22～56岁，全身健康(妇女未妊娠)且3个月内未服用任何抗生素。选择牙位：选一颗牙的近中和远中颊侧两位点。要求一侧为牙周健康或牙龈炎或轻度牙周炎，探诊深度(probing depth, PD)≤4 mm，X线根尖片示邻面无牙槽骨吸收或吸收不超过根长的1/3；另一侧为中、重度牙周炎,PD为≥5 mm，X线片示牙槽骨吸收超过根长的1/3；且两侧PD差别大于2 mm，邻面牙槽骨高度差别≥3 mm。患者有一颗牙符合以上条件即可入选。本研究共纳入29颗牙。
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2.取样与临床指标的记录[5]：先在病变轻侧取样，20分钟后在该牙的重侧取样，均采用袋内法取30 s GCF样本。如取出的滤纸条上带血则弃去该牙。记录菌斑指数(plaque index, PLI)、出血指数(bleeding index,BI)、PD和附着丧失(attachment level, AL)，以及该位点相邻牙齿的相邻位点(简称邻牙)、取样部位舌侧位点的PD和AL。
3.测定 GCF中AST和ALP的水平[5] 。
4.统计学处理：各指标以位点为观察单位, 所有资料用SPSS软件包进行统计分析。①不同临床指标的分布状况用频数表统计。②同一颗牙病变轻重两侧的各生化指标和临床指标除PD用配对t检验外，其余均用配对秩和检验，取样部位、取样部位邻牙和取样部位舌侧临床指标的比较用One-way ANOVA。③取样部位的生化指标与临床指标之间的关系采用Spearman等级相关分析。
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结果
1.取样部位的临床指标分布情况：由表1可见，轻侧基本属于龈炎和轻度牙周炎；重侧基本属于中、重度牙周炎，重度偏多。
表1 轻侧和重侧取样部位的临床指标分布 临床指标
轻侧位点数
重侧位点数
附着丧失(mm)
0
12
0
0.5～2
11
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0
2.5～3
6
2
3.5～6
0
10
6.5～13
0
17
探诊深度(mm)
1～3
26
, 百拇医药
0
3.5～4
3
0
5～7
0
15
7.5～11
0
14
出血指数
0
3
0
, 百拇医药
1,2
23
0
3,4
3
29
菌斑指数
0
10
0
1
4
4
2
, 百拇医药
12
10
3
3
15
2.取样部位与其邻牙和相邻舌侧部位的临床指标比较：由表2可见，在轻侧，取样部位破坏最轻，而取样部位舌侧和邻牙的牙周破坏状况则较为一致。在重侧，取样部位及其舌侧的破坏程度都明显重于邻牙，而取样部位舌侧的破坏程度基本与取样部位相一致。
表2 取样部位与其邻牙和相邻舌侧部位
探诊深度、附着丧失的比较 (mm，
±s) 部位, http://www.100md.com
探诊深度
附着丧失
轻侧
重侧
轻侧
重侧
取样部位
2.59±
0.13
7.48±
0.33**
1.03±
0.21
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6.98±
0.53**
邻牙
3.10±
0.31
4.36±
0.34
2.05±
0.41*
3.71±
0.49
舌侧
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3.50±
0.19*
7.05±
0.40**
2.16±
0.33*
7.00±
0.50**
注：*取样部位比较，P<0.05；**与取样部位的邻牙比较，P<0.05
3.牙周组织破坏重，其各项临床指标都比破坏轻的相应指标水平高(P<0.001)；重侧每样本的ALP和AST总量也明显高于轻侧(P<0.001)，见表3。表3 病变轻侧和重侧各指标的比较(
±s) 指标, 百拇医药
牙数
轻侧
重侧
附着丧失(mm)
29
1.03±0.21
6.98±0.53*
探诊深度(mm)
29
2.59±0.13
7.48±0.33*
出血指数
, 百拇医药
29
1.55±0.17
3.86±0.07*
菌斑指数
29
1.28±0.20
2.38±0.14*
龈沟液量(unit)
27
37.63±5.31
178.63±5.68*
, 百拇医药
碱性磷酸酶(mIU)
28
71.03±6.95
300.03±42.84*
天冬氨酸转氨酶
(mIU)
20
447.06±127.67
5 011.72±724.94*
注：*重侧与轻侧比较，P<0.001
4.取样部位每样本AST和ALP总量及GCF量也都与其舌侧的PD、AL显著正相关(P<0.001)，但仅GCF量与邻牙的AL、PD正相关(P<0.05)，ALP总量和邻牙的PD也呈正相关(P<0.05)，见表4。表4 取样部位相邻位点的临床指标与取样部位的
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生化指标及龈沟液量的相关系数(r) 指标
邻牙(n)
舌侧(n)
附着丧失
探诊深度
附着丧失
探诊深度
天冬氨酸
转氨酶
0.311 (37)
0.304 (41)
0.711**(37)
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0.657**(41)
碱性磷
酸酶
0.250 (50)
0.275*(56)
0.565**(48)
0.541**(54)
龈沟液
0.288*(49)
0.337*(55)
, http://www.100md.com
0.657**(47)
0.824**(53)
注：*P<0.05, **P<0.001
讨论
本研究结果证实，在同一颗牙上，不同部位的各项指标均可以有差异, 破坏重侧的GCF-AST、ALP总量水平明显高于轻侧。闫福华等[2]曾检测同一牙上临床指标相似的近、远中两部位的GCF-AST，处于活动性破坏的一侧AST水平明显高于相对静止的另一侧，说明一个部位酶水平的高低与取样时该部位的牙周状态相关。本研究的近远中部位是否处于活动性破坏并不清楚，但临床指标差别明显，而曹采方和闫福华[6]的研究发现深牙周袋发生活动性破坏的可能性更大，因此本结果从另一角度证实一个部位GCF中的AST、ALP水平的高低与其自身的牙周组织炎症和破坏状态密切相关，不能代表所取牙齿的总体水平，也表明一颗牙齿的一个邻面部位即使重度破坏，对其另一邻面部位不会产生明显影响。而且, 本研究选择一颗牙的两个对应的邻面部位严格配对，消除了个体差异的影响，更证实了牙周破坏的部位特异性。
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Lamster等[7]发现同一牙同一邻面的颊点和舌点间的β葡萄糖醛酸转移酶(β-glucuronidase，βG)关系最为密切，表明此两点的相互影响大。AST和ALP与βG一样，主要受牙周组织局部因素的影响，与GCF流率无明显关系[1,8]，推测此两种酶与解剖部位的关系可能近似于βG。结果表明，取样部位的AST、ALP总量与取样部位舌侧的PD、AL的相关关系，明显强于与取样部位邻牙的PD和AL的相关关系。近一步证实，在一个龈乳头区域，同侧舌点对取样部位(颊点)的影响比邻牙的影响更大。在临床科研中，由于GCF量极微，有学者[3,4,9]用2个或3个滤纸条分别从同一面的颊舌侧或近远中侧甚至颊侧中央取样并混合起来，以代表该牙或该取样邻面部位的牙周状况，本研究则提示若选择如此取样方法，就要根据研究目的慎重选择取样牙，即取样的龈乳头区域或患牙各部位的临床指标近似较好。
参考文献
1 Binder TA, Goodson JM, Socransky SS. Gingival fluid levels of acid and alkaline phosphatase. J Periodontal Res，1987，22:14-19.
, 百拇医药
2 闫福华, 曹采方, 李晓新. 龈沟液中天冬氨酸转氨酶水平与牙周炎活动性的关系. 中华口腔医学杂志, 1995 ,30: 40-42.
3 黎芮, 曹采方, 李晓新. 龈沟液中天冬氨酸转氨酶水平的变化.中华口腔医学杂志, 1992, 27:70-73.
4 谢昊，曹采方，马大龙. 龈沟液中的炎症调节因子——白细胞介素8.中华口腔医学杂志 ,1997,32：136-138.
5 和璐，沙月琴，曹采方. 取样方法的比较及其对龈沟液酶水平的影响. 中华口腔医学杂志,1998,33：100-102.
6 曹采方, 闫福华. 牙周炎维护治疗期中活动性破坏的发生特征.中华口腔医学杂志, 1994,29：272-274.
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, 百拇医药
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(收稿：1999-01-29 修回：1999-05-20), http://www.100md.com