子宫内膜异位症的免疫状态与中医辨证分型的关系
作者：王志莲 张永洛 岳月娥 李世光
单位：王志莲 张永洛(山西医科大学第二医院 太原 030001)；岳月娥 李世光(山西医科大学儿科系 太原 030001)
关键词：子宫内膜异位症；血瘀证；辨证分型
摘 要 目的 探讨子宫内膜异位症 摘 要 目的 探讨子宫内膜异位症(Endometriosis EMS)的免疫状态与中医辨证分型的关系。方法 采用间接免疫荧光法检测EMS患者外周血中的T细胞亚群、B、NK、IL-2R+细胞，并用酶联免疫双抗体夹心法检测外周血及腹腔液中的TNF-α，并与中医辨证分型进行相关关系分析。结果 以气滞血瘀、寒凝血瘀、湿热瘀阻三组组成的实证组CD+4/CD+8值升高，而肾虚血瘀组除此变化外，B、IL-2R+细胞百分率增高，外周血及腹腔液TNF-α浓度也显著增高。结论 CD+4/CD+8值与多因素逐步回归分析后发现，EMS患者外周血中CD+4/CD+8值与中医辨证分型密切相关。
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中国图书分类 R711.71
Relation between Immune Function of Endometriosis
and Traditional Chinese Medicine Syndrome
Wang Zhilian Zhang Yonglou Yue YueE
(Shanxi Medical University, Taiyuan 030001)
Abstract:Objective :To study the relation between immune function of endometriosis (EMS) and traditional Chinese medicine syndrome. Method:Peripheral blood leukocyte profile of endometriosis were observed by using indirect immunofluorescence assay, ELISA was further applied to determine the conceration of TNF-a in the parallel samples of peripheral blood and peritoneal fluid. Results: After distinguishing the syndromes of the EMS patients according to traditional Chinese medicine theory, it is discovered that in the sthenia syndrome group, the ratio of CD4+/CD8+ is higher than that of control group, these variations in the kindeny deficiency blood stasis group, the variation of the ratio of CD+4/CD+8 is ,more significant than that of the sthenia syndrome group, Besides, the percentage of B cells and IL-2R+ cell and concentration of TNF-α are highr than that of the control group. Conclusion:Multifactors logistic regression to the ratio of CD+4/CD+8 shows that the ratio of CD+4/CD+8 is closely relation with the syndromes of traditional Chinese medicine.
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Key words:Endometriosis Blood-stasis Traditional Chinese medicine syndrome
子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)是育龄妇女的常见病，且其发病率愈来愈高[1]。近年来，国外有学者提出EMS与自身免疫有关[2、3]，但有关EMS的中医辨证分型与其免疫状态之间的关系尚未见报道。研究通过对EMS患者外周血中T细胞亚群、B细胞、NK细胞、IL-2R+细胞及外周血和腹腔液中的TNF-α进行了检测，旨在探讨内异症免疫功能的变化，为临床辨证施治提供了客观指标。
材料与方法
1 研究对象
来源于1995年～1996年度在山西医科大学第二医院接受腹腔镜检查的妇女。
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1.1 EMS组
55例，年龄22岁～43岁，均经腹腔镜检查证实，术前均未经任何内分泌药物治疗。对EMS患者进行中医辨证分型[4]。
1.1.1 气滞血瘀型(8例) 经前下腹胀痛，经行痛剧，痛引腰骶，痛甚昏厥，腹痛拒按，经行不畅或夹有血块，块下痛减，肛门坠胀经前乳房胀痛，胸闷不舒，性交疼痛，舌质紫黯边尖有瘀斑，苔薄白，脉弦。
1.1.2 寒凝血瘀型(13例) 经前下腹隐痛，经行疼痛加剧，得温则减，月经推迟，量少，色暗或夹血块，形寒肢冷，带下量多，色白，大便稀，舌暗红或边尖有瘀斑点，苔薄白或腻、脉弦或沉紧。
1.1.3 热郁血瘀型(10例) 下腹疼痛，有灼热感，经行腹痛加剧，月经先期，色暗红，质粘或淋漓不断，或伴低热，心烦易怒，口干不渴，大便不畅或干，带下量多，色黄，舌红，苔薄黄，边尖有瘀点，脉滑。
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1.1.4 肾虚血瘀型(24例) 经行腰腹疼痛，后期加重，阴部空坠，大便频，质稀，月经量少，色黯淡，质稀，或伴头晕，失眠，性欲减退，舌淡暗体胖，或边有瘀斑，苔薄，脉沉细。
以上各型中凡具备一型中五项症状便可诊断该型。并将前三型归为实证组(31例)，后一型为虚中夹瘀组(24例)。
1.2 对照组
为月经规则、盆腔正常的健康妇女20例，年龄25岁～40岁，为同期住院施行腹腔镜下激光绝育术者，术前3月内均未服过避孕药。
所有研究对象均无肿瘤及自身免疫病史。
检测方法
1 T细胞亚群、B细胞、IL-2R与NK细胞的检测方法
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均采用单克隆抗体间接免疫荧光法检测。取被检者静脉血3 mL，用肝素抗凝，用等量无C+a、M+gHanks液稀释后置淋巴细胞分离液上，再以2000转/min离心20 min，然后吸取淋巴细胞层，再用无Ca+、Mg+Hanks液洗涤3次，调整细胞至5×106/mL，取50 mL加入反应板孔中，每孔分别加入抗人淋巴细胞单克隆抗体(测T细胞亚群加入WuT3、WuT4、WuT5；测B细胞加入B单抗；测IL-2R加入WuTac；测NK细胞加入CD16单抗，均由武汉生物制品所供给)。混匀后，置于4℃冰箱30min后取出反应板，加入0.1%叠氮钠、2%小牛血清Hanks液洗涤3次，加1∶16的50 ul二抗(FITC标记的兔抗鼠IgG)，置4℃冰箱30min，再用无C+a、M+g Hanks液洗涤3次，取混悬液于玻片上，在日本产OLYMPUS荧光显微镜下记数200个淋巴细胞荧光阳性细胞，计算其百分率。
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2 TNF-α检测方法
酶联免疫(双抗体夹心法)，试剂盒由北京邦定生物医学公司提供。
3 统计学处理
借助于SPSS软件进行。检测结果以x±s表示。两样本均数的比较采用t检验，方差不齐时，采用变量变换使其方差齐，多个样本均数的比较采用方差分析和q检验，多因素的筛选采用逐步回归分析法。
结果
1 EMS患者实证组与虚中夹瘀组T淋巴细胞检测结果显示：虚中夹瘀组CD+4细胞百分率最高，其次为实证组，对照组最低；三组的CD+8细胞百分率之间也有显著性差异(P<0.001)，对照组最高，实证组居第二，虚中夹瘀组最低。同时CD+4/CD+8比值在三组之间也具有显著性差异(P<0.05)。虚中夹瘀组的B细胞百分率较对照组增高(P<0.05)；三组NK细胞百分率之间均无显著性差异；虚中夹瘀组IL-2R+细胞百分率最高，实证组第二，对照组最低。
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2 各证型EMS患者T细胞亚群、B细胞NK细胞和IL-2R+细胞及外周血和腹腔液中TNF-α测定结果见表1、表2、表3。
表1所示，EMS各证型组与对照组的CD+3细胞百分率无显著性差异(F=1.1204，P=0.3539)；CD+4细胞百分率以热郁血瘀型和肾虚血瘀型较高，显著高于对照组及寒凝血瘀型组(P<0.05)；CD+8细胞百分率则以对照组最高，气滞血瘀、寒凝血瘀、热郁血瘀和肾虚血瘀各组依次变小，两两比较显示，寒凝血瘀、热郁血瘀组与对照组比较具有显著性差异(P<0.05)，而肾虚血瘀组除与对照组比较有显著性差异外，还与气滞血瘀组有显著性差异(P<0.05)。CD+4/CD+8比值以对照组最低，气滞血瘀、寒凝血瘀两组均高于对照组，而热郁血瘀和肾虚血瘀型组CD+4/CD+8比值较前三组均升高(P<0.05)。
, 百拇医药
表1 各证型EMS患者T细胞亚群测定值(
±s)
组 别
例数
CD+3(%)
CD+4(%)
CD+8(%)
CD+4/CD+8
, 百拇医药
对 照 组
20
56.7345±3.9443
37.3860±4.0439
37.9515±3.1666
0.9787±0.0975
气滞血瘀组
8
58.5575±2.7477
39.9825±2.4451
35.6200±3.9227
, 百拇医药
1.1417±0.1534a
寒凝血瘀组
13
58.4096±5.1978
39.1153±1.7508
33.4746±3.2352a
1.1773±0.1116a
热郁血瘀组
10
59.7133±2.0416
42.6060±3.3326c
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32.1320±2.8470a
1.3326±0.1426d
肾虚血瘀组
24
57.7192±3.8318
42.6063±3.2554c
31.6533±3.3278b
1.3575±0.1483d
注：a与对照组比较：P<0.05；b与对照组及气滞血瘀组比较：P<0.05；c与对照组及寒凝血瘀组比较：P<0.05；d与对照组、气滞血瘀组及寒凝血瘀组比较：P<0.05。表2 各证型EMS患者B、NK、IL-2R+细胞测定值(±s)
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组 别
例数
B(%)
NK(%)
IL-2R+(%)
对 照 组
20
10.7180±2.2785
11.1960±3.9707
6.9080±2.3857
气滞血瘀组
8
, 百拇医药
10.4475±1.4990
11.4525±4.8309
9.5600±4.1752
寒凝血瘀组
13
11.9438±3.3918
10.3338±3.7277
7.8108±3.5114
热郁血瘀组
10
15.4280±4.9726b
, 百拇医药
7.5760±3.6419
9.3320±3.6223
肾虚血瘀组
24
14.2479±4.6021a
10.4004±3.2548
11.1008±4.7827a
注：a与对照组比较：P<0.05；b与对照组及气滞血瘀组比较：P<0.05。
表3 各证型EMS合并不孕患者TNF-α浓度(Pg/mL)测定值(±s)
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组 别
例数
TNF-α
血清
腹腔液
对 照 组
10
15.8878± 1.5191
176.1857± 8.0848
气滞血瘀组
3
26.1374±12.4120
, 百拇医药
307.3337±113.9108
寒凝血瘀组
5
23.5198± 8.7748
295.3494± 76.7586a
热郁血瘀组
2
24.7052± 8.5093
308.1605± 49.2959
肾虚血瘀组
10
, 百拇医药
57.0810±44.3587a
373.0433±152.6079b
注：a与对照组比较：P<0.05；b与对照组及寒凝血瘀组比较：P<0.05。
表2所示，热郁血瘀和肾虚血瘀组B细胞百分率较对照组高(P<0.05)，热郁血瘀组B细胞百分率还较气滞血瘀组高(P<0.05)，而其余各组之间均无显著性差异；NK细胞百分率在各组之间均无显著性差异(F=0.04549，P=0.7685)；IL-2R+细胞百分率在肾虚血瘀组较对照组高(P<0.05)，其余各组之间均无显著性差异。
表3所示，各证型EMS合并不孕患者血清TNF-α浓度中，以肾虚血瘀型最高，与对照组比较有显著性差异(P<0.05)，其他组TNF-α浓度高于对照组，但无统计学意义。腹腔液TNF-α浓度也以肾虚血瘀组最高，远高于对照组(P<0.005)，此外，寒凝血瘀组也高于对照组(P<0.05)，而其余各组之间均无显著性差异。
, 百拇医药
3 运用逐步回归法对EMS患者外周血CD+4/CD+8值与有关因素进行分析：将55例EMS患者的CD+4/CD+8值作为应变量Y，6个可能与之有关的因素作为自变量X，即年龄X1、月经状况X2、孕产状况X3、盆区疼痛程度X4、临床分期X5、辨证分型X6进行逐步回归分析。剔选指标的临界值定为(1)引入回归方程α=0.05，(2)剔出回归方程α=0.10。结果显示，6个自变量中只有一个变量X6被引入回归方程，Y=1.049569+0.078921X，回归系数β=0.551260，进一步进行方差分析得出F=23.1370，P<0.001，说明回归在α=0.05水平上非常显著，即CD+4/CD+8比值与辨证分型之间依存关系密切。另外，复相关系数R=0.55126，说明CD+4/CD+8值与辨证分型密切相关。该回归方程又提示随着辨证分型的不同，即气滞血瘀、寒凝血瘀、热郁血瘀和肾虚血瘀型CD+4/CD+8比值逐渐上升，而其余未选入因素是作用较小或不显著。
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讨论
中医学认为，EMS属痛经、FDB8积、不孕范畴。子宫内膜异位灶周期性出血和周围组织纤维化，这些离经之血，中医称为瘀血。瘀血凝滞，不通则痛，瘀久即为FDB8积，形成结节肿块。本病最主要的辨证是血瘀证，中医辨证分为四型，即气滞血瘀、寒凝血瘀、热郁血瘀和肾虚血瘀型，前三型为实证组，后一型为虚中夹瘀组。本研究结果显示，实证组患者CD+4细胞增多，CD+8细胞减少，CD+4/CD+8值也明显增高，提示EMS实证组患者T细胞亚群已失去平衡；而虚中夹瘀组患者CD+4细胞更多；CD+8细胞更少，相应CD+4/CD+8值更高。此外，B细胞也增多，相应IL-2R+细胞也增多，无论是外周血中还是腹腔液中的TNF-α浓度均显著增高，提示肾虚血瘀患者细胞免疫及体液免疫功能均严重失调。中医认为[5]肾主生殖、主生髓，髓又分为脊髓与骨髓，现代医学认为骨髓是免疫系统的中枢免疫器官，所以，肾亦主免疫功能。已有研究表明[6]，免疫功能减退，表明为肾阳虚，免疫功能异常增强，表现为肾阴虚而虚火旺。上述免疫指标提示肾虚血瘀型患者主要是肾阴虚并导致阴虚火旺。所以，该型患者易出现失眠，月经量少，脉沉细等阴虚火旺病象。腹腔液中的TNF-α可促进子宫内膜细胞与腹膜间皮细胞的粘附[7]，是造成EMS患者血瘀证的重要因素之一。因粘附影响气血运行，势必造成血瘀，肾虚血瘀型患者TNF-α增高，表明血瘀程度更严重，免疫功能更加紊乱。
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有研究[8]指出，β-内腓肽(β-EP)具有内源性镇痛作用，EMS患者外周血中的β-EP含量显著低于正常人，因此认为这正是EMS患者痛经与盆腔痛的原因之一。另外，有报道[9]，血浆中β-EP的含量过高可影响TH细胞表面特异性CD4抗原的表达，使外周血中CD4细胞减少。因此可此推测，由于EMS患者血中β-EP含量过低，会使外周血中TH细胞表达CD4抗原增多，故本结果EMS患者CD4细胞百分率增高。β-EP是一种神经内分泌激素，它的生成部位在下丘脑、垂体、脑干的孤束核以及肠道中的内分泌腺体，故β-EP与下丘脑——垂体——靶腺轴有密切关系[8]。而此轴的功能正是中医“肾”的本质所在[10]。
研究的另一有意义的提示是，通过EMS患者CD+4/CD+8值与多因素逐步回归发现，CD+4/CD+8值与中医辨证分型密切相关，其特点是从气滞血瘀型、寒凝血瘀型、热郁血瘀型到肾虚血瘀型，CD+4/CD+8值逐渐升高，从这个序列看，似乎气滞血瘀、寒凝血瘀、热郁血瘀、肾虚血瘀各型在EMS血瘀证中免疫功能紊乱状态有一种递增趋势。这种递增趋势不仅从免疫学角度显示出这四种证型严重程度的层次性，而且为其病机转化提出了客观佐证。气滞血瘀、寒凝血瘀、热郁血瘀三型正气皆未明显受损，属实证范畴，因此，仅表现为T细胞亚群平衡失调。中医认为久病必虚，或者虽为新病，但体质过于虚弱，或邪气太甚，亦可在疾病的初期就表现为虚象，而虚则易瘀，正气虚又必然会促进血瘀，二者互为因果，加重血瘀，因而肾虚血瘀患者瘀血程度更加严重。此外，肾虚则提示下丘脑——垂体——靶腺轴功能低下，势必会导致β-EP减少又可能会使CD+4细胞增多，所以肾虚血瘀患者CD+4/CD+8值显著高于实证组，因而CD+4/CD+8值可以作为临床EMS辨证的一个参数，从而有助于EMS及其分型的准确诊断，进而可能为EMS的治疗开辟新的前景，即应用中医中药调整机体免疫状态从而达到治疗的目的。
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作者简介：王志莲，女，31岁，山西医科大学第二医院讲师。专业方向：中西医结合妇产科临床。
参考文献
1.Strathy JH.Endometriosis and infertility:a Laparoscopic study of Endometriosis among fertil and infertility women.Fertil Steril,1982;38:667～672
2.Weed JC,Arquembourg PC.Endometriosis:Can it produce an autommune response resulting in infertilitu?Obstet Gynecol,1980;23:885～886
3.Dmoski WP,Gebel HM,Braun DP.The role of cell-mediated immunity in pathogenesis of Endometriosis.Acta obstet gynecol scand,1994;159:7～15
, 百拇医药
4.中华人民共和国卫生部.中药新药临床研究指导原则.第1辑.北京：人民卫生出版社，1993；267～268
5.李超荆.虚证研究.上海：上海科学技术出版社，1991：71
6.李大金，李超荆，朱影.滋阴降火中药治疗免疫性不孕症.中国中西医结合杂志 1995；15(1)：3～5
7.Zhang RJ.Effect of tumor necrosis factor-a on adhesis of human endometrial stromal cells to peritoneal mesothelial cells:an in vitro suatem.Fertil steril,1993;59:1196～1201
8.俞超芹，翟美英，姚韧敏.子宫内膜异位症患者性周期β-内啡肽变化及中药内异方对其的影响.中国中西医结合杂志 1995；15(1)：6～8
9.李世光，岳月娥，赵俊萍等.体外循环心内直视手术病儿细胞及体液免疫观察.中华胸心血管外科杂志 1995；11(3)：142～144
10.沈自尹，王文建，陈响中，等.肾阳虚证的下丘脑-垂体-甲状腺、性腺、肾上腺皮质轴功能的对比观察.医学研究通讯 1983；10：21～27
(收稿日期 1998—05—08 修回日期 1999—01—22), http://www.100md.com
单位：王志莲 张永洛(山西医科大学第二医院 太原 030001)；岳月娥 李世光(山西医科大学儿科系 太原 030001)
关键词：子宫内膜异位症；血瘀证；辨证分型
摘 要 目的 探讨子宫内膜异位症 摘 要 目的 探讨子宫内膜异位症(Endometriosis EMS)的免疫状态与中医辨证分型的关系。方法 采用间接免疫荧光法检测EMS患者外周血中的T细胞亚群、B、NK、IL-2R+细胞，并用酶联免疫双抗体夹心法检测外周血及腹腔液中的TNF-α，并与中医辨证分型进行相关关系分析。结果 以气滞血瘀、寒凝血瘀、湿热瘀阻三组组成的实证组CD+4/CD+8值升高，而肾虚血瘀组除此变化外，B、IL-2R+细胞百分率增高，外周血及腹腔液TNF-α浓度也显著增高。结论 CD+4/CD+8值与多因素逐步回归分析后发现，EMS患者外周血中CD+4/CD+8值与中医辨证分型密切相关。
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Relation between Immune Function of Endometriosis
and Traditional Chinese Medicine Syndrome
Wang Zhilian Zhang Yonglou Yue YueE
(Shanxi Medical University, Taiyuan 030001)
Abstract:Objective :To study the relation between immune function of endometriosis (EMS) and traditional Chinese medicine syndrome. Method:Peripheral blood leukocyte profile of endometriosis were observed by using indirect immunofluorescence assay, ELISA was further applied to determine the conceration of TNF-a in the parallel samples of peripheral blood and peritoneal fluid. Results: After distinguishing the syndromes of the EMS patients according to traditional Chinese medicine theory, it is discovered that in the sthenia syndrome group, the ratio of CD4+/CD8+ is higher than that of control group, these variations in the kindeny deficiency blood stasis group, the variation of the ratio of CD+4/CD+8 is ,more significant than that of the sthenia syndrome group, Besides, the percentage of B cells and IL-2R+ cell and concentration of TNF-α are highr than that of the control group. Conclusion:Multifactors logistic regression to the ratio of CD+4/CD+8 shows that the ratio of CD+4/CD+8 is closely relation with the syndromes of traditional Chinese medicine.
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Key words:Endometriosis Blood-stasis Traditional Chinese medicine syndrome
子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)是育龄妇女的常见病，且其发病率愈来愈高[1]。近年来，国外有学者提出EMS与自身免疫有关[2、3]，但有关EMS的中医辨证分型与其免疫状态之间的关系尚未见报道。研究通过对EMS患者外周血中T细胞亚群、B细胞、NK细胞、IL-2R+细胞及外周血和腹腔液中的TNF-α进行了检测，旨在探讨内异症免疫功能的变化，为临床辨证施治提供了客观指标。
材料与方法
1 研究对象
来源于1995年～1996年度在山西医科大学第二医院接受腹腔镜检查的妇女。
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1.1 EMS组
55例，年龄22岁～43岁，均经腹腔镜检查证实，术前均未经任何内分泌药物治疗。对EMS患者进行中医辨证分型[4]。
1.1.1 气滞血瘀型(8例) 经前下腹胀痛，经行痛剧，痛引腰骶，痛甚昏厥，腹痛拒按，经行不畅或夹有血块，块下痛减，肛门坠胀经前乳房胀痛，胸闷不舒，性交疼痛，舌质紫黯边尖有瘀斑，苔薄白，脉弦。
1.1.2 寒凝血瘀型(13例) 经前下腹隐痛，经行疼痛加剧，得温则减，月经推迟，量少，色暗或夹血块，形寒肢冷，带下量多，色白，大便稀，舌暗红或边尖有瘀斑点，苔薄白或腻、脉弦或沉紧。
1.1.3 热郁血瘀型(10例) 下腹疼痛，有灼热感，经行腹痛加剧，月经先期，色暗红，质粘或淋漓不断，或伴低热，心烦易怒，口干不渴，大便不畅或干，带下量多，色黄，舌红，苔薄黄，边尖有瘀点，脉滑。
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1.1.4 肾虚血瘀型(24例) 经行腰腹疼痛，后期加重，阴部空坠，大便频，质稀，月经量少，色黯淡，质稀，或伴头晕，失眠，性欲减退，舌淡暗体胖，或边有瘀斑，苔薄，脉沉细。
以上各型中凡具备一型中五项症状便可诊断该型。并将前三型归为实证组(31例)，后一型为虚中夹瘀组(24例)。
1.2 对照组
为月经规则、盆腔正常的健康妇女20例，年龄25岁～40岁，为同期住院施行腹腔镜下激光绝育术者，术前3月内均未服过避孕药。
所有研究对象均无肿瘤及自身免疫病史。
检测方法
1 T细胞亚群、B细胞、IL-2R与NK细胞的检测方法
, 百拇医药
均采用单克隆抗体间接免疫荧光法检测。取被检者静脉血3 mL，用肝素抗凝，用等量无C+a、M+gHanks液稀释后置淋巴细胞分离液上，再以2000转/min离心20 min，然后吸取淋巴细胞层，再用无Ca+、Mg+Hanks液洗涤3次，调整细胞至5×106/mL，取50 mL加入反应板孔中，每孔分别加入抗人淋巴细胞单克隆抗体(测T细胞亚群加入WuT3、WuT4、WuT5；测B细胞加入B单抗；测IL-2R加入WuTac；测NK细胞加入CD16单抗，均由武汉生物制品所供给)。混匀后，置于4℃冰箱30min后取出反应板，加入0.1%叠氮钠、2%小牛血清Hanks液洗涤3次，加1∶16的50 ul二抗(FITC标记的兔抗鼠IgG)，置4℃冰箱30min，再用无C+a、M+g Hanks液洗涤3次，取混悬液于玻片上，在日本产OLYMPUS荧光显微镜下记数200个淋巴细胞荧光阳性细胞，计算其百分率。
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2 TNF-α检测方法
酶联免疫(双抗体夹心法)，试剂盒由北京邦定生物医学公司提供。
3 统计学处理
借助于SPSS软件进行。检测结果以x±s表示。两样本均数的比较采用t检验，方差不齐时，采用变量变换使其方差齐，多个样本均数的比较采用方差分析和q检验，多因素的筛选采用逐步回归分析法。
结果
1 EMS患者实证组与虚中夹瘀组T淋巴细胞检测结果显示：虚中夹瘀组CD+4细胞百分率最高，其次为实证组，对照组最低；三组的CD+8细胞百分率之间也有显著性差异(P<0.001)，对照组最高，实证组居第二，虚中夹瘀组最低。同时CD+4/CD+8比值在三组之间也具有显著性差异(P<0.05)。虚中夹瘀组的B细胞百分率较对照组增高(P<0.05)；三组NK细胞百分率之间均无显著性差异；虚中夹瘀组IL-2R+细胞百分率最高，实证组第二，对照组最低。
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2 各证型EMS患者T细胞亚群、B细胞NK细胞和IL-2R+细胞及外周血和腹腔液中TNF-α测定结果见表1、表2、表3。
表1所示，EMS各证型组与对照组的CD+3细胞百分率无显著性差异(F=1.1204，P=0.3539)；CD+4细胞百分率以热郁血瘀型和肾虚血瘀型较高，显著高于对照组及寒凝血瘀型组(P<0.05)；CD+8细胞百分率则以对照组最高，气滞血瘀、寒凝血瘀、热郁血瘀和肾虚血瘀各组依次变小，两两比较显示，寒凝血瘀、热郁血瘀组与对照组比较具有显著性差异(P<0.05)，而肾虚血瘀组除与对照组比较有显著性差异外，还与气滞血瘀组有显著性差异(P<0.05)。CD+4/CD+8比值以对照组最低，气滞血瘀、寒凝血瘀两组均高于对照组，而热郁血瘀和肾虚血瘀型组CD+4/CD+8比值较前三组均升高(P<0.05)。
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表1 各证型EMS患者T细胞亚群测定值(
±s)组 别
例数
CD+3(%)
CD+4(%)
CD+8(%)
CD+4/CD+8
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对 照 组
20
56.7345±3.9443
37.3860±4.0439
37.9515±3.1666
0.9787±0.0975
气滞血瘀组
8
58.5575±2.7477
39.9825±2.4451
35.6200±3.9227
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1.1417±0.1534a
寒凝血瘀组
13
58.4096±5.1978
39.1153±1.7508
33.4746±3.2352a
1.1773±0.1116a
热郁血瘀组
10
59.7133±2.0416
42.6060±3.3326c
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32.1320±2.8470a
1.3326±0.1426d
肾虚血瘀组
24
57.7192±3.8318
42.6063±3.2554c
31.6533±3.3278b
1.3575±0.1483d
注：a与对照组比较：P<0.05；b与对照组及气滞血瘀组比较：P<0.05；c与对照组及寒凝血瘀组比较：P<0.05；d与对照组、气滞血瘀组及寒凝血瘀组比较：P<0.05。表2 各证型EMS患者B、NK、IL-2R+细胞测定值(
±s), http://www.100md.com
组 别
例数
B(%)
NK(%)
IL-2R+(%)
对 照 组
20
10.7180±2.2785
11.1960±3.9707
6.9080±2.3857
气滞血瘀组
8
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10.4475±1.4990
11.4525±4.8309
9.5600±4.1752
寒凝血瘀组
13
11.9438±3.3918
10.3338±3.7277
7.8108±3.5114
热郁血瘀组
10
15.4280±4.9726b
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7.5760±3.6419
9.3320±3.6223
肾虚血瘀组
24
14.2479±4.6021a
10.4004±3.2548
11.1008±4.7827a
注：a与对照组比较：P<0.05；b与对照组及气滞血瘀组比较：P<0.05。
表3 各证型EMS合并不孕患者TNF-α浓度(Pg/mL)测定值(
±s), http://www.100md.com
组 别
例数
TNF-α
血清
腹腔液
对 照 组
10
15.8878± 1.5191
176.1857± 8.0848
气滞血瘀组
3
26.1374±12.4120
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307.3337±113.9108
寒凝血瘀组
5
23.5198± 8.7748
295.3494± 76.7586a
热郁血瘀组
2
24.7052± 8.5093
308.1605± 49.2959
肾虚血瘀组
10
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57.0810±44.3587a
373.0433±152.6079b
注：a与对照组比较：P<0.05；b与对照组及寒凝血瘀组比较：P<0.05。
表2所示，热郁血瘀和肾虚血瘀组B细胞百分率较对照组高(P<0.05)，热郁血瘀组B细胞百分率还较气滞血瘀组高(P<0.05)，而其余各组之间均无显著性差异；NK细胞百分率在各组之间均无显著性差异(F=0.04549，P=0.7685)；IL-2R+细胞百分率在肾虚血瘀组较对照组高(P<0.05)，其余各组之间均无显著性差异。
表3所示，各证型EMS合并不孕患者血清TNF-α浓度中，以肾虚血瘀型最高，与对照组比较有显著性差异(P<0.05)，其他组TNF-α浓度高于对照组，但无统计学意义。腹腔液TNF-α浓度也以肾虚血瘀组最高，远高于对照组(P<0.005)，此外，寒凝血瘀组也高于对照组(P<0.05)，而其余各组之间均无显著性差异。
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3 运用逐步回归法对EMS患者外周血CD+4/CD+8值与有关因素进行分析：将55例EMS患者的CD+4/CD+8值作为应变量Y，6个可能与之有关的因素作为自变量X，即年龄X1、月经状况X2、孕产状况X3、盆区疼痛程度X4、临床分期X5、辨证分型X6进行逐步回归分析。剔选指标的临界值定为(1)引入回归方程α=0.05，(2)剔出回归方程α=0.10。结果显示，6个自变量中只有一个变量X6被引入回归方程，Y=1.049569+0.078921X，回归系数β=0.551260，进一步进行方差分析得出F=23.1370，P<0.001，说明回归在α=0.05水平上非常显著，即CD+4/CD+8比值与辨证分型之间依存关系密切。另外，复相关系数R=0.55126，说明CD+4/CD+8值与辨证分型密切相关。该回归方程又提示随着辨证分型的不同，即气滞血瘀、寒凝血瘀、热郁血瘀和肾虚血瘀型CD+4/CD+8比值逐渐上升，而其余未选入因素是作用较小或不显著。
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讨论
中医学认为，EMS属痛经、FDB8积、不孕范畴。子宫内膜异位灶周期性出血和周围组织纤维化，这些离经之血，中医称为瘀血。瘀血凝滞，不通则痛，瘀久即为FDB8积，形成结节肿块。本病最主要的辨证是血瘀证，中医辨证分为四型，即气滞血瘀、寒凝血瘀、热郁血瘀和肾虚血瘀型，前三型为实证组，后一型为虚中夹瘀组。本研究结果显示，实证组患者CD+4细胞增多，CD+8细胞减少，CD+4/CD+8值也明显增高，提示EMS实证组患者T细胞亚群已失去平衡；而虚中夹瘀组患者CD+4细胞更多；CD+8细胞更少，相应CD+4/CD+8值更高。此外，B细胞也增多，相应IL-2R+细胞也增多，无论是外周血中还是腹腔液中的TNF-α浓度均显著增高，提示肾虚血瘀患者细胞免疫及体液免疫功能均严重失调。中医认为[5]肾主生殖、主生髓，髓又分为脊髓与骨髓，现代医学认为骨髓是免疫系统的中枢免疫器官，所以，肾亦主免疫功能。已有研究表明[6]，免疫功能减退，表明为肾阳虚，免疫功能异常增强，表现为肾阴虚而虚火旺。上述免疫指标提示肾虚血瘀型患者主要是肾阴虚并导致阴虚火旺。所以，该型患者易出现失眠，月经量少，脉沉细等阴虚火旺病象。腹腔液中的TNF-α可促进子宫内膜细胞与腹膜间皮细胞的粘附[7]，是造成EMS患者血瘀证的重要因素之一。因粘附影响气血运行，势必造成血瘀，肾虚血瘀型患者TNF-α增高，表明血瘀程度更严重，免疫功能更加紊乱。
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有研究[8]指出，β-内腓肽(β-EP)具有内源性镇痛作用，EMS患者外周血中的β-EP含量显著低于正常人，因此认为这正是EMS患者痛经与盆腔痛的原因之一。另外，有报道[9]，血浆中β-EP的含量过高可影响TH细胞表面特异性CD4抗原的表达，使外周血中CD4细胞减少。因此可此推测，由于EMS患者血中β-EP含量过低，会使外周血中TH细胞表达CD4抗原增多，故本结果EMS患者CD4细胞百分率增高。β-EP是一种神经内分泌激素，它的生成部位在下丘脑、垂体、脑干的孤束核以及肠道中的内分泌腺体，故β-EP与下丘脑——垂体——靶腺轴有密切关系[8]。而此轴的功能正是中医“肾”的本质所在[10]。
研究的另一有意义的提示是，通过EMS患者CD+4/CD+8值与多因素逐步回归发现，CD+4/CD+8值与中医辨证分型密切相关，其特点是从气滞血瘀型、寒凝血瘀型、热郁血瘀型到肾虚血瘀型，CD+4/CD+8值逐渐升高，从这个序列看，似乎气滞血瘀、寒凝血瘀、热郁血瘀、肾虚血瘀各型在EMS血瘀证中免疫功能紊乱状态有一种递增趋势。这种递增趋势不仅从免疫学角度显示出这四种证型严重程度的层次性，而且为其病机转化提出了客观佐证。气滞血瘀、寒凝血瘀、热郁血瘀三型正气皆未明显受损，属实证范畴，因此，仅表现为T细胞亚群平衡失调。中医认为久病必虚，或者虽为新病，但体质过于虚弱，或邪气太甚，亦可在疾病的初期就表现为虚象，而虚则易瘀，正气虚又必然会促进血瘀，二者互为因果，加重血瘀，因而肾虚血瘀患者瘀血程度更加严重。此外，肾虚则提示下丘脑——垂体——靶腺轴功能低下，势必会导致β-EP减少又可能会使CD+4细胞增多，所以肾虚血瘀患者CD+4/CD+8值显著高于实证组，因而CD+4/CD+8值可以作为临床EMS辨证的一个参数，从而有助于EMS及其分型的准确诊断，进而可能为EMS的治疗开辟新的前景，即应用中医中药调整机体免疫状态从而达到治疗的目的。
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作者简介：王志莲，女，31岁，山西医科大学第二医院讲师。专业方向：中西医结合妇产科临床。
参考文献
1.Strathy JH.Endometriosis and infertility:a Laparoscopic study of Endometriosis among fertil and infertility women.Fertil Steril,1982;38:667～672
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3.Dmoski WP,Gebel HM,Braun DP.The role of cell-mediated immunity in pathogenesis of Endometriosis.Acta obstet gynecol scand,1994;159:7～15
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4.中华人民共和国卫生部.中药新药临床研究指导原则.第1辑.北京：人民卫生出版社，1993；267～268
5.李超荆.虚证研究.上海：上海科学技术出版社，1991：71
6.李大金，李超荆，朱影.滋阴降火中药治疗免疫性不孕症.中国中西医结合杂志 1995；15(1)：3～5
7.Zhang RJ.Effect of tumor necrosis factor-a on adhesis of human endometrial stromal cells to peritoneal mesothelial cells:an in vitro suatem.Fertil steril,1993;59:1196～1201
8.俞超芹，翟美英，姚韧敏.子宫内膜异位症患者性周期β-内啡肽变化及中药内异方对其的影响.中国中西医结合杂志 1995；15(1)：6～8
9.李世光，岳月娥，赵俊萍等.体外循环心内直视手术病儿细胞及体液免疫观察.中华胸心血管外科杂志 1995；11(3)：142～144
10.沈自尹，王文建，陈响中，等.肾阳虚证的下丘脑-垂体-甲状腺、性腺、肾上腺皮质轴功能的对比观察.医学研究通讯 1983；10：21～27
(收稿日期 1998—05—08 修回日期 1999—01—22), http://www.100md.com