左旋千金藤啶碱对大鼠纹体多巴氨受体亚型的作用特点*
作者：董兆君王仕丽 李云鹏
单位：董兆君 王仕丽 李云鹏 第三军医大学预防医学系毒理学教研室 重庆，400038
关键词：多巴胺受体；腺苷酸环化酶；纹状体
第三军医大学学报990708 提 要 目的：研究左旋千金藤啶碱(SPD)和其同类物CSL、THPB10对大鼠纹状体D1、D2多巴胺(DA)受体作用特性。方法：24 mA直流电刺激体外灌流之大鼠纹状体脑薄片，每5 min收集灌流液测定[3H]DA释放量；分离大鼠纹状体突触体，用放免方法测定腺苷酸环化酶活性。结果：D2受体激动剂LY171555显著抑制电刺激诱发的[3H]DA释放，SPD、CSL和THPB10翻转LY171555的抑制作用，SPD、CSL、THPB10也诱发DA释放。在用Butaclamol封闭D2受体后，SPD和CSL以剂量依赖方式激活常敏大鼠纹状体突触体腺苷酸环化酶，而THPB10无作用。结论：含双羟基的SPD及其同类物CSL对DA受体不同亚型有激动/阻滞不同效应。
, http://www.100md.com
中图法分类号 R966
Study of the characteristic pharmacological property of stepholidine on dopamine subtype receptors of the striatum in rats
Dong Zhaojun, Wang Shili, Li Yunpeng
(Department of Toxicology, Third Military Medical University, Chongqing,400038)
Abstract Objective: To investigate the pharmacological property of stepholidine (SPD) and its analogues as CSL and THPB10 on subtype receptors of the striatum in rats. Methods: Slices of the striatum of the rats, preincubated with 3H-dopamine (3H-Da), were superfused and stimulated with electricity. The efflux was collected in 5 min interval and the radiation of 3H-Da in the samples was measured to identify the Da released from the striatum slices. The synaptosomes of the striatum were prepared and the adenlage cyclase activity was determined with radioimmunoassay. Results: Ly171555, a selective D2 dopamine receptor agonist, significantly inhibited 3H-Da release evoked electrically from the striatal slices. This effect of Ly171555 was antagonized or reversed by SPD, CSL and THPB10. The antagoning effect of CSL against Ly171555 in decreasing 3H-Da release was short-lived as compared wtih that of SPD and THPB10. Interestingly to note, SPD, CSL and THPB10 themselves were obviously able to evoke 3H-Da release in the striatal slices without electricity stimulation. In the samples of striatal synatosomes, in which the D2Da receptors were blocked with butaclamol, the activity of adenylate cyclase was significantly stimulated by SPD and CSL but not by THPB10. Conclusion: These findings suggest that SPD and its analogue CSL possess 2 hydroxyl groups and exercise dual actions on D1 and D2 dopamine subtype receptors, agonist for D1 receptors and antagonist for D2 receptors. THPB10, however, exercises antagonist action for D2 receptors only.
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Key words dopamine receptor; adenylate cyclase; corpus striatum; rat
左旋千金藤啶碱[(-)-Stepholidine,SPD]是四氢原小檗碱同类物(Tertrahydroprotoberberines,THPBs)的先导化合物[1]。早期的研究资料证实，SPD对中枢多巴胺(Dopamine,DA)受体有选择性高亲和力结合[2]，明显翻转去水吗啡(APO)对大鼠黑质致密区(SNC)DA神经元放电的抑制作用[3]。神经生化研究结果表明，SPD以剂量依赖关系激活酪氨酸羟化酶，促进DA合成和释放[4，5]。而在DA受体超敏的大鼠模型，SPD使大鼠产生健侧旋转行为[6]。上述结果提示，SPD对中枢DA受体呈阻滞/激动双相作用。本研究比较SPD及其同类物(-)-12-choloroscoulerine(CSL)和THPB10对大鼠纹状体D1和D2 DA受体作用特性。
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1 材料与方法
1.1 药品和试剂
SPD、CSL和THPB10由中国科学院上海药物研究所馈赠，临用前以少量二甲基甲酰胺溶解，再用缓冲液稀释至所需浓度。LY171555、Haloperidol和APO购自Sigma,Dopamine、Nomifensin和Butaclamol为RBI产品，cAMP测定盒由上海中医药科大学提供。
1.2 纹状体脑片[3H]DA释放
参照文献[7]方法进行，SD大鼠200～250 g，颈动脉放血处死后于4°C迅速开颅取双侧纹状体，于切片机上制备厚度为0.3 mm脑薄片。将3片3mm×3mm脑片移入2ml 0.1μmol/L[3H]DA灌流液中摄取[3H]DA。30 min后脑片转入约1 cm×1 cm×1 cm玻璃灌流小室中，以95% O2饱和的灌流液37°C恒温持续灌流。灌流液组份为(mmol/L):NaCl 118;KCl 4.8;CaCl2 1.3;MgSO4 1.2; NaHCO3 25; KH2PO4 1.2;EDTA 0.03。平衡30 min后开始收集流出液，每5 min为一个样品，共6个时相点。于电刺激前5 min向灌流液中加入待测药物，在第10分钟时对脑片施加24 mA 3 Hz电刺激2 min。样品中加10 ml闪烁液，用LKB液闪仪测放射强度，结果以Bq表示。
, 百拇医药
1.3 腺苷酸环化酶活力测定
断颈处死大鼠，于冰上取双侧纹状体，按1∶20加分离液，匀浆。1000×g离心10 min，上清液经2000×g离心20 min，相同分离液洗2遍。沉淀块用反应液重悬后测蛋白含量。
玻璃试管中加突触体蛋白50μg、待测药物100μl、ATP 50μl，ATP终浓度1 mmol/L。用反应液补足500μl。30°C准确反应5 min，95°C水浴3 min终止反应。1 000×g离心10 min，取上清液100 μl，用放免法测cAMP含量。实验结果以x±s表示。
2 结果
对照组脑片于受24 mA直流电刺激后第5分钟，[3H]DA释放量迅速增加。第15、20、25、30分钟分别为1255.4±170.3、 2414.6±213.4、 2254.0±208.6和1016.8±102.7。其释放峰在第20分钟和第25分钟。灌流液中加入10μmol/LLy171555，电刺激诱发的[3H]DA释放量明显小于对照组，20 min和25min的释放量为1447.2±286.6和1403±219.1，见表1。
, 百拇医药
灌流液中同时加入Ly171555和SPD或CSL或THPB10时，Ly171555对电诱发大鼠纹状体脑片[3H]DA释放的抑制作用明显减弱或被取消。
在不施加电刺激的大鼠纹状体脑片，SPD、CSL和THPB10也能诱发[3H]DA释放，诱发时间于给药后10～15 min。50μmol/L SPD、CSL和THPB10使第20分钟的释放量分别增加72.9%、148.6%和57.2%，见表2。
反应系统中含2μmol/L D2受体阻滞剂Butaclamol时，DA增加大鼠纹状体突触体腺苷酸环化酶活力，随浓度的升高，DA对酶活力的影响增加，见表3。SPD和CSL的作用与DA相似，但THPB10对腺苷酸环化酶活力无明显影响。
表1 SPD、CSL、THPB10对电诱发大鼠纹状体脑片[3H]DA释放量的影响(12 Bq,n=6)
, 百拇医药
Tab 1 Effect of SPD,CSL and THPB10(μmol/L) on electric stimulation evoked
[3H]DA released from rats striatum slices in vitro (12 Bq,n=6)
5 min
10 min
15 min
20 min
25 min
30 min
Control
, 百拇医药
655.4±139.5
547.0±54.2
1255.4±170.3
2414.6±213.4
2254.0±208.6
1016.8±102.7
Ly171555(10)
727.5±178.0
563.2±51.8
888.2±194.8*
1447.2±286.**
, 百拇医药
1403.4±219**
677.2±226.7**
Ly171555(10)+SPD(50)
556.8±77.4
573.8±104.1
1312.6±443.0
2009.2±516.8
2177.4±243.0
1034.2±145.1
Ly17155(10)+CSL(50)
, 百拇医药
522.0±57.3
535.8±41.1
1423.8±186.9
2003.0±409.9
1931.4±193.3
735.0±169.**
Ly171555(10)+THPB10(50)
681.0±163.4
536.2±55.4
1192.6±151.4
2330.8±144.8
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2315.6±217.4
965.6±100.7
*:P<0.05，**：P<0.01 vs control
表2 SPD、CSL和THPB10对大鼠纹状体脑片[3H]DA静息释放的影响(CB/μmol.L-1,n=5)
Tab 2 Effect of SPD、CSL and THPB10 on basic release of [3H]DA from rats striatum slices in vitro(CB/μmol.L-1,n=5)
5 min
, 百拇医药
10 min
15 min
20 min
25 min
30 min
Control
606±35.7
599.0±145.7
655.4±139.5
727.2±178.0
579.1±61.2
562.2±49.3
, http://www.100md.com
SPD(50)
592.4±90.1
601.3±83.3
884.0±83.3
1257.4±102.2**
1258.2±181.1**
1056.0±135.5**
CSL(50)
558.2±87.5
583.6±78.3
905.4±149.1*
, 百拇医药
1807.6±98.4**
1685.8±158.6**
1449.0±231.6**
THPB10(50)
593.4±50.1
585.0±68.9
844.8±98.7
1143.2±177.3**
1467.2±181.3**
1202.8±53.5**
, 百拇医药
*:P<0.05， **：P<0.01 vs control
表3 SPD同类物对大鼠纹状体突触体腺苷酸环化酶活力的影响(cAMP, λB/pmol.mg-1.min-1)
Tab 3 Effect of SPD analogues on synaptosomal adenylate cyclase activity(cAMP, λB/pmol.mg-1.min-1)
Control
Concentration (μmol/L)
1
, 百拇医药
10
100
1 000
Dopamine
103.6±8.99
105.0±13.32
187.6±10.26**
189.8±9.09**
199.4±9.99**
SPD
100.1±10.50
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98.8±9.73
127.2±4.82
149.8±9.31**
161.6±5.59**
CSL
103.6±6.94
102.8±7.98
142.0±10.39**
160.8±10.83**
167.0±12.79**
, 百拇医药
THPB10
101.8±8.53
104.6±11.78
101.6±14.43
98.4±11.99
103.2±8.43
**：P<0.01 vs control
3 讨论
脑内DA神经元主要集中在中脑黑质致密区和中脑腹侧被盖区，分别支配纹状体和伏膈核、杏仁核、扣带回及额叶皮层等核团，与人类锥体外系运动功能和认识、情绪、记忆等有密切关系。已经证实，DA神经退变是帕金森氏症的重要发病机制，作用于DA系统的药物研究日益引起人们的注。SPD是我国科学家从植物提取的有效化学成分。早期研究证实，SPD对DA受体有选择性阻滞作用。但在用6-OHDA损毁单侧黑质的大鼠模型上，SPD能引发动物的健侧旋转行为。提示SPD对DA受体兼有内在激动作用[6]。SPD上述的阻滞作用和激动作用可能是其作用于不同DA受体亚型的结果，并与其化学结构中的羟基有关[8]。
, 百拇医药
纹状体DA神经突触前D2为自身受体(Autoreceptors)，与DA释放有关。我们以离体大鼠纹状体片DA释放模型，研究SPD及其同类物CSL和THPB10对D2受体的作用特性。10μmol/L选择性D2受体激动剂LY171555明显抑制电诱发的[3H]DA释放，此作用为50μmol/L SPD、CSL和THPB10所对抗，见表1，提示三者均有D2受体阻滞作用。但CSL的作用时间比SPD和THPB10短。在无D2受体阻滞剂LY171555存在，又不施加电刺激时，浓度为50 μmol/L的SPD、CSL和THPB10，均刺激脑片释放DA，见表2，这一步证实三者对D2受体的阻滞作用特性。
中枢DA受体为G蛋白耦联受体，D1受体经Gs与腺苷酸环化酶正耦联，D2经Gi与腺苷酸环化酶负耦联。本研究用D2受体阻滞剂Butaclamol封闭D2受体，能准确研究CSL经D1受体对腺苷酸环化酶的作用特点。在mmol/L至μmol/L的浓度范围内，SPD和CSL均明显提高腺苷酸环化酶活力，使cAMP生成量明显增加，且作用强度有随药物浓度升高而加强的趋势。这些结果与既往的行为实验结果相吻合，提示SPD和CSL对纹状体D1受体有激动剂作用。
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SPD同类物THPB10对大鼠纹状体突触体腺苷酸环化酶的活性无明显影响，即使浓度高达1000μmol/L时，THPB10也不能显著改变cAMP的生成量，说明THPB10与SPD及CSL的作用性质不同，THPB10对D1受体无激动特性。
SPD是THPB同类物的先导化合物。本实验证实双羟基化合物SPD和CSL具有D2受体阻滞和D1受体激动双重作用，而单羟基化合物THPB10未显示D1受体激动作用。因此，双重作用可能由SPD同类物结构中双羟基所决定。此论点尚需大量同类物研究数据的支持。
*重庆市资助课题
**董兆君，男，45岁，副教授，博士
参考文献
1 Jin G Z, Wang X L, Shi W X. Tetrahydroprotoberberine-a new chemical type of antagonist of dopamine receptors. Sci Sin B,1986,29(5):527
, 百拇医药
2 Xu S H, Yu L P, Han Y R, et al. Effect of tetrahydroprotoberberines on dopamine receptor subtypes in brain. Acta Pharmacol Sinica,1989,10(2):104
3 Huang K X, Jin G Z. The antagonistic effects of tetrahydro-protoberberines on dopamine receptors: electrophysiological studies. Sci China B,1992,35(6):688
4 陈丽娟，郭 新，王青梅，等.左旋千金藤立定和左旋四氢巴马汀阻滞突触前D2的反馈调控作用.中国药理学报，1992，13(5)：442
5 黄开星，孙宝存，金国章.在体伏胺法测量四氢原小檗碱同类物对纹状体多巴胺受体释放和3，4-双羟苯乙酸含量的影响.中国药理学报，1991，12(1)：32
, http://www.100md.com
6 Shi W X, Chen Y, Jin G Z. Effects of 1-stepholidine on rotational behavior in rats. Acta Pharmacol Sin,1984,5(4):222
7 黄华玉，戴树平.细胞外钙对附拜醇基酯加强肾上腺素释放的影响.中国药理学报，1990，11(6)：494
8 Dong Z J, Guo X, Chen L J, et al. Dual actionss of (-)-stepholidine on the dopamine receptor-mediated adenylate cyclase activity in rat corpus striatum. Life Sci,1997,61(4):465
收稿：1998-11-23；修回：1999-01-22, 百拇医药
单位：董兆君 王仕丽 李云鹏 第三军医大学预防医学系毒理学教研室 重庆，400038
关键词：多巴胺受体；腺苷酸环化酶；纹状体
第三军医大学学报990708 提 要 目的：研究左旋千金藤啶碱(SPD)和其同类物CSL、THPB10对大鼠纹状体D1、D2多巴胺(DA)受体作用特性。方法：24 mA直流电刺激体外灌流之大鼠纹状体脑薄片，每5 min收集灌流液测定[3H]DA释放量；分离大鼠纹状体突触体，用放免方法测定腺苷酸环化酶活性。结果：D2受体激动剂LY171555显著抑制电刺激诱发的[3H]DA释放，SPD、CSL和THPB10翻转LY171555的抑制作用，SPD、CSL、THPB10也诱发DA释放。在用Butaclamol封闭D2受体后，SPD和CSL以剂量依赖方式激活常敏大鼠纹状体突触体腺苷酸环化酶，而THPB10无作用。结论：含双羟基的SPD及其同类物CSL对DA受体不同亚型有激动/阻滞不同效应。
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中图法分类号 R966
Study of the characteristic pharmacological property of stepholidine on dopamine subtype receptors of the striatum in rats
Dong Zhaojun, Wang Shili, Li Yunpeng
(Department of Toxicology, Third Military Medical University, Chongqing,400038)
Abstract Objective: To investigate the pharmacological property of stepholidine (SPD) and its analogues as CSL and THPB10 on subtype receptors of the striatum in rats. Methods: Slices of the striatum of the rats, preincubated with 3H-dopamine (3H-Da), were superfused and stimulated with electricity. The efflux was collected in 5 min interval and the radiation of 3H-Da in the samples was measured to identify the Da released from the striatum slices. The synaptosomes of the striatum were prepared and the adenlage cyclase activity was determined with radioimmunoassay. Results: Ly171555, a selective D2 dopamine receptor agonist, significantly inhibited 3H-Da release evoked electrically from the striatal slices. This effect of Ly171555 was antagonized or reversed by SPD, CSL and THPB10. The antagoning effect of CSL against Ly171555 in decreasing 3H-Da release was short-lived as compared wtih that of SPD and THPB10. Interestingly to note, SPD, CSL and THPB10 themselves were obviously able to evoke 3H-Da release in the striatal slices without electricity stimulation. In the samples of striatal synatosomes, in which the D2Da receptors were blocked with butaclamol, the activity of adenylate cyclase was significantly stimulated by SPD and CSL but not by THPB10. Conclusion: These findings suggest that SPD and its analogue CSL possess 2 hydroxyl groups and exercise dual actions on D1 and D2 dopamine subtype receptors, agonist for D1 receptors and antagonist for D2 receptors. THPB10, however, exercises antagonist action for D2 receptors only.
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Key words dopamine receptor; adenylate cyclase; corpus striatum; rat
左旋千金藤啶碱[(-)-Stepholidine,SPD]是四氢原小檗碱同类物(Tertrahydroprotoberberines,THPBs)的先导化合物[1]。早期的研究资料证实，SPD对中枢多巴胺(Dopamine,DA)受体有选择性高亲和力结合[2]，明显翻转去水吗啡(APO)对大鼠黑质致密区(SNC)DA神经元放电的抑制作用[3]。神经生化研究结果表明，SPD以剂量依赖关系激活酪氨酸羟化酶，促进DA合成和释放[4，5]。而在DA受体超敏的大鼠模型，SPD使大鼠产生健侧旋转行为[6]。上述结果提示，SPD对中枢DA受体呈阻滞/激动双相作用。本研究比较SPD及其同类物(-)-12-choloroscoulerine(CSL)和THPB10对大鼠纹状体D1和D2 DA受体作用特性。
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1 材料与方法
1.1 药品和试剂
SPD、CSL和THPB10由中国科学院上海药物研究所馈赠，临用前以少量二甲基甲酰胺溶解，再用缓冲液稀释至所需浓度。LY171555、Haloperidol和APO购自Sigma,Dopamine、Nomifensin和Butaclamol为RBI产品，cAMP测定盒由上海中医药科大学提供。
1.2 纹状体脑片[3H]DA释放
参照文献[7]方法进行，SD大鼠200～250 g，颈动脉放血处死后于4°C迅速开颅取双侧纹状体，于切片机上制备厚度为0.3 mm脑薄片。将3片3mm×3mm脑片移入2ml 0.1μmol/L[3H]DA灌流液中摄取[3H]DA。30 min后脑片转入约1 cm×1 cm×1 cm玻璃灌流小室中，以95% O2饱和的灌流液37°C恒温持续灌流。灌流液组份为(mmol/L):NaCl 118;KCl 4.8;CaCl2 1.3;MgSO4 1.2; NaHCO3 25; KH2PO4 1.2;EDTA 0.03。平衡30 min后开始收集流出液，每5 min为一个样品，共6个时相点。于电刺激前5 min向灌流液中加入待测药物，在第10分钟时对脑片施加24 mA 3 Hz电刺激2 min。样品中加10 ml闪烁液，用LKB液闪仪测放射强度，结果以Bq表示。
, 百拇医药
1.3 腺苷酸环化酶活力测定
断颈处死大鼠，于冰上取双侧纹状体，按1∶20加分离液，匀浆。1000×g离心10 min，上清液经2000×g离心20 min，相同分离液洗2遍。沉淀块用反应液重悬后测蛋白含量。
玻璃试管中加突触体蛋白50μg、待测药物100μl、ATP 50μl，ATP终浓度1 mmol/L。用反应液补足500μl。30°C准确反应5 min，95°C水浴3 min终止反应。1 000×g离心10 min，取上清液100 μl，用放免法测cAMP含量。实验结果以x±s表示。
2 结果
对照组脑片于受24 mA直流电刺激后第5分钟，[3H]DA释放量迅速增加。第15、20、25、30分钟分别为1255.4±170.3、 2414.6±213.4、 2254.0±208.6和1016.8±102.7。其释放峰在第20分钟和第25分钟。灌流液中加入10μmol/LLy171555，电刺激诱发的[3H]DA释放量明显小于对照组，20 min和25min的释放量为1447.2±286.6和1403±219.1，见表1。
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灌流液中同时加入Ly171555和SPD或CSL或THPB10时，Ly171555对电诱发大鼠纹状体脑片[3H]DA释放的抑制作用明显减弱或被取消。
在不施加电刺激的大鼠纹状体脑片，SPD、CSL和THPB10也能诱发[3H]DA释放，诱发时间于给药后10～15 min。50μmol/L SPD、CSL和THPB10使第20分钟的释放量分别增加72.9%、148.6%和57.2%，见表2。
反应系统中含2μmol/L D2受体阻滞剂Butaclamol时，DA增加大鼠纹状体突触体腺苷酸环化酶活力，随浓度的升高，DA对酶活力的影响增加，见表3。SPD和CSL的作用与DA相似，但THPB10对腺苷酸环化酶活力无明显影响。
表1 SPD、CSL、THPB10对电诱发大鼠纹状体脑片[3H]DA释放量的影响(12 Bq,n=6)
, 百拇医药
Tab 1 Effect of SPD,CSL and THPB10(μmol/L) on electric stimulation evoked
[3H]DA released from rats striatum slices in vitro (12 Bq,n=6)
5 min
10 min
15 min
20 min
25 min
30 min
Control
, 百拇医药
655.4±139.5
547.0±54.2
1255.4±170.3
2414.6±213.4
2254.0±208.6
1016.8±102.7
Ly171555(10)
727.5±178.0
563.2±51.8
888.2±194.8*
1447.2±286.**
, 百拇医药
1403.4±219**
677.2±226.7**
Ly171555(10)+SPD(50)
556.8±77.4
573.8±104.1
1312.6±443.0
2009.2±516.8
2177.4±243.0
1034.2±145.1
Ly17155(10)+CSL(50)
, 百拇医药
522.0±57.3
535.8±41.1
1423.8±186.9
2003.0±409.9
1931.4±193.3
735.0±169.**
Ly171555(10)+THPB10(50)
681.0±163.4
536.2±55.4
1192.6±151.4
2330.8±144.8
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2315.6±217.4
965.6±100.7
*:P<0.05，**：P<0.01 vs control
表2 SPD、CSL和THPB10对大鼠纹状体脑片[3H]DA静息释放的影响(CB/μmol.L-1,n=5)
Tab 2 Effect of SPD、CSL and THPB10 on basic release of [3H]DA from rats striatum slices in vitro(CB/μmol.L-1,n=5)
5 min
, 百拇医药
10 min
15 min
20 min
25 min
30 min
Control
606±35.7
599.0±145.7
655.4±139.5
727.2±178.0
579.1±61.2
562.2±49.3
, http://www.100md.com
SPD(50)
592.4±90.1
601.3±83.3
884.0±83.3
1257.4±102.2**
1258.2±181.1**
1056.0±135.5**
CSL(50)
558.2±87.5
583.6±78.3
905.4±149.1*
, 百拇医药
1807.6±98.4**
1685.8±158.6**
1449.0±231.6**
THPB10(50)
593.4±50.1
585.0±68.9
844.8±98.7
1143.2±177.3**
1467.2±181.3**
1202.8±53.5**
, 百拇医药
*:P<0.05， **：P<0.01 vs control
表3 SPD同类物对大鼠纹状体突触体腺苷酸环化酶活力的影响(cAMP, λB/pmol.mg-1.min-1)
Tab 3 Effect of SPD analogues on synaptosomal adenylate cyclase activity(cAMP, λB/pmol.mg-1.min-1)
Control
Concentration (μmol/L)
1
, 百拇医药
10
100
1 000
Dopamine
103.6±8.99
105.0±13.32
187.6±10.26**
189.8±9.09**
199.4±9.99**
SPD
100.1±10.50
, http://www.100md.com
98.8±9.73
127.2±4.82
149.8±9.31**
161.6±5.59**
CSL
103.6±6.94
102.8±7.98
142.0±10.39**
160.8±10.83**
167.0±12.79**
, 百拇医药
THPB10
101.8±8.53
104.6±11.78
101.6±14.43
98.4±11.99
103.2±8.43
**：P<0.01 vs control
3 讨论
脑内DA神经元主要集中在中脑黑质致密区和中脑腹侧被盖区，分别支配纹状体和伏膈核、杏仁核、扣带回及额叶皮层等核团，与人类锥体外系运动功能和认识、情绪、记忆等有密切关系。已经证实，DA神经退变是帕金森氏症的重要发病机制，作用于DA系统的药物研究日益引起人们的注。SPD是我国科学家从植物提取的有效化学成分。早期研究证实，SPD对DA受体有选择性阻滞作用。但在用6-OHDA损毁单侧黑质的大鼠模型上，SPD能引发动物的健侧旋转行为。提示SPD对DA受体兼有内在激动作用[6]。SPD上述的阻滞作用和激动作用可能是其作用于不同DA受体亚型的结果，并与其化学结构中的羟基有关[8]。
, 百拇医药
纹状体DA神经突触前D2为自身受体(Autoreceptors)，与DA释放有关。我们以离体大鼠纹状体片DA释放模型，研究SPD及其同类物CSL和THPB10对D2受体的作用特性。10μmol/L选择性D2受体激动剂LY171555明显抑制电诱发的[3H]DA释放，此作用为50μmol/L SPD、CSL和THPB10所对抗，见表1，提示三者均有D2受体阻滞作用。但CSL的作用时间比SPD和THPB10短。在无D2受体阻滞剂LY171555存在，又不施加电刺激时，浓度为50 μmol/L的SPD、CSL和THPB10，均刺激脑片释放DA，见表2，这一步证实三者对D2受体的阻滞作用特性。
中枢DA受体为G蛋白耦联受体，D1受体经Gs与腺苷酸环化酶正耦联，D2经Gi与腺苷酸环化酶负耦联。本研究用D2受体阻滞剂Butaclamol封闭D2受体，能准确研究CSL经D1受体对腺苷酸环化酶的作用特点。在mmol/L至μmol/L的浓度范围内，SPD和CSL均明显提高腺苷酸环化酶活力，使cAMP生成量明显增加，且作用强度有随药物浓度升高而加强的趋势。这些结果与既往的行为实验结果相吻合，提示SPD和CSL对纹状体D1受体有激动剂作用。
, http://www.100md.com
SPD同类物THPB10对大鼠纹状体突触体腺苷酸环化酶的活性无明显影响，即使浓度高达1000μmol/L时，THPB10也不能显著改变cAMP的生成量，说明THPB10与SPD及CSL的作用性质不同，THPB10对D1受体无激动特性。
SPD是THPB同类物的先导化合物。本实验证实双羟基化合物SPD和CSL具有D2受体阻滞和D1受体激动双重作用，而单羟基化合物THPB10未显示D1受体激动作用。因此，双重作用可能由SPD同类物结构中双羟基所决定。此论点尚需大量同类物研究数据的支持。
*重庆市资助课题
**董兆君，男，45岁，副教授，博士
参考文献
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3 Huang K X, Jin G Z. The antagonistic effects of tetrahydro-protoberberines on dopamine receptors: electrophysiological studies. Sci China B,1992,35(6):688
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5 黄开星，孙宝存，金国章.在体伏胺法测量四氢原小檗碱同类物对纹状体多巴胺受体释放和3，4-双羟苯乙酸含量的影响.中国药理学报，1991，12(1)：32
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收稿：1998-11-23；修回：1999-01-22, 百拇医药