六味地黄汤对糖尿病大鼠肾脏抗脂质过氧化损伤的影响★
作者：袁 咏 曲竹秋 周云岩 王作成
单位：
关键词：糖尿病；＠六味地黄汤；药理学；超氧化物类；动物模型；大鼠
新中医990620 提 要 在链脲佐菌素(STZ)诱导的早期糖尿病大鼠肾脏组织中，其过氧化脂质(LPO)含量与肾脏肥大及高滤过程度呈显著正相关(P<0.05)。六味地黄汤不仅可以降低糖尿病大鼠的空腹血糖，而且可以降低其肾组织中的LPO含量，提高SOD的活性，降低肾脏肥大及高滤过。提示：六味地黄汤防治糖尿病血管并发症有一定作用。
糖尿病肾病(DN)出现最早的病理改变是肾脏肥大和高滤过现象，而自由基所产生的脂质过氧化损伤可能参与了这一过程。本实验探讨六味地黄汤治疗糖尿病肾病的可能机制。
1 材料
, http://www.100md.com
1.1 动物 雄性Wistar大鼠36只，体重271±18.55 g，月龄3月，分笼喂养，自由进食水。
1.2 造模用药 链脲佐菌素(streptozocin)，Sigma Co.USA产品。
1.3 实验用药 六味地黄汤各成份由天津中医学院第二附属医院制剂科提供，药用：生地黄30 g，茯苓、山药、山茱萸各15 g，牡丹皮、泽泻各10 g，并浓缩至3 g/2 ml。维生素E注射液5 mg/ml，上海第九制药厂产品(批号970207)。
1.4 主要试剂 硫代巴比妥酸，北京生化二厂产品，分析纯。SOD放免试剂盒，北京解放军总医院放射免疫研究所。血糖试纸，德国产品。其余试剂均为国产分析纯。
1.5 主要仪器 Z323K低温高速离心机，德国生产。7530紫外分光光度计，上海分光光度计厂。LKB自动r计数器，荷兰生产。Vital Lab半自动生化分析仪，荷兰生产。Accutrend alpha血糖仪，德国生产。千分之一光电分析天平，上海生产。R7170全自动生化仪，日本生产。
, 百拇医药
2 实验方法
2.1 造模 实验动物禁食12 小时，腹腔注射STZ50 mg/kg(STZ临时溶于0.1 M，pH 4.2，4℃的无菌枸椽
★天津医科大学中青年科研基金课题(97-03)
酸-枸椽酸钠缓冲液中，制成浓度为0.5%的溶液)。非造模动物，腹腔注射等量的缓冲液。72 小时后，测定空腹血糖13.8～25.0 mmol/L，多饮、多食、多尿，体重明显减轻，尿糖(+++)以上，且在整个实验过程中保持上述条件不变者定为糖尿病患鼠〔1〕。
2.2 实验分组 造模72 小时后，将大鼠随机分为4组：正常对照组6只及糖尿病组10只，每天以2 ml/只蒸馏水灌胃；维生素E组10只，每天每只以14 mg/kg维生素E注射液灌胃〔2〕；六味地黄汤组10只，每天每只灌以六味地黄汤3 g/2 ml〔3〕，共28天。
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2.3 观察指标 大鼠在注射STZ前后测血糖、体重、定性尿糖，实验结束心腔取血并留24 小时尿，测血、尿糖，血、尿肌酐，体重、肾重及肾组织LPO含量和SOD活性。
2.4 检测方法 血糖用alpha血糖仪测定，血、尿肌酐及尿糖用自动生化仪测定，SOD用放免法，LPO用硫代巴比妥酸法。
2.5 统计 所有实验数据以x±s表示，组间差异用t检验。
3 实验结果
3.1 糖尿病模型肾脏肥大与其肾组织LPO含量的关系 糖尿病形成28 天，糖尿病组大鼠较正常组体重减轻(P<0.05)，肾重增加(P<0.05)，SOD活力下降(P<0.05)。肾重/体重比值较正常组增大65.2%，同时肾组织中LPO含量也高于正常组(P<0.05)，二者之间呈显著正相关(r＝0.869，n＝14，P<0.05)。见表1。
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关键词：糖尿病；＠六味地黄汤；药理学；超氧化物类；动物模型；大鼠
新中医990620 提 要 在链脲佐菌素(STZ)诱导的早期糖尿病大鼠肾脏组织中，其过氧化脂质(LPO)含量与肾脏肥大及高滤过程度呈显著正相关(P<0.05)。六味地黄汤不仅可以降低糖尿病大鼠的空腹血糖，而且可以降低其肾组织中的LPO含量，提高SOD的活性，降低肾脏肥大及高滤过。提示：六味地黄汤防治糖尿病血管并发症有一定作用。
糖尿病肾病(DN)出现最早的病理改变是肾脏肥大和高滤过现象，而自由基所产生的脂质过氧化损伤可能参与了这一过程。本实验探讨六味地黄汤治疗糖尿病肾病的可能机制。
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1.1 动物 雄性Wistar大鼠36只，体重271±18.55 g，月龄3月，分笼喂养，自由进食水。
1.2 造模用药 链脲佐菌素(streptozocin)，Sigma Co.USA产品。
1.3 实验用药 六味地黄汤各成份由天津中医学院第二附属医院制剂科提供，药用：生地黄30 g，茯苓、山药、山茱萸各15 g，牡丹皮、泽泻各10 g，并浓缩至3 g/2 ml。维生素E注射液5 mg/ml，上海第九制药厂产品(批号970207)。
1.4 主要试剂 硫代巴比妥酸，北京生化二厂产品，分析纯。SOD放免试剂盒，北京解放军总医院放射免疫研究所。血糖试纸，德国产品。其余试剂均为国产分析纯。
1.5 主要仪器 Z323K低温高速离心机，德国生产。7530紫外分光光度计，上海分光光度计厂。LKB自动r计数器，荷兰生产。Vital Lab半自动生化分析仪，荷兰生产。Accutrend alpha血糖仪，德国生产。千分之一光电分析天平，上海生产。R7170全自动生化仪，日本生产。
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2 实验方法
2.1 造模 实验动物禁食12 小时，腹腔注射STZ50 mg/kg(STZ临时溶于0.1 M，pH 4.2，4℃的无菌枸椽
★天津医科大学中青年科研基金课题(97-03)
酸-枸椽酸钠缓冲液中，制成浓度为0.5%的溶液)。非造模动物，腹腔注射等量的缓冲液。72 小时后，测定空腹血糖13.8～25.0 mmol/L，多饮、多食、多尿，体重明显减轻，尿糖(+++)以上，且在整个实验过程中保持上述条件不变者定为糖尿病患鼠〔1〕。
2.2 实验分组 造模72 小时后，将大鼠随机分为4组：正常对照组6只及糖尿病组10只，每天以2 ml/只蒸馏水灌胃；维生素E组10只，每天每只以14 mg/kg维生素E注射液灌胃〔2〕；六味地黄汤组10只，每天每只灌以六味地黄汤3 g/2 ml〔3〕，共28天。
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2.3 观察指标 大鼠在注射STZ前后测血糖、体重、定性尿糖，实验结束心腔取血并留24 小时尿，测血、尿糖，血、尿肌酐，体重、肾重及肾组织LPO含量和SOD活性。
2.4 检测方法 血糖用alpha血糖仪测定，血、尿肌酐及尿糖用自动生化仪测定，SOD用放免法，LPO用硫代巴比妥酸法。
2.5 统计 所有实验数据以x±s表示，组间差异用t检验。
3 实验结果
3.1 糖尿病模型肾脏肥大与其肾组织LPO含量的关系 糖尿病形成28 天，糖尿病组大鼠较正常组体重减轻(P<0.05)，肾重增加(P<0.05)，SOD活力下降(P<0.05)。肾重/体重比值较正常组增大65.2%，同时肾组织中LPO含量也高于正常组(P<0.05)，二者之间呈显著正相关(r＝0.869，n＝14，P<0.05)。见表1。
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